4种中药对体外培养兔关节软骨细胞代谢的影响

采用家兔关节软骨细胞体外培养的方法，通过同位素示踪探讨当归、丹参、黄芪、川芎嗪４种中药对软骨细胞ＤＮＡ、蛋白多糖以及胶原合成的影响。实验结果显示：１％当归、１％黄芪、１％川芎嗪能促进ＤＮＡ合成，１０％当归无促进作用，１％丹参、１０％丹参，１０％黄芪、１０％川芎嗪则能起抑制作用；１％或１０％当归、黄芪、川芎嗪可促进胶原合成，１０％丹参无影响，１％丹参有抑制作用；１％当归、１０％当归、１％丹参、１０％川芎嗪能促进蛋白多糖的合成，１０％丹参、１％黄芪、１０％黄芪、１％川芎嗪则无影响。本研究证明：当归、黄芪、川芎嗪能显著地促进体外培养的兔关节软骨细胞代谢，有可能促进软骨损伤的修复。这对探讨中药制剂对关节软骨损伤修复的作用机理和寻找有效的治疗药物有一定意义。

淫羊藿糖浆对家兔血浆睾酮水平的影响

为了探索淫羊藿糖浆对增强体能和消除运动性疲劳的作用机理，以雄性家兔为实验对象，通过观察服用淫羊藿糖浆后血睾酮的动态性变化，来阐明淫羊藿的某些药理作用。实验结果表明，淫羊藿糖浆能使雄性家兔血睾酮水平升高，约为对照组的２倍，但比肌肉注射丙酸睾丸酮组低。停药３天后，血睾酮水平均降至正常范围。说明淫羊藿能刺激家兔睾酮的分泌增加。

体外培养的兔软骨细胞对某些中药反应的超微结构观察

本研究采用家兔关节软骨细胞体外培养的方法,采用扫描及透射电镜,结合计量学的方法,从超微结构来观察4种中药当归、丹参、黄芪、川芎嗪对培养的软骨细胞的影响。扫描电镜观察细胞表面形态结构:纤细突起、囊泡和皱折,间接证实当归、丹参、川芎嗪具有改善软骨细胞功能作用。透射电镜观察刭,当归、丹参、川芎嗪3组细胞线粒体丰富,粗面内质网发达,当归和川芎嗪组高尔基体增多。软骨细胞核定量分析显示当归和丹参组的细胞核面积增大。本研究证明,当归、丹参、川芎嗪有促进体外培养的兔软骨细胞的合成代谢功能。

骨关节病滑膜细胞凋亡和癌基因表达

为了探索骨关节病在细胞和分子水平上的发病机理，观察了骨关节病的关节滑膜细胞的凋亡和癌基因表达。采用ＤＮＡ末端转移酶介导的凋亡细胞原位检测技术，检测正常滑膜和病理滑膜细胞程序化死亡，同时，采用免疫组化法观察ｐ５３，ｅｒｂＢ－２和ＰＣＮＡ在滑膜细胞中的表达。结果发现骨关节病中有，７７．８％出现滑膜细胞凋亡，与正常对照有明显差别。病理组中癌基因表达昨３阳性占７１．４％，ｅｒｂＢ－２阳性占７１．４％，ＰＣＮＡ在正常和病理滑膜细胞中均呈阴性表达。说明细胞凋亡和多种癌基因的产物有关，ｐ５３和ｅｒｂＢ－２对细胞凋亡有调节作用。

