克氏原螯虾虾青蛋白A2基因克隆、组织分布及原核表达

虾青蛋白对甲壳类水产品色泽的形成和调控具有重要作用。为探究克氏原螯虾虾青蛋白A2(PcCRA2)的基因结构及原核表达,作者通过基因克隆获得PcCRA2基因编码序列(cra2),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测cra2基因在克氏原螯虾9种组织中的表达模式,并以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,进行PcCRA2异源重组表达。结果表明,克氏原螯虾cra2基因cDNA全长573 bp,编码190个氨基酸。生物信息学分析显示,虾青蛋白A2相对分子质量为21 158.9,理论等电点为5.59。氨基酸序列比对发现,克氏原螯虾cra2编码蛋白质序列与红螯螯虾相似度最高,为91.58%。RT-qPCR结果显示,cra2在所检组织中均有表达,在表皮的表达量最高(P<0.05)。构建了pET28a-cra2原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达。其最佳诱导表达条件为:接种4 h后加入0.5 mmol/L IPTG于30℃诱导6 h;UV-vis结果表明重组蛋白质能与虾青素特异性结合,最大吸收峰为505 nm。该研究结果为进一步研究虾青蛋白质的生物功能奠定基础。

肌肽对叔丁基过氧化氢诱导肝细胞损伤的修复作用

肌肽是一种新型的食品补充剂,具有多种生物活性功能,已广泛应用于保健品、功能饮料、美容等领域,但肌肽对肝损伤修复的研究与应用鲜有报道。该文旨在研究肌肽对肝损伤的修复作用并探究其作用机制。肌肽预处理正常人肝细胞(normal human hepatocyte,L-02)12 h,400 mmol/mL叔丁基过氧化氢(tert butyl hydrogen peroxide,TBHP)处理L-02细胞4 h,细胞计数试剂盒-8检测细胞存活率,试剂盒检测谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,流氏细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹定量分析氧化信号通路与凋亡信号通路的相关蛋白表达。结果表明,肌肽预处理显著降低了L-02细胞外液ALT、AST活性,抑制ROS形成,提高细胞内GSH含量,显著抑制L-02细胞凋亡,上调核红细胞2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)的蛋白表达,下调Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)、磷酸化氨基末端激酶(amino-terminal kinases phosphorylation,p-JNK)、胱天蛋白酶3(caspase-3,Cas-3)的蛋白表达。肌肽通过调控Keap1-Nrf2与JNK-Cas-3信号通路有效修复TBHP诱导的肝细胞损伤。

草果精油微胶囊的制备工艺优化及性质研究

草果精油易挥发、不稳定的特点限制其应用范围。为了有效提高草果精油利用率,本文对草果精油微胶囊的制备工艺进行优化并对其性质进行探究。以草果精油、乳化剂为芯材,辛烯基琥珀酸酐淀粉钠(Octenyl Succinic Anhydride Starch,OSA淀粉)、麦芽糊精、胶体为壁材,采用喷雾干燥法制备草果精油微胶囊。通过单因素和正交实验优化其制备工艺,并研究了草果精油微胶囊的物理性质、形貌特征、热稳定性。结果表明:最佳工艺配方为草果精油30%(w/w)、单,双甘油脂肪酸酯1%(w/w)、N-CREAMER 46型号OSA淀粉15%(w/w)、阿拉伯胶0.2%(w/w),喷雾干燥制备的草果精油微胶囊包埋率81.07%±3.20%,负载率64.43%±5.32%,水分含量3.40%±0.08%,复水后平均粒径(226.37±3.06)nm,微胶囊产品呈干燥粉末状,复水溶解迅速,包埋效果较好。经过同步热重差热分析,包埋后的草果精油的热稳定性得到了明显提高,扫描电镜观察草果精油微胶囊颗粒分布均匀。本研究可为喷雾干燥法制备草果精油微胶囊的工业生产提供一定技术参考。

