甲胎蛋白和甲胎蛋白异质体联合检测对肝癌的诊断价值及其与肝癌大小的相关性研究

目的探讨甲胎蛋白(AFP)和甲胎蛋白异质体(AFP-L3)联合检测对肝癌的诊断价值及两者水平与肝癌肿瘤大小的相关性。方法收集73例原发性肝癌(PHC)患者和60例良性肝病患者的血清,分别进行AFP和AFP-L3的检测,并分析两者水平与肝癌患者癌灶大小的关系。结果在73例PHC患者中,AFP>20ng/mL的阳性率为64.4%,AFP-L3百分比阳性率为80.8%,两者联合检测的PHC患者中阳性率为93.1%。PHC患者血清AFP-L3百分率与癌灶大小呈正相关(r=0.764,P<0.05),而AFP水平与肿瘤大小的相关性分析显示r=0.304,两者之间无相关性。结论单独应用AFP或AFP-L3检测肝癌均有一定的局限性,两者联合检测将有助于提高肝癌的检出率。同时,AFP-L3百分率对于判断癌灶的大小具有一定的临床价值,而AFP水平与肿瘤大小无明显相关性。

医院检验科试剂的科学管理

为提高检验质量,降低检验成本,通过完善和规范试剂管理制度,采用试剂管理系统实现试剂的科学化、信息化管理等措施保证了试剂质量,节约了检验成本,在很大程度上避免了浪费,提高了试剂管理工作效率。

PIVKA-Ⅱ、AFP、AFP-L3联合检测在肝细胞肝癌诊断中的价值

目的探讨血清异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)、血清甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)检测在肝细胞肝癌(HCC)诊断中的临床应用价值。方法选择2016年6-11月在山东大学附属省立医院中心院区住院的92例HCC患者为HCC组,64例肝硬化患者为肝硬化组,72例乙型肝炎患者为肝炎组,另选取70例健康人作为健康对照组,检测所有研究对象PIVKA-Ⅱ、AFP、AFP-L3水平并比较分析。结果 HCC组血清PIVKA-Ⅱ、AFP、AFP-L3水平明显高于肝硬化组、肝炎组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HCC组PIVKA-Ⅱ、AFP、AFP-L3的受试者工作特征曲线下面积分别为0.904、0.867、0.840。单项检测中,PIVKA-Ⅱ的灵敏度和准确度最高,为82.61%和87.92%;AFP-L3特异度最高,为93.20%。联合检测中,PIVKA-Ⅱ+AFP-L3以及PIVKA-Ⅱ+AFP+AFP-L3组合的特异度最高,为98.54%;PIVKA-Ⅱ/AFP/AFP-L3组合的灵敏度最高,为94.57%。结论 PIVKA-Ⅱ、AFP、AFP-L3联合检测可以提高HCC的诊断效能,弥补单项检测的不足。

济南地区不同性别、年龄人群血清小而密低密度脂蛋白胆固醇水平调查

目的调查济南地区不同性别、年龄人群血清小而密低密度脂蛋白胆固醇(sd LDL-C)水平。方法选择济南地区8 275例健康体检者为研究对象。采用酶法检测研究对象血清sd LDL-C水平,分析不同年龄、性别人群中sd LDL-C的水平。结果 8 275例体检者血清sd LDL-C总体水平随年龄增长呈先上升后下降的趋势。不同性别体检者中,血清sd LDL-C水平均随年龄增长呈先上升后下降的趋势,18~29岁、50~59岁、60~69岁、70~79岁组女性体检者的血清sd LDL-C水平高于男性体检者(P<0.05)。男性体检者中,7~17岁、18~29岁、30~39岁组体检者血清sd LDL-C水平依次升高,50~59岁、60~69岁、70~79岁组血清sd LDL-C水平依次降低(P<0.05)。女性体检者中,7~17岁、40~49岁组血清sd LDL-C水平分别低于第18~29岁、50~59岁组,50~59岁、60~69岁、70~79岁组,血清sd LDL-C水平依次降低(P<0.05)。结论济南地区人群的血清sd LDL-C水平存在性别和年龄差异。