低强度脉冲超声对新生骨成熟过程的影响

目的:探讨低强度脉冲超声对兔四肢骨延长模型新生骨成熟过程的影响。方法:60只成年新西兰兔随机分为低强度超声治疗组和空白对照组,所有动物行胫骨中段截骨并以Orthofix M103型迷你外固定架延长器固定,术后7 d后以0.5 mm/12 h延长10 d,超声治疗组在骨延长完成后以超声骨折治疗仪治疗4周,对照组不予治疗。分别于骨延长完成后4周、8周、12周处死治疗组及对照组实验动物,并收集新生骨标本。在骨延长后12周摄X光片,用ImageJ图像分析软件进行影像学分析,比较骨痂生长情况。用双能X线吸收测量法(dual energy X-ray absorptiometry,DEXA)测量兔胫骨中段骨密度。取8周组、12周组双侧兔胫骨标本做扭转生物力学测试。结果:以图像分析软件测量X线片上的12周组新生骨灰度值,发现12周治疗组的灰度值明显高于对照组(P<0.05)。DEXA测量显示8周和12周治疗组新生骨的骨密度大于对照组(P<0.05)。生物力学测试中,8周和12周治疗组的最大扭力、极限扭转强度、破裂能各指标均优于对照组(P<0.05)。结论:低强度超声可作为一种生物物理刺激促使兔胫骨骨折部位成骨。

低强度脉冲超声对兔腰椎融合区软骨内成骨的影响

目的:观察低强度脉冲超声对兔腰椎融合区软骨内成骨的影响,探讨其可能的作用机制。方法:20只新西兰兔行双侧腰椎后外侧融合术,左侧植入自体髂骨,右侧植入羟基磷灰石人工骨。所有实验兔随机分成治疗组和对照组,治疗组于术后1周开始低强度脉冲超声治疗,共4周;对照组予以假治疗。于手术结束及超声治疗结束时摄腰椎后前位X线片观察融合情况;组织学检测观察融合区形态学结构,并计数软骨细胞。结果:治疗组X线融合率明显高于对照组(P<0.05)。组织学切片发现治疗组融合区骨小梁结构丰富,软骨细胞数量明显高于对照组(P<0.05),髂骨组与人工骨组治疗后软骨细胞数量无统计学差异(P>0.05)。结论:低强度脉冲超声能提高兔腰椎后外侧融合的植骨融合率,其可能机制是促进软骨内成骨。

骨关节病关节软骨细胞线粒体DNA突变检测

目的 :探讨线粒体DNA突变在退行性疾病骨关节病发病中的意义。方法 :采用PCR -SSCP技术 ,结合线粒体DNA测序方法 ,检测了 8例骨关节病和 3例正常人的关节软骨细胞线粒体DNA在一个特点区域 (np:80 0 0— 90 0 0 )内的突变改变。结果 :在 8例骨关节病例中 ,有 4例出现了线粒体DNA突变 (不包含中性突变 ) ,其中单有点突变并导致氨基酸发生改变的有 2例 ,单有缺失突变的有 1例 ,既有点突变又有缺失突变的有 1例 ;此外 ,发现中性突变 (不改变氨基酸 )的有 4例 ;1例正常标本发现有线粒体DNA点突变存在 ;所有进行了DNA测序检测的标本均发现线粒体DNA886 0位点AG的突变。结论 :骨关节病与线粒体DNA突变有密切关系 ,但其因果关系尚待进一步研究。

髌骨关节软骨体视学研究

采用体视学的方法，测量家兔髌骨软骨负重区的软骨体视学变化，包括软骨细胞数、体密度、面密度、比表面等各项指标。利用图象分析技术进行关节定量化的形态学分析，对于研究关节软骨损伤，修复过程及软骨疾病的发病原理均有重要意义。实验结果表明，透明软骨与钙化软骨具有显著差别。透明软骨除单个细胞面积数值较小外，其体密度、面密度、数密度和比表面均较钙化软骨的数值为高。透明软骨细胞核的体密度和面密度亦高于钙化软骨细胞核。这些数据对研究关节软骨功能和病理变化有重要意义。

骨关节炎关节软骨中软骨细胞线粒体DNA缺失突变的分析(英文)

目的：分析骨关节炎病人关节软骨组织中软骨细胞线粒体DNA序列变化，探讨骨关节炎发病的潜在病理机制。方法：应用gap—PCR扩增方法检测10例骨关节炎病人和3例正常关节软骨中软骨细胞线粒体DNA的4977bp缺失突变。采用2轮PCR扩增，第1轮PCR反应以骨关节炎病人的关节软骨中软骨细胞线粒体DNA为模板；第2轮PCR扩增反应以第1轮PCR扩增反应的产物为模板，再次进行扩增。结果：第1轮PCR反应结果显示，mtDNA524bp扩增产物呈阴性，而533bp扩增产物均呈阳性；第2轮PCR扩增反应结果显示，10例骨关节炎病人病例标本中有2例出现524bp区带，而533bp扩增产物均呈阳性。两次扩增，正常关节软骨中软骨细胞和外周血对照524bp扩增产物全部为阴性。结论：骨关节炎病人关节软骨组织中软骨细胞线粒体DNA有8470～13447nt之间4977bp大片段缺失，提示骨关节炎的发病与关节软骨中软骨细胞线粒体DNA的突变关系密切。

