严重急性呼吸道综合征冠状病毒疫苗研究现状

冠状病毒被认为是新近爆发的严重急性呼吸道综合征的病原体 .迄今公共数据库中已发表了不同国家和地区分离的 12个SARS病毒株基因组完整序列 .突起蛋白是冠状病毒的主要抗原 ,包含许多抗原决定簇 .SARS冠状病毒突起蛋白的相对保守性为有效疫苗的开发奠定了很好的研究基础 .灭活或减毒的冠状病毒疫苗存在一定的局限性和危险性 .

糖尿病大鼠肾皮质细胞表型转化的探讨

目的:探讨糖尿病大鼠肾皮质中波形蛋白(vimentin)、结蛋白(desmin)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的变化规律及其相互关系。方法:建立STZ诱导的SD大鼠糖尿病模型;用RT-PCR法检测造模成功后第3、7、14、30、60和90 d糖尿病大鼠肾皮质中vimentin、desmin和TGF-β1mRNA的表达水平。结果:①糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1和vimentin mRNA的表达分别从模型建立后第7 d和第14 d起逐渐增多,desmin mRNA的表达从第14 d起逐渐减少,糖尿病大鼠和对照组大鼠相比差异显著(P<0.05,P<0.01)。②糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1和vimentin的mRNA表达呈显著正相关,TGF-β1和desmin的mRNA表达却呈显著负相关,desmin和vimentin的mRNA表达也呈显著负相关。结论:糖尿病大鼠TGF-β1在肾皮质局部表达增多可能促进肾小管上皮细胞向成纤维细胞转化。

嵌合型E1B55-kDa蛋白缺陷型腺病毒载体治疗肿瘤的评价(英文)

ONYX-015和H101为可复制E1B55-kDa蛋白缺陷的C族腺病毒,它们正作为抗癌药物进行临床研究.然而它们在癌症基因治疗中的应用却受到了C族腺病毒天然特性的制约,部分原因是由于在恶性肿瘤中C族腺病毒受体(coxsackievirus-adenovirusreceptor,CAR)的表达量较低.构建了一个以H101为骨架的含有编码35型腺病毒鞭毛区域的基因,替代5型腺病毒鞭毛基因的嵌合型腺病毒载体.这一改动使得腺病毒载体可以通过一种在肿瘤中高表达的膜蛋白CD46感染肿瘤细胞.应用RT-PCR方法检测不同肿瘤细胞株中CAR和CD46表达量的区别.在CAR受体低表达的细胞株中(MDA-MB-435和MCF-7),H101-F35表现出比H101和ONYX-015更强的细胞杀伤效果;在CAR受体高表达的细胞株中(A549,NCI-H446,Hep3B,LNCaP,ZR-75-30和Bcap-37),H101-F35、H101和ONYX-015的细胞杀伤效果则相似.在荷MDA-MB-435肿瘤的裸鼠模型中,注射H101-F35的抑瘤效果比注射H101的抑瘤效果更明显.这些结果表明嵌合型溶瘤腺病毒载体H101-F35在肿瘤基因治疗中将有很好的应用前景.

纯钛表面梯度生物活性涂层材料生物相容性研究

目的评价复合氧化及水热沉淀法制备纯钛表面梯度生物活性涂层材料生物相容性和骨诱导能力。方法通过对L929成纤维细胞和M373成骨细胞体外细胞培养进行细胞相容性实验和动物颅骨植入实验评价梯度羟基磷灰石(HA)涂层生物相容性和骨诱导能力。结果涂层表面L929成纤维细胞附着与增殖实验提示多孔的羟基磷灰石表面涂层对细胞的黏附生长有诱导作用,促进细胞在其表面繁殖。体外细胞毒性实验提示各组材料对M373成骨细胞的生长、增值、代谢无不良影响。在细胞接种后期HA试件组的细胞增殖数较其他组有显著增加。颅骨植入实验提示羟基磷灰石涂层组在诱导成骨反应方面优于其它组。结论复合氧化及水热沉淀法制备纯钛表面梯度生物活性涂层材料具有良好的生物相容性和骨诱导能力,值得作为新型颅骨修补材料。

