皮肤上的“小东西”,怎么就要了命?

人的一生中,皮肤上或多或少会长点“小东西”,可能是信者则灵的“发财痣”“美人痣”,或是美肤达人热聊的“脂肪粒”,抑或是让人感叹容颜易逝的“老年斑”,甚至还有令人闻之色变的皮肤癌……这些“小东西”有个共同的名字——皮肤肿瘤。大家听到“肿瘤”二字先别慌,虽然它们有的很“坏”,进展迅速,甚至会转移夺命,但是大部分其实都很“懒”,安于现状或缓慢变化,只有在被刺激后才会“黑化”。

家兔再造阴茎再生神经纤维轴浆流的恢复

目的:观察家兔再造阴茎植入神经轴浆流恢复情况,以探讨感觉神经末梢再生以及阴茎再造后感觉功能恢复的可能性.方法:将游离隐神经移植体与阴茎背神经吻接后植入腹壁浅血管筋膜蒂岛状皮瓣内,以建立阴茎再造重建感觉功能的动物模型.术后不同时间切取S2～S4节段双侧背根神经节(dorsal root ganglia,DRG),应用辣根过氧化酶法(horseradish peroxidase method,HRP)对实验组(植入神经)和对照组(未植神经)进行逆行神经示踪,观察DRG内辣根过氧化酶法(HRP)阳性标记细胞出现的时间和数量.结果:术后1个月实验组动物吻接侧DRG内开始出现HRP阳性细胞,且随着时间延长,阳性细胞数逐渐增多,植入隐神经束也可见HRP阳性;而对照组术后始终未见DRG内HRP阳性标记细胞出现.术后1个月、3个月和6个月3个时间点的HRP阳性神经元计数结果:S2为35.0±9.3、97.0±12.5、106.6±17.9,S3为22.1±7.7、71.3±16.7、103.8±29.4,S4为17.8±6.5、35.0±7.1、81.1±6.2.结论:家兔阴茎再造术后,植入神经轴浆流恢复,提示其感觉神经末梢再生与感觉功能重建是可能的.

再造阴茎感觉功能重建动物模型的建立

目的:建立再造阴茎感觉功能重建的动物模型,为临床上改善阴茎再造术后感觉功能探索新术式。方法:以成年新西兰雄兔为实验对象,采用腹壁浅血管筋膜蒂岛状皮瓣行阴茎再造术,切取一段隐神经游离移植,与阴茎背神经端端吻合植入皮瓣后阴茎成形。术后不同时间对再造阴茎进行组织形态学观察和感觉神经肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)免疫组化标记。结果:再造阴茎术后1个月时少量CGRP阳性神经纤维仅见于真皮深层,术后3 个月数量明显增多,并开始出现在真皮浅层以及真皮乳头内,术后6个月真皮与表皮交界层以及皮肤附属器周围也可见CGRP阳性纤维。结论:隐神经游离移植与阴茎背神经吻接植入再造阴茎皮瓣内可以获得良好的神经再生,这一动物模型可为临床应用该术式重建再造阴茎感觉功能提供实验依据。

家兔阴茎皮肤和阴茎背神经躯体感觉神经元的示踪定位

目的：明确家兔阴茎感觉神经躯体纤维来源及其节段性分布规律。方法：健康成年雄性新西兰家兔8只，随机均分为A、B两组，采用辣根过氧化物酶（HRP）逆行神经示踪技术，A组用微量注射器将50％HRP多点注射于阴茎皮下，B组注射于右侧阴茎背神经近侧断端内，留针时间30min，动物存活5d后，4％多聚甲醛心脏灌注，取出腰骶段脊髓及相应背根神经节（DRG），对躯体传入和传出纤维来源的节段分布进行观察。结果：A组s2一s。节段脊神经节内出现大量HRP阳性标记感觉神经元，以S：和S。为多，呈明显节段性分布，各节段阳性神经元计数分别为：S：（215．0±10．2）、S，（242．2．4-8．3）、S。（109．7．4-8．4），组间差异具有统计学意义（P〈0．01）。B组同侧S2-S4节段脊髓灰质前角腹外侧部出现部分阳性标记细胞，同侧S2-S4 DRG内也出现了大量的HRP阳性细胞。结论：家兔阴茎皮肤感觉神经躯体传入和传出纤维投射来源与阴茎背神经一致，均源自骶髓前角及相应的脊神经节，并呈现明显的节段性分布。