运动与心理健康

在国外,体育运动正日益成为一种能提高和维持良好心理状态的手段。尽管其间的因果联系尚未完全阐明,但有越来越多的研究显示,运动与心理状态的改变密切相关。运动对正常人心理健康的调节作用是适量的。

骨关节病关节软骨细胞癌基因表达及其相互关系

为了探索骨关节病在分子水平上的发病机理 ,观察了骨关节病的关节软骨细胞的癌基因表达及其相互关系。采用免疫组化方法 ,原位检测骨关节病关节软骨细胞的癌基因 (p5 3、p16、bcl- 2、erbB - 2 ,C -myc) ,以及增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 ,并观察其相互关系。结果发现 ,正常软骨细胞对数种癌基因呈弱阳性表达 ,骨关节病关节软骨细胞中的这些癌基因表达信号增强且阳性表达细胞数明显增多 ,erbB - 2和bcl- 2的阳性表达有同步关联。提示多种癌基因表达 ,可能与骨关节病的发病密切相关 ,但其中许多问题尚待进一步研究。

基因治疗在运动医学中的应用

基因治疗是人类很多疾病治疗的重大变革，为人类战胜疾病，延长寿命，提供了新的途径。人类基因治疗领域的发展速度非常迅猛，已由早期针对单基因遗传性疾病的治疗迅速扩展到治疗获得性疾病，而且基因转移还可用作一种药物的传递系统。运动创伤经常涉及一些愈合能力十分有...

兔骨关节炎软骨细胞中caspase-3表达及其细胞凋亡的研究

【目的】观察兔骨关节炎软骨细胞中caspase-3的表达,探讨其与软骨细胞凋亡的关系。【方法】Hulth法建造兔右膝骨关节炎动物模型。造模4周后,解剖其双侧膝关节,取出关节软骨观察软骨退变情况,观测软骨细胞caspase-3的表达,检测软骨细胞凋亡。【结果】骨关节炎组软骨细胞caspase-3的表达以及软骨细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05)。【结论】骨关节炎软骨细胞中caspase-3的高表达,与软骨细胞凋亡密切相关。

颈性头痛的发病因素及治疗现状

颈性头痛或颈椎性头痛,也称为颈性头痛综合征,是一种非遗传性、单侧性头痛。其诊断主要依据病史及症状,神经学的检查无阳性结果,影象学检查对鉴别诊断有价值。其发病大多是多因素综合所致。目前治疗本病的方法主要有:①枕大神经阻滞术;②颈硬膜外麻醉;③射频治疗;④麻醉下颈椎手法。

用氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的研究

目的:评价氧化铁磁性纳米颗粒(nanoparticles)作为基因载体的可行性。方法:应用沉淀法制成外包葡聚糖的氧化铁磁性生物纳米颗粒DextranCoatedIronOxideNanoparticlesDCIONP。用分光光度计及琼脂糖凝胶电泳分析氧化铁磁性生物纳米颗粒的DNA结合力及抵抗DNASEⅠ消化的作用。以绿色荧光蛋白基因为报道基因,进行用氧化铁磁性纳米颗粒作为基因载体的体外细胞转染实验。结果:电镜检测证实DCIONP的直径在10纳米(nanometernm)左右。在酸性条件下,这种纳米颗粒表现出DNA结合力和抵抗DNASEⅠ消化的作用从而证明DCIONP与DNA的结合是静电引力的作用。在氧化铁磁性生物纳米颗粒表面修饰阳离子聚合物多聚赖氨酸DextranCoatedIronOxideNanoparticlesmodifiedwithPolyLLysine,PLLDCIONP在中性及碱性的条件下,亦可与带阴性电荷的DNA结合及抵抗DNASEⅠ消化的作用。PLLDCIONP可作为基因载体将报道基因转染入细胞,用荧光显微镜可观察到发绿色荧光的细胞。在PLLDCIONP和质粒的质量成一定的比例时,PLLDCIONP的转染效率高于脂质体。结论:PLLDCIONP可作为DNA转移载体。