转化生长因子β_1和波形蛋白及结蛋白在糖尿病大鼠肾皮质中早期表达的研究

目的 :探讨糖尿病大鼠早期不同阶段转化生长因子β1(TGF-β1)和波形蛋白 (vimentin)、结蛋白 (desmin)在大鼠肾皮质中表达的变化规律及其相互关系。方法 :建立 STZ诱导的 SD大鼠糖尿病模型 ;用 RT- PCR法半定量检测早期各观察时点糖尿病大鼠肾皮质中 TGF-β1和 vimentin、desmin m RNA的表达水平。结果 :1随着糖尿病病情的进展 ,TGF- β1和 vimentin m RNA的表达量分别从模型建立后第 7d和第 14 d起逐渐增多 (P=0 .0 0 1) ,desmin m RNA表达从第 14 d起却逐渐减少 (P<0 .0 5 )。 2糖尿病组的 TGF- β1与 vimentin的 m RNA表达呈正相关 (r=0 .74 0 ,P=0 .0 0 0 ) ,desmin与 TGF- β1的 m RNA表达呈负相关 (r=- 0 .6 95 ,P=0 .0 0 0 ) ,desmin与 vimentin的 m RNA表达也呈负相关 (r=- 0 .5 91,P=0 .0 0 2 )。结论 :糖尿病大鼠早期肾皮质中 TGF- β1和 vimentin的表达逐渐增多 ,desmin的表达却逐渐减少 ,提示 TGF- β1可能促进小管上皮细胞向成纤维细胞转化。

颅骨修补材料钛金属表面梯度生物活性涂层的生物相容性研究

目的评价复合氧化及水热沉淀法制备纯钛表面梯度生物活性涂层材料的生物相容性。方法分别通过体外细胞相容性实验和动物皮下植入实验综合评估复合氧化及水热沉淀法制备的梯度羟基磷灰石(hydroxyapitate,HA)涂层的生物相容性。结果体外细胞相容性实验(MTT法)显示,各组材料对L929细胞的生长、增殖、代谢无不良影响。在不同时间点上,羟基磷灰石改性试件表面的光吸收值均比纯钛试件有所增加,在细胞接种后期增加尤为显著,提示羟基磷灰石改性试件的细胞相容性优于其它各组试件。动物皮下植入实验结果显示各组材料30d后,炎性细胞反应程度、囊壁形成情况、周边组织反应均﹤I级,符合GB/T16886.6-1997医疗器械生物学评价I级标准,其中羟基磷灰石组在纤维囊壁成熟方面更优于其它组。结论复合氧化及水热沉淀法制备纯钛表面梯度生物活性涂层材料具有良好的生物相容性,值得作为颅骨修补材料进一步研究。

雷公藤内酯醇对小鼠肾小球足细胞裂孔隔膜核心蛋白表达干预作用的研究

目的观察雷公藤内酯醇(TP)干预高糖环境培养的小鼠肾小球足细胞裂孔隔膜nephrin、podocin和CD2AP的表达,探讨雷公藤治疗糖尿病肾病(DN)蛋白尿的分子生物学机制。方法培养成熟的小鼠足细胞随机分为对照组1、对照组2、高糖组和TP干预组,TP干预组进一步分为低剂量、中剂量和高剂量组。用不同浓度的TP(8、16和32ng/ml)干预高糖(25mmol/L的Glu)培养24h后的小鼠足细胞,用RT-PCR法检测干预前后nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达;用间接免疫荧光法检测16ng/ml TP干预后nephrin和podocin蛋白的表达。结果(1)与对照组相比,高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA表达均明显减弱(均P<0.01)。(2)TP显著上调高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达(均P<0.05)。(3)16ng/ml TP能明显上调高糖对足细胞nephrin和podocin(均P<0.05)蛋白表达的抑制。结论 TP显著上调高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,可能是其降低DN蛋白尿的机制之一。

