H3.3G34W、p63及SATB2免疫组织化学染色联合应用对骨巨细胞瘤的诊断价值

目的探讨H3.3G34W、p63及SATB2在骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCTB)中的表达情况及其联合应用对GCTB的诊断作用和价值。方法收集西安交通大学附属红会医院病理科2020年至2022年诊断的54例GCTB、83例非骨巨细胞瘤(non-giant cell tumor of bone,NGCTB)(包含14例动脉瘤样骨囊肿、16例软骨母细胞瘤和53例非骨化性纤维瘤)患者的样本和病历资料,采用免疫组织化学EliVision法检测H3.3G34W、p63及SATB2的表达情况。通过χ^(2)检验判断H3.3G34W、p63及SATB2的阳性率在各组间是否存在统计学差异;通过Logistic回归分析建立包括H3.3G34W、p63及SATB2的联合诊断模型,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析评价模型的诊断价值。结果H3.3G34W、p63及SATB2在GCTB组中阳性率分别为81.5%、90.7%、92.6%;在NGCTB组中阳性率分别为2.4%、28.9%、62.7%。与NGCTB组相比,GCTB组患者年龄显著较大[(41.222±14.849)vs.(16.566±9.439);P<0.001],女性比男性患病率更高(51.9%vs.48.1%,P<0.001)。与NGCTB组相比,GCTB组中H3.3G34W(81.5%vs.2.4%,P<0.001);p63(90.7%vs.28.9%,P<0.001)和SATB2(92.6%vs.62.7%,P<0.001)的阳性率更高。单因素Logistic回归分析构建单因素预测模型,同时行ROC曲线分析,表明年龄(AUC=92.9%,P<0.001)、性别(AUC=64.5%,P=0.004)、H3.3G34W阳性率(AUC=89.5%,P<0.001)、p63阳性率(AUC=80.9%,P<0.001)、SATB2阳性率(AUC=65.0%,P=0.003)是GCTB诊断的独立预测因素。进一步的多因素Logistic回归分析构建混合预测模型,并行ROC曲线分析,发现混合模型展现出比单因素模型更好的预测价值(AUC=98.4%,P<0.001)。结论H3.3G34W、p63及SATB2是有效诊断GCTB的分子标记物,且三者联合应用更能提高GCTB的诊断预测效能。

自制磷酸钙骨水泥人工骨的生物安全性

目的 评价自制磷酸钙骨水泥人工骨 (CPC)的生物相容性。方法 将CPC人工骨制成生理盐水浸提液 ,培养L 92 9细胞 ,观察浸提液对L 92 9细胞生长和相对增殖度的影响 ,评价CPC人工骨对细胞的潜在毒性作用 ;将CPC人工骨制成一定大小和形状植入新西兰兔股部肌肉 ,观察植入后不同时期试样周围组织反应程度 ,评价CPC对组织的刺激性和相容性。结果 CPC对L 92 9靶细胞未见毒性作用 ;植入后对周围组织、肌肉无刺激反应。

溶瘤病毒抗肿瘤的作用机制及其在骨肉瘤治疗中的研究进展

骨肉瘤是一种骨组织原发性恶性肿瘤,常好发于儿童和青少年,一般可产生局部疼痛、肿胀和活动畸形等临床症状。目前手术切除和化疗是骨肉瘤的常见治疗类型,但由于其高度恶性、耐药性、易复发及易远处转移的特点,临床治疗效果并不理想。近年来,溶瘤病毒作为一种新型的免疫治疗手段参与肿瘤治疗,已成为骨肉瘤研究的新方向。本文旨在综述溶瘤病毒的定义和分类、抗肿瘤机制、治疗骨肉瘤研究进展及与其他疗法协同治疗骨肉瘤的效果,为骨肉瘤提供新的治疗思路。