关节镜下清理并半月板切除治疗合并膝骨关节炎的半月板损伤

目的探讨关节镜下清理并半月板切除治疗合并早、中期膝关节骨关节炎(KOA)的中、重度半月板损伤的疗效。方法选取2011年10月-2014年10月该科156例合并有早、中期KOA的中、重度半月板损伤患者,行关节镜下清理并半月板切除术。术前对所有患者行Lysholm膝关节功能评分,常规行膝关节正侧位、髌骨轴位、双下肢全长站立位X片和患膝磁共振成像(MRI)检查,明确KOA诊断和临床分期以及半月板损伤诊断和分级。所有患者均在全麻下行关节镜下关节清理并半月板切除术。术后积极行患肢康复训练,术后7~10天出院,出院后佩戴护膝负重行走。采用门诊复诊或电话方式对患者进行随访。结果所有患者均无围手术感染、化脓性关节炎等严重围手术期并发症;术后随访6~12个月,平均10.9个月。Lysholm膝关节功能评分术后(87.3±7.9)明显优于术前(67.5±4.9)(P<0.05)。结论关节镜下清理并半月板切除治疗合并早、中期KOA的中、重度半月板损伤,创伤小、恢复快、近期疗效良好。

生物荧光氧化硅纳米颗粒的研制与应用

运用OP-10(壬基酚聚氧乙烯醚)/环己烷/氨水微乳液自组装体系合成了罗丹明B嵌入的荧光氧化硅纳米颗粒.通过电镜检测、光谱分析以及荧光猝灭试验研究了荧光颗粒的特性.将荧光纳米颗粒与培养细胞共培育后,通过激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪研究了不同时间点细胞内荧光信号和荧光强度.结果表明,合成的荧光氧化硅纳米颗粒粒径小(约20nm),分布均匀,形态规则,表面光滑圆润,发光性质稳定.它可被体外培养细胞有效摄入,并可在培养细胞中检测到较强的荧光信号和较高的荧光强度.这提示生物荧光氧化硅纳米颗粒在细胞生物学、超微化学与免疫检测等领域将具有重要应用前景.

川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型caspase-3和NF表达的影响

目的:观察川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型损伤段半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和神经丝蛋白(NF)表达的影响。方法:SD大鼠88只,随机分为空白对照组,生理盐水组和川芎嗪组。采用改良ALLEN氏打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型。采用改良Rivlin斜板实验和BBB评分对大鼠脊髓功能进行行为学评分。在建模后1h,3h,6h,1d,3d,7d,14d和21d获取损伤段脊髓标本,HE染色观察其组织病理变化;免疫组织化学染色检测caspase-3和NF-L,NF-H,NF-M表达,并进行相关分析。结果:随着时间推移,术后斜板临界度数和BBB评分均逐渐升高,且术后7,14和21d,川芎嗪组斜板临界度数和BBB评分均较对照组高(P<0.05)。术后3,7和14d,川芎嗪组caspase-3表达值较生理盐水组低(P<0.05),NF表达值较生理盐水组高(P<0.05)。改良Rivlin斜板临界角度与NF的表达正相关;BBB评分值与NF的表达正相关,与caspase-3的表达负相关;Caspase-3的表达与NF的表达负相关。结论:川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤模型损伤段脊髓有保护作用,可能与川芎嗪增加NF表达,抑制caspase-3表达有关。