扁舵鲣鱼低聚肽对HT-22细胞的神经保护和抗氧化作用

为了评价扁舵鲣鱼低聚肽(Auxis thazard peptides,ATP)的神经保护作用和抗氧化作用,以皮质酮和谷氨酸为诱导剂构建HT-22细胞损伤模型,以细胞形态学、细胞活力、细胞功能和生化指标等指标探究扁舵鲣鱼低聚肽对HT-22损伤细胞的保护作用。结果表明,0.9 mmol/L的皮质酮和15.0 mmol/L的谷氨酸诱导HT-22细胞24 h,细胞存活率为50%左右。在该条件下,10、20、40μg/mL的扁舵鲣鱼低聚肽均能显著抑制皮质酮和谷氨酸引起的HT-22细胞存活率下降,可提高血清素、乙酰胆碱酯酶和胆碱浓度,降低乙酰胆碱活性,抑制皮质酮诱导的细胞损伤,抑制谷氨酸诱导细胞产生的氧化应激,增加超氧化物歧化酶、谷胱甘肽酶与谷胱甘肽过氧化物酶的活性,减少氧化产物丙二醛和活性氧的产生。

高压静电场解冻对凡纳滨对虾肌球蛋白结构特征的影响

该研究以去头凡纳滨对虾为材料,以羰基与总巯基含量、表面疏水性与粒径大小、内源荧光光谱与傅里叶变换红外光谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳的特征等作为考察指标,以自然解冻(nature thawing,NT)作为对照,研究了高压静电场解冻(high voltage electrostatic field thawing,HVEFT)的场强(1.8、3.8、4.3 kV)和温度(5、15、25℃)对去头虾肌球蛋白结构的影响。结果表明,当场强为3.8 kV时,随着温度的升高,总巯基、粒径、α-螺旋的含量呈先增后减的趋势,表面疏水性呈先下降后上升的趋势,羰基和内源荧光强度逐渐增加。当温度在15℃时,随着场强的增加,总巯基、α-螺旋表现为先增后减的趋势,羰基逐渐增加,表面疏水性则呈现出先下降后上升的趋势。综上所述,当场强为3.8 kV,温度为15℃时,高压静电场解冻对去头肌球蛋白结构影响最小。在此条件下,与NT处理组相比,HVEFT处理组样品的总巯基(3.35 mol/104g)和α-螺旋的占比(30.7%)分别是NT的1.15倍和1.17倍,表面疏水性是NT(22.54μg/mL)的0.42倍。结果表明,HVEFT能较好地维持虾肌球蛋白结构稳定性,有利于去头虾解冻后品质的保持。研究结果为高压静电场技术在水产制品解冻中的应用提供科学依据。

等容冷冻技术在食品保存中的研究进展

冷冻是抑制食品腐败变质,延长食品保质期的有效手段。但传统冷冻方法易形成大而不规则的冰晶,导致食品品质的劣变。找到合适的冷冻方式抑制冷冻导致的食品品质劣变是食品冷冻行业亟待解决的问题。等容冷冻是一种新兴的冷冻技术,它利用等容环境中,冰晶的形成增加环境内压,降低液相的凝固点,使得液相处于过冷的环境中,抑制处于液相中的食品中冰晶的出现,降低冰晶生长对食品组织的破坏。该文对等容冷冻的设备、基本原理以及其在食品贮存方面的应用进行了综述,以期为等容冷冻在食品贮存中的应用提供参考。

热风干制凡纳滨对虾口腔加工过程中香气感知特性的研究

为了探究热风干制凡纳滨对虾口腔加工过程中香气感知特性的变化规律,采用气体采集袋结合固相微萃取-气相色谱-质谱技术和暂时性感官支配分析法,研究受试者在不同口腔加工阶段呼气成分、咀嚼参数和感官属性的变化规律,以相对气味活度值为指标,筛选香气感知过程中的主要香气成分。结果表明,口腔加工前期主要是“烟熏味”和“腥味”属性占据主导,虾类特征香气感知主要发生在口腔加工后期,吞咽后“甜香味”和“肉香味”属性占据主导。香气释放曲线表明不同口腔加工过程中的香气释放始终处于动态变化,且具有个体差异性;咀嚼时间和次数与香气释放量存在显著的正相关关系;且吞咽前与吞咽后相比香气释放比率较大。120%口腔加工阶段香气释放对香气感知有重要影响,主要香气物质为2,5-二甲基吡嗪、异戊醛、辛醛、十一醛、2-戊酮,对风味起修饰作用的物质为3-辛醇、辛酸乙酯。综上所述,虾干特征香气感知主要发生在120%口腔加工阶段。该研究为虾干制品开发和品质提升提供科学依据和理论参考。