血清AFP、AFP-L3与PIVKAⅡ联合检测在原发性肝癌诊断中的应用

目的探讨血清甲胎蛋白(AFP)、AFP异质体(AFP-L3)及异常凝血酶原Ⅱ(PIVKAⅡ)单独和联合检测对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。方法收集该院62例PHC患者、99例良性肝病患者(对照组)血清,分别进行AFP、AFP-L3和PIVKAⅡ的检测,并采用受试者工作特性曲线(ROC)分析三者在PHC诊断中的价值。结果经Mann-Whitney U检验,PHC组AFP、AFP-L3和PIVKAⅡ三项指标检测结果与对照组比较差异均具有统计学意义(Z值分别为3.87、6.87、4.89,P<0.05);AFP、AFP-L3和PIVKAⅡ单独检测PHC的灵敏度分别为69%、63%、85%,特异度分别为84%、92%、75%,其中PIVKAⅡ诊断PHC的灵敏度高于AFP、AFP-L3(χ2值分别为4.15和5.76,P<0.05),AFP-L3诊断PHC的特异度优于AFP和PIVKAⅡ(χ2值分别为4.87和5.96,P<0.05),而且三者联合检测诊断PHC灵敏度可达90%,特异度可达95%;AFP、AFP-L3和PIVKAⅡ单独运用诊断PHC的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.898(95%CI:0.845~0.951)、0.915(95%CI:0.862~0.968)、0.938(95%CI:0.887~0.989),血清PIVKAⅡ用于诊断PHC的诊断价值优于AFP。结论 AFP、AFP-L3和PIVKAⅡ对诊断PHC具有重要意义,且三者联合检测可大大提高PHC诊断的特异度和灵敏度。

强冷凝集对血常规检测结果的影响及处理措施的探讨

目的探讨强冷凝集对血常规结果的影响以及不同处理方法的效果,以期获得最佳处理方案。方法筛选27例强冷凝集血常规检测标本,对其分别采用37℃水浴法、血浆置换法和样本1∶7预稀释法等3种方法依次处理,然后在SYSMEX-XN1000血细胞分析仪上常规检测并进行手工涂片染色。结果强冷凝集标本处理前上机检测时,仪器出现红细胞凝集相关报警,检测结果中红细胞和血细胞比容(HCT)显著降低,而红细胞平均容积(MCV)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)异常增高(P<0.01);37℃水浴法加热30min后立即检测结果中MCH和MCHC结果稍高(P<0.05),其余项目恢复正常;血浆置换法所得红细胞相关检测指标结果恢复正常,但血小板结果明显降低(P<0.01);1∶7预稀释法所获检测结果各项指标均趋于正常。涂片染色镜下发现,经37℃水浴法处理后的标本仍可见红细胞轻度凝集,而经其余两种方法处理后涂片未见红细胞凝集。结论在临床工作中应注意冷凝集标本的检测以确保结果的准确性,处理强冷凝集标本应用1∶7预稀释法效果优于37℃水浴法和血浆置换法,此法不仅操作简单方便,而且保证了血常规检测结果的准确性。

肝癌外泌体miRNAs研究进展

原发性肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,肝细胞癌(HCC)早期缺乏典型症状,一般不易诊断,超过80%的HCC患者在就诊时已处于中晚期。目前仍缺乏早期诊断HCC的生物标志物,且常规治疗方式效果不尽理想。因此,早期HCC的诊断迫切需要有效的、无创的、特异的生物标志物。此外,还需更多的治疗HCC的生物疗法。越来越多的外泌体miRNAs研究为HCC诊治提出了新的方向,其与HCC的发生、发展密切相关,在HCC诊治及预后评估等方面发挥着重要作用。因此,对HCC的诊治具有巨大的潜在价值。

