HPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS法的银黄颗粒主要成分定性与定量研究

目的采用高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF-MS/MS）快速鉴定银黄颗粒化学成分和HPLC-DAD法同时定量测定银黄颗粒中15种成分（獐牙菜苷、马钱苷、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、芦丁、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素）。方法分析采用月旭Ultimate-XB C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,体积流量0.8 m L/min,柱温30℃。飞行时间质谱,采用负离子模式扫描。二极管阵列检测器的检测波长为240、276、326 nm。结果 HPLC-Q-TOF-MS/MS法推断鉴定银黄颗粒中的44种成分,HPLC-DAD定量分析银黄颗粒中15种成分在考察的质量浓度范围内,与峰面积之间呈良好的线性关系（r〉0.999 0）;回收率均在97.3%~100.9%范围内,RSD为1.4%~2.8%。结论通过HPLC-Q-TOF-MS/MS法和HPLC-DAD法鉴定银黄颗粒的化学成分优于HPLC法,尤其测定环烯醚萜苷类成分（獐牙菜苷、马钱苷）可为综合评价银黄制剂的质量提供参考。

第二代骨吸收生化标志物——血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b的临床研究

目的 对血清TRACP5b作为骨吸收生化标志物进行临床研究。方法 利用BoneTRAP试剂盒 ,对 473例正常及骨质疏松患者血清做TRACP5b检测及分析。结果 男性和女性 ,随年龄的增加 ,特别是男性更年期及女性绝经期后 ,血清TRACP5b水平均不断升高 ,表明骨吸收增强 ;当患有骨质疏松后 ,血清中TRACP5b的水平高于同龄人 ,且男性及女性骨质疏松患者血清TRACP5b水平均高于正常人 ,统计学提示有显著性差异。

Fas/FasL途径介导的人肺癌细胞免疫逃逸

目的:观察在3种人肺癌细胞(A549、EBC-1、LCSC)和人T细胞(Jurkat)Fas/FasL表达情况,探讨人肺癌细胞免疫逃逸及反杀伤作用与Fas/FasL途径的关系。方法:用FACScan、RT-PCR方法检测Fas/FasL蛋白及mRNA表达;以荧光染色法观察细胞调亡;用台盼蓝拒染法检测细胞存活。结果:3种人肺癌细胞及T-细胞系(Jurkat)均表达Fas及FasL;肺癌细胞与Jurkat细胞共培养时,肺癌细胞可导致Jurkat细胞生长抑制(P<0.05)及凋亡;在共培养体系中加入FasL中和性抗体NOK1,可封闭肺癌细胞对Jurkat细胞的生长抑制作用(P>0.05)。结论:Fas/FasL途径可介导上述3种人肺癌细胞对Jurkat细胞的生长抑制及致凋亡作用;中和性抗体可有效阻断Fas信号转导途径,抑制肿瘤细胞的反杀伤作用,有效保护免疫系统。

太空环境对肿瘤细胞生理特性的影响

将3种肿瘤细胞搭载于“神舟4号”的卫星返回舱内,经过7天太空飞行,回收后对存活细胞进行单克隆化,观察细胞形态,并测定了细胞周期、黏附力及细胞因子表达.结果显示,经太空飞行,小鼠黑色素瘤B16细胞的周期发生改变,G1期细胞明显增多(p<0.05),并表现多种细胞形态;人肺鳞癌细胞L78对血管内皮细胞黏附力明显减弱,但经传代培养其黏附力恢复且超过对照组细胞;Caski细胞IL-2、IL-8、TNF和TGF的表达均明显增加,而L78细胞上述4种细胞因子的表达均显著下降.结论,太空环境可影响肿瘤细胞的某些生理特性,但可否影响肿瘤细胞的免疫原性,仍需做进一步的实验.

IFNγ调控人肺癌A549细胞FasFasL表达对T淋巴细胞生长的影响

为探讨IFNγ调控人肺癌细胞Fas FasL表达对T细胞生长的影响 ,分别采用FACScan、RT PCR方法检测Fas FasL蛋白质及mRNA表达 ;以荧光染色及FACScan法观察细胞调亡 ;用苔酚兰排除实验分析细胞生长。结果表明 ,人肺癌细胞A5 49及T 细胞系 (Jurkat)均有Fas及FasL表达 ;IFNγ可引起A5 49Fas表达上调 ,且与剂量相关 ,并增加了A5 49细胞凋亡诱导的敏感性 ;A5 49细胞与Jurkat细胞共培养实验证明 :人A5 49细胞通过Fas FasL介导导致Jur kat细胞生长抑制及凋亡诱导 ;IFNγ处理A5 49细胞后 ,减少了其对Jurkat细胞的生长抑制。上述结果提示 :Fas FasL途径介导了A5 49细胞与Jurkat细胞之间的凋亡 ,IFNγ通过对人肺癌细胞Fas FasL系统表达调控 ,使A5 49细胞自身对凋亡诱导的敏感性增加 ,并对T细胞生长的抑制作用减弱 。