增生性瘢痕退行性变的相关影响因素

瘢痕（cicatrix）是正常组织修复过程中的产物。当创伤修复过程发生异常时，以胶原为主的细胞外基质（extracellarmatrix，ECM）成分大量沉积，导致真皮组织过度增生，则出现病理性瘢痕（pathologicscar）或称异常瘢痕（abnormalscar），即增生性瘢痕和瘢痕疙瘩（keloid，K）。

再造阴茎感觉重建过程中背根节胶质细胞源性神经营养因子基因表达的变化及意义

目的:研究兔再造阴茎感觉重建过程中背根节感觉神经元内胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的表达变化及其意义。方法:建立成年新西兰雄兔再造阴茎感觉重建的动物模型,分别于术后1,2周,1,3个月灌注取材S2节段背根节,用RT-PCR法检测不同时间背根节感觉神经元内GDNFmRNA的表达情况。结果:GDNFmRNA在正常背根节感觉神经元内存在少量表达;感觉重建早期背根节内GDNFmRNA的表达显著增强,1个月时轻度下调,至术后3个月恢复正常水平。结论:GDNF是再造阴茎感觉重建过程中参与“胞体-轴突-靶器官”途径恢复重建的重要保护性因素。

CXCR4靶向shRNA质粒载体的制备和体外鉴定

目的:设计并构建CXCR4靶向shRNA质粒载体,转染黑色素瘤细胞株,验证shRNA对黑色素瘤CXCR4基因的沉默效应。方法:设计合成CXCR4特异性shRNA,将其插入pSilencer质粒载体,并将重组后的pSilencer质粒载体经脂质体包裹转染黑色素瘤MV3细胞株,抗性筛选稳定抑制CXCR4表达的永久性克隆。应用RT-PCR技术检测shRNA对黑色素瘤细胞内CXCR4 mRNA表达,应用Westernblot法检测CXCR4蛋白变化。结果:成功构建和筛选出CXCR4特异性的shRNA质粒载体及稳定抑制CXCR4表达的永久性细胞克隆。阳性克隆测序结果表明合成的寡核苷酸链序列插入正确。稳定转染CXCR4-shRNA的高转移性黑色素瘤细胞MV3的CXCR4 mRNA和蛋白的表达较空白对照组明显下调。结论:脂质体介导shRNA体内表达法制备的CXCR4-shRNA在黑色素瘤细胞中可获得高效转染,并能产生特异性的基因沉默效应,以CXCR4为靶向的shRNA能够有效下调CXCR4基因的表达,有望为转移性黑色素瘤的靶向基因治疗提供一条新途径。

猫抓病15例临床病理特征

目的 探讨猫抓病(CSD)临床病理特征、病因及诊断要点,以提高对CSD的认识,减少漏诊和误诊。方法回顾我院1986～1999年间所收集的15例猫抓病患者淋巴结活检资料,对其进行临床病理分析。结果 15例猫抓病患者均有与猫密切接触史;临床表现以自限性局部(颈部7例,腋下8例,肘部3例)淋巴结肿大为主,沿淋巴引流方向规律分布;HE镜下病理学特点为淋巴结内坏死性肉芽样微脓肿形成;特殊染色显示血管壁及微脓肿中革兰氏阴性、嗜银性、不耐酸的多形性杆菌存在。结论 CSD是一种病程自限的细菌感染性疾病,临床特征和淋巴结活检病理特点辅以Warthin-Starry银染色对其诊断及鉴别诊断具有重要意义。

CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭和转移影响的实验研究

目的探讨CXCR4基因沉默对黑色素瘤侵袭及转移的影响及可能机制。方法设计合成CXCR4特异性短发夹状RNA(shRNA)插入p Silencer载体,转染人高转移性黑色素瘤细胞株MV3、RT-PCR和Western blot法检测shRNA对靶基因CXCR4表达的影响。利用Transwell小室模型检测细胞体外侵袭能力,MTT法检测细胞体外增殖能力。通过裸鼠尾静脉瘤细胞注射,将转染后的细胞接种至裸鼠皮下,构建黑色素瘤转移模型,观察肿瘤生长情况。结果 CXCR4-shRNA能有效下调CXCR4基因的表达,降低黑色素瘤细胞增殖、体外侵袭及转移能力。RT-PCR及细胞免疫荧光显示,转染CXCR4-shRNA的黑色素瘤瘤MV3细胞系MMP-2表达下调;免疫组化结果显示,实验组裸鼠黑色素瘤瘤体及转移灶组织MMP-2的表达低于对照组。结论 shRNA介导的CXCR4基因沉默在体外实验能够显著抑制黑色素瘤细胞的生长和增殖活性,减弱体外侵袭能力,且体外产生抑瘤效应,明显降低肝、脑器官转移能力和定向肺转移能力。其机制可能与SDF-1/CXCR4信号途径阻断,进而抑制MMP-2的表达有关。

胃肠间质肿瘤临床病理与免疫组化特征

目的:探讨胃肠间质瘤(GISTs)临床病理、免疫组化及组织分型。方法:44例胃肠非上皮梭形细胞肿瘤常规检查,Vimentin、Desmin、SMA、S-100、CD345种抗体采用Envision法免疫组化检测。44例非上皮梭形细胞肿瘤中,GISTs37例,占84.1%,良性GISTs8例,潜在恶性GISTs7例,恶性GISTs22例。临床以消化道出血,疼痛多见。光镜下为梭形细胞和上皮样细胞两种基本成分。结果:37例GISTs中,Vimentin、Desmin、SMA、S-100、CD34阳性分别为94.6%、5.4%、43.2%、48.7%、89.2%,其中GISTsⅠ型8例(21.6%),GISTsⅡ型10例(27.1%),GISTSsⅢ型8例(21.6%),GISTsⅣ型11例(29.7%)。结论:GISTs是胃肠道最常见的间质性肿瘤,具有多向分化特性,HE形态类似,免疫组化在GISTs诊断中起主要作用,CD34有较高的特异性和敏感性。

核酶对人皮肤瘢痕成纤维细胞增殖和TIMP-1表达的影响

目的:探讨核酶对人金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP 1)基因表达的特异性抑制作用,以寻找治疗增生性瘢痕的新方法。方法:应用特异切割TIMP 1 的嵌合型核酶基因克隆pU6 Rz182 转染增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar derived fibroblasts,HSF),G418筛选稳定表达核酶的细胞克隆,MTT法检测并绘制细胞生长曲线,观察核酶对细胞生长的影响;RT PCR检测核酶对靶基因TIMP 1 表达的抑制。结果:在mRNA水平,与正常对照组相比,稳定表达活性核酶Rz182的HSF中TIMP 1的表达被抑制了87.9%,而点突变核酶抑制达36.4%,两者之间差异非常显著(P<0.01)。HSF细胞生长进入平台期后,转染核酶基因组与点突变组及对照组相比,活细胞数显著降低(P<0.01),而点突变组与对照组无明显差异。结论:核酶U6Rz182能特异地抑制HSF中TIMP 1的表达,并使HSF的增殖受到抑制。

