载脂蛋白A1抗体通过抑制Ca^(2+)载体A23187诱导的Ca^(2+)内流降低精子活力

目的 分析载脂蛋白A1(apo A1)抗体对Ca^(2+)载体A23187诱导的精子Ca^(2+)内流的影响,探讨apo A1抗体与精子活力的关系。方法 收集健康男性精液样本38份。采用免疫荧光法观察apo A1在人精子中的定位和apo A1抗体对精子顶体反应的影响。采用免疫印迹法检测精子获能相关蛋白酪氨酸磷酸化情况。分别采用正常兔Ig G(正常兔Ig G组)和40μg·m L^(-1) apo A1抗体(apo A1抗体组)处理样本,以正常精液样本作为空白对照组,比较各组精子总活力和前向运动精子百分率差异。分别采用正常兔Ig G和10、20、40μg·m L^(-1) apo A1抗体处理Fluo-4AM负载的精子样本,以未作处理的Fluo-4AM负载的精子样本作为空白对照,采用10μmol·L^(-1) A23187诱导30 min,采用流式细胞术检测精子内Ca^(2+)水平。结果 apo A1蛋白定位于人精子头部。apo A1抗体组精子总活力和前向运动精子百分率均显著低于空白对照组和正常兔Ig G组(P<0.001),空白对照组与正常兔Ig G组之间2项指标差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞术结果显示,A23187诱导后,精子内Ca^(2+)荧光强度升高;采用apo A1抗体处理后,Ca^(2+)浓度显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。40μg·m L^(-1) apo A1抗体+A23187组顶体反应率显著低于A23187组和正常兔Ig G+A23187组(P<0.001),且apo A1抗体对精子自发顶体反应无影响。免疫印迹法结果显示,apo A1抗体处理前后精子的蛋白酪氨酸磷酸化无显著变化。结论 apo A1抗体可以通过降低Ca^(2+)内流使精子活力下降,并抑制Ca^(2+)载体A23187诱导的顶体反应。

造血干细胞移植患者术后淋巴细胞亚群水平在移植物抗宿主病中的临床意义

目的 动态监测血液病患者行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)术后30、60、90 d淋巴细胞亚群水平。探讨淋巴细胞亚群水平变化与移植后急性移植物抗宿主病(a GVHD)的相关性,以及监测淋巴细胞亚群的临床意义。方法 选取2019年1月—2021年12月解放军总医院第一医学中心allo-HSCT术后患者33例,根据是否发生a GVHD分为a GVHD组(19例)和非a GVHD组(14例)。采用流式细胞术检测患者移植后30、60、90 d淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD19^(+)、CD16^(+)CD56^(+))和调节性T细胞(CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+))水平,分析淋巴细胞亚群的动态变化特征。比较2组淋巴细胞亚群差异。结果 移植后第30天,患者自然杀伤(NK)细胞相对计数达到较高水平,60 d后逐渐降至正常水平。B细胞长期处于较低水平。T细胞在移植后第30天时处于较低水平,60 d后恢复至正常水平;CD8^(+)在各监测时间点均高于CD4^(+)。淋巴细胞亚群相对计数中,各监测时间点NK细胞、总T细胞、CD8^(+)、CD8^(+)CD28^(+)、CD8^(+)CD28~-差异均具有统计学意义(P<0.05);绝对计数中,各监测时间点仅CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)差异具有统计学意义(P<0.05),NK细胞、B细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05)。此外,a GVHD组和非a GVHD组移植后第30天的调节性T细胞和第60天的CD4^(+)差异有统计学意义(P<0.05),其他淋巴亚群差异无统计学意义(P>0.05)。结论 定期检测造血干细胞移植(HSCT)患者淋巴细胞亚群对监测其免疫重建过程有重要意义。术后监测调节性T细胞有助于临床及时发现a GVHD,提高患者生存率。

