粗叶悬钩子对实验性肝损伤的治疗作用研究

目的:研究粗叶悬钩子对实验性肝损伤的治疗作用。方法:以CCl4 制备小鼠急性肝损伤模型,分别用三种不同浓度的CERA进行干预,观察检测血清ALT、AST和肝匀浆SOD、MDA、NO的含量变化及肝组织病理学变化。结果:CERA能降低CCl4 所致小鼠血清中异常增高的ALT、AST及肝组织中异常增高的MDA、NO的含量,同时升高SOD含量,且能改善肝脏病理损伤。结论:CERA对小鼠实验性肝损伤有一定的治疗作用。抑制CCl4 引起的脂质过氧化反应。

粗叶悬钩子根部提取物对急性肝损伤大鼠TNF-α IL-1β IL-6的影响

目的:探讨粗叶悬钩子根部提取物对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:以化学方法提取总生物碱、总多糖、总黄酮为治疗药物,通过一次性腹腔注射99.5%CCL4建立大鼠急性肝损伤模型,检测药物对大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量的影响。结果:粗叶悬钩子根部总多糖能明显降低大鼠血清中异常增高的TNF-α、IL-1β、IL-6含量(P<0.01)减轻大鼠肝细胞坏死程度。总生物碱、总黄酮对大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量有一定影响但没有统计学意义。结论:粗叶悬钩子根部总多糖具有减轻炎症因子对肝细胞造成损伤的作用。

药对川芎-白芍与其单味药挥发油的衰减全反射-傅里叶变换红外光谱指纹图谱研究

目的:研究药对川芎-白芍挥发油指纹图谱的化学特征。方法:采用衰减全反射-傅里叶变换红外光谱(ATR-FTIR)法,建立川芎、白芍及药对川芎-白芍挥发油的红外光谱,采用峰位、峰形及峰强进行评价,并与单味药川芎、白芍进行比较。结果:药对川芎-白芍、单味药川芎及白芍的红外光谱相似,但配伍后挥发油中某类化学成分的吸收度减小。结论:该方法能直接、快速、准确地测定样品的傅里叶变换红外光谱(FTIR)图谱,直观地揭示川芎-白芍配伍后的化学特征。

粗叶悬钩子根部提取物对急性肝损伤大鼠血清NO和肝组织SOD、MDA的影响

目的:探讨粗叶悬钩子根部提取物对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:以化学方法提取总生物碱、总多糖、总黄酮为治疗药物,通过一次性腹腔注射99.5%CCl_4建立大鼠急性肝损伤的模型,检测药物对大鼠血清NO及肝组织中SOD、MDA的影响。结果:粗叶悬钩子根部总生物碱能明显降低大鼠血清中异常增高的NO及肝组织中MDA含量(P<0.01),提高肝组织中SOD活性,减轻大鼠肝细胞坏死程度。总多糖、总黄酮对大鼠血清NO及肝组织中SOD、MDA有一定影响但没有统计学意义。结论:粗叶悬钩子根部总生物碱具有减轻CCl_4所致肝细胞损伤的作用,其作用机理可能与减轻脂质过氧化反应有关。

粗叶悬钩子根部提取物对急性肝损伤的治疗作用研究

目的:探讨粗叶悬钩子根部提取物对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:以化学方法提取粗叶悬钩子根部总生物碱、总多糖、总黄酮为治疗药物,通过一次性腹腔注射99.5%CCl4建立大鼠急性肝损伤模型,检测药物对大鼠血清ALT、AST、AG、GST含量的影响。结果:粗叶悬钩子根部总生物碱可显著降低大鼠血清中异常增高的ALT、AST、GST含量(P<0.01),但总多糖、总黄酮效果不明显(P>0.05)。结论:粗叶悬钩子根部总生物碱具有保护肝细胞膜、细胞内膜和抗肝损伤的作用,可能为粗叶悬钩子抗肝损伤的有效部位。

揉膝推髌点穴法对膝骨性关节炎的疗效

目的探讨揉膝推髌点穴法治疗膝骨性关节炎的临床疗效。方法选择膝骨性关节炎100例,随机分为治疗组50例,对照组50例,在口服奥太灵基础之上,治疗组揉膝推髌点穴法,每次30 min,隔天1次,治疗2 w;对照组扶他林乳剂涂于膝关节周围患处,并轻轻揉擦,每天3次,治疗2 w,对两组治疗前后症状总积分变化及临床疗效进行分析比较。结果两组治疗后症状总积分相比,Ⅰ级、Ⅱ级患者分别相比有显著性差异(P<0.05);两组患者治疗后优良率,Ⅰ级、Ⅱ级患者有显著性差异(P<0.05),Ⅰ级、Ⅱ级膝骨性关节炎的疗效治疗组优于对照组,且病变程度越轻疗效越好。结论揉膝推髌点穴法能有效缓解膝骨性关节炎的临床症状、改善关节功能。