水泥型羟基磷灰石人工骨的制备及性能分析

目的 制备水泥型羟基磷灰石人工骨 ,并进行性能分析。方法 高温法制备出磷酸四钙 ,然后在模拟体内环境下将其与无水磷酸氢钙发生水化固化反应 ,合成水泥型羟基磷灰石人工骨 ,采用X线衍射、吸水率、孔隙率测量及力学测试进行性能分析 ,并采用扫描电镜观察细胞因子在复合骨块内的分布情况。结果 该人工骨主要成分为低结晶度的羟基磷灰石 ;微观结构呈针状或花瓣状晶体构成 ,微孔直径为 4～ 10 μm ,孔隙相互交通 ;平均密度为 1.92 2 g·cm- 3;平均吸水率为 15 .5 0 3% ;孔隙率为 2 9.777% ;耐压强度为 4 2 .7MPa。结论 本研究所制人工骨具有三维空间结构 ,力学性能符合人体非负重骨植骨要求。

骨髓间质干细胞体外定向诱导分化为软骨细胞的实验研究

目的:探讨分离骨髓间充质干细胞(MSCs)并诱导其向软骨细胞转化的体外培养方法,为软骨组织工程的种子细胞来源提供实验依据。方法:抽取兔髂骨骨髓液,经梯度离心法和贴壁法进行体外培养,贴壁细胞传代,取第3代细胞在培养基中添加软骨分化诱导剂[转化生长因子(TGFβ2)10ng/ml、地塞米松10-7mol/L、维生素C50μmol/L],经7、14、21d诱导培养后,倒置显微镜观察细胞形态,免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。将诱导细胞与软骨支架材料——聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸(CPP/PLLA)复合,1周后终止培养,扫描电镜观察细胞黏附情况。结果:诱导后细胞体外扩增能力显著降低,细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变,诱导21d后细胞形态变化最为显著,Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀。诱导后的MSCs可在支架材料内良好黏附生长。结论:体外培养的MSCs可定向诱导分化为软骨细胞,分泌软骨细胞特异性基质,可用作软骨组织工程的种子细胞。

股骨近端纤维结构不良的手术治疗

目的:通过对股骨近端纤维结构不良病例进行回顾性研究,总结肿瘤学和功能学结果,探讨其治疗方法及效果。方法:2007年4月至2009年1月,收治15例股骨近端纤维结构不良患者,男9例,女6例;年龄16～32岁,平均25岁;单侧病变12例,双侧病变3例;单骨型12例,多骨型3例;病程2个月～16年,平均2年。股骨近端纤维结构不良伴髋内翻2例,颈干角分别为80°和100°,股骨长度较对侧短缩分别为5cm和3cm。所有患者采用病灶刮除、打压植骨(同种异体人工骨和/或自体髂骨)、内固定治疗,其中2例牧羊拐畸形者采用外翻截骨矫形术。结果:所有患者获随访,时间12～32个月,2例股骨近端牧羊拐畸形患者经截骨矫形后畸形矫正,颈干角恢复,股骨长度延长分别为4cm和3cm,术后4个月扶双拐下地行走。所有患者术后病变无复发及内固定物松动,植骨区术后3个月可见局部骨吸收,术后8～12个月植骨区骨愈合,疼痛消失,步态正常。结论:彻底刮除病灶、植骨及有效内固定是治疗股骨近端纤维结构不良的有效方法,对伴有牧羊拐畸形者应同时行外翻截骨以恢复髋关节功能。

自制磷酸钙骨水泥人工骨修复骨缺损的实验研究

目的 观察自制水泥型羟基磷灰石 (CPC)人工骨修复兔桡骨大段骨缺损的成骨效果。方法 将自制的CPC人工骨植入新西兰兔桡骨大段骨缺损模型中 ,术后 4、8、12、16周取材 ,采用HE染色和Masson三色染色分析评价骨缺损修复效果。结果 CPC植入后 4周有新生软骨形成及未成熟的骨组织 ,可见大量的软骨细胞、成骨细胞、胶原组织及较多的小血管。 8～ 16周新骨继续生成 ,人工骨逐渐改建为成熟的板层骨、骨小梁和髓腔结构。结论 自制CPC人工骨有良好的生物相容性和成骨效果 。