常压浸渍与脉冲真空浸渍麻辣凤尾虾的风味特性及其风味成分分析

为了研究常压浸渍和脉冲真空浸渍调味技术对麻辣凤尾虾风味特性与风味成分的影响,采用HPLC、原子吸收分光光度法、GC-MS等分析麻辣凤尾虾的羟基-α-山椒素、辣椒素、无机盐离子、呈味核苷酸、游离氨基酸及挥发性风味成分,采用偏最小二乘回归(partial least squares regression,PLSR)对其感官特性与主要风味成分进行相关性分析。结果表明,脉冲真空浸渍麻辣凤尾虾的羟基-α-山椒素含量(146.59μg/mg)显著高于常压浸渍的麻辣凤尾虾的含量(129.29μg/mg)(P<0.05),但常压浸渍的凤尾虾中呈味核苷酸与鲜味氨基酸的鲜味叠加效应更好;GC-MS分析显示,麻辣凤尾虾中共检出72种挥发性化合物,其中含16种香气活性化合物。与常压浸渍处理相比,脉冲真空浸渍处理的挥发性成分和香气活性化合物种类更丰富。常压浸渍调味组有4种(芳樟醇、D-柠檬烯、草蒿脑、月桂烯),脉冲真空浸渍组有7种(芳樟醇、D-柠檬烯、草蒿脑、乙酸芳樟酯、2-酰基-噻唑、β-月桂烯、(Z)-3,7-二甲基-1,3,6-十八烷三烯)。感官特性与主要风味成分PLSR相关分析结果与其风味成分含量一致,脉冲真空浸渍调味组花椒味、辣椒味与香气活性化合物相关性较好,常压浸渍调味组鲜味、甜味与Glu、Ala、IMP相关性较好。研究结果为脉冲真空浸渍技术在水产预制食品品调味上的应用提供了理论基础。

低温等离子体对金鲳鱼肌原纤维蛋白结构特性的影响

采用不同电压(10、20、30 kV)处理金鲳鱼,分析处理后鱼肉肌原纤维蛋白的Ca^(2+)-ATP酶活性、肌原纤维小片化指数(myofibrillary fragmentation index, MFI)、三氯乙酸(trichloroacetic acid, TCA)溶解肽、总氨基酸含量、表面疏水性、紫外吸收光谱、红外光谱和SDS-PAGE,探究低温等离子体(cold plasma, CP)处理对金鲳鱼肌原纤维蛋白结构特性的影响。结果表明,随着CP处理电压的增加,金鲳鱼肉的MFI、TCA溶解肽和总氨基酸含量显著升高(P<0.05),Ca^(2+)-ATP酶活力显著下降(P<0.05),表明肌原纤维蛋白变性程度随电压增加而加深。同时,表面疏水性和紫外吸收强度增加,但是红外光谱和SDS-PAGE未发生显著变化,表明过高电压CP处理会促进蛋白质变性,三级结构发生一定程度舒展,但是对一、二级结构影响较小。综上,在利用CP对水产品进行杀菌时应该避免过高电压导致的水产蛋白质的变性。

鲣鱼蒸煮液营养品质与风味价值评价

该研究以鲣鱼加工过程中的蒸煮液为研究对象,对其中的主要营养成分及挥发性成分组成进行分析,评价鲣鱼蒸煮液的营养品质与风味价值。结果表明,鲣鱼蒸煮液蛋白质含量为(55.69±0.38)%、灰分(32.42±0.02)%与少量的脂肪(0.58±0.04)%;总氨基酸中半必需氨基酸甘氨酸含量最高占(28.81±0.84)%,赖氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和苏氨酸7种必需氨基酸占(22.07±0.37)%;饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸分别占脂肪酸总量的(38.31±0.65)%、(30.83±0.77)%、(30.86±1.42)%;功能性成分肌肽含量为(10.43±2.74)mg/g,鹅肌肽含量为(19.24±1.78)mg/g;GC-MS检测的挥发性物质38种,最多的是醛类15种,其次为烷烃类10种、酮类6种、杂环类3种、醇类3种、芳香族1种。鲣鱼蒸煮液不仅营养品质高,而且富含风味物质与风味前体物质,是功能活性与良好风味物质提取的优质原料。该研究能够为鲣鱼蒸煮液在营养保健与调味品方面的高值化利用提供科学的理论依据。

