雷公藤内酯醇调节5-脂氧合酶对胰腺癌细胞增殖的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(Triptolide,TL)在胰腺癌细胞中5-脂氧合酶(5-LOX)蛋白的表达及对癌细胞生长的影响。方法:应用免疫细胞化学法检测胰腺癌细胞株SW1990和Capan2中5-LOX蛋白的表达,同时检测TL对胰腺癌细胞株SW19905-LOX蛋白表达的影响,采用M TT法和流式细胞术分别检测胰腺癌细胞SW1990的增殖和凋亡。结果:胰腺癌细胞株SW1990和Capan2中均表达5-LOX,并与细胞分化程度有关;TL抑制SW1990中5-LOX蛋白的表达,并抑制胰腺癌细胞SW1990增殖和促进细胞的凋亡,作用随浓度的增加而增强(P<0.01);细胞的增殖和凋亡与5-LOX蛋白的表达相关(P<0.01)。结论:TL抑制胰腺癌细胞SW1990中5-LOX的表达,并抑制胰腺癌细胞增殖和诱导凋亡,5-LOX代谢途径在胰腺癌细胞的生长中发挥重要作用。

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注肠组织半胱氨酰白三烯受体1表达和病理的影响

目的:研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)保护作用和机理。方法:30只大鼠分为3组,假手术对照组、I/R模型组和中药治疗组各10只。通过免疫组织化学染色方法和RT-PCR法检测大鼠肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平,并应用光学显微镜观察小肠病理改变。结果:1与对照组比较,中药治疗组大鼠肠道组织的病理改变均明显减轻。2肠I/R时肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平均减低。结论:柴芍承气汤能减轻肠I/R肠道组织的病理损害,并能抑制大鼠肠黏膜抑制肠组织CysLTR1的表达,CysLTR1的表达可能是柴芍承气汤保护肠黏膜损伤的靶点。

孟鲁司特对大鼠肠缺血再灌注继发肝损伤的保护作用研究

目的:探讨孟鲁司特对Wistar大鼠肠缺血再灌注(intestinal ischemia-reperfusion,I/R)继发肝损伤的影响及机制。方法:30只大鼠随机分成3组:对照组、模型组和孟鲁司特组,复制大鼠肠缺血再灌注动物模型,孟鲁司特组术前1 h经胃灌注孟鲁司特(2 mg/kg体质量),对照组和模型组灌注同等剂量生理盐水。再灌注3 h后处死大鼠,测定各组血清丙胺酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平,观察各组肝脏病理改变和评分,检测大鼠肝组织半胱氨酰白三烯受体1(Cys LTR1)蛋白和mRNA表达水平,检测肝细胞凋亡水平。结果:与对照组相比,模型组ALT和AST均显著升高(P<0.01),模型组肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05),肝组织细胞凋亡指数明显升高(P<0.05),肝脏病理损伤明显(P<0.05);与模型组相比,孟鲁司特组ALT和AST均降低(P<0.05);肝组织病理损伤减轻(P<0.05),肝细胞凋亡指数降低(P<0.05),肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平均减低(P<0.05);肝组织Cys LTR1蛋白的表达水平与肝组织病理损伤和肝细胞凋亡指数呈正相关。结论:孟鲁司特可以明显减轻肠I/R继发肝损伤,其机制可能与抑制Cys LTR1介导的炎症反应和肝细胞凋亡有关。

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注后肠组织半胱氨酰白三烯受体1的表达和肠黏膜细胞凋亡的影响

