双酚A通过上调Apoa 1基因的表达抑制TM3细胞睾酮合成

旨在从脂质代谢的角度探讨载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,Apoa 1)是否介导了双酚A(bisphenol A,BPA)暴露所致小鼠睾丸间质细胞株(TM3)睾酮合成的降低。将TM3细胞随机分为不同浓度的BPA暴露剂量(0、5、10、20、40、60、80μmol·L^(-1))组,0μmol·L^(-1)BPA为对照组(CON)。给予相应剂量处理24 h后,运用CCK-8法检测TM3细胞活力,确定BPA最适染毒剂量;通过ELISA检测TM3细胞培养上清液睾酮(testosterone,T)含量;利用RT-qPCR检测TM3细胞脂质代谢相关基因Apoa1、Apoa 2(apolipoprotein A2)、Apoc 3(apolipoprotein C3)的mRNA表达水平;运用Western blot和免疫荧光方法检测APOA1蛋白表达水平;采用油红O染色观察细胞内脂滴累积情况。结果表明,20μmol·L^(-1)BPA处理24 h对TM3细胞活力无显著影响,40μmol·L^(-1)BPA处理24 h后,TM3细胞活力受到极显著抑制(P<0.01);此外,20μmol·L^(-1)BPA处理TM3细胞24 h后,培养上清液中睾酮含量极显著低于对照组(P<0.01),Apoa 1基因的mRNA表达水平及蛋白表达量极显著升高(P<0.001),但Apoa 2和Apoc 3基因的mRNA表达水平无显著变化;与对照组相比,20μmol·L^(-1)BPA处理24 h,TM3细胞的脂滴累积量极显著降低(P<0.0001)。综上,BPA可通过上调Apoa 1基因的表达水平,增强胆固醇逆向转运(reverse cholesterol transport,RCT),引起TM3细胞内的脂滴含量减少,导致TM3细胞的睾酮合成分泌降低。

20种燕麦及青贮饲草农艺性状及营养成分分析

为了鉴选出优质的饲用燕麦品种,本试验测定了白城市农科院种植的20个燕麦品种乳熟期的株高、叶长、叶宽、叶片数、茎粗、粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、粗脂肪、粗灰分、碳水化合物、木质素,并采用灰色关联度分析评价方法进行综合评价。结果表明,(1)‘白燕8号’‘Rus25’‘1425’的农艺性状最优,产量最高。(2)营养成分与饲草品质上,供能方面最适宜选育的品种为‘3695’‘3916’‘1279(2014Rus-14)’,适口性方面‘3916’‘3695’‘Ca89’三个品种最佳,‘白燕8号’‘太8-1’‘Rus25’这三种燕麦综合性评价最优,更适合制作饲草。(3)青贮品质上‘Rus25’和‘3916’灰色关联系数最大,与理想指标最接近,且各项指标排名靠前,品质最优秀。(4)结合20个品种在生产性能、营养成分与饲用品质以及青贮营养成分的表现,‘Rus25’综合表现及单项指标表现均处于前列,品质最好。

生物素标记的6种cDNA探针检测H22、EAC及其克隆细胞株mRNA的表达

目的 检测H2 2、EAC瘤细胞及其克隆细胞株mRNA的表达。方法 用生物素标记的 6种cDNA探针 ,细胞玻片原位杂交的方法。结果 H2 2与生物素标记的 4种探针杂交阳性 ,其克隆细胞株H2D8、H2G4分别与 3及 1种探针杂交阳性 ;EAC细胞株与 4种探针杂交阳性 ,克隆细胞株E2G8与 2种探针杂交阳性 ,E2C6克隆细胞株与 6种探针杂交均阴性。

PCR法诊断奶牛腐蹄病坏死梭杆菌的研究与应用

试验根据坏死梭杆菌白细胞毒素基因序列的特异性,设计1对引物FLP并建立了PCR检测方法。试验结果表明,引物FLP具有相对较高的特异性和敏感性,其敏感性达到了48.5pg。对现地采集奶牛蹄部病料进行PCR检测,发现引物FLP具有很好的特异性,能够准确诊断出坏死梭杆菌的存在。

