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肝细胞癌高表达中期因子与肝癌细胞血行播散的关系 被引量:8
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作者 殷正丰 康晓燕 +3 位作者 罗祥基 钱海华 吴宗娣 吴孟超 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期361-364,共4页
目的:探讨肝细胞癌(HepatocellularCarcinoma,HCC)中期因子(Midkine,MK)蛋白高表达与肝癌细胞血行播散的可能关系。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学染色方法分别检测AFP阳性HCC患者术前外周血AFPmRNA和手术切除肝癌组织MK蛋白,了解肝癌... 目的:探讨肝细胞癌(HepatocellularCarcinoma,HCC)中期因子(Midkine,MK)蛋白高表达与肝癌细胞血行播散的可能关系。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学染色方法分别检测AFP阳性HCC患者术前外周血AFPmRNA和手术切除肝癌组织MK蛋白,了解肝癌细胞血行播散和MK表达的情况,分析两者之间的相关性。结果:在41例HCC患者中,18例术前外周血可检出AFPmRNA,检出率为43.9%。在对应的肝癌组织中,29例高表达MK,表达率为70.7%。在29例高表达MK的HCC患者中,18例术前外周血AFPmRNA阳性,阳性率为62.1%;而在12例MK低表达的HCC患者中,仅3例术前外周血AFPmRNA阳性,阳性率为25.0%。两组之间差异有显著性(P<0.05)。结论:肝癌组织异常表达MK与外周血循环中存在肿瘤细胞有关,可能是肝癌细胞转移潜能的一个指标。 展开更多
关键词 肝肿瘤 中期因子 外周血肿瘤细胞 RT-PCR 免疫组织化学
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甲胎蛋白变异体作为肝细胞癌预后指标的研究 被引量:8
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作者 殷正丰 康晓燕 +3 位作者 钱海华 吴宗娣 虞紫茜 吴孟超 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期466-467,479,共3页
目的探讨AFP变异体作为HCC预后指标的意义,为临床应用提供依据.方法本研究涉及1991~1994年在我院第一次行肝癌根治性切除术的AFP阳性HCC患者129例,术前采用小豌豆凝集素亲和免疫电泳自显影法测定血清AFP变异体含量,术后随访至1999年,... 目的探讨AFP变异体作为HCC预后指标的意义,为临床应用提供依据.方法本研究涉及1991~1994年在我院第一次行肝癌根治性切除术的AFP阳性HCC患者129例,术前采用小豌豆凝集素亲和免疫电泳自显影法测定血清AFP变异体含量,术后随访至1999年,将相关资料进行归纳整理,分析血清AFP变异体含量与HCC复发率、生存率的关系,并进行统计学分析.结果 129例HCC患者1,3,5年累计复发率分别为32.6%,66.7%和86.8%.AFP变异体含量≥20%组(A组,83例)和AFP变异体含量<20%组(B组,46例)的累计复发率分别为37.3%和23.9%(1年),73.5%和54.3%(3年),92.8%和76.1%(5年).A组累计复发率明显增高(P<0.05).129例HCC患者1,3,5年生存率分别为88.4%,63.6%和41.1%.A组和B组累计生存率分别为84.3%和95.7%(1年),56.7%和76.1%(3年),32.5%和56.5%(5年).B组生存时间明显延长(P<0.01).结论AFP变异体是恶性生物学的良好指标,作为一个独立的预后标志物,可在临床上用于预测HCC预后和复发. 展开更多
关键词 甲胎蛋白 肝细胞癌 预后 肝肿瘤
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腺病毒介导的VEGF启动子-胸苷激酶表达系统对肝癌细胞的选择性杀伤作用 被引量:4
3
作者 王孟龙 殷正丰 +2 位作者 吴宗娣 王率 吴孟超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期12-14,共3页