尿α1微球蛋白和β2微球蛋白对2-4期慢性肾病患者的诊断价值

目的：探讨尿α1、β2微球蛋白在2～4期慢性肾病患者中诊断价值。方法解放军总医院2011年12月至2013年5月肾内科的134例住院患者和50例健康体检者的尿α1、β2微球蛋白和其他肾功能指标进行检测分析，采用MDRD公式进行肾小球滤过率计算。结果慢性肾病组尿α1、β2微球蛋白水平明显高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0．01）。2～4期慢性肾病患者中尿α1、β2微球蛋白结果呈明显升高趋势，其差异有统计学意义（P＜0．05）。尿α1、β2微球蛋白在3a和3b期中结果有明显差异，3a期尿α1微球蛋白（20．00±18．9）mg/L、3b期（40．5±28．5）mg/L ；3a期β2微球蛋白（4．1±4．0）mg/L、3b期（10．0±8．7）mg/L。相关分析显示，尿α1、β2微球蛋白与肌酐呈显著正相关，与eGFR呈显著负相关。结论尿α1、β2微球蛋白是用于评价慢性肾脏疾病肾功能较好的实验室指标。

血清C反应蛋白、纤维蛋白原与原发性肾病综合征相关分析

目的探讨血清C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)与原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)的相关性。方法采用免疫比浊法测定血清CRP和FIB水平,比较66例PNS患者和40例健康对照组的血清CRP、FIB和其他生化指标。结果 PNS患者血清CRP水平明显高于对照组。Pearson相关分析显示CRP与质量指数(body mass index,BMI)、收缩压(systolic blood pressure,SBP)和舒张压(diastolic blood pressure,DBP)呈正相关(P<0.05),CRP、FIB与24 h尿蛋白相关性分析r值分别为0.615、0.723,显示在试验组CRP、FIB与24 h尿蛋白存在一定程度的正相关关系(P<0.05)。结论 PNS患者体内微炎症反应,凝血状态的变化在PNS的发生和发展过程中起一定作用。

血清胱抑素C与β_2微球蛋白在慢性肾病新分期中的检测与意义

目的探讨血清胱抑素C(Cys C)与β2微球蛋白(β2-MG)在慢性肾脏疾病(CKD)患者新分期中的临床诊断意义。方法选择解放军总医院2011年12月至2013年1月肾内科219例住院患者为研究对象,检测患者Cys C、β2-MG和其他肾功能指标,采用MDRD公式计算肾小球滤过率(eGFR)。分析Cys C、β2-MG与其他检测项目的相关性。结果 CKD不同分期患者Cys C和β2-MG指标差异有统计学意义(P<0.05)。随着eGFR下降,Cys C和β2-MG在CKD新分期中呈明显升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。Cys C和β2-MG与肌酐、尿素氮有较好的相关性。结论 Cys C、β2-MG是用于评价CKD患者肾功能较好的实验室指标。

凝血参数 中性粒细胞/淋巴细胞比值和前列腺抗原在转移性前列腺癌诊断中的临床意义

目的探讨凝血参数、中性粒细胞/淋巴细胞比值等血细胞参数及前列腺抗原等项目在转移性前列腺癌患者中的诊断意义。方法对2011年8月至2013年6月解放军总医院36例良性前列腺增生患者、36例前列腺癌患者以及30例转移性前列腺癌患者的凝血功能、血细胞参数、前列腺抗原、碱性磷酸酶及C反应蛋白进行检测分析。结果转移性前列腺癌患者组的纤维蛋白原和D-二聚体等指标高于良性前列腺增生组和前列腺癌患者组;前列腺癌转移患者组的中性粒细胞、中性粒细胞/淋巴细胞比值指标高于良性前列腺增生组和前列腺癌患者组;前列腺癌转移患者中总前列腺抗原、游离前列腺抗原及C反应蛋白水平明显高于其他两组,差异均有统计学意义(P<0.01)。前列腺癌骨转移患者的碱性磷酸酶水平明显高于其他两组(P<0.01)。凝血功能、细胞参数及生化免疫指标在前列腺癌患者与良性前列腺增生患者间有一定差别,但其差异无统计学意义(P>0.05)。结论纤维蛋白原、D-二聚体、中性粒细胞/淋巴细胞比值等的联合检测对转移性前列腺癌患者的诊断有一定的临床价值。

不断发展的POCT新技术

近年来POCT的应用快速增长,主要分为手持式与台式POCT分析设备,可进行定性与定量分析。新出现的POCT分析设备包括可用于分子检测的仪器,如用于感染性疾病床旁诊断的PCR技术等。POCT的质量管理有助于其在临床应用中的质量提高。