烟雾病旁路移植术中荧光造影在血流动力学评估中的应用

目的探讨术中吲哚菁绿（indocyanine green,ICG）荧光造影技术及Flow800分析软件对行颞浅-大脑中动脉（superficial temporal artery to middle cerebral artery,STA-MCA）旁路移植手术的烟雾病（moyamoya disease,MMD）患者和颅内动脉粥样硬化（atherosclerotic cerebrovascular disease,ACVD）所致烟雾综合征患者旁路移植前后的皮层血流动力学特点并评估旁路移植手术对皮层血流灌注的改善情况。方法本研究连续入选首都医科大学附属北京天坛医院脑血管3病房2013年4月~2014年9月拟行STA-MCA旁路移植手术的34例MMD（19例）和ACVD所致烟雾综合征患者（15例）,通过术中ICG造影技术记录旁路移植前后皮层血管造影资料,分别选取MMD组、ACVD组和13例无颅内血管狭窄、闭塞的对照组患者的皮层动脉、静脉,拟受体动脉、受体动脉分支动脉、邻近区域动脉、远隔区域动脉管辖皮层血管进行荧光强度曲线分析获得血管最大荧光强度、上升斜率、达峰时间、动脉-皮层通过时间、皮层-静脉通过时间、局部循环时间（microvascular transit time,MVTT）,分析上述区域皮层血流动力学特点和旁路移植手术后皮层灌注的改善情况。结果 MMD组、ACVD组、对照组的皮层血流动力学参数slope值分别为44.21±11.59、101.00±52.40、163.20±12.19,3组间两两比较差异均具有显著性（P均〈0.01）;MVTT值分别为（5.75±0.23）s、（4.57±1.21）s、（3.27±0.57）s,3组间两两比较差异均具有显著性（P均〈0.01）。行旁路移植后受体血管分支动脉区域的皮层ICG曲线slope较旁路移植前显著增加,其中受体动脉旁路移植前：45.61±13.05,旁路移植后89.32±5.41;受体分支动脉slope值旁路移植前43.70±11.57,旁路移植后96.66±15.82,邻近动脉slope值旁路移植前45.92±14.92,旁路移植后77.80±14.30。旁路移植前后各组slope值比较差异均具有显著性（P〈0.05）。旁路移植后区域内MVTT缩短,受体分支动脉旁路移植前MVTT（5.75±0.58）s,旁路移植后MVTT（2.04±0.54）s,其中邻近动脉旁路移植前MVTT为（5.54±0.26）s,旁路移植后MVTT（2.97±0.73）s,旁路移植前后各组MVTT值差异均具有显著性（P〈0.05）。结论术中ICG联合Flow800软件进行血流动力学分析有助于了解MMD和ACVD皮层血流动力学特点,在行STA-MCA旁路移植手术中有助于受体血管的选择,可以快速判断旁路移植通畅程度及旁路移植后皮层血流灌注改善程度。

超声监测卵泡及子宫内膜在不孕症治疗中的意义

目的通过超声连续监测不孕症患者的卵泡生长、子宫内膜状况,探讨其在不孕症治疗中的价值。方法经B型超声对诊断为不孕症的患者共110例进行卵泡生长情况和子宫内膜的监测,同时采用克罗米芬和HCG进行正规治疗。结果排卵障碍型不孕症患者中出现优势卵泡并且排卵的68例,有40例最终妊娠。先出现优势卵泡后萎缩29例(其中卵细胞未排出而原位黄素化7例,多囊卵巢综合症14例)。13例未见优势卵泡。出现优势卵泡并且排卵的68例中,均质征子宫内膜为24例(35.3%),三线征子宫内膜为44例(64.7%),均质征子宫内膜厚度分布区域在<9 mm范围内。结论 B型超声是一种有价值的监测卵泡生长发育及子宫内膜变化的手段,对指导临床合理使用药物治疗不孕症具有重要意义。

雷公藤内酯醇干预高糖诱导足细胞转分化作用机制的研究

目的观察不同浓度雷公藤内酯醇(TP)体外干预高糖环境下小鼠足细胞上皮细胞向间充质细胞转分化(EMT)及TGF-β/Smad信号通路的调节作用,探讨其保护足细胞损伤的可能机制。方法将培养成熟的小鼠足细胞随机分为25mmol/L葡萄糖培养液干预组(高糖组),5mmol/L葡萄糖培养液干预组(对照组)和在25mmol/L葡萄糖培养液中分别加入浓度为8、16、32ng/ml的TP干预组(低、中、高TP组)。体外培养48h后,倒置显微镜下观察足细胞形态变化,采用RT-PCR和Western-blot技术分别检测各组足细胞NEPH1、desmin、TGF-β_1和Smad7的mRNA和蛋白表达变化。结果高糖组和高、中、低TP组的小鼠足细胞NEPH1和Smad7 mRNA和蛋白的表达水平均较对照组低,desmin和TGF-β_1的mRNA和蛋白的表达水平均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。高、中、低TP组足细胞NEPH_1和Smad7的mRNA和蛋白的表达水平均高于高糖组,desmin和TGF-β_1的mRNA和蛋白的表达水平均低于高糖组,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);中TP组NEPH1和Smad7的mRNA和蛋白的表达水平均高于低TP组和高TP组,desmin和TGF-β_1的mRNA和蛋白的表达水平均低于低TP组和高TP组(均P<0.01)。结论TP可能通过抑制TGF-β/Smad信号通路缓解高糖诱导的足细胞转分化。