目的 :构建携带受血管内皮生长因子 (VEGF)启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV- tk)的重组腺病毒载体 ,并探讨该重组腺病毒对体外培养的肝癌细胞的特异性杀伤活性。方法 :采用 Ad Easy System构建携带受 VEGF启动子或巨细胞病毒... 目的 :构建携带受血管内皮生长因子 (VEGF)启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV- tk)的重组腺病毒载体 ,并探讨该重组腺病毒对体外培养的肝癌细胞的特异性杀伤活性。方法 :采用 Ad Easy System构建携带受 VEGF启动子或巨细胞病毒 (CMV)启动子调控 tk基因表达的 Ad VEGF- tk和 Ad CMV- tk,这两种重组腺病毒载体在 2 93细胞中包装、扩增后 ,体外感染正常肝细胞系 L 0 2和肝癌细胞系 Hep G2 ,并用不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)处理后以 MTT法检测受染细胞的增殖情况。 结果 :Ad VEGF- tk的病毒滴度为 1× 10 1 0 pfu/ ml,Ad CMV- tk为 5× 10 1 0 pfu/ ml。 L 0 2细胞感染 Ad VEGF- tk后对GCV的敏感性无明显改变 ,而 Hep G2细胞感染 Ad VEGF- tk后对 GCV的敏感性明显增加 ,在感染复数 (MOI)为 10 0并用 5 0μg/ m l GCV处理时 ,则有 90 %以上 Hep G2细胞被杀死 ;而 Ad CMV- tk可杀死 95 %Hep G2细胞和 80 %以上 L 0 2细胞。 结论 :VEGF启动子调控的 HSV- tk基因表达可特异性地杀死肝癌细胞 ,同时对正常肝细胞几无影响。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 单纯疱疹病毒胸苷激酶 腺病毒 肝癌 细胞 VEGF 启动子
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腺病毒介导的KDR启动子-胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用 被引量:4
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作者 朱忠政 殷正丰 +2 位作者 吴宗娣 张柏和 吴孟超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第4期243-247,共5页
目的 :研究腺病毒介导的KDR启动子 胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用。方法 :应用PCR克隆出人KDR基因启动子序列 - 2 2 5bp~ +12 7bp ,以AdEasysystem为载体 ,构建携带受KDR启动子或CMV启动子调控tk基因表达的 2种重组腺... 目的 :研究腺病毒介导的KDR启动子 胸苷激酶系统对血管内皮细胞的选择性杀伤作用。方法 :应用PCR克隆出人KDR基因启动子序列 - 2 2 5bp~ +12 7bp ,以AdEasysystem为载体 ,构建携带受KDR启动子或CMV启动子调控tk基因表达的 2种重组腺病毒质粒 pAdKDR tk和 pAdCMV tk ,在 2 93细胞中包装、扩增后 ,体外感染表达KDR的脐静脉血管内皮细胞系HUVEC和不表达KDR的肝癌细胞系HepG2 ,并给予不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)处理 ,5d后收集存活细胞并计数。结果 :产生的病毒滴度均为 5× 10 9pfu/ml。在MOI为 10 0、GCV为 5 0 μg/ml条件下 ,AdKDR tk转染HUVEC后细胞生存率下降 (31 49%± 6 .42 % ) ,AdKDR tk转染HepG2后细胞生存率为 76 .5 7%± 3.49% ,而转染AdCMV tk的 2细胞系生存率均显著下降 ,细胞生存率分别为 2 2 .2 4%± 3.77% (HUVEC)和 2 6 .5 3%± 6 .84% (HepG2 )。 结论 :KDR基因启动子可调控HSV tk在血管内皮细胞中特异性表达 ,为进一步开展靶向肿瘤血管内皮的自杀基因治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肿瘤 血管内皮细胞 KDR启动子 自杀基因治疗 腺病毒 胸苷激酶系统
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逆转录病毒介导的人肝癌特异性HSV-tk/ACV的体外抗肝癌作用 被引量:2
5
作者 高军 曹广文 +5 位作者 戚中田 吴宗娣 杜平 仇小芳 崔龙 杨文国 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期505-508,共4页
目的:建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果:构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)的人肝癌特异性逆转录病毒载体,经过PA317细胞包装及病毒滴度测定后,感染肝癌HepG2和SMMC7721细胞,... 目的:建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果:构建携带单纯疮疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tk)的人肝癌特异性逆转录病毒载体,经过PA317细胞包装及病毒滴度测定后,感染肝癌HepG2和SMMC7721细胞,用Northern杂交方法证明HSV-tk基因在AFP高分泌的HepG2细胞中得到特异转录,以阿昔洛韦(ACV)为前药攻击转基因的肝癌细胞显示对HepG2有相对选择性杀伤作用。结论:该AFPe/HSV-tk/前药转换疗法为肝癌特异性基因治疗提供了有价值的资料。 展开更多
