PBL教学法应用于神经内科见习教学的实践

目的:探讨PBL教学法在神经内科见习中的应用效果。方法:将我校临床医学专业神经内科见习的学生随机分为实验组(30人)和对照组(30人),对照组采用传统的LBL教学法,实验组采用PBL教学法。结果:2组的理论成绩无明显差异,实验组的病例分析和神经系统体格检查成绩优于对照组,实验组在主观评价教学法是否增加学习兴趣、提高自学能力、文献查阅能力、综合分析问题的能力以及扩大知识面、团队合作、教学满意度等方面优于对照组(P<0.05)。结论:PBL教学法较传统LBL教学法效果更优,能提高见习教学质量和学生的综合能力。

以谷物干燥为例探究农业机械的成本效益

近年来,随着国家强农惠农政策的扶持,农民的数量不断减少,而粮食种植规模却不断扩大,动辄几百亩甚至上千亩的种粮大户不断涌现。传统的单个家庭的耕作,已不能满足快速发展的需要,于是农户纷纷购置农业机械,其中包括烘干机。然而我们却看到,很多农户宁肯雇人晒谷,也不使用机器。

牙周膜成纤维细胞多种培养法的研究

目的提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成功率,提高组织块贴壁率,缩短培养时间,加快细胞增殖。方法以高血清结合改良组织块培养法培养原代HPDLCs与传统组织块法及改良组织块培养法作比较。通过免疫组化方法鉴定细胞的来源,绘制细胞的生长曲线,对三种方式的培养成功率、组织块贴壁率及细胞增殖速度进行比较。结果三种方法所培养的原代细胞生长均趋于正常,细胞呈长梭形或多角形,波形蛋白鉴定呈阳性,角蛋白鉴定呈阴性,符合正常HPDLCs的正常形态及生物学特点。高血清结合改良组织块培养法的成功率为86.67%,明显高于其他两种方法(P<0.01)。结论高血清结合改良组织块培养法明显提高了HPDLCs原代培养的成功率,适合在临床上运用。

低碳经济下碳排放权的会计处理与战略选择

全球气候变化问题日益严峻,低碳经济理念深入人心。清洁发展机制实现了节能减排与资金技术转移的双赢,当下国内外碳排放权交易市场处于不断完善中。本文通过对碳排放权会计处理的研究,将其确认为可供出售金融资产,以公允价值计量,并进行有关信息的披露。最后提出我国建立碳排放权期货市场的战略选择,有助于会计行业和宏观经济的长足发展。

不同流体剪切力对牙周膜成纤维细胞分泌COX-2的影响

目的:研究流体剪切力(FSS)对体外培养人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs)分泌环氧合酶2(COX-2)蛋白的影响。方法:体外培养的HPDLCs置于体外FSS加载装置系统,分别加载0、5、8、12及15 r/min的FSS 1、2及6 h,免疫组织化学染色方法检测细胞分泌的COX-2蛋白量,分析蛋白量的灰度值。结果:HPDLCs在FSS的作用下COX-2蛋白表达增强,加载力为12 r/min及加载时间2 h时,COX-2蛋白的表达达峰值。结论:体外加载FSS可影响人HPDLCs分泌COX-2蛋白。

自噬对帕金森病小鼠的影响及TFEB的相关调控作用

目的观察调节自噬对C57BL／6帕金森病模型小鼠行为学、多巴胺能神经元存活数目、α-突触核蛋白（α-Syn）的影响，并探讨转录因子EB（TFEB）的相关调控作用。方法C57BL／6雄性小鼠采用1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）腹腔注射建立帕金森病模型，分别采用雷帕霉素、3-甲基腺嘌吟（3-MA）进行干预，设立正常对照。各组小鼠在最后1次MPTP或生理盐水注射后1d、7d、14d进行行为学测试，14d处死取中脑黑质脑组织行酪氨酸羟化酶（TH）免疫组化染色，Western Blot检测α-Syn、TFEB和自噬蛋白LC3的蛋白表达。结果（1）雷帕霉素干预可使帕金森病小鼠的爬杆时间延长，悬挂分值增加，旷场试验总距离及平均速度增加，而3-MA干预则相反，造模后14d时最明显。（2）雷帕霉素干预可增加帕金森病小鼠黑质TH免疫阳性神经元数目，减少帕金森痛小鼠黑质α-Syn的蛋白表达，增加自噬蛋白LC3-Ⅱ水平以及TFEB的表达，3-MA干预则使得黑质TH免疫阳性神经元数目进一步减少，α-Syn蛋白表达进一步增加，并减少LC3-Ⅱ水平以及TFEB的表达。结论诱导自噬可促进α-Syn的清除，保护多巴胺能神经元，从而改善帕金森病小鼠的运动障碍，相反抑制自噬则会导致α-Syn异常聚集增加进而加重帕金森病小鼠的运动障碍，TFEB在此过程中可能发挥重要调控作用。