胃癌患者外周血中单个核细胞及CD3^+CD8^(low)T细胞中ILT3的表达及意义

目的探讨免疫球蛋白样转录子3(ILT3)在胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)和CD3+CD8lowT淋巴细胞亚群中的表达,并分析其表达与胃癌生物学行为和临床病理学特征的关系。方法选择80例胃癌患者及40例健康人对照者为研究对象,用实时荧光定量PCR检测PBMC的ILT3 mRNA的表达,流式细胞术(FACS)检测外周血CD3+CD8lowT淋巴细胞亚群中ILT3的表达,并结合临床病理特征进行分析。结果胃癌患者与健康人对照者PBMC的ILT3 mRNA相对表达量分别为8.465±0.674和6.234±0.556,差异有统计学意义(t=2.160,P<0.05);低分化和中、高分化胃癌患者PBMC的ILT3 mRNA相对表达量分别为8.217±0.433(n=66)和3.656±0.195(n=14),差异有统计学意义(t=4.802,P<0.01);肿瘤未侵及深肌层与侵及深肌层比较,PBMC的ILT3 mRNA相对表达量分别为3.495±0.243(n=24)和7.316±0.404(n=56),差异有统计学意义(t=5.971,P<0.01)。胃癌患者和健康人对照者CD3+CD8lowT淋巴细胞亚群ILT3阳性率为(75.53±2.20)%和(12.83±0.94)%,差异有统计学意义(t=19.67,P<0.01)。结论胃癌患者PBMC的ILT3 mRNA表达与肿瘤细胞分化和浸润程度有关。ILT3在胃癌患者CD3+CD8lowT细胞亚群的表达增强,提示其可能参与肿瘤的免疫逃逸。

环孢菌素A对NK细胞免疫球蛋白样转录子4的表达和杀伤功能的影响

目的探讨CsA对NK细胞抑制性受体ILT4的表达及NK细胞杀伤功能的影响。方法以10mg／LCsA分别处理NK细胞12、24、36h作为3个实验组，以DMSO分别作用NK细胞12、24、36h作为3个对照组。通过RT—qPCR和流式细胞术分别检测各组中NK细胞ILT4mRNA和蛋白表达变化，同时测定人胃癌细胞株BGC-823、绒毛膜癌细胞株JEG-3HLA—G的表达，采用MTT法检测NK细胞经CsA处理36h前后对肿瘤细胞杀伤活性的变化。用药处理不同时间段ILT4表达数据比较先使H{单因素方差分析，再进行各均数问两两比较Dunnettt检验，而JEG-3、BGC-823细胞HLA—G的表达差异及NK细胞对JEG-3、13GC-823细胞的杀伤活性比较采用t检验。结果用RT—qPCR检测经CsA处理12、24、36h组的NK细胞ILT4mRNA相对表达水平依次为0．99±0．27、1．79±0．29、6．79±0．64，经DMSO处理的对照组分别为0．86±0．11、0．94±0．12、1．06±0．17；CsA处理NK细胞24、36h组的ILT4表达较对照组明显增加（t值分别为4．69、14．99，P均〈0．05），而作用12h前后组间的差异无统计学意义（t=0．78，P〉0．05）。刚流式细胞术检测经CsA处理12、24、36h组的NK细胞ILT4蛋白表达阳性率分别为（5．16±0．42）％、（6．23±0．48）％、（23．8±1．5）％，分别高于经DMSO处理12、24、36h组[（3．08±0．19）％、（3．35±0．12）％、（3．36±0．21）％]，且不同处理组在不同处理时间的阳性率比较差异有统计学意义（t值分别为7．70、10．06、20．72，P均〈0．01）；CsA处理NK细胞36h组的ILT4mRNA和蛋白表达均显著高于处理12h和24h组（t值分别为16．38、14．12、21．81、20．56；P均〈0．01）。同时，当经CsA处理前后且效靶比为10：1时，NK细胞对低表达HLA—G的肿瘤细胞BGC-823的杀伤率分别为（81．96±2．80）％、（60．23±1．57）％，CsA对NK细胞杀伤活性的抑制率为（26．48±2．42）％；而NK细胞对高表达HLA—G的JEG-3细胞的杀伤率分别是（53．46±2．21）％、（28．30±1．85）％，抑制率为（47．10±1．59）％。经CsA处理前后NK细胞对肿瘤细胞杀伤活性的变化表明CsA可抑制NK细胞对BGC-823和JEG-3细胞的杀伤（t值分别为11．74、15．16，P均〈0．01），对JEG-3细胞杀伤抑制率显著高于对BGC-823细胞的杀伤抑制率（t=12．31，P〈0．01）。结论CsA可上调NK细胞抑制性受体ILT4的表达，并通过ILT4与HLA—G相互作用影响NK对肿瘤细胞的杀伤。

免疫球蛋白样转录子的研究进展

免疫球蛋白样转录子（ILT）家族表达于髓系和淋巴系细胞表面,包括抑制性受体和激活性受体,通过与相应的配体结合发挥抑制或激活作用.配体包括MHC-Ⅰ类分子及其相关分子.由于抑制性受体与激活性受体特征相似,但在细胞内的功能却截然相反,因而研究ILT的结构、功能及其在临床相关疾病中的作用十分重要.