关键词 肝肿瘤 胸苷激酶 甲胎蛋白 增强子 基因治疗
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携带HSV-tk基因的人肝癌特异性逆转录病毒载体的构建 被引量:2
6
作者 高军 曹广文 +5 位作者 戚中田 仇小芳 吴宗娣 杜平 杨文国 崔龙 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期101-104,共4页
构建携带单纯疱疹病毒tk基因(HSV-tk)的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果:切除逆转录病毒载体pMNSM内部的SV40启动子使之成为pMNM;从真核表达载体pBPGK-tk质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因(... 构建携带单纯疱疹病毒tk基因(HSV-tk)的人肝癌特异性逆转录病毒载体。方法和结果:切除逆转录病毒载体pMNSM内部的SV40启动子使之成为pMNM;从真核表达载体pBPGK-tk质粒中游离带有磷酸甘油酸激酶基因(pgk)启动子调控的HSV-tk片段,克隆到pMNM的PL位点上,构建成普通型PMNp-tk逆转录病毒载体;从pGEM.7Z-AFPe质粒中游离人甲胎蛋白基因增强子核心序列,克隆到pMNp-tk的pgk启动子上游,构建成人肝癌特异型pMNAP-tk逆转录病毒载体。结论:该载体对肝癌特异性前药转换基因治疗有重要意义。 展开更多
关键词 肝肿瘤 基因治疗 逆转录病毒载体 HSV-TK
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小儿细菌性脑膜炎外周血和脑脊液中干扰素的检测 被引量:2
7
作者 张育才 王岱明 +1 位作者 杨文国 吴宗娣 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 1995年第10期609-610,共2页
小儿细菌性脑膜炎外周血和脑脊液中干扰素的检测上海医科大学儿科医院张育才,王岱明第二军医大学微生物学教研室杨文国,吴宗娣干扰素(Interferon,IFN)是一类具有多种生物学活性的糖蛋白,并被认为是宿主对病毒感染最... 小儿细菌性脑膜炎外周血和脑脊液中干扰素的检测上海医科大学儿科医院张育才,王岱明第二军医大学微生物学教研室杨文国,吴宗娣干扰素(Interferon,IFN)是一类具有多种生物学活性的糖蛋白,并被认为是宿主对病毒感染最早应答反应的产物。近年来观察到非病... 展开更多
关键词 脑膜炎 细菌性脑膜炎 干扰素 外周血 脑脊液
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肝动脉灌注AdVEGF-tk治疗大鼠肝癌 被引量:1
8
作者 王孟龙 殷正丰 +4 位作者 吴宗娣 康晓燕 钱海华 夏少晴 吴孟超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期84-86,共3页
目的 :研究经肝动脉灌注腺病毒介导的血管内皮生长因子 (VEGF)启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV- tk)系统 (Ad VEGF- tk)对大鼠肝癌模型的治疗作用。 方法 :以二乙基亚硝胺 (DEN)诱导建立 Wistar大鼠肝癌模型 ,将32只成瘤鼠随... 目的 :研究经肝动脉灌注腺病毒介导的血管内皮生长因子 (VEGF)启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV- tk)系统 (Ad VEGF- tk)对大鼠肝癌模型的治疗作用。 方法 :以二乙基亚硝胺 (DEN)诱导建立 Wistar大鼠肝癌模型 ,将32只成瘤鼠随机分成 Ad VEGF- tk/GCV组、Ad/GCV组、Ad CMV- tk/GCV组和生理盐水 /GCV组 ,每组 8只。诱癌后第 1 2 0天时经肝动脉分别给予重组腺病毒或生理盐水 ,次日起连续 1 0 d每天腹腔内给予丙氧鸟苷 (GCV) 1次 ,剂量为 5 0 mg·kg- 1· d- 1。停止注射后第 1 0天剖腹测量肿瘤大小 ,比较各组间肿瘤评分变化及大鼠存活情况。结果 :DEN处理第 1 2 0天后 ,所有大鼠均有典型肿瘤形成 ,病理证实为肝细胞癌。经肝动脉灌注腺病毒载体或生理盐水后 ,Ad CMV- tk/GCV组在腹腔内注射 GCV开始后第 5天陆续死亡 ,灌注后第 2 0天时该组大鼠只剩下 2只 ;其他 3组大鼠均完全存活。肿瘤评分表明 ,Ad VEGF-tk/GCV组处理前后肿瘤评分没有明显差异 [(2 .2 5± 0 .89) vs(2 .2 5± 0 .76 ) ],而 Ad/GCV组 [(2 .0 0± 0 .93) vs(3.89±0 .83) ]和生理盐水 /GCV组 [(2 .1 3± 0 .83) vs(3.75± 0 .89) ]在处理后明显增高 (P<0 .0 1 )。到灌注后第 90天时 ,Ad VEGF-tk/GCV组大鼠的生存时间明显延长。 展开更多