川芎嗪关节腔内注射对膝骨关节炎的治疗作用

目的:探讨川芎嗪关节腔内注射对膝骨关节炎的治疗作用。方法:71例膝骨关节炎患者随机分为两组,分别予盐酸川芎嗪注射液或透明质酸钠注射液膝关节腔内注射,每周1次,连续5周。随访3月。参照Lequesne骨关节炎严重性和活动性评估法制定观察表,分别对两组患者治疗前后Lequesne评分及疗效进行比较。结果:透明质酸钠组在治疗1周后Lequesne评分较治疗前有明显降低(P<0.01),川芎嗪组在治疗3周后Lequesne评分明显降低(P<0.01)。治疗5周后,川芎嗪组总有效率为82.1%,透明质酸钠组总有效率为87.2%,两组疗效差异无统计学意义(P>0.05)。两组在治疗过程中均未见明显的不良反应。结论:川芎嗪关节腔内注射对膝骨关节炎具有治疗作用,且无明显不良反应,但起效较慢。

距腓前韧带腓骨止点双束解剖重建治疗慢性踝关节外侧不稳

目的:距腓前韧带(anterior talofibular ligament,ATFL)损伤是运动医学领域最常见的损伤性疾病之一,常导致踝关节外侧不稳定,如未获得及时有效的治疗,病情长期迁延反复,将发展为踝骨关节炎而出现不可逆性损害,严重影响患者的日常生活。经保守治疗3~6个月后未见明显好转的ATFL损伤患者应尽早考虑手术修复以恢复踝关节的稳定性和功能。本研究旨在探讨ATFL腓骨止点双束解剖重建治疗慢性踝关节外侧不稳的临床疗效。方法:回顾性调查2015年1月至2018年1月间在中南大学湘雅医院运动医学科诊断为慢性踝关节外侧不稳的67例患者,其中男42例,女25例,年龄17~41岁,病程为(12.6±3.2)个月;左踝29例,右踝38例。患者均因反复扭伤导致踝关节疼痛、肿胀、关节明显松弛;ATFL止点压痛、跟腓韧带止点压痛、踝关节前抽屉试验、内翻应力试验均为阳性。采用X线检查排除其他踝关节疾患,术前采用彩色多普勒超声和磁共振检查观察患侧ATFL损伤情况。患者均有手术指征且无明显手术禁忌证,在神经阻滞麻醉下采用踝关节镜下清理并ATFL腓骨止点双束解剖重建手术治疗。术后予以常规护理及标准化流程的康复锻炼。术后3、6、12、24个月进行门诊随访,使用美国足踝外科协会(American Orthopaedic Foot and Ankle Society,AOFAS)评分、卡尔森踝关节功能(Karlsson ankle functional,KAF)评分及日本足踝外科学会(the Japanese Society for Surgery of the Foot,JSSF)量表评分评价临床结果。结果:67例患者在术中关节镜下检查发现炎性滑膜增生52例(77.6%),明显骨赘增生12例(17.9%),Ⅱ~Ⅲ度距骨骨软骨损伤23例(34.3%),Ⅳ度软骨损伤5例(7.5%)。所有患者顺利完成手术,术后在麻醉状态下前抽屉试验为阴性、内翻应力试验为阴性;术后锚钉位置良好。其中3例(4.5%)患者术后出现腓浅神经暂时性麻痹,足踝部皮肤麻木,2周内逐渐恢复;无围手术期感染、化脓性关节炎等严重围手术期并发症。术后随访12~24(15.64±3.17)个月。末次随访时,所有患者可以正常行走;踝关节疼痛较术前明显好转,大多数患者无疼痛或偶有轻度疼痛;踝关节的功能及活动度得到恢复,没有发生再次失稳。64例(95.5%)患者可以恢复至伤前的劳动或运动水平。站立位X线检查提示关节间隙良好,未见狭窄;内固定位置良好。术后AOFAS评分(94.78±6.37)明显优于术前(64.17±12.43,P<0.01),KAF评分和JSSF量表评分较术前均显著增加,差异具有统计学意义(KAF:91.04±11.36 vs 59.74±13.63,P<0.01;JSSF:95.32±10.21 vs 66.92±14.38,P<0.01)。结论:关节镜下清理并ATFL腓骨止点双束解剖重建治疗慢性踝关节外侧不稳具有创伤小、恢复快的优点,近期疗效良好。