抗GABABR脑炎一例临床分析

边缘性脑炎（LE）指可累及海马、杏仁核、岛叶及扣带回皮质等边缘结构，临床表现以近记忆缺失、精神行为异常和癫痫发作为特点的中枢神经系统炎性疾病。Y-氨基丁酸B型受体（GABABR）抗体相关LE则是近年来发现的一种自身抗体介导性LE，

企业竞争战略与管理层策略性业绩:基于管理层业绩预告的分析

从战略管理理论出发研究竞争战略对管理层盈利预测策略的影响。结果表明,采取差异化战略的企业更可能自愿披露盈利预测信息,然而预测偏差较大并更倾向于披露悲观消息。机制检验表明经营风险在差异化战略影响盈利预测中起中介作用。进一步研究发现,在国有企业和金融化程度较强的样本中,差异化竞争战略和盈利预测偏差的关系被显著弱化。

人参皂苷Rg1对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮细胞损伤的抑制作用及机制

目的探究人参皂苷Rg1(GRg1)对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮(ARPE)细胞损伤的作用及机制。方法体外培养ARPE-19细胞,将其随机分为对照组、模型组及GRg1高、中、低剂量组与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂组。除对照组外,其余组采取氯化钴诱导ARPE-19细胞构建缺氧模型,通过CCK-8法、TUNEL法测定各组不同时间点细胞活性及凋亡情况,DCFH-DA荧光探针对各组活性氧(ROS)水平,经由RT-qPCR、Western blotting法测定各组细胞内HIF-1α、BDNF、PACAP38 mRNA与蛋白表达。结果与对照组相比,各组给药0、12、24 h时ARPE-19细胞活性均低、凋亡率高(P均<0.05);GRg1高剂量组给药12、24、48 h时ARPE-19细胞活性均高于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05),细胞凋亡率均低于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组给药24、48 h时细胞活性均高于GRg1中剂量组(P均<0.05)。与对照组相比,各组给药48 h时ARPE-19细胞ROS、HIF-1αmRNA及蛋白表达均高(P均<0.05);GRg1高剂量组ARPE-19细胞ROSHIF-1αmRNA及蛋白表达均低于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组ARPE-19细胞BDNF、PACAP38 mRNA及蛋白表达均高于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组与HIF-1α抑制剂组给药不同时间点细胞活性与凋亡率、细胞ROS、HIF-1α、BDNF、PACAP38表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论GRg1能减轻缺氧诱导所致ARPE-19细胞损伤,其机制可能与抑制细胞ROS、HIF-1α表达,上调BDNF、PACAP38表达有关。

探究农业生产机械化的成本效益

一、农业生产机械化趋势（一）浙江省农业生产向机械化发展2009年11月,浙江省人民政府就加快发展粮食烘干机问题进行了专题研究,形成了浙江省人民政府专题会议纪要：力争通过3年的努力,达到20亩以上种粮大户基本实现粮食机械化烘干。

不同容量液体对失血性休克家兔早期复苏效果的影响

目的观察不同容量液体复苏对失血性休克家兔复苏即刻重要器官体系数、血液流变学指标的影响。方法27只健康实验家兔随机均分3组，颈总动脉放血复制家兔失血性休克模型。休克20min后将放出的全血加等倍生理盐水（1：1复苏组）或放出的全血加2倍生理盐水（1：2复苏组）行液体复苏，并设对照组。液体复苏后，观察重要器官体系数、血液流变学指标的变化。结果经不同容量液体复苏后，两组动物血压基本恢复正常；1：1复苏组复苏即刻的肝系数小于对照组与1：2复苏组（P〈0．01），三组间的心、肾、肺系数无统计学差异（p〉0．05）;1与1：2复苏组各切变率下的全血粘度均显著低于对照组（p〈0．01），三组间的血浆粘度与相对粘度无统计学差异（P〉0．05）。结论失血性休克行液体复苏后．能较好地恢复血容量，但全血粘度及肝系数下降；休克早期的低粘血症，值得重视。