临床检验急诊检验技术人员培训模式的探讨

目的探讨临床检验急诊检验技术人员的培养模式,完善临床检验技术人员培养体系。方法通过建立急诊检验人才培养导师制、急诊检验大讲台、急诊检验微信平台检验报告网络化复检与教学、医疗纠纷现场模拟、急诊检验质量监督等多种形式的培养形式,多方位构建急诊检验人才的培养平台。结果 2011提10月–2015年12月,培养急诊检验带教师资10人,培养急诊检验技术人员80名;开展急诊检验大讲台活动,每年进行急诊检验继续教育专项培训10次;建立急诊检验诊断与教学的微信平台,推出平台栏目开展急诊检验品管圈活动、ISO15189质量评价活动,进行急诊检验的质量监督,ISO15189质量评价活动成为了日常工作的一部分;举行医疗纠纷现场模拟4场次,大大减少了病人投诉事件。结论围绕急诊检验人才培养开展理论授课、网络教学、现场模拟等教学形式的急诊检验人才培养模式,可加强急诊检验人才的培养,促进急诊检验质量的不断提高。

超声处理对大肠杆菌HCV-NS_3融合蛋白纯化的影响

为获得优质的纯化融合蛋白 ,观察了不同超声功率、不同超声时间处理的细菌相对破碎率及处理时样品溶液的温度变化 ,采用 SDS-PAGE观察目的蛋白纯化效果。结果显示 ,短时、高功率。

粪便肿瘤标志物对胃肠道肿瘤的筛查

胃肠道肿瘤的是世界范围内发病率非常高的肿瘤,人一生中患该病风险为6%。早期检测是减少胃肠道肿瘤病死率的关键因素。常用的筛查手段包括内镜检查、粪便隐血试验和粪便DNA分析。内镜检查为金标准方法,但存在有一定的缺陷和局限性。基于联苯胺及其衍生物为底物的化学法隐血试验是较常用的方法,较好的降低了胃肠道肿瘤的发生率和病死率。针对于人血红蛋白的免疫学隐血试验,改善了化学隐血试验受食物及药物的影响,并提高了隐血试验的检出率。粪便DNA检测是早期胃肠道肿瘤检测的新手段,其灵敏度与特异性均达90%,但其存在价格高的不足之处。本文对粪便肿瘤标志物在早期胃肠道肿瘤中的筛查意义作综述。

粪便自动检测分析仪的临床应用评价

目的评估粪便自动化分析仪检测粪便常规的临床应用价值。方法分别采用来源于A、B 2个厂家的粪便自动化分析仪对2 252例中国人民解放军总医院住院患者的粪便标本进行粪便常规检测,以人工镜检作为金标准,对2台分析仪结果进行分析比较,计算仪器检测粪便常规的灵敏度、特异度,观察两种仪器检测结果的一致性。结果 2 252例粪便常规检查中,A厂家粪便分析仪检出红细胞的敏感度为0.768,特异度为0.991;检出白细胞的敏感度为0.597,特异度为0.985。B厂家粪便分析仪检出红细胞的敏感度为0.886,特异度为0.992;检出白细胞的敏感度为0.605,特异度为0.988。结论粪便自动检测分析仪与手工镜检结果一致性较好。

黑火药烟雾致吸入性肺损伤大鼠模型的建立与评价

目的构建黑火药烟雾所致吸入性肺损伤大鼠模型并对其进行评价。方法分析黑火药烟雾成分,建立吸入性肺损伤大鼠模型。42只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组和建模后1、2、6、24、48、96h组(n=6),检测各组大鼠动脉血气的变化,测定肺湿/干比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞数及蛋白含量,并取肺组织行大体及镜下病理组织学观察。结果黑火药烟雾成分主要为CO2和CO,且12min内浓度稳定。大鼠吸入烟雾后表现为低氧血症,COHb于吸入后1h达峰值(P<0.05),W/D于2h达峰值(P<0.05),吸入后24h内BALF白细胞数呈进行性增加(P<0.05),蛋白含量显著增高(P<0.05)。病理观察可见肺组织出血、水肿及炎性细胞浸润,呈急性肺损伤表现,至吸入后96h仍未恢复。结论通过黑火药烟雾暴露可成功建立大鼠吸入性肺损伤模型,且具有易复制、稳定、可靠的优点,可用于战场环境下吸入性肺损伤的实验研究。