AO微创内固定系统治疗股骨远端骨折

目的探讨AO微创内固定系统（LISS）治疗股骨远端骨折的临床效果。方法应用LISS治疗股骨远端骨折15例,33-A2型2例,33-A3型5例,33-C2型5例,33-C3型3例。9例开放骨折为GustiloⅡ-Ⅲ型,其中有4例多发骨折。结果所有患者随访3-19个月,骨折均连接,骨折愈合时间12（8-18）周。未出现钢板螺钉松动移位、骨折塌陷、复位丢失等。HSS评分：优5例,良7例,可3例。膝关节活动范围70°-140°,所有患者膝关节行走无疼痛。结论LISS能有效治疗各种分型的股骨远端骨折,特别是对于骨质疏松患者具有更好的优越性。

转化生长因子-β_2体外诱导骨髓间充质干细胞表达软骨细胞表型的观察

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在转化生长因子(TGF-β2)诱导下向软骨细胞表型转化的能力,探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可能性。方法抽取兔髂骨骨髓液3～4ml,进行原代和传代培养,传代后实验组以高糖DMEM无血清特定培养液诱导,培养液含TGF-β210ng/ml、地塞米松10-7mol/L、维生素C50μmol/L;对照组以高糖DMEM无血清培养液培养,相差显微镜下观察细胞形态变化,免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达。结果诱导后细胞体外扩增能力显著降低,细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变,诱导21d后细胞形态变化最为显著,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色深而均匀。结论TGF-β2可有效诱导MSCs向软骨细胞表型转化,分泌软骨细胞特异性基质,有可能成为软骨组织工程较理想的种子细胞来源。

AO微创内固定系统治疗胫骨近端骨折

目的探讨应用AO微创内固定系统（less invasive stabilization system，LISS）治疗胫骨近端骨折的临床效果。方法2004年2月至2006年1月间，应用LISS治疗胫骨近端骨折18例，41-A2骨折2例，41-A3骨折6例，41-C1骨折5例，41-C2骨折3例，41-C3骨折2例。其中9例开放骨折均为Ⅱ～Ⅲ级，有4例患者为多发骨折患者，伤后4d（2～7d）应用LISS行内固定治疗。结果所有患者随访3～19个月，骨折均连接，平均骨折愈合时间12周（8～18周），未出现钢板螺钉松动移位、骨折塌陷、复位丢失等。胫骨近端骨折18例，HSS评分优10例，良7例，可1例。膝关节活动范围90°～140°，所有患者膝关节行走无疼痛。结论LISS能有效治疗各种分型的胫骨近端骨折，特别是对于骨质疏松患者具有更好的优越性。

磷酸钙骨水泥人工骨的制备及修复兔桡骨大段骨缺损的实验研究

目的 制备水泥型羟基磷灰石(CPC)人工骨,并研究CPC人工骨修复兔桡骨大段骨缺损的成骨效果。方法 高温法制备出磷酸四钙,然后在模拟体内环境下将其与无水磷酸氢钙发生水化固化反应,合成水泥型羟基磷灰石人工骨,将自制的CPC人工骨植入新西兰兔桡骨大段骨缺损模型中,术后4、8、12、16周取材,采用HE染色和Masson三色染色分析评价骨缺损修复效果。结果 CPC植入后4周有新生软骨形成及未成熟的骨组织,可见大量的软骨细胞、成骨细胞、胶原组织及较多的小血管。8～16周新骨继续生成,人工骨逐渐改建为成熟的板层骨、骨小梁和髓腔结构。结论 CPC人工骨制备简单,有良好的生物相容性和成骨效果,可能是一种较理想的骨移植替代材料。

自体腓骨近端游离移植重建桡骨远端骨巨细胞瘤切除后骨缺损

桡骨远端骨巨细胞瘤约占全身骨巨细胞瘤10%,是骨巨细胞瘤的第三好发部位,随着肿瘤发展容易发生病理性骨折,由于缺乏骨质和临近桡腕关节,病灶刮除不是合适的处理方法,而且复发率高。