山茱萸新苷对EAE中枢神经系统MCP-1表达及CD68阳性细胞浸润的影响

[目的]研究山茱萸新苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)大鼠中枢神经系统单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)表达及CD68阳性细胞浸润的影响。[方法]制备豚鼠全脊髓匀浆免疫抗原,皮下注射至Lewis大鼠,建立EAE模型。设正常对照组、EAE组、山茱萸新苷组、波尼松组,每天神经功能评分,待症状达到高峰处死实验动物,用RT-PCR、Western Blot法比较各组实验动物中枢神经系统MCP-1 m RNA及蛋白的表达,免疫组织化学染色法比较各组实验动物中枢神经系统CD68阳性细胞浸润情况。[结果]正常对照组、EAE组、山茱萸新苷组、波尼松组大鼠MCP-1 m RNA的相对表达量分别为(11.265±2.928)、(401.373±55.398)、(124.987±20.244)、(75.465±7.766),MCP-1蛋白相对表达量分别为(7.458±2.570)、(24.155±1.420)、(19.568±0.863)、(17.458±1.630),CD68阳性指数分别为0%、(41.93±12.25)%、(16.08±8.70)%、(5.38±2.88)%。使用单因素方差分析法,MCP-1 m RNA的相对表达量、MCP-1蛋白相对表达量、CD68阳性指数组间差异显著,均有统计学意义(F=199.734、66.081、35.565,均P=0.000)。山茱萸新苷组与EAE组在神经功能评分、MCP-1 m RNA的相对表达量、MCP-1蛋白相对表达量、CD68阳性指数表达差异均有统计学意义(P=0.002、0.000、0.003、0.013)。[结论]山茱萸新苷可改善EAE大鼠神经功能,抑制EAE大鼠中枢神经系统MCP-1表达及CD68阳性细胞浸润。

氧自由基与大鼠坐骨神经非冻结性冷损伤

目的:观察大鼠坐骨神经在非冻结性低温作用后,局部氧自由基的水平及脂质过氧化产物丙二醛(malonic dialdenhyde,MDA)的含量以及形态学改变,探讨氧自由基在周围神经冷损伤中的作用。方法:80只雄性wistar大鼠随机平均分成持续低温组与间断低温组。每只大鼠一侧坐骨神经给予低温作用,另一侧作为对照。持续低温组给予坐骨神经4℃,2h;间断低温组4℃,1h,恢复体温1h后,再次4℃,1h。于冷刺激结束后即刻、4小时、1天、3天测定坐骨神经氧自由基和MDA的含量。结果:1.坐骨神经冷损伤后,以大有髓纤维变性为主,且程度随时间延长而逐渐加重,间断低温组较持续低温组的变性更显著。2.受冷侧坐骨神经局部氧自由基含量与对照侧相比:持续低温组在冷刺激结束即刻无明显变化,而间断低温组在冷刺激结束即刻就开始增加,在随后的4h,1d,3d两组都有显著增加,氧自由基含量均于1d时达高峰。而且,在低温结束即刻和3d时,间断低温组产生的氧自由基明显多于持续低温组。3.与对照侧相比,低温后即刻,持续低温组与间断低温组MDA含量均无显著变化;4h,1d,3d两组都有显著增加,两组间无显著差异。结论:非冻结性低温可以造成坐骨神经有髓纤维变性,而这种变性程度与低温后产生的氧自由基含量增加的趋势相一致,提示氧自由基是坐骨神经非冻结性损伤的因素之一。

中国卒中患者高血压管理专家共识

卒中后血压升高与患者死亡和神经功能恢复不良相关,积极有效地控制血压对改善预后非常重要。《中国卒中患者高血压管理专家共识》基于现有循证医学证据,对出血性卒中和缺血性卒中早期降压治疗的时机、目标和用药措施进行了推荐;考虑到临床实际中多病共存的现状,还对合并心力衰竭、颈部大血管狭窄、主动脉夹层、肾功能衰竭、心房颤动、肺部感染等特殊病情卒中患者的降压时机、目标和用药措施进行了推荐;同时就卒中一级、二级预防中的血压管理进行了介绍。《中国卒中患者高血压管理专家共识》的发布有利于临床实践中卒中患者高血压的规范化管理。