TNF-α及IL-6基因多态性与大肠癌易感性的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及白细胞介素-6（IL-6）基因多态性与中国山东地区汉族人大肠癌发生发展的关系.方法 采用基因芯片技术检测TNF-α-238G/A、-308G/A以及IL-6-174G/C、-572G/C、-597G/A位点单核苷酸多态性（SNP）,并采用ELISA测定TNF-α及IL-6血清水平.通过病例-对照研究方法分析490例大肠癌与TNF-α-238/-308及IL-6-174/-572/-597 SNPs的关系.采用x2、t检验行相关指标的比较分析;以比值比（OR）及其95%置信区间（95%CI）估计相对风险.结果 （1）大肠癌组TNF-α-308AA频率显著高于对照组（x2 =6.15,P〈0.05）;IL-6-572CC频率显著低于对照组（x2 =4.97,P〈0.05）.（2）结肠癌,管状腺癌及高、中分化腺癌TNF-α-308AA频率均显著高于对照组,其OR（95%CI）分别为：2.31（1.17-4.55）、2.32（1.28-4.21）、2.05（1.01-4.15）及5.88（1.79-19.30）.（3）大肠癌组TNF-α-308AA携带者TNF-α血清水平显著高于G携带者（t=2.13, P〈0.05）及对照组AA携带者（t=2.13, P〈0.05）,IL-6血清水平显著高于对照组（t=6.74,P〈0.001）.结论 TNF-α-308、IL-6-572 SNP与山东地区汉族人大肠癌相关.

呼吸道病原体IgM抗体检测及炎性指标的诊断价值分析

目的 探讨呼吸道感染（respiratory tract infection,RTI）者病原体IgM抗体（IgM antibody,IgM-Ab）及炎性指标的诊断价值.方法 2016年1至6月山东省立医院1316例RTI者中有577例同时检测呼吸道IgM-Ab和细菌培养,分成细菌组50例、病毒组172例、混合组56例和支原体组112例,对照组为180例体检者,分析IgM-Ab及各组炎性指标.结果 IgM-Ab总阳性率为71.12％（936/1316）.单一感染占47.22％（442/936）,混合感染占52.78％（494/936）,577例标本检出致病菌123株（21.32％）.混合组C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）水平大于病毒组（Z=-3.070,P〈0.05）,细菌组、混合组降钙素原（procalcitonin,PCT）水平大于病毒组（Z=-5.512、-4.984,均P〈0.05）和支原体组（Z=-5.174、-5.654,均P〈0.05）,细菌组、混合组PCT阳性率大于病毒组（χ2=30.286、22.695,均P〈0.05）和支原体组（χ2=40.142、31.156,均P〈0.05）.PCT和CRP曲线下面积（AUC）分别为0.751和0.587,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 PCT是细菌性感染的理想标志物,联合IgM-Ab检测对RTI病因学诊断有重要价值.

山东地区汉族人群中TGFβ1及TGFβR2单核苷酸多态性在大肠癌中的分布特征

目的探讨转移生长因子-βl（TGFβ1）及转移生长因子β受体-2（TGFβR2）基因多态性与大肠癌发生发展的关系。方法采用基因芯片技术检测TGFβ1-509C／T及＋869T／C单核苷酸多态性（SNP），并采用ELISA测定TGFβ1血清水平；以限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）检测TGFβR2-875G／A SNP，并以免疫组化检测TGFβR2表达水平。通过病例-对照研究分析490例大肠癌与TGFβ1-509／＋869及TGFβR2-875SNP的关系。采用X^2、t检验行相关指标的比较分析；以比值比（OR）及其95％置信区间（95％CI）评估相对风险。结果（1）大肠癌组TGFβR2-875GG及G频率均显著高于对照组（X^2GG=4．65，P=0．031；X^2G=4．95，P=0．026），TGFβ1-509／＋869SNP各基因型及等位基因频率与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）直肠癌、管状腺癌及高化管状腺癌TGFβR2-875GG及G频率均显著高于对照组，其OR（95％CI）分别为：1．39（1．02～1．95）、1．51（1．14-2．00）、1．68（1．19～2．38）及1．32（1．01～1．73）、1．45（1．14～1．85）、1．62（1．18～2．21）。（3）大肠癌组TGFβR2-875G携带者TGFβ1血清水平显著高于相应AA携带者（t=-3．42，P〈0．05）及对照组AA携带者（t=-5．09，P〈0．001）。（4）直肠癌TGFβR2-875G表达显著下调．低于相应AA携带者（P=0．047）及对照组（P=0．027）。结论TGFβR2-875SNP与大肠癌相关，TGFβR2-875GG可能是大肠癌易感风险因素。