目的研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法 30只大鼠分为3组,对照组、模型组和中药组各10只。通过免疫组织化学染色方法、Western blot和RT-PCR法检测大鼠肠组织半胱胺酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,CysLTR1)蛋白和mRNA表达水平,并用光学显微镜观察小肠病理改变,检测小肠重量变化,TUNEL-方法检测小肠黏膜细胞凋亡。结果 (1)与对照组比较,中药组大鼠肠组织的病理改变均明显减轻(均P<0.05);与对照组比较,模型组小肠含水量明显增加(P<0.05),而中药组小肠含水量显著降低(P<0.01);(2)肠I/R时肠组织CysL.TR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肠组织CysLTR1蛋白和mRNA表达水平均减低(均P<0.05);(3)与模型组比较,中药组小肠黏膜细胞凋亡显著减少(P<0.01);(4)小肠黏膜中CysLTR1蛋白表达分别与细胞凋亡、黏膜病理损伤、小肠含水量呈正相关(r=0.8463、0.8783、0.7708,均P<0.05)。结论柴芍承气汤能减轻肠I/R肠组织的病理损害和降低小肠黏膜细胞凋亡,并能抑制肠黏膜组织CysLTR1的表达,CysLTR1的表达可能是柴芍承气汤保护肠黏膜损伤的靶点。

半胱氨酰白三烯受体-1在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotrienes receptor,CysLTsR1)在肠缺血再灌注(intestinal ischemia-reperfusion,I/R)损伤中的可能作用.方法:以I/R大鼠肠I/R损伤模型为研究对象,并运用不同剂量CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特(0.2、2和20 mg/kg)加以干预,通过免疫组织化学染色方法和RT-PCR法检测大鼠肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平,并应用光学显微镜观察小肠病理改变、检测小肠质量变化、确定CysLTsR1拮抗剂孟鲁司特对小肠的炎症程度的影响.结果:肠I/R可造成肠组织损伤,小肠含水量增加(模型组78.13 g±1.35 g vs正常组78.13 g±1.35 g,P<0.05),肠I/R时肠组织CysLTsR1蛋白和mRNA表达水平升高(P<0.05);应用孟鲁司特后,小肠含水量降低(低、中、高剂量组分别为76.47 g±1.48 g、72.67 g±5.35 g及75.39 g±3.66 g),肠组织损伤减轻,肠组织CysLTsR1蛋白表达和mRNA表达水平均减低(P<0.05).结论:CysLTsR1参与了肠I/R损伤的形成,孟鲁司特可以减轻肠I/R对肠组织的损伤,CysLTsR1是保护肠I/R损伤的新的作用靶点.

齐留通对胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨齐留通阻断5-脂氧合酶(5-LOX)代谢途径对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将人胰腺癌细胞SW 1990与不同浓度齐留通(浓度分别为40,30,20,10,5,3和1μg.mL-1)共同孵育,以不加齐留通的细胞为对照组。采用MTT法和流式细胞仪(FCM)AnnexinⅤ/PI双染法检测各组SW 1990细胞增殖和凋亡比例,FCM检测细胞周期。结果培养48 h后,40和30μg.mL-1齐留通组对胰腺癌细胞增殖的抑制作用明显强于对照组,且均差异有极显著性(均P<0.01);培养72 h后,40,30和20μg.mL-1齐留通组对胰腺癌细胞的抑制较对照组显著增强(均P<0.01)。其他检测结果亦表明,齐留通可抑制SW 1990细胞增殖,促进细胞凋亡,该作用呈浓度和时间依赖性。与对照组相比,齐留通作用18 h后G0/G1期细胞比例较对照组明显增高(P<0.01),G2/M期、S期细胞所占比例降低。结论齐留通能抑制胰腺癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,使细胞DNA合成受抑制,产生G1期阻滞。

雷公藤内酯醇降调胰腺癌细胞5-脂氧合酶表达作用研究

目的探讨雷公藤内酯醇(TL)对胰腺癌细胞中5-脂氧合酶(5-LOX)蛋白表达及胰腺癌细胞凋亡的影响。方法应用RT-PCR法和免疫细胞化学法检测胰腺癌细胞株SW 1990中5-LOX表达,同时应用流式细胞术检测胰腺癌细胞SW 1990的凋亡指数。结果胰腺癌细胞株SW 1990表达5-LOX,正常胰腺组织不表达;TL可抑制SW 1990中5-LOX表达,并促进胰腺癌细胞SW 1990凋亡,作用随浓度的增加而增强(P<0.01);细胞凋亡与5-LOX蛋白的表达相关(P<0.01)。结论TL可抑制胰腺癌细胞SW 1990中5-LOX的表达,并促进胰腺癌细胞凋亡。