慢性肾脏病患者血栓弹力图、凝血参数等指标的分析及临床意义

目的通过常规凝血、血栓弹力图（thrombelastography,TEG）等指标,观察慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）患者凝血状态的变化。方法回顾性选取我院2012年1月-2013年1月90例CKD患者将其分为5组,即CKD 1-2期组、CKD 3期组、CKD 4期组、CKD 5期未透析组及CKD 5期透析组,分析常规凝血功能和TEG等指标在CKD患者各组间的变化。结果 CKD 5期未透析组及透析组的血浆纤维蛋白原（Fib）显著高于CKD 1-2期组（P〈0.05）,其血浆D-二聚体（D-Dimer）也显著高于CKD 1-2期和CKD 3期组（P〈0.05）,而血浆抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）则显著低于CKD 1-2期及CKD 3期组（P〈0.05）。血栓弹力图CKD 5期透析组反应时间（reaction time,R）值、K时间值均低于CKD 1-2期组（P〈0.05）,CKD 5期未透析组及CKD 4期组的最大振幅（maximal amplitude,MA）、G值、综合凝血指数（clot index,CI）均显著高于CKD 1-2期组及CKD 3期组（P〈0.05）。eGFR与各指标的相关性分析结果显示Fib、D-Dimer、MA、G和CI值与eGFR呈负相关（P〈0.05）,AT-Ⅲ、R、K与eGFR呈正相关（P〈0.05）。多元线性回归分析显示CI值的变化与eGFR存在直线回归关系,且与eGFR呈负相关（P〈0.05）。结论 CKD 3-5期患者出现贫血现象和高凝状态,进行凝血参数和TEG等检测利于CKD患者高凝状态的判断。

氢氧化铝干粉与凝胶制作大鼠哮喘模型的效果比较

目的比较利用佐剂氢氧化铝干粉与氢氧化铝凝胶制作大鼠过敏性哮喘模型的建模效果。方法 30只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分为A组(正常对照组)、B组(氢氧化铝凝胶造模组)和C组(氢氧化铝干粉造模组),每组10只。建模后通过观察大鼠行为学改变,检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞变化、肺组织匀浆中细胞因子水平变化及肺组织病理学改变,并评价模型效果。结果 1)B组与C组均出现哮喘症状,但C组发病程度轻于B组。2)B组与C组BALF中细胞总数和嗜酸细胞(eosinophils,EOS)百分比均高于A组(P<0.05),且B组大鼠BALF中细胞总数和EOS百分比显著高于C组(P<0.05)。3)B组与C组肺组织匀浆中IFN-γ含量显著低于A组(P<0.01)。4)B组与C组都表现出哮喘炎症反应的病理改变,其中以B组更为显著。结论氢氧化铝凝胶增强由卵清蛋白(ovalbumin,OVA)所致的过敏反应模型效果优于氢氧化铝干粉模型。

血常规和凝血检测在急性心肌梗死转归期中的临床意义

目的:探讨血常规和凝血检测在急性心肌梗死(AMI)转归期中的临床意义。方法:选取198例明确诊断为急性心肌梗死且出院的患者,按照心肌梗死溶栓治疗(TIMI)危险评分标准将其分为低分组(98例,得分≤4)与高分组(100例,得分>4)。对所有患者在转归期的血常规、生化指标及凝血参数进行检测分析。结果:1血常规:低分组的血小板(PLT)计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和血小板与淋巴细胞比值(PLR)明显低于高分组,差异有统计学意义(t=45.466,t=15.506,t=636.619;P<0.05),其余指标两组之间相比无差异;2生化指标:低分组和高分组的C反应蛋白(CRP)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、血尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及肌钙蛋白T(Tn T)中无统计学差异;3凝血参数:低分组的抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)高于高分组(t=57.869,P<0.05),在凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)与纤维蛋白原(FIB)等指标两组间无差异。结论:血常规PLT、PLR和NLR以及凝血联合检测对急性心肌梗死转归期患者有一定的临床价值。