关键词 肝动脉灌注 AdVEGF-tk 治疗 大鼠 肝癌 血管内皮生长因子 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因
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识别肿瘤血管内皮细胞的嵌合性T细胞受体的构建与鉴定 被引量:1
9
作者 王率 殷正丰 +2 位作者 崔贞福 吴宗娣 吴孟超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期688-689,共2页
关键词 肿瘤 血管内皮细胞 嵌合性T细胞受体 构建 鉴定 基因重组
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Construction of retroviral vector carrying HSV tk gene under control of human AFP enhancer core sequence and human pgk promotor * 被引量:1
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作者 高军 曹广文 +5 位作者 戚中田 仇小芳 吴宗娣 杜平 杨文国 崔龙 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 1997年第1期14+12-13,12-13,共3页
AIM Tenstruct retroviral vector bringing HSV tk gene under control by human AFP enhancer core sequence and human pgk promotor.
关键词 Liver neoplasms\ \ Simplexvirus\ \ Retroviridae\ \ alpha fetoproteins Enhancer elements (genetics)\ \ Gene therapy
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腺病毒介导的VEGF启动子—胸苷激酶系统对骨肉瘤细胞的杀伤试验
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作者 周正明 殷正丰 +4 位作者 王孟龙 吴宗娣 康晓燕 杨惠光 吴孟超 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期53-55,共3页
目的 探讨腺病毒介导的VEGF启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV tk)系统 (AdVEGF tk)对体外培养的骨肉瘤细胞的选择性杀伤作用。方法 采用 2种重组腺病毒载体AdVEGF tk和AdCMV tk(CMV启动子调控tk基因表达 )体外感染低表达VEG... 目的 探讨腺病毒介导的VEGF启动子调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (HSV tk)系统 (AdVEGF tk)对体外培养的骨肉瘤细胞的选择性杀伤作用。方法 采用 2种重组腺病毒载体AdVEGF tk和AdCMV tk(CMV启动子调控tk基因表达 )体外感染低表达VEGF的成骨细胞系MC3T3 E1和高表达VEGF的骨肉瘤细胞系LM 8,并给予不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)处理 ,用MTT法检测感染细胞的增殖情况。结果 未感染病毒或感染空病毒的MC3T3 E1细胞和LM8细胞对GCV不敏感 ,感染AdCMV tk的MC3T3 E1细胞和LM 8细胞对GCV敏感。与感染空病毒的MC3T3 E1细胞相比 ,感染AdVEGF tk的MC3T3 E1细胞对GCV的敏感性轻度增加 ,用 5 0 μg/mlGCV处理时 ,30 %MC3T3 E1细胞被杀死 ;感染AdVEGF tk的LM8细胞对GCV的敏感性明显增加 ,用 5 0 μg/mlGCV处理时 ,95 %LM 8细胞被杀死 ,产生的细胞毒活性表现为剂量依赖性。结论 腺病毒介导的VEGF启动子 tk/GCV系统对高表达VEGF的骨肉瘤细胞具有杀伤作用。 展开更多
关键词 腺病毒 介导 VEGF启动子 胸苷激酶系统 骨肉瘤细胞 杀伤试验