透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞Cyclin D1 mRNA表达的影响

目的:观察透骨消痛胶囊含药血清对软骨细胞CyclinD1 mRNA表达的影响,探讨透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的可能作用机制。方法:采用抽签法将16只12周龄雄性新西兰大白兔随机分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组4只。低剂量组按5 mL.kg-1体质量以5 mg.mL-1透骨消痛胶囊溶液灌胃,中剂量组按5 mL.kg-1体质量以10 mg.mL-1透骨消痛胶囊溶液灌胃,高剂量组按5 mL.kg-1体质量以20 mg.mL-1透骨消痛胶囊溶液灌胃,空白组按5 mL.kg-1体质量以生理盐水灌胃。每天灌胃2次,连续7 d,最后1 d连续2次灌胃,中间间隔2 h。末次灌胃后3 h提取各组实验兔含药血清低温保存备用。将6只4周龄雄性新西兰兔处死,取其膝关节软骨,置入盛有Ⅱ型胶原酶的培养皿中进行消化,建立软骨细胞体外培养体系,并采用甲苯胺蓝染色法鉴定细胞功能。将体外培养的第3代软骨细胞随机分为空白组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,并分别加入含空白血清、低剂量中药血清、中剂量中药血清、高剂量中药血清的DMEM培养液中继续培养72 h后,采用MTT法检测软骨细胞的增殖情况,采用RT-PCR法检测CyclinD1 mRNA的表达,并在透射电子显微镜下观察细胞形态。结果:Ⅱ型胶原酶消化法成功建立了软骨细胞的体外培养体系,甲苯胺蓝染色可见软骨细胞内呈紫红色异染颗粒。干预72 h后,各组软骨细胞光密度值比较,差异有统计学意义(F=6.209,P=0.004);中剂量组、高剂量组软骨细胞光密度值高于空白组(P=0.005,P=0.002);中剂量组、高剂量组软骨细胞光密度值高于低剂量组(P=0.034,P=0.011)。各组软骨细胞CyclinD1 mRNA表达量比较,差异有统计学意义(F=8.262,P=0.001);中剂量组、高剂量组软骨细胞CyclinD1 mRNA表达量高于空白组(P=0.002,P=0.001);中剂量组、高剂量组软骨细胞CyclinD1 mRNA表达量高于低剂量组(P=0.012,P=0.004);中剂量组、高剂量组可见较多处于分裂期的细胞。结论:透骨消痛胶囊的含药血清能促进软骨细胞G1期正性调节因子CyclinD1 mRNA的表达,从而促进软骨细胞增殖,这可能是透骨消痛胶囊在临床上治疗骨性关节炎具有较好疗效的部分机理,而有关透骨消痛胶囊治疗骨性关节炎的具体作用机制还需作更进一步的深入研究,以便为临床应用提供理论依据。

透骨消痛颗粒含药血清对兔软骨细胞增殖影响的研究

目的:探讨透骨消痛颗粒含药血清对兔软骨细胞增殖的影响。方法:取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第3代软骨细胞随机分为5组,分别加入培养液、空白血清和中药血清低、中、高剂量继续培养24、48、72 h后,采用流式细胞仪检测软骨细胞周期的变化。结果:流式细胞仪细胞周期检测显示中药血清中、高剂量能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,并呈现时间的依赖性,干预48 h后G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与低量组、空白组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进软骨细胞的增殖。

三白草多糖微波提取及其对糖尿病治疗的实验研究

为了探讨三白草降血糖的作用机理 ,采用微波技术提取多糖 ,以葡萄糖氧化酶法进行含量测定 ,建立四氧嘧啶型糖尿病兔动物模型 ,观察三白草多糖对其体内的血糖、超氧化物歧化酶和丙二醛的影响。实验结果显示运用微波技术从三白草中多糖提取速度加快 ;以葡萄糖氧化酶法进行多糖含量测定 ,为多糖含量测定方法寻找一种新的简便的途径 ;药理实验说明三白草中的多糖可使四氧嘧啶型糖尿病兔体内血糖值降低 ,超氧化物歧化酶的活力增强 ,丙二醇下降。