是否应重新重视RNA在启动基因中的作用

比较真核生物与原核生物的区别 ,分析RNA活化基因的证据 ,作者认为基因组中广泛存在的无转录、无编码功能的DNA序列及内含子RNA可能有重要的生物学功能 。

X染色体的DNA序列结构不同于6、7、8、10、11、12号染色体(英文)

雌性哺乳动物X染色体上的大部分基因均因X染色体失活作用而失去表达能力 ,X染色体长臂表现失活更明显。虽然对X染色体失活的许多方面都有所了解 ,但是仍然不清楚失活信号沿着X染色体全长扩散的机制。为了了解X染色体是否有不同于其他染色体的基因组学特征 ,这些特征是否关系到X染色体的失活扩散和维持 ,分析 6、7、8、1 0、1 1、1 2号染色体和X染色体DNA序列 7碱基 (7nt)组合水平的结构是否显示差异。从NCBI基因库(http :∥www .ncbi.nlm .nih .gov genome guide)下载 7条染色体长臂各 6 0Mb区域。将这 6 0Mb区域分为 0 5Mb (或 5 0kb)一段 ,对每一段DNA做 7nt字符串组合分析 ,如 1～ 7,2～ 8,3～ 9…… ,记录每种 7nt字符串的频率 ,A、C、G和T4个硷基的 7nt字符串共有 4 7=1 6 384种组合。根据数字差异显示的结果 (http :∥www .ncbi.nlm .nih .gov genome guide) ,选择在扁桃腺生发中心B细胞中高表达的基因 70个 ,用以计算所有内含子 (有义链 )的 7nt频率值。每个内含子被记录为一组 7nt频率值 ,求和相同基因中的所有内含子相同 7nt字符串的频率值 ,再用该和乘以该基因的表达频率得该基因 7nt字符串的频率值 ,求和 70个基因的 7nt字符串的频率值称做intron 7nt,该值试图模拟细胞中RNA小片段的总和。?

生物素标记的6种cDNA探针检测S180及其克隆细胞株mRNA的表达

目的 检测S180及其克隆细胞株S1B11及S2D9mRNA的表达 ,对这些细胞株进行识别和质量控制。方法 用生物素标记的 6种cDNA探针 ,细胞玻片原位杂交的方法检测细胞中mRNA的表达。结果 北京市肿瘤研究所 (肿瘤所 )保存的S180与生物素标记的P16、c fos、c myc及c jun探针杂交阳性 ,克隆细胞株S1B11与c fos及c jun探针杂交阳性 ,克隆细胞株S2D9与c fos、c myc及c jun探针杂交阳性。结论 肿瘤所S180及其 2株克隆细胞中mRNA的表达不同 ,c myc基因的表达与否可以把S1B11及S2D9克隆细胞区别开 ;

绵羊安氟醚低流量吸入麻醉的研究

应用吸入麻醉药安氟醚 ,对绵羊进行低流量吸入麻醉 ,试验通过监测其对心、脑、呼吸及循环等功能的影响及变化 ,结果在麻醉试验中 ,经临床各项反射、痛觉监测 ,证明安氟醚肺泡有效浓度达 2 .2 %时 ,麻醉效果良好 ,且达到外科手术级的麻醉深度 ;脑电图监测显示其频率和波幅变化与麻醉深浅呈一致性变化。呼吸监测结果显示其呼吸系统的各项生理指标基本维持在正常范围内 ,不致发生呼吸性酸中毒等变化 ,并能防止因呼吸抑制而发生死亡。试验表明 ,安氟醚麻醉诱导快 ,麻醉安全范围大 ,易维持和控制麻醉深度 ,苏醒快 ;且低流量吸入麻醉法 ,具有麻醉平稳、用药量少。