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人白细胞介素2、β干扰素基因逆转录病毒载体的构建和在人肾细胞癌及其TIL中的表达
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作者 曹广文 侯建国 +11 位作者 李光辉 杜平 杨文国 戚中田 吴宗娣 仇小芳 廖国强 夏广彬 钱松溪 郑家富 马永江 孔宪涛 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第3期206-211,共6页
从pcD-5.1质粒和pSPGNHIFNB10质粒分别切下人白细胞介素2(HuIL-2)cDNA和人β干扰素(HuIFN-β)cDNA,分别克隆到pNMSM逆转录病毒载体多克隆位点,经酶切鉴定确定正确插入方向。经PA... 从pcD-5.1质粒和pSPGNHIFNB10质粒分别切下人白细胞介素2(HuIL-2)cDNA和人β干扰素(HuIFN-β)cDNA,分别克隆到pNMSM逆转录病毒载体多克隆位点,经酶切鉴定确定正确插入方向。经PA317包装细胞包装成重组病毒,测转染效率。用NIH/3T3细胞测重组病毒感染效率。在8μg/ml鱼精蛋白存在的条件下分别感染人新鲜肾透明细胞癌体外建株细胞以及人肾细胞癌肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)。经G418选择阳性克隆后测上清表达HuIL-2及HuIFN-β活性。结果HuIL-2和HuIFN分别在转HuIL-2基因和HuIFN-β基因肾细胞癌细胞的表达量达250U/106细胞·d-1和6400U/106细胞·d-1,在经目的基因转染TIL细胞中的表达量分别比未经目的基因转染的TIL高2~3倍和4~8倍。TIL生长状况未有明显改变,抗肿瘤活性未见明显增强。 展开更多
关键词 白细胞介素 Β干扰素 转基因 肾肿瘤 基因表达
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含CD基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建 被引量:10
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作者 崔龙 曹广文 +6 位作者 王元和 屠岳 孟荣贵 高军 仇小芳 吴宗娣 谢苏庆 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期289-291,共3页
含CD基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建崔龙,曹广文,王元和,屠岳,孟荣贵,高军,仇小芳,吴宗娣,谢苏庆关键词大肠癌;胞嘧啶脱氨酶基因;逆转录病毒载体;癌胚抗原;转录调控序列胞嘧啶脱氨酶(CD)是真菌及某些大肠... 含CD基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建崔龙,曹广文,王元和,屠岳,孟荣贵,高军,仇小芳,吴宗娣,谢苏庆关键词大肠癌;胞嘧啶脱氨酶基因;逆转录病毒载体;癌胚抗原;转录调控序列胞嘧啶脱氨酶(CD)是真菌及某些大肠杆菌等DNA嘧啶补救合成途径中的关... 展开更多
关键词 大肠肿瘤 CD基因 逆转录病毒载体 病毒载体
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含HSV-tk基因的人大肠癌特异性逆转录病毒载体的构建 被引量:5
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作者 崔龙 曹广文 +5 位作者 王元和 屠岳 孟荣贵 高军 仇小芳 吴宗娣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期216-218,共3页
目的:为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达,以达到靶向基因治疗的目的,首先构建以CEA基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法:将目的基因片段HSV-tk定向克隆入pUC118质粒载体中,以相应的内切酶取出合适... 目的:为使自杀基因在大肠癌细胞中特异性表达,以达到靶向基因治疗的目的,首先构建以CEA基因转录调控序列驱动的重组逆转录病毒载体。方法:将目的基因片段HSV-tk定向克隆入pUC118质粒载体中,以相应的内切酶取出合适的酶切片段后,与来自pCEA424/2CAT质粒的CEA5'转录调控序列相连接,克隆入逆转录病毒载体中。结果:经鉴定及筛选,构建成重组逆转录病毒载体G1CEAtkNa。结论:G1CEAtkNa的成功构建,为进一步研究大肠癌组织特异性基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒 大肠肿瘤 逆转录病毒 病毒载体