HA植入治疗犬股骨头骨缺损实验研究

目的 :评价 HA移植对犬股骨头骨缺损的修复作用。方法 :用健康成年杂种犬1 2只共 2 4髋 ,造成股骨头内骨缺损模型。 2个月后动物随机平均分为 A组自然修复组、B组取自体同侧大转子骨植入和 C组 HA植入组。术后 8、1 6周观察不同方法的治疗效果 ,了解股骨头骨缺损的修复情况。结果 :A组所有股骨头表面不光滑 ,软骨下骨板断裂 ,骨质生长不良。B组植入的自体骨坏死 ,坏死骨主要起到成骨支架的作用。C组股骨头表面光滑 ,缺损区骨质生长良好 ,修复较满意。结论 :HA能促进犬股骨头骨缺损修复 ,防止塌陷发生 ,是治疗股骨头骨缺损及早期股骨头坏死的有效方法之一。

HA植入治疗幼犬Perthes病实验研究

目的：评价HA移植对实验性幼犬Legg-Perthes病动物股骨头的修复作用。方法：用TH胶股骨颈内注射法将12只幼犬共24髓制作Legg-Perthes病模型，3mo后动物随机平均分为自然修复组A，自体松质骨移植组B和HA植入组C，术后8、12周观察不同方法的治疗效果。结果：A组所有股骨头变扁，骨质生长不良。B、C组股骨头高度略低于术前，股骨头囊变区骨质生长良好，骨骺高度逐渐恢复，C组HA人工骨大部分降解，修复较满意。结论：HA能促进幼犬股骨头修复，防止塌陷发生，是Legg-Perthes病治疗的一种有效方法。

激素性股骨头缺血坏死发病机制的实验研究

目的 探讨股骨头缺血坏死的发病机制 ,以冀正确指导临床。方法 2 4只日本大耳白兔随机分为模型组和对照组。给模型组动物大剂量肌注醋酸泼尼松龙 (8mg/kg) 8周 ,造成股骨头缺血坏死模型。造模开始后第 4周、8周、12周两组动物各取 2只进行光镜和扫描电镜观察 ,并在两组动物中各取 4只测定晨空腹血中一氧化氮、组织型纤溶酶原激活物、纤溶酶原激活物抑制物的含量。结果 与对照组相比 ,模型组股骨头骨质疏松 ,光镜下空骨陷窝数增多 ,脂肪细胞数增多 ,扫描电镜下骨小梁断裂塌陷 ,骨基质表面胶原纤维松解、断裂。模型组动物与对照组相比血浆中一氧化氮、组织型纤溶酶原激活物含量下降 (P <0 0 1) ,纤溶酶原激活物抑制物的含量升高 (P <0 0 1)。结论 激素性股骨头缺血坏死可能与一氧化氮含量及纤溶系统的活性下降有关。