缬沙坦对小鼠足细胞GPSD核心蛋白在高糖环境下表达的影响

目的通过观察缬沙坦体外干预高糖环境培养的小鼠足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,探讨RAS抑制剂治疗糖尿病肾病蛋白尿的机制。方法用不同浓度的缬沙坦干预高糖(25mmol/L的葡萄糖)培养24h后的小鼠足细胞,以RT-PCR方法检测干预前后足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达水平;以间接免疫荧光法检测2×10-5mol/L缬沙坦干预后nephrin、podocin蛋白的表达。结果①与对照组相比,高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA表达显著减弱(P<0.01);②缬沙坦能显著上调高糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达(P<0.05或P<0.01);③2×10-5mol/L缬沙坦能显著上调高糖对足细胞nephrin和podocin(P<0.05)蛋白表达的抑制。结论缬沙坦显著上调髙糖诱导的足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达,可能是其独立于降压作用以外的降低糖尿病肾病蛋白尿的机制之一。

高糖对小鼠足细胞向间充质细胞转分化的影响

目的通过观察高糖环境下小鼠足细胞表达NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的变化,探讨高糖损伤足细胞的机制。方法将培养成熟的小鼠足细胞用RandA 1.0软件完全随机分为高糖1、2、3组(葡萄糖浓度分别为15、25和30mmol/L)和对照组(葡萄糖浓度5mmol/L),倒置显微镜下观察高糖干预前后足细胞的形态变化,采用RT—PCR和Western blot技术分别检测足细胞NEPH1、desmin、TGF-β1和Smad7的mRNA和蛋白表达变化。结果与对照组相比,高糖环境下培养48h后,足细胞形态发生不同程度变化。NEPH1和Smad7的mRNA表达较对照组显著减少(P<0.05或0.01),desmin和TGF-β1的mRNA表达较对照组增加(P<0.05或0.01)。其中高糖2组的NEPH1和Smad7的蛋白表达较对照组显著减少(均P<0.01),而desmin和TGF—β1的蛋白表达较对照组显著增加(P<0.01)。小鼠足细胞在高糖培养下NEPH1 mRNA和desmin mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.993,P<0.01);NEPH1 mRNA和TGF—β1 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.989,P<0.01);TGF-β1 mRNA的表达和Smad7 mRNA的表达呈显著负相关(r=-0.996,P<0.01)。结论高糖可能通过激活TGF—β/Smad信号通路诱导小鼠足细胞发生表型转化。

蛋白聚糖与糖尿病微血管病变

蛋白聚糖在糖尿病微血管病变的发生发展过程中起重要的作用 ,大量研究表明其在糖尿病微血管病变时出现质和量的变化。糖尿病肾病和糖尿病视网膜病变时硫酸软骨素、透明质酸、硫酸皮肤素等多种蛋白聚糖在纤维化细胞外基质组织局部表达明显升高 ,而硫酸类肝素蛋白聚糖无明显变化或表达下降 ,在糖尿病视网膜病变时表达明显下降。此外 ,由于硫酸软骨素蛋白聚糖中小分子核心蛋白聚糖decorin能结合并中和转化生长因子 β1的活性 。

高频彩色多普勒超声对体表肿块的诊断价值

目的探讨高频彩色多普勒超声在体表肿块中的诊断价值。方法对67例体表肿块患者的超声表现进行回顾性分析,总结其声像图特征,根据其声像图形态、大小、内部回声、边缘回声、血流特点及是否有完整包膜,观察高频彩色多普勒超声对这些患者体表肿块的定性诊断。结果 67例中脂肪瘤20例,窝囊肿15例,纤维瘤7例,腱鞘囊肿7例,坐骨结节囊肿6例,血管瘤5例,神经鞘膜瘤3例,皮脂腺囊肿3例,脂肪坏死1例。每种疾病声像图特征各异。结论在常见体表肿块的诊断及鉴别诊断中,高频彩色多普勒超声具有重要的临床应用价值。

彩色多普勒超声在小儿急腹症诊断中的价值

目的探讨彩色多普勒超声显像应用于小儿急腹症中的诊断价值。方法通过对108例小儿急腹症患者超声资料的回顾性分析,并将超声诊断结果与术后病理或治疗后复诊及其他检查结果相对照。结果本组患儿肠套叠40例,阑尾炎29例,肠系膜淋巴结炎27例,肠梗阻8例,内脏出血3例,胆囊结石1例。结论超声检查对诊断小儿急腹症具有较高的应用价值,是小儿急腹症首选可靠的影像学检查。

彩色多普勒超声诊断下肢深静脉血栓的价值

目的 :探讨彩色多普勒超声(CDFl)检测下肢深静脉血栓的应用价值。方法 :收集2000年2月～2004年7月在我院确诊为下肢深静脉血栓94例患者进行彩色多普勒超声检测。以观察管壁、管腔及周围结构,记录血栓部位、大小及栓塞程度。结果 :超声检测下肢深静脉血栓90例 ,其中双侧15例 ,单侧75例 ,左侧71条 ,右侧34条。结论 :彩色多普勒超声是无创诊断下肢静脉血栓形成、帮助临床诊断、选择治疗方案和客观评价药物疗效的重要方法。