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肝细胞癌高表达中期因子蛋白与肝内转移的关系 被引量:8
15
作者 殷正丰 罗祥基 +3 位作者 康晓燕 吴宗娣 钱海华 吴孟超 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期27-29,共3页
目的 探讨中期因子 (midkine ,MK)蛋白在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达特点、水平及其与肝内侵袭、转移的可能关系。方法 应用免疫组织化学染色、Western印迹等方法 ,对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配... 目的 探讨中期因子 (midkine ,MK)蛋白在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达特点、水平及其与肝内侵袭、转移的可能关系。方法 应用免疫组织化学染色、Western印迹等方法 ,对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MK蛋白定位表达及表达水平的研究 ,并结合肝内有无卫星灶形成进行分析。结果 免疫组织化学结果与Western印迹结果具有一致性 (P >0 .0 5 )。在正常肝组织及良性肝病变组织中 ,MK无表达 ;而在HCC组织中 ,MK高表达。在癌旁肝硬化组织中 ,MK微量表达 ;而在肿瘤侵袭前沿区域 ,MK表达则增强。HCC中MK表达率与其组织学类型、组织分级、瘤体大小、包膜状况、AFP值之间差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但在有卫星灶形成的HCC中 ,MK蛋白表达率显著高于无卫星灶形成者 (P <0 .0 5 )。结论 HCC在蛋白水平上表达MK增加 ,并可能与肝内侵袭、转移有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 中期因子蛋白 肝内肿瘤转移 免疫组织化学
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肝癌患者外周血甲胎蛋白异质体和转录物含量的相关分析 被引量:6
16
作者 康晓燕 殷正丰 +3 位作者 钱海华 吴宗娣 虞紫茜 吴孟超 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2003年第1期17-19,共3页
目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血清甲胎蛋白(AFP)异质体含量与肝癌细胞血行播散的关系。 方法应用凝集素亲和免疫电泳自显影法和巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测AFP阳性HCC患者手术前外周血AFP异质体含量和AFP mRNA,分析血清AFP异... 目的探讨肝细胞癌(HCC)患者血清甲胎蛋白(AFP)异质体含量与肝癌细胞血行播散的关系。 方法应用凝集素亲和免疫电泳自显影法和巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测AFP阳性HCC患者手术前外周血AFP异质体含量和AFP mRNA,分析血清AFP异质体含量和肝癌细胞血液播散之间的相关性。结果 在46例HCC患者中,37例手术前血清AFP异质体≥20%,阳性率为80.4%;24例手术前外周血可检出AFP mRNA,检出率为52.2%。在37例AFP异质体≥20%的HCC患者中,22例外周血AFP mRNA阳性,阳性率为59.5%;而在9例AFP异质体含量<20%的HCC患者中,仅2例外周血AFP mRNA阳性,阳性率为22.2%。两组之间差异有显著性(X2=4.02,P<0.05)。 结论肝癌患者血清AFP异质体含量升高与外周血循环中存在肝癌细胞有关。 展开更多
关键词 肝癌 外周血 甲胎蛋白异质体 转录物 含量 相关分析
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人肾透明细胞癌细胞系的建立及其生物学特性 被引量:8
17
作者 侯建国 曹广文 +7 位作者 李光辉 吴宗娣 宝建中 马大烈 张青 孙秀芳 郑家富 钱松溪 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第6期350-351,共2页
采用肾癌病人肾切除新鲜瘤组织,经过体外细胞建株及培养,通过记录其生长曲线、集落形成率、染色体分析、增殖细胞核抗原(PCNA)检测及透射电镜观察,人肾透明细胞癌RCC-949细胞系,在体外连续传82代,历经8个月,细胞生长和传代稳定,群体倍... 采用肾癌病人肾切除新鲜瘤组织,经过体外细胞建株及培养,通过记录其生长曲线、集落形成率、染色体分析、增殖细胞核抗原(PCNA)检测及透射电镜观察,人肾透明细胞癌RCC-949细胞系,在体外连续传82代,历经8个月,细胞生长和传代稳定,群体倍增时间18小时,具有超二倍体核型,染色体众数为71,集落形成率为24%,PCNA检测提示有较强的增殖活性,具有良好的裸鼠致瘤效率。结果说明:RCC-949细胞系符合细胞系的建立标准,可为肾癌RCC的临床及基础研究提供有用的细胞和移植瘤模型。 展开更多