液相色谱-电喷雾电离质谱与电子轰击质谱联用筛选百合中的甾体皂甙

利用高效液相色谱 电喷雾电离质谱联用仪 (HPLC/ESI MS)、电子轰击质谱 (EI MS)和半制备型高效液相色谱 ,从卷丹百合中筛选出了两种甾体皂甙 ,其中一种为含有 3个糖基与提果皂甙元的甾体皂甙 ,另一种为含有 3个糖基和薯蓣皂甙元的甾体皂甙。结果表明 :在线的HPLC/ESI MS能够准确快速地提供糖甙类化合物的分子质量和糖链部分的有益信息 ,但对甙元部分提供的信息极少 ;离线的EI MS只需极少量 (1mg～ 2mg)的纯品就能准确地提供甙元部分的有益信息 ,但很难获得糖甙的分子离子峰与糖链部分的信息 ,两者有机地结合起来能快速地从植物中筛选甾体皂甙。

湛江海域14种主要海藻SOD含量与活力测定

对湛江海域的14种主要海藻SOD粗酶蛋白含量与活力进行了测定,结果显示:SOD含量高低与活性大小随藻种、生态环境、水分含量及其它成分的含量变化较大,14种海藻SOD粗蛋白的含量在0.14±0.02mg/g～3.62±0.88mg/g干重之间,SOD比活力为182±42U/mg～11303±454U/mg。其中,杉叶蕨藻和总状蕨藻等可食用性海藻SOD粗酶蛋白和比活力均较高,是开发抗衰老与防辐射保健食品的良好天然资源。亨氏马尾藻、半叶马尾藻和小石花菜、鸡毛藻等不可食性海藻SOD粗酶蛋白含量较低,比活力较高,且含有高丰富的多糖类成分,是开发化妆用品的良好天然资源。

百合皂苷的提取分离与结构初步鉴定

以百合鳞茎为原料 ,采用乙醇抽提 ,一系列液 液萃取、AB 8大孔吸附树脂分离、乙醚丙酮分步沉淀与HPLC等多种分离方法 ,以电喷雾质谱 (ESI MS)为手段筛选出了两种甾体皂苷 ,并通过化学与光谱手段对其结构进行了初步鉴定。

长松藻化学成分及其营养评价

分析结果显示,碳水化合物和蛋白质是长松藻的主要成分,两者共占藻体干重的92.0%,其中不溶性膳食纤维占藻体干重的41.5%,蛋白质占19.7%,必需氨基酸丰富,占氨基酸总量的43.5%,氨基酸评分88,限制氨基酸为蛋氨酸和胱氨酸;脂肪含量为4.79%,不饱脂肪酸含量高,占脂肪酸的47.9%;矿质元素含量丰富,尤其是铁和锌含量高。因此,长松藻是一种高膳食纤维、高蛋白、低脂肪、低热量,且富含铁、锌等微量矿质元素的天然理想保健食品原料。

百合淀粉糊化特性的研究

以自制的卷丹百合淀粉为材料,运用差示扫描量热仪对百合淀粉糊化特性进行了研究。结果表明,百合淀粉具有糊化温度低、糊化热焓小、易糊化等特点。整个糊化过程可分为两个阶段,低温(<63.79℃)糊化的特点是速率低,而且不能彻底糊化;高温(>63.79℃)糊化的特点是速率高,可瞬间完成,类似于高活化能的鸡蛋蛋白变性作用。