糖尿病大鼠肾皮质局部转化生长因子β_1、波形蛋白和结蛋白的表达

目的探讨糖尿病大鼠肾皮质中转化生长因子β1(TGF-β1)、波形蛋白(vimentin)和结蛋白(desmin)表达的变化规律及其相互关系。方法建立STZ诱导的SD大鼠糖尿病模型;用RT-PCR法检测造模成功后第3、7、14、30、60和90天糖尿病大鼠肾皮质中TGF-β1、vimentin和desminmRNA的表达水平。结果①糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1和vimentinmRNA的表达分别从模型建立后第7天和第14天起逐渐增多,desminmRNA的表达从第14天起却逐渐减少,这种变化持续至整个实验期末,糖尿病大鼠和对照组大鼠相比差异具有显著性;②糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1和vimentin的mRNA表达呈显著正相关,TGF-β1和desmin的mRNA表达却呈显著负相关,desmin和vimentin的mRNA表达也呈显著负相关。结论糖尿病大鼠TGF-β1在肾皮质局部表达增多可能促进肾小管上皮细胞向成纤维细胞转化。

彩色多普勒超声诊断胎儿脐带绕颈的临床价值

目的 :探讨彩色多普勒超声在诊断胎儿脐带绕颈中的临床价值。方法 :收集了 2 0 0 3年 8月至 2 0 0 4年 9月间在我院作超声筛选的孕妇共 15 6 0人。对经过超声诊断的 2 0 4例脐带绕颈与分娩结果对照分析。结果 :通过彩色多普勒超声对胎儿脐带绕颈松紧程度及圈数作出判断 ,并动态观察脐动脉 S/D值 ,可降低因“胎儿宫内窘迫”而误行的剖宫产术 ,又成功抢救了新生儿 ,改善了围产儿预后 ,对于降低围产儿死亡率至关重要。

小鼠肾脏足细胞GPSD核心蛋白在高糖环境下表达的变化

目的通过观察高糖环境培养的肾小球足细胞裂孔隔膜（GPSD）核心蛋白nephrin、podocin和CD2AP的表达，探讨糖尿病肾病蛋白尿的发生机制。方法以RT—PCR方法检测不同浓度（5、10、20和40mmol／L）葡萄糖培养液培养小鼠足细胞24h后nephrin、podocin和CD2AP mRNA的表达水平。结果足细胞nephrin mRNA的表达在5mmol／L葡萄糖培养液培养24h后即显著减弱（P〈0.05），在其它浓度葡萄糖培养液培养24h后几乎无表达（均P〈0.01）；podocin和CD2AP mRNA的表达在10mmol／L葡萄糖培养液培养24h后显著下降（P〈0．01）。但随着培养液的葡萄糖浓度增加，podocin和CD2AP mRNA的表达却逐渐上调。结论口糖环境抑制足细胞nephrin、podocin和CD2AP的表达，可能是糖尿病肾病蛋白尿发生、发展机制之一。

卵巢癌的经阴道彩色多普勒超声血流参数与血管新生、癌细胞增殖活力的相关性

目的:研究卵巢癌的经阴道彩色多普勒超声血流参数与血管新生、癌细胞增殖活力的相关性。方法:收集在苏州大学附属常熟市第一人民医院妇产科手术切除Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌41例、Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌27例、卵巢良性病变病灶35例作为临床研究的样本,行经阴道彩色多普勒超声测定血流参数,经酶联免疫吸附实验测定血管新生基因、细胞增殖基因、抑癌基因的蛋白表达量。结果:Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌、Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌的RI、PI显著低于卵巢良性病变,Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌的RI、PI显著低于Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌;Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌、Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌病灶内VEGF165、NRP-1、SphK1、SphK2、YAP、CTGF、Gli2、TNFAⅠP8、LSD1的蛋白表达量显著高于卵巢良性病变,PTEN、MFN2、ST7L的蛋白表达量显著低于卵巢良性病变;Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌病灶内VEGF165、NRP-1、SphK1、SphK2、YAP、CTGF、Gli2、TNFAⅠP8、LSD1的蛋白表达量显著高于Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌且与RI、PI呈负相关,PTEN、MFN2、ST7L的蛋白表达量显著低于Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌且与RI、PI呈正相关。结论:卵巢癌的经阴道彩色多普勒超声血流参数RI、PI的降低与血管新生增多、癌细胞增殖活力增强密切相关。