关键词 肾肿瘤 细胞系 PCC-949 生物学特性
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中期因子转录物及其蛋白在肝细胞癌中的定位与表达研究 被引量:7
18
作者 罗祥基 殷正丰 +3 位作者 康晓燕 吴宗娣 张柏和 吴孟超 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期220-222,共3页
目的了解中期因子 (Midkine,MK)转录物及其蛋白产物在肝细胞癌 (hepatocellularcarci noma ,HCC)中的定位情况与表达特点。方法应用原位杂交、免疫组织化学染色等方法对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MKm... 目的了解中期因子 (Midkine,MK)转录物及其蛋白产物在肝细胞癌 (hepatocellularcarci noma ,HCC)中的定位情况与表达特点。方法应用原位杂交、免疫组织化学染色等方法对 33例人HCC组织、10例良性肝肿瘤组织及其配对瘤旁肝组织进行了MKmRNA及蛋白的定位与表达研究。结果免疫组织化学结果与原位杂交结果具有一致性 (χ2 =0 5 0 0 ,P >0 0 5 )。MK在HCC组织中呈高表达。MKmRNA及蛋白的阳性信号聚集于HCC细胞质。在HCC细胞外组织中亦有MK表达 ,尤以血管密集处明显。HCCMK表达率与肝癌组织学类型、分级等临床病理学特点无相关性。结论HCC在mRNA和蛋白水平上表达MK增加 。 展开更多
关键词 生物因子 原位杂交 免疫组织化学 肝细胞癌 中期因子转录物 蛋白定位 蛋白表达
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缺氧对血管内皮生长因子启动子-胸苷激酶系统杀伤肝癌细胞系的增强作用 被引量:3
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作者 王孟龙 殷正丰 +4 位作者 吴宗娣 王率 钱海华 康晓燕 吴孟超 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期455-457,共3页
目的 探讨缺氧对腺病毒介导的血管内皮生长因子启动子 胸苷激酶系统 (AdVEGF tk)对肝癌细胞系HepG2选择性杀伤活性的增强作用。方法 采用AdEasysystem构建重组腺病毒载体AdVEGF tk和AdVEGF GFP ,在 2 93细胞中包装、扩增后 ,分别感染... 目的 探讨缺氧对腺病毒介导的血管内皮生长因子启动子 胸苷激酶系统 (AdVEGF tk)对肝癌细胞系HepG2选择性杀伤活性的增强作用。方法 采用AdEasysystem构建重组腺病毒载体AdVEGF tk和AdVEGF GFP ,在 2 93细胞中包装、扩增后 ,分别感染LO2 (正常肝细胞系 )和HepG2。AdVEGF GFP感染细胞经正常培养 2 4h后 ,在荧光显微镜下观察其荧光蛋白表达情况 ;AdVEGF tk感染细胞在缺氧或不缺氧条件下培养 ,并给予不同浓度的丙氧鸟苷 (GCV)处理 ,用MTT法检测感染细胞的增殖情况。结果 AdVEGF GFP感染的L0 2细胞仅见稀散的荧光 ,而AdVEGF GFP感染的HepG2细胞则出现大量荧光。感染AdVEGF tk后 ,当感染指数 (MOI)为 10 0且GCV浓度为 10 μg/ml时 ,L0 2细胞在不缺氧条件下对GCV几乎不敏感 ,但在缺氧条件下 ,70 %以上的细胞被杀死 ;而HepG2细胞即便在不缺氧培养条件下也有 6 0 %以上的细胞被杀死 ,缺氧则使 80 %以上细胞被杀死。结论 缺氧可加强腺病毒介导的AdVEGF 展开更多
关键词 肝癌 缺氧 血管内皮生长因子 胸苷激酶 腺病毒载体 血管生成
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异常凝血酶原酶免疫测定法作为肝癌标志物的研究 被引量:5
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作者 殷正丰 崔贞福 +3 位作者 康晓燕 吴宗娣 陈汉 吴孟超 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2001年第8期503-504,共2页
新近越来越多的临床研究资料表明,异常凝血酶原对原发性肝细胞癌(HCC)具有相当的诊断意义[1,2].本文采用酶免疫测定法检测1*!026例各种良恶性疾病患者血浆异常凝血酶原,进一步探讨异常凝血酶原作为HCC标志物的应用价值.
关键词 肝癌 异常凝血酶原 酶免疫测定法 肿瘤标志物
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