新型骨组织工程支架材料β-磷酸三钙/聚磷酸钙纤维/聚左旋乳酸的细胞生物相容性

目的:在体外细胞培养条件下,从细胞形态和细胞增殖方面观察新型骨组织工程支架材料β-磷酸三钙/聚磷酸钙纤维/聚左旋乳酸的细胞生物相容性。方法:实验于2002-01/2004-01在西安交通大学医学院实验中心及西安交通大学地方病研究所实验室进行。①材料:β-磷酸三钙为兰州交通大学复合材料研究室制备;磷酸纤维平均直径(15.0±1.2)μm,平均体外生物降解率(3.0±0.46)%,拉伸强度(1.0±0.2)GPa,弹性模量(48.0±7.6)GPa;聚左旋乳酸平均分子质量为27.6×104。支架复合物质量比为β-磷酸三钙∶聚磷酸钙纤维∶聚左旋乳酸=2∶3∶5。②实验方法:按复合材料1g∶浸提介质10mL的比例,用含体积分数为0.1的胎牛血清的DMEM37℃条件下浸提24～72h,制备复合支架材料的浸提液,过滤24h内进行试验。将骨髓基质细胞分为3组,分别用支架材料浸提液(实验组)、DMEM培养液(阴性对照组)和6.4g/L苯酚溶液(阳性对照组)培养,同时实验组将浸提液按100%,75%,50%,25%的浓度稀释分别培养。③观察指标:每日使用倒置相差显微镜观察骨髓基质细胞形态变化;用MTT法检测细胞生长及增殖情况,测定A值,计算细胞增殖率。结果:①细胞形态变化:在细胞培养1,2,3d,阳性对照组细胞数量明显减少,细胞固缩甚至崩解,实验组与阴性对照组细胞数量明显增加,细胞形态正常。②细胞生长及增殖情况:在培养各时间点除阳性对照组毒性为4级(细胞增殖率为0～20%)外,其余均为0级(细胞增殖率>80%);除阳性对照组外,各实验组及阴性对照组A值均随培养天数的增加而升高,培养1,2,3天时阳性对照组的A值明显低于其他组(P<0.01),阴性对照组与实验组间无显著差异(P>0.05)。结论:β-磷酸三钙/聚磷酸钙纤维/聚左旋乳酸复合材料对骨髓基质细胞的增殖分化无明显影响,无细胞毒性,有良好细胞生物相容性。

新型骨组织工程支架材料β-TCP/CPPF/PLLA的性能观察

目的:研究新型骨组织工程支架材料β-TCP/CP-PF/PLLA的降解性能及生物相容性.方法:将试样真空干燥至恒重后放入盛有人工降解液的试管中,在37℃下密闭降解,用扫描电镜观察材料的微观结构.将骨髓基质细胞(BM-SCs)与材料复合构建人工骨,在体外培养3,7d后,扫描电镜观察骨髓基质细胞在材料上的附着及生长情况.结果:降解后的材料仍然具有三维网状的立体结构,扫描电镜(SEM)见在材料表面及内部有大量细胞正常生长.结论:β-TCP/CP-PF/PLLA骨组织工程支架复合材料具有合理的微孔直径、较高的孔隙率,良好的降解性及生物相容性,基本满足骨组织工程的要求.

双切口入路治疗复杂胫骨平台骨折22例

目的：评价双切口入路治疗复杂胫骨平台骨折的疗效。方法：手术治疗复杂胫骨平台骨折22例,均为闭合性骨折。按照Schatzker分型标准：V型13肢,Ⅵ型10肢。均采用双切口入路,双钢板固定手术治疗。结果：随访12~22个月,平均14.6个月。术后骨折愈合时间6~9个月,平均7.4个月。其中1肢因关节面粉碎严重未达到解剖复位;1肢因干骺端粉碎严重未恢复下肢正常力线,出现膝内翻;2肢出现伤口表皮坏死,无骨外露,经换药处理后愈合。膝关节功能按R asm ussen评分标准评定：优10肢,良8肢,可2肢,差3肢。结论：双切口入路降低了软组织的并发症,有利于关节面复位;双钢板固定可靠,可早期行功能锻炼,是一种较好的治疗复杂胫骨平台骨折的手术入路和方法。

兔骨髓基质细胞同种异体移植修复骨缺损的实验研究

目的 :观察同种异体骨髓基质细胞移植治疗骨缺损的效果。方法 :取新生新西兰大白兔四肢长管骨骨髓 ,分离后加入条件培养液体外培养 ,冻存复苏的细胞以明胶海绵吸附后回植于异体兔的桡骨缺损处作为实验侧 ,对侧以明胶海绵吸附生理盐水作为对照侧。分别于术后 2、4、8、 1 2周取材 ,观察其修复骨缺损的能力和免疫排斥反应。结果 :植入异体骨髓基质细胞明胶海绵复合体未见明显的免疫排斥反应 ;术后 1 2周实验侧全部骨性愈合 ,对照侧由纤维组织填充。结论