RNA促进小鼠重组染色质白蛋白基因DNaseⅠ消化敏感性

同样的基因在不同的分化细胞中表达不同,基因的选择性表达问题涉及分化和衰老的本质。转录基因对DNaseⅠ(DNA酶Ⅰ)消化敏感,本文研究了RNA对小鼠重组染色质白蛋白基因DNaseⅠ消化敏感性的影响。分离BALB/c小鼠脑细胞核,加入终浓度为2mol/L的NaCl破坏核小体结构,加入不同量、不同来源的RNA,装透析袋,逐渐降低离子强度进行染色质重组。重组染色质中加入DNaseⅠ消化DNA,PCR扩增白蛋白基因的外显子1到外显子2约1200bp区段,PAGE电泳后,用银染色观察不同来源RNA促进DNaseⅠ对白蛋白基因的消化作用。不同组织来源(肝、肺、肾、脑)RNA对小鼠重组染色质中白蛋白基因DNaseⅠ消化敏感性均有促进作用,其中肝和肺RNA促进消化作用较强;酵母tRNA无显著促进消化作用;消化促进作用与RNA剂量有关。RNA能增加DNaseⅠ对白蛋白基因的消化敏感性且有组织(细胞)来源特异性。又委托丹麦ChemicalRD实验室合成2条与白蛋白基因互补的各23核苷酸的RNA,用其进行重组试验。结果表明,重组混合物中含有低至0.2μg/mL的RNA,即可以发挥显著的DNaseI消化促进作用。

人X染色体长臂(Xq)和短臂(Xp)基因组学比较分析(英文)

X染色体发生X染色体失活 ,但是Xp基因有 30 %表现为逃逸 ,而Xq仅不到 3%。为了研究X染色体基因失活和表达逃逸发生和维持的分子机制 ,比较了Xq和XpDNA序列的RNA模拟结合强度。X染色体的核苷酸序列被分为 5 0kb一段 ,对每一段DNA做 7碱基 (7nt)字符串组合分析 (共有 4 7=16 384种组合 ) ,记录每段 5 0kbDNA中每种 7nt字符串的频率。选择生发中心B细胞中的 12 0个高表达基因 ,计算这些基因的内含子 7nt字符串的出现频率 ,称为intron 7nt,以此作为RNAs(RNA群 ,模拟细胞中RNA在小片段的总和 )。已知一段DNA序列的 7nt频率值和intron 7nt,即可以计算该DNA段与intron 7nt的结合强度。每段 5 0kbDNA与intron 7nt的结合强度取决于该DNA段与intron 7nt互补核苷酸的频率 ,互补的核苷酸序列越多 ,结合强度就越大。DNA段与intron 7nt的模拟结合强度称为RNA结合强度 ,试图模拟该段DNA可以结合的RNA小片段的总量。之所以采用 7nt字符串组合分析是考虑到连续 7个核苷酸互补则可以形成相对稳定的结合。研究发现 :1)Xp各DNA段的RNA结合强度均值显著大于Xq (P <0 0 0 1) ;2 )Xp上高结合RNA的DNA段数目显著高于Xq (P <0 0 0 1) ;3)RNA高结合DNA段形成的簇与X染色体基因表达逃逸区关联。有证据表明 。

紧闭式吸入麻醉在我国兽医界的应用前景

吸入麻醉的主要优点是发挥作用快，容易控制麻醉深度，可迅速终止麻醉，不但安全可靠而且麻醉效果好，可以满足各种重大手术的要求。吸入麻醉作为全身麻醉的一种主要手段，在医学界和国外兽医学界不断应用与发展，发现紧闭式吸入方式要比其他吸入麻醉方式（包括开放式、半...

ELISA检测法对石家庄地区大、小鼠病毒感染的调查

用间接ELISA方法对石家庄地区三个单位一、二级大、小鼠病毒感染情况进行了调查。所用抗原来源为:淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）、痘苗病毒[抗原性与鼠痘病毒（POXV）类似]和仙台病毒（SendaiV）用BHK21细胞培养;鼠肝炎病毒（MHV）用DBT细胞培养;流行性出血热病毒（EHFV）ELISA抗原购自卫生部生物制品检定所。实验方法是用病毒抗原包被微孔板。

一种新的衰老学说——基因阻遏平衡论

基因阻遏平衡论试图用统一的观点解释所有的生命现象。基因阻遏平衡论提出以下新论点：三级基因，基因链，不存在衰老基因，衰老是因为上级基因抑制，衰老是流动的过程，衰老有重要的生物意义，衰老、肿瘤和分化有共同的基础。