切应力和TNF-α调节人血管内皮细胞质膜微囊蛋白的表达

目的质膜微囊蛋白(caveolin)是细胞质膜微囊的主要结构蛋白,研究显示caveolin可与多种信号分子相互作用,在细胞信号转导和多种疾病的发生中有重要意义。本研究观察切应力和肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人主动脉内皮细胞(HAECs)caveolin-1表达的调节作用。方法使用培养的3-5代HAECs细胞,采用平行板流动室,产生切应力为1.0Pa的稳定流动环境。内皮细胞经切应力和TNF-α刺激不同时间后,采用Westernblot和RT-PCR测定caveolin-1蛋白和mRNA表达的变化。结果1.0Pa切应力作用24h可明显引起caveolin-1蛋白和mRNA表达的下调,尤其是mRNA表达的下调(P<0.05)。1h和4h的切应力刺激可以引起caveolin-1mRNA表达的明显下调(P<0.05),但4h时caveolin-1蛋白表达尚没有明显下降。24hTNF-α刺激可以引起caveolin-1蛋白和mRNA表达的明显下调(P<0.05)。结论切应力和TNF-α可以抑制caveolin-1mRNA和蛋白表达,这种改变可能会影响动脉粥样硬化斑块的形成。

DFMO通过Fas/FasL通路诱导人肺癌细胞凋亡的研究

背景与目的:Fas/FasL系统是细胞凋亡的重要通路。为了解Fas/FasL系统在肿瘤多胺生物合成抑制导致恶性表型逆转中的作用,本研究拟探讨多胺生物合成抑制剂α-二氟甲基鸟氨酸(α-difluoromethylornithine,DFMO)对人肺癌A549细胞生长、凋亡的影响及其与人肺癌相关抗原、rasP21蛋白及Fas/FasL表达的相关性。方法:用MTT法观察细胞生长,流式细胞仪分析细胞周期,DNAladder电泳法观察细胞凋亡,SP免疫组化法及RT-PCR法检测细胞蛋白及基因表达。结果:DFMO可抑制A549细胞生长并诱导凋亡,使G1期细胞增多(61.0±2.08)%,S期细胞减少(21.2±0.88)%,出现DNAladder;同时下调A549细胞人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达,上调Fas基因mRNA及蛋白表达。结论:DFMO通过Fas/FasL通路诱导肺癌A549细胞的凋亡,并可能与人肺癌相关抗原及rasP21蛋白表达调控有关。

返回式卫星搭载肿瘤细胞和生物工程细胞的初步研究

目的初步探讨空间环境对细胞生长特性的影响。方法利用细胞生存装置将肿瘤细胞及生物工程细胞于我国第 18颗返回式卫星返回舱内进行无源搭载。对返回细胞进行单克隆化 ,光学显微镜观察细胞形态 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,MTT法测定细胞生长曲线。结果空间飞行后 ,肿瘤细胞与生物工程细胞存活率相比明显不同 ,均出现多种细胞形态 ;单克隆株与地面对照相比 ,倍增时间及增殖速度出现快慢不一的变化 ;细胞周期分布改变 ,G1期细胞增多 (P <0 0 5 ) ,S期细胞减少 (P <0 0 5 )。结论空间环境可导致细胞产生多种变异 ,但并非均为可遗传性变异 ,是否能够筛选出所需要的细胞株 ,需做进一步研究。

细胞凋亡与肿瘤

细胞凋亡(apoptosis)是一种不同于细胞坏死的生理性死亡方式,对生物机体的正常发育及自身稳定具有极其重要的作用.细胞凋亡功能的失控可引起机体平衡失调,导致一些相关疾病的发生,如肿瘤、心脑血管疾病等.因此,了解细胞凋亡途径及其调控因素、研究其与肿瘤发生、发展的关系、探讨肿瘤的治疗方案已成为近年来人们关注的热点之一.