周围神经损伤再生后肌肉nAChRε亚单位基因表达的变化

目的:建立肌肉内烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR )ε亚单位mRNA表达水平的荧光定量检测方法,观察周围神经损伤后肌肉内nAChRε亚单位mRNA表达的变化。方法:构建克隆载体pMD18 T ε作为定量模板,进行TaqMan实时荧光定量PCR反应,同时测定该法的灵敏性、特异性和重复性。同法检测大鼠股薄肌支配神经损伤修复后不同时间肌肉标本内nAChRε亚单位mRNA表达的变化。结果:用该方法检测nAChRε亚单位mRNA表达,其线性检测范围为6 个数量级,最低检测下限为1×102 拷贝,最高检测上限为1×107 拷贝。大鼠股薄肌支配神经损伤后,与对照组相比ε亚单位mRNA表达的拷贝数先增加后减少,在术后第3 周降到最低后又逐渐增高,但到术后30 周仍处于低水平(P<0.01)。结论:采用Taq Man实时荧光定量RT PCR检测nAChRε亚单位mRNA的表达水平具有灵敏度高、特异性强、重复性好、线性检测范围宽的优点。神经损伤再生的晚期ε亚单位mRNA表达水平较损伤前有所降低。

热应激预处理加强皮瓣组织存活的作用及其与HSP_(70)合成的关系

目的:探讨热应激预处理对皮瓣组织的保护作用及其与皮瓣中HSP70合成量的关系.方法:制作大鼠腹部岛状超长随意皮瓣活体原位热缺血模型,采用免疫组织化学(EnVision法)观察一定时间内不同温度(40、41、42、43、44 ℃)热应激预处理后,皮瓣中HSP70合成情况及其与皮瓣存活率的关系.结果:加热至40～44 ℃ 30 min,HSP70的合成量随温度升高而增多.相关分析表明,除对细胞的致死性温度44 ℃外,其余各组皮瓣的HSP70合成量与皮瓣存活率呈正相关(r＝0.757 7,P<0.01),41～43℃为诱发热休克反应、产生HSP70并发挥抗有害因素损伤作用、进而保护皮瓣的适宜温度.结论:HSP70对皮瓣组织具有保护作用,热应激预处理改善皮瓣存活率的保护作用与皮瓣内HSP70合成量呈正相关.

微小切口双重荷包缝合法矫正重度乳头内陷

目的介绍一种疗效确切,创伤小,矫正重度乳头内陷的新术式。方法设计切口位于乳晕第四象限,方向斜向外下方,呈放射状切口,长约1.5cm,松解乳头基底部,切断牵拉的纤维条索,上提乳头,在距乳头0.8cm和1.5cm处,双重荷包缝合固定。结果12例乳头内陷患者术后随访1个月至4年,均获得满意疗效。乳头横径、纵径、高度及外观明显改善。结论该术式矫正乳头内陷具有切口小、创伤轻微、操作简单易行、效果确切、不易复发和并发症少等优点。

四种耳郭支架材料全耳再造的临床应用评估

目的 比较同种异体软骨耳支架、自体肋软骨耳支架、Medpor耳支架和自体肋软骨Medpor耳基复合耳郭支架等四种不同耳郭支架材料 ,应用于全耳再造的效果。方法 应用耳后皮瓣和颞浅筋膜瓣包裹耳支架行全耳再造修复 ,术后根据手术效果和并发症出现情况 ,对近远期各支架的满意程度进行评估。结果 自 1994年至2 0 0 2年 ,临床应用 16 8例 ,随访 3个月至 8年 ,同种异体软骨耳支架、自体肋软骨耳支架、Medpor耳支架和自体肋软骨Medpor耳基复合耳郭支架的满意率 ,分别为 2 0 %、75 %、85 %和 10 0 %。 结论 全耳再造以自体肋软骨Medpor耳基复合耳郭支架效果最好 ,Medpor和自体肋软骨次之 ,异体肋软骨效果最不理想。