巨噬细胞与坐骨神经非冻结性冷损伤

目的观察非冻结性冷损伤后坐骨神经超微结构的动态变化,探讨炎性细胞在神经损伤中的作用。方法 20只雄性wistar大鼠随机分成持续低温组与间断低温组。每只大鼠一侧坐骨神经给予低温作用,另一侧坐骨神经作为常温对照。持续低温组给予坐骨神经3～5℃,2小时低温处理;间断低温组给予3～5℃,1小时低温处理,待其恢复体温1小时后,再次给予3～5℃,1小时低温处理。冷损伤后1天、3天时分别观察坐骨神经超微结构变化及炎性细胞活动。结果①持续冷损伤后1天,坐骨神经多数有髓纤维即发生"空轴索"改变;无髓纤维基本正常。神经内膜血管内皮肿胀管腔狭窄,管腔内未见血小板激活与红细胞淤滞;②持续冷损伤后3天,有髓纤维病变继续加重,而无髓纤维仍保持正常。神经内膜血管病变同前;③间断冷损伤后1天,有髓纤维病变的同时伴随少量无髓纤维退变。第3天时观察到巨噬细胞侵犯、吞噬有髓纤维。结论非冻结性冷损伤时温度波动可以增强血液再灌注,加速氧自由基的产生,这可能是间断低温后出现巨噬细胞活动的主要原因,它将使坐骨神经有髓纤维变性更加严重。

基因芯片联合激光捕获显微切割技术在脊髓背根神经节基因表达研究中的应用

目的探索联合激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)与基因芯片技术在大鼠脊髓背根神经节的感觉神经元基因表达研究中的可行性。方法取大鼠L4、L5、L6节段脊髓背根神经节,用LCM技术获取神经细胞,提取总RNA,甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA质量,检测纯度和产量,并以实时RT-PCR方法进行验证。结果总RNA的完整性较好,经单轮T7线性扩增后得到足量的aRNA,可用于实时RT-PCR研究和进一步基因芯片杂交实验。结论结合有效的RNA保护方法和线性扩增,LCM可以分离出纯净的背根神经节的感觉神经元,满足下游基因芯片研究的要求。

黄芪注射液对肺癌A549细胞增殖的影响

目的观察人肺癌A549细胞形态,探讨黄芪注射液对人肺癌A549细胞形态和增殖的影响。方法以体外培养的人肺癌A549细胞为研究对象,倒置显微镜观察细胞形态;采用活细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测黄芪注射液对A549细胞增殖的影响;采用改良寇氏法计算黄芪注射液作用A549细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果黄芪注射液作用A549细胞24、48 h时,100、200、400 mg/mL黄芪注射液组对其均有促生长的作用,但随着浓度的增加而减弱,600、800 mg/mL黄芪注射液组对细胞有抑制作用;作用72 h后,400 mg/mL黄芪注射液组不再具有促细胞生长作用,600、800 mg/mL黄芪注射液组的抑制作用增强。改良寇氏法计算24、48、72 h的IC50分别为776、851、616 mg/mL。结论低浓度的黄芪注射液在短时间内对A549细胞有促生长的作用,达到一定作用时间后,浓度越高对A549细胞的抑制作用越明显。

维甲酸对脑出血大鼠LINGO-1表达的影响

目的观察脑出血后LINGO-1表达的变化,探讨维甲酸对脑出血后LINGO-1表达的影响。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和维甲酸治疗组,选取造模后1d、3d、7d和14d为观察点。制备脑出血模型,Longa评分法评价神经功能缺损程度,RT-PCR法检测LINGO-1 m RNA的表达,Western blot法检测LINGO-1蛋白的表达。结果模型组Longa评分7d最高,14d出现下降;LONG-1 m RNA 3d表达最高,7~14d出现下降;LONG-1蛋白7d到高峰,14d出现下降。维甲酸治疗组在14d Longa评分较模型组下降(P<0.05);在7d和14d LINGO-1m RNA表达较模型组下降(P<0.05);在14d LINGO-1蛋白表达较模型组下降(P<0.05)。结论脑出血后LINGO-1表达明显上调,呈先上升后下降的变化规律。维甲酸可以降低LINGO-1 m RNA和蛋白的表达及神经功能评分。

动态突变的产生、致病作用及主要相关疾病

基因内或侧翼序列的一些 DNA重复序列与许多人类遗传病的发病有关。这些 DNA重复序列主要包括 CAG、CCG、CTG等三核苷酸重复序列 ,以及其他长度不等的小卫星、微卫星重复序列等。它们的拷贝数在世代传递的过程中发生扩增 ,并常在体细胞中发生长短不等的扩增而造成体细胞的嵌合性。这种不稳定的突变形式称为动态突变。发生动态突变的DNA重复序列通过导致基因功能丢失或获得异常表达产物等途径致病。目前已知的动态突变疾病大约有 2 0种。本文就动态突变有关的新进展作一论述。