槲皮素对人软骨肉瘤细胞活性的抑制作用

目的研究槲皮素对人软骨肉瘤细胞(SW1353)增殖的抑制作用。方法用体外细胞培养技术与显微镜观察50、100、200、400μmol/L浓度的槲皮素溶液作用于SW1353细胞,MTT法检测细胞生长抑制率。结果加药48 h后,随着槲皮素浓度的增高,对SW1353增殖的抑制作用增强,具有显著的浓度依赖性。结论槲皮素可促进人软骨肉瘤细胞凋亡,具有抗肿瘤作用。

气相色谱-质谱联用技术分析梅花入骨丹挥发油的化学成分

目的分离鉴定梅花入骨丹挥发油的化学成分。方法用药典记载的提取方法提取梅花入骨丹的挥发油,经过气相色谱-质谱联用分析,应用峰面积归一化法测定各组分的相对含量。结果从梅花入骨丹中共分离出78个峰,通过与软件中的质谱标准谱图库比较鉴定出其中的24种化合物。结论本研究为梅花入骨丹的物质基础研究和进一步开发应用提供了实验依据。

梅花入骨丹多糖对SW1353软骨肉瘤细胞活性的影响

目的研究梅花入骨丹多糖对SW1353细胞活性的影响。方法体外培养SW1353细胞,用MTT法检测其在梅花入骨丹多糖剂量为50、100、200、400、800μg/mL中的细胞活性。结果 SW1353细胞在50～200μg/mL多糖剂量范围内细胞活性增加,400～800μg/mL时受抑制。结论低剂量的梅花入骨丹多糖溶液对SW1353细胞活性有促进作用,高剂量有抑制作用。

三白草黄酮类化合物对糖尿病治疗作用的实验研究

为探讨三白草降血糖的作用机理 ,建立四氧嘧啶型糖尿病兔动物模型 ,观察三白草总黄酮对四氧嘧啶型糖尿病兔体内的血糖、超氧化物歧化酶和丙二醛的影响 ,结果显示三白草中的黄酮可使四氧嘧啶型糖尿病兔体内血糖值降低 ,超氧化物歧化酶的活力增强 ,丙二醇下降 ,说明三白草对四氧嘧啶型糖尿病具有治疗作用。

HPLC法测定梅花入骨丹中的没食子酸和槲皮素含量

目的测定梅花入骨丹中没食子酸和槲皮素的含量。方法用HPLC法,以SinoChromC18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液,流速为1 mL/min,检测波长为255 nm,柱温为30℃,梯度洗脱。结果没食子酸在0.162～3.24μg,槲皮素在0.002052～0.041μg内呈良好的线性关系,没食子酸平均回收率为103.9%,RSD为1.20%;槲皮素平均回收率为100.5%,RSD为0.97%。结论 HPLC法测定没食子酸和槲皮素,方法简便可行,重复性和分离效果好。

梅花入骨丹多糖含量的测定

目的测定梅花入骨丹多糖含量。方法采用苯酚一硫酸法。结果本法建立的标准曲线为Y=8.1249X-0.0067(r2=0.9991),检测波长为490 nm,多糖含量为2.98%,平均回收率为99.15%,RSD为1.73%(n=5)。结论此方法简便可行,重现性较好,可作为梅花入骨丹的质量评价依据,为合理开发该药提供参考。

软骨细胞体外分离培养与鉴定的实验研究

目的探讨免关节软骨细胞分离、培养和鉴定的方法,建立软骨细胞的体外培养体系。方法4周龄新西兰白兔采用机械-酶消化法.分离膝关节软骨细胞接种培齐以及传代培养,倒置相差显微镜观察细胞形态.甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组化对细胞进行鉴定。结果成功建立了体外培养软骨细胞的实验方法。原代培养的软骨细胞呈多角形.传代3次后出现反分化。形态学、免疫化学染色显示细胞培养3代以内可以保持表型的稳定。甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性。细胞传至5代后,出现"成纤维细胞样"。结论本研究建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法;初代、第2代、第3代细胞生长良好.适合于实验研究:软骨细胞5代培养后,细胞表型发生改变。

没食子酸丙酯在大鼠体内生物利用度的测定

血栓性疾病是人类的主要杀手之一。血栓性心脑血管病的死亡率在我国人口总死亡中约占40％。每年全国死于该病患者达200万人。由于现代社会来自工作、社会、生活等方面的影响，使心脑血管病的发病率不断提高。且发病的年龄跨度不断扩大。

透骨消痛颗粒对兔软骨细胞周期的影响

目的观察透骨消痛颗粒对兔软骨细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪检测透骨细胞颗粒干预后兔软骨细胞周期的变化。结果含药血清能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,干预48 h后,G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。结论透骨消痛颗粒含药血清能有效地促进软骨细胞的增殖。