百合总皂苷定量测定方法的研究

应用比色法研究了百合(Liliumbrowniivar.colchesteri)总皂苷的定量测定方法,结果表明:以甲醇为提取剂,采用超声波提取1h,然后以等体积的水饱和正丁醇萃取4次制备样品,按高氯酸5mL、时间20min、温度55℃的条件进行显色,根据其406nm处的吸光度和回归方程进行百合皂苷的定量测定,该方法具有简单、干扰小、准确度高、分析速度快等优点,适合于大量试样的分析。

总状蕨藻Caulerpa racemosa多糖抗肿瘤和免疫增强活性

以荷S180实体瘤的昆明小鼠为模型,研究了总状蕨藻粗多糖（CRP）的抗瘤作用及其对免疫器官等的影响,采用细胞培养法研究了CRP及其两个主要级分（CRPF1和CRPF2）对正常小鼠免疫细胞功能的影响。实验结果显示：总状蕨藻粗多糖对S180实体瘤具有显著的抑制作用,其抑瘤率和免疫活性与给药方式、剂量等因素有关,在注射和灌胃给药条件下,当CRP剂量分别为25mg/（kg·d）和100mg/（kg·d）时,其抑瘤率达到最大值,分别为46.2%和58.2%,且在注射给药时能显著地增加小鼠的脾脏指数。在50-200mg/（kg.d）范围内,灌胃给药时能升高小鼠碳廓清指数;细胞培养结果显示：CRP能提高正常小鼠的免疫功能,不过,其对静止淋巴细胞增殖的促进作用和对小鼠腹腔巨噬细胞MФ分泌NO的促进作用均小于CRPF1和CRPF2。以上事实表明,总状蕨藻多糖具有较强的抗肿瘤和增强小鼠免疫力的作用。

百合化学成分及其淀粉粒结构与一般特性

对百合基本成分、淀粉粒的表面与晶体结构以及其淀粉的一般特性进行了系统研究,结果显示:百合含有丰富的淀粉、蛋白质与果胶,脂肪含量低;百合淀粉粒具有多种形态,粒径范围宽(10μm～105μm),平均粒径为35μm。百合淀粉粒具有典型的晶体结构特征,晶型为B-型;百合淀粉溶解度和膨润力较马铃薯淀粉与玉米淀粉大;百合淀粉的抗冻稳定性较马铃薯淀粉与玉米淀粉差。

南海3种可食绿藻化学成分及其营养评价

对南海3种可食绿藻条浒苔(Enteromorpha clathrata)、石莼(Ulva lactuca L.)和总状蕨藻(Caulerpa racemosa)的主要化学成分进行了分析,结果显示:多糖、蛋白质和粗纤维是构成藻体的主要化学成分,占藻体的92%以上,其中膳食纤维占64.22%～70.80%;蛋白质占14.15%～18.91%,平均为16.16%,且蛋白质中必需氨基酸含量高,占总氨基酸的42.37%～48.37%,氨基酸评分在73分以上,第一限制氨基酸随藻种而变化;脂肪含量在0.51%～0.81%之间,均低于1%,多不饱和脂肪酸和必需脂肪酸含量高,其含量分别为其总量的56.10%～63.20%和37.71%～39.39%;矿物质和维生素含量丰富,尤其是Fe、Zn、I等矿质元素和维生素C含量高.3种可食绿藻是高膳食纤维,高蛋白,低脂肪,低热能,且富含矿物质和维生素的天然理想保健食品原料.

百合甾体皂苷元的气-质联用分析及其结构鉴定

运用气相色谱 质谱联用仪(GC/MS)对来自百合Liliumbrowniivar.colchesteri中的2种甾体皂苷元进行了直接分析,并根据其GC/MS、红外光谱、紫外光谱和核磁共振碳谱(13C NMR)等数据对其结构进行了鉴定.结果表明:气 质联用仪(GC/MS)直接分析甾体皂苷元快速、方便,不仅需要样品量少,而且能同时获得样品的色谱图和质谱图,适合于大量试样的分析.2种百合皂苷元的光谱数据经分析,并与文献标准对照,鉴定百合皂苷元1为薯蓣皂苷元(diosgenin),百合皂苷元2为提果皂苷元(tigogenin).