PL-11血小板功能分析仪检测ADP诱导的血小板聚集率参考区间初步调查

目的评价PL-11血小板功能分析仪(电阻抗法)检测二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集率的性能并初步调查其参考区间。方法参照临床和实验室标准化协会(CLSI)相关文件,评价PL-11血小板功能分析仪检测PLT的精密度、正确度、携带污染率及线性范围,与比浊法检测100例心内科患者ADP诱导的血小板聚集率结果进行对比。用PL-11血小板功能分析仪检测544例体检健康者ADP诱导的血小板聚集率水平,初步建立健康成人ADP诱导的血小板聚率的参考区间。结果PL-11血小板功能分析仪检测PLT的变异系数(CV)<4.0%,偏移<4.0%,在(40～800)×109/L范围内线性良好(R2=0.995 3),携带污染率<1.5%,符合CLSI相关文件要求;电阻抗法和比浊法检测ADP诱导的血小板聚集率结果分别为(67.58±15.14)%、(41.28±15.45)%,相关系数(r)=0.62(P<0.05)。健康成人ADP诱导的血小板聚集率(电阻抗法)的参考区间为49.66%～86.62%。结论 PL-11血小板功能分析仪检测ADP诱导的血小板聚集率性能良好,初步建立了其参考区间。

迈瑞BC-5000全自动血细胞分析仪性能的可靠性研究

目的:研究血细胞分析仪(BC-5000)全血细胞计数(CBC)和白细胞分类(DC)的可靠性。方法:按照相关文件规定对BC-5000的CBC和DC性能指标进行评价,并与参比仪器希斯美康XE-2100(XE-2100)及人工分类进行比较。结果:BC-5000血细胞分析仪CBC的携带污染率、总重复性和精密度均符合要求,在正常及常见的病理范围内线性良好(相关系数r>0.998),与XE-2100血细胞分析仪相关性好(r>0.95);BC-5000血细胞分析仪DC性能评价中,中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的重复性好,与XE-2100血细胞分析仪的结果比较,中性粒细胞(%)、淋巴细胞(%)及嗜酸性粒细胞(%)3个参数的相关性较好(r>0.96),Mon%次之(r=0.9413),Baso%的相关系数最低(r=0.7270)。BC-5000与人工分类的结果比较,Neu%、Lym%及Eos%分类结果的一致性良好(r=0.9806,r=0.9691,r=0.9839),Mon%次之(r=0.8993),Baso%的分类结果相关性欠佳(r=0.4110)。结论:除对怀疑白细胞分类异常的结果需人工分类复核外,BC-5000血细胞分析仪检测的结果准确、可靠,主要性能指标符合临床检验要求。

长链非编码RNA MEG3抑制食管癌细胞增殖和侵袭作用研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MEG3对食管癌细胞增殖和侵袭等生物学行为的调控作用。方法收集食管癌手术患者的肿瘤组织42例(肿瘤组)及与其配对的肿瘤旁正常食管组织42例(对照组),通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测MEG3的表达水平并比较其在肿瘤和正常组织中的表达差异;采用聚乙烯亚胺(PEI)和脂质体分别进行MEG3过表达或干扰消除实验;采用噻唑蓝(MTT)、Transwell小室来对各组的KYSE30细胞的增殖活性和侵袭活性进行检测。结果 RT-PCR的结果显示,与正常组织相比,lncRNA MEG3在食管癌组织中呈现低表达。过表达MEG3抑制食管癌细胞系KYSE30细胞增殖,敲除MEG3之后,能够增加食管癌细胞的增殖和侵袭作用。结论 lncRNA MEG3参与食管癌的发生和发展,在食管癌中作为一个肿瘤抑制基因发挥着关键作用。

快速尿液单羟酚代谢物检测在恶性肿瘤中的诊断价值

目的探讨尿液单羟酚代谢物检测在恶性肿瘤中的诊断价值。方法采用尿液单羟酚试剂盒对本院采集的1 100份尿液样本进行对羟基苯丙氨酸进行检测分析,其中健康者100例(对照组),非肿瘤患者121例(非肿瘤疾病组),病理确诊的恶性肿瘤患者879例(恶性肿瘤组),比较3组研究对象的尿液单羟酚代谢物的水平。结果尿液单羟酚代谢物检测试剂在检测恶性肿瘤、非肿瘤疾病、对照组中的阳性检出率分别为71.2%、20.7%和3%。在恶性肿瘤组中的阳性率明显高于其他组,恶性肿瘤组中消化道肿瘤组的阳性率(87.0%)高于非消化道肿瘤组(56.1%),差异均有统计学意义(P<0.05)。150例经影像及病理诊断的恶性肿瘤及非肿瘤疾病患者进行尿单羟酚检测,一致性检验显示,尿单羟酚试验结果与病理检测结果有中等程度的一致性(Kappa=0.476)。结论尿液单羟酚代谢物检测适用于恶性肿瘤的广谱筛查,特别对消化道肿瘤具有高敏感性及广谱性的优点。