IL-1β及IL-1RN intron2基因多态性在中国山东地区汉族人大肠癌中的分布特征

目的探讨白细胞介素-1β（IL-1β）及白细胞介素-1RN（IL-1RN）基因多态性与中国山东地区汉族人大肠癌的关系。方法用基因芯片检测IL-1β-31／-511位点单核苷酸多态性（SNP）；以凝胶电泳检测IL-1RNintron2基因多态性（VNTR）；以ELISA测定IL-1β／-1ra血清水平。以病例一对照研究方法分析490例大肠癌与IL-1β-31／-511SNP及IL-1RNVNTR的关系。用矿、t检验行相关指标的比较。以比值比（OR）及其95％可信区间（95％CI）估计相对风险。结果（1）大肠癌组IL—1ra／-1β比值显著低于对照组（M=-23，P〈0．01）；IL-1β-5111TT及T频率均显著高于对照组[X^2=5．22，P〈0．05）比（X^2=4．59，P〈0．05）]。（2）直肠癌及管状腺癌组．511TT／T频率均显著高于对照组，其OR（95％CI）分别为，TF：1．59（1．03～2．45）及1．74（1．19～2．55）；T：1．39（1．04～1．86）及1．42（1．10-1．83）。低分化管状腺癌组-511TT频率（61．90％）显著高于对照组；而其cT频率（19．05％）显著低于对照组，其OR（95％CI）分别为，TT：4．57（1．96—10．65）及CT：0．23（0．08—0．64）；中及低分化管状腺癌组-511T频率均显著高于对照组，其OR（95％CI）分别为：5．80（1．24—27．08）及2．35（1．24—4．59）。结论IL．1B．511C／TSNP与山东地区汉族人大肠癌相关。

免疫球蛋白样转录子2在胃癌细胞中的表达及临床意义

目的检测免疫球蛋白样转录子2(ILT2)在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达,分析其表达与胃癌生物学行为和临床特征的关系。方法采用免疫组织化学方法检测50例胃癌病理组织中ILT2蛋白的表达,并结合临床病理指标进行分析。采用实时荧光定量PCR和FACS流式细胞术检测6株高(MKN1)、中(SGC-7901,AGS)、低(MGC-803)及未分化(HGC-27,BCG-823)人胃癌细胞株ILT2的mRNA和蛋白表达。MTT法检测自然杀伤细胞(NK-92)和外周血淋巴细胞(PBMCs)对HGC-27、MKN1两种胃癌细胞的杀伤活性。结果 50例胃癌病理组织中ILT2表达阳性率为62.0%(31/50),正常胃组织不表达ILT2。在低分化型胃癌组织中ILT2表达阳性率为73.3%(22/30),在分化型组织中表达阳性率为45%(9/20),差异有统计学意义(χ2=4.089,P<0.05);肿瘤直径>5 cm时胃癌组织中ILT2表达阳性率为84.2%(16/19),明显高于肿瘤<5 cm时患者阳性率48.4%(15/31),差异有统计学意义(χ2=6.417,P<0.01)。6株人胃癌细胞均表达ILT2,ILT2在低分化和未分化胃癌细胞中表达阳性率高于中分化和高分化细胞(P<0.05)。在不同效靶比下人PBMC及NK-92细胞对MKN1细胞(ILT2低表达)的杀伤能力高于对HGC-27细胞(ILT2高表达)的杀伤(P<0.05)。结论胃癌组织细胞ILT2的表达与细胞分化程度和胃癌临床病理特征显著相关,PBMC和NK-92细胞对高表达ILT2的胃癌细胞的杀伤能力降低。提示ILT2可能参与肿瘤的免疫逃逸并可作为胃癌诊断和治疗的新靶点。