热应激预处理缩短皮管断蒂时间的实验研究

目的:探讨热应激预处理对皮管的保护作用以及缩短皮管断蒂时间的可行性。方法:以Labrador犬为实验对象建立动物模型,行双侧下腹部皮管成形术,分为实验侧和对照侧进行自身对照,术后用红外线热疗仪对实验侧皮管局部加温进行热应激预处理,再分别延迟0 h、24 h、48 h、72 h、1周、2周皮管断蒂,对照侧皮管未经热应激预处理直接断蒂,每一时间段组各4只动物,断蒂7 d后观测比较两侧皮管存活情况,并用免疫组化ABC法观察两侧皮管组织中热休克蛋白70(heat shockprotein 70,HSP70)的相应动态变化。结果:实验侧皮管组织内HSP70表达阳性,以热应激预处理后延迟24 h及48 h断蒂皮管的表达最强,对照侧则均呈阴性;24 h、48 h、72 h、1周和2周各时段,热应激预处理侧(实验侧)的皮管存活率大于对照侧,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:热应激预处理对皮管具有保护作用,能够提高皮管断蒂以后的存活率,缩短皮管断蒂时间,其机制可能与热应激预处理后皮管HSP70的诱导合成有关。

增生性瘢痕增生期与成熟期相关基因谱表达的差异

目的:从基因水平探索增生性瘢痕退行性变的机制,筛选调控增生性瘢痕从过度增殖向成熟稳定期转化的退行性变相关基因。方法:实验于2003-05/2005-03在解放军第二军医大学整形外科实验室和上海联合基因集团博星基因芯片公司进行。收集8例烧伤后增生性瘢痕患者的病理标本,每张芯片以同一患者同一部位退变成熟期的瘢痕组织为实验组,增生活跃期的瘢痕组织为对照组。按一步法抽提出瘢痕组织总RNA,纯化mRNA,分别制成Cy3和Cy5荧光标记cDNA探针,与含有14112个cDNA的高密度基因微矩阵芯片杂交,通过计算机扫描生物信息学分析筛选差异表达基因。结果:在14112个基因中,8例患者退变后稳定期的增生性瘢痕组织与增殖活跃的增生性瘢痕组织之间比较存在差异表达基因共有840条,其中上调基因438条,下调基因362条,新基因102条;包括细胞凋亡基因、原癌基因和抑癌基因、细胞骨架和运动基因、细胞受体、免疫相关、细胞信号和传递蛋白、代谢蛋白、发育相关等多种基因。结论:增生性瘢痕的退行性变与多种基因的差异表达有关。

家兔阴茎皮肤感觉脊神经来源的电生理研究

目的：探讨家兔阴茎感觉神经来源。方法：健康成年雄性新西兰白兔12只，随机均分为两组：每组6只，A组在左侧脊神经上记录，B组在右侧脊神经上记录。对家兔阴茎施加不同大小的机械刺激，用神经单纤维记录技术，在同侧S1～S4脊神经上记录单纤维放电。结果：通过对家兔阴茎施加各种不同机械刺激，在同侧S2～S3脊神经上能记录到放电，S1、S4脊神经上未能记录到放电。左侧脊神经放电纤维数量分别为：S2：39．67±3．14，S3：21．00±2．19；右侧脊神经放电纤维数量分别为：S2：40．00±3．16，S3：19．67±2．58，左右侧差异无显著性（P〉0．05）。结论：家兔阴茎皮肤感觉来源于S2～S3脊神经。

VEGF和p53在退变椎间盘组织中的表达及其意义

目的：探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和p53蛋白在退变椎间盘组织中的表达情况及其参与血管浸润的机制。方法：将156例腰椎间盘突出症患者手术中所取得的椎间盘组织进行病理切片检查，免疫组织化学方法检测退变椎间盘组织中的VEGF和p53蛋白的表达情况。结果：156例退变椎间盘组织中见血管浸润现象98例，占62．8％；退变椎间盘组织中VEGF和p53的阳性表达率分别为73．42％(116／156)和58.97％(92／156)，共同表达率53．2％(83／156)；有血管浸润的退变椎间盘组织中VEGF、p53的表达明显高于无血管浸润的退变椎间盘组织；VEGF与p53蛋白表达密切相关。结论：VEGF和p53基因在退变椎间盘组织中存在协同表达，共同参与椎间盘组织中新生血管形成和浸润，加速椎间盘组织退变。