HPLC-DAD法分析栝楼桂枝汤血中移行成分

目的研究栝楼桂枝汤血中移行成分。方法采用HPLC-DAD全波长扫描法,色谱柱:Diamonsial C18(460×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱;流速:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样量:10μL。结果采用相对保留时间和DAD全波长扫描图相结合,推测大鼠灌胃给药栝楼桂枝汤后含药血清中有22个入血移行成分,并经标品比对鉴定其中16个化合物:没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷亚硫酸酯、芍药内酯苷、芍药苷、芹糖甘草苷、甘草苷、五没食子酰葡萄糖、芹糖异甘草苷、异甘草苷、芒柄花苷、甘草素、肉桂酸、苯甲酰芍药苷、异甘草素、甘草酸。结论本研究基于DAD全波长扫描法分析复方血中移行成分,为揭示栝楼桂枝汤在体内抗脑卒中后肢体痉挛与神经保护药效物质提供一定实验依据。

大黄素对2型糖尿病大鼠脂肪组织葡萄糖转运蛋白4表达的影响

葡萄糖的利用障碍和生成增加导致2型糖尿病的发生,胰岛素介导下的葡萄糖转运蛋白,尤其是葡萄糖转运蛋白4(GluT-4)作为葡萄糖进入组织细胞的关键因素,与葡萄糖的摄取障碍和胰岛素受体后缺陷疾病密切相关。我们通过实验观察大黄素对2型糖尿病大鼠皮下脂肪组织细胞膜上GluT-4表达的影响,探讨其降血糖的作用机制。1实验材料1.1动物SPF级健康雄性Wistar大鼠30只,

读者活动对培养视障读者阅读习惯的帮助——以贵州省图书馆视障读者活动为例

公共图书馆在如何加强视障人士的阅读工作上付出了巨大的努力,但是我国视障人士的阅读现状却不容乐观,对于视障读者来说阅读习惯的培养存在着内因、外因等不利因素的影响,读者活动的开展可以帮助视障读者克服心理障碍感受阅读乐趣;发挥图书馆服务优势让视障读者感受便利阅读;让视障读者学会使用图书馆;提高全社会对视障人士的关注度,改变阅读现状,满足阅读需求。

网络环境下读者服务工作的思考

在网络环境下要做好读者服务工作,就必须加强网络自动化基础设施建设,积极采取新的工作对策和措施,注重对传统型读者的服务,加强对读者的培训,处理好有偿与无偿服务的关系等问题。

服务工作中对视障读者阅读心理的探索

视力残障者作为一个特殊的群体,在阅读过程中有着独特的心理表现,如孤独感、自卑感、内疚感、怨恨感、依赖性、反复无常性和片面性,其阅读心理可分为求知型、交友型、特长型、被动型、好奇型。图书馆员应掌握视障读者心理,提升自身的服务能力。

浅谈未来图书馆的功能与发展

本文对图书馆的发展从立法、馆舍、藏书、工作人员等方面进行了探讨,浅议了图书馆功能的发展趋势。

抑制多胺生物合成对A549细胞生长及端粒酶激活的抑制作用

目的 :研究抑制多胺生物合成对肿瘤细胞生长及端粒酶活性的作用。方法 :以人肺腺癌A5 49细胞系为模型 ,MTT法观察细胞生长 ;流式细胞分析法、Mary Grnemrold法和DNALadder电泳法检测细胞凋亡 ;端粒酶重复扩增法测定端粒酶活性。结果 :经二氟甲基鸟氨酸 (DFMO)处理的A5 49细胞 ,其生长受到抑制 ,部分细胞发生凋亡 ,端粒酶活性被明显抑制 ,如同时加入外源性腐胺 ,上述现象消失。结论 :DFMO对多胺生物合成的抑制所引起的肿瘤细胞生长抑制及凋亡诱导 ,可能与其对端粒酶激活的抑制有关。

加强公共图书馆为弱势群体服务的思考

为弱势群体服务是公共图书馆读者服务工作的重要内容,是构建社会主义和谐社会的重要组成部分。图书馆要结合自身特点,利用自身优势,运用各种方式充分发挥图书馆的社会教育职能,做好为弱势群体服务的工作。

图书馆导读工作之我见

文章指出导读工作的意义和必要性,分析了目前导读工作存在的不足,并对如何改进导读工作提出自己的看法。

现代技术与中医药古籍的保护利用

保护和利用中医药古籍是实现中医现代化,为中医药教育、临床应用服务的重要内容。我国中医药古籍目前存在着讹误较多,版本杂乱;文献数量巨大,收录散杂等问题。缩微技术、光盘技术、网络技术是中医药古籍保护利用的重要手段。