实验性胰腺癌动物模型研究进展

从上世纪70年代用化学方法诱导制作出胰腺癌动物模型以来,经过数十年的发展,各国学者又设计出了多种胰腺癌动物模型并对其进行了大量的实验研究.上世纪90年代的裸鼠移植瘤模型,尤其是通过外科原位移植(SOI)组织学完整的瘤组织建立的"种植鼠"模型,和近年的基因工程模型,是更为接近人体肿瘤特征的动物模型.现将有关研究进展介绍如下.

胰腺癌细胞中5-脂氧合酶mRNA和蛋白的表达

胰腺癌预后差,早期诊断困难,发病率于近年来逐步上升,且传统治疗效果不理想.因此,深入研究胰腺癌的发病机制对探索更为有效的预防、诊断和治疗方法具有重要意义.近年来研究结果表明,5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-LOX)代谢途径与胰腺癌的发生和发展关系密切.为此,我们应用RT-PCR和免疫组织(细胞)化学技术检测胰腺癌细胞株SW1990和Capan2中5-LOX的表达情况.

柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注后肝组织半胱氨酰白三烯受体1的表达和肝细胞凋亡的影响

目的:研究中药柴芍承气汤对大鼠肠缺血再灌注(I/R)继发肝损伤的保护作用及其机制。方法:30只大鼠分为3组,对照组、模型组和中药组各10只。通过免疫组织化学染色方法、Western blot和RT-PCR法检测大鼠肝组织半胱胺酰白三烯受体1(cysteinyl leukotriene receptor 1,Cys LTR1)蛋白和mRNA表达水平,并用光学显微镜观察肝脏病理改变,TUNEL方法检测肝细胞凋亡。结果:(1)与对照组比较,模型组有大鼠肝脏病理损伤,中药组大鼠组肝脏组织的病理改变明显减轻(均P<0.05);(2)肠I/R时肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平升高;应用中药后,肝组织Cys LTR1蛋白和mRNA表达水平均减低(均P<0.05);(3)与对照组比较,模型组肝细胞凋亡指数升高;与模型组比较,中药组肝细胞凋亡显著减少(P<0.01);(4)肝组织中Cys LTR1蛋白表达分别与细胞凋亡、肝脏组织病理损伤正相关(r=0.8463、0.8783、0.7708,均P<0.05)。结论:柴芍承气汤能减轻肠I/R继发肝脏损伤的病理损害和降低肝细胞凋亡,并能抑制肝脏组织中Cys LTR1的表达,柴芍承气汤可能通过抑制肝脏组织中Cys LTR1的表达和抑制肝细胞凋亡减轻肠I/R继发肝损伤。

脂氧合酶代谢途径和胰腺癌

研究胰腺癌中脂氧合酶(LOX)异常表达,及了解LOX代谢途径与胰腺癌之间的关系,为LOX 代谢途径作为胰腺癌治疗和化学预防的新靶点,提供理论依据和治疗途径。

特利加压素治疗食管胃底静脉曲张破裂出血39例

目的观察特利加压素治疗肝硬化患者急性食管胃底静脉曲张破裂出血的临床疗效。方法收集肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血患者79例,随机分为两组。特利加压素治疗组39例,静脉推注2 mg后,每6 h静脉推注1mg;生长抑素组40例,静脉滴注250μg后,每小时250μg连续静脉滴注。观察两种药物的临床疗效、止血时间、再出血率、病死率和不良反应。结果特利加压素组和生长抑素组有效率分别为89.74%和82.50%(P>0.05);再出血率分别为14.29%和21.21%(P>0.05),病死率分别为7.69%和10.00%(P>0.05);止血时间分别为(7.32±4.53)和(8.71±5.21)h,再出血例数分别为5和7例,不良反应发生率分别为12.8%和12.5%(P>0.05)。特利加压素治疗失败的4例中,改用生长抑素治疗仍无效,而生长抑素治疗失败的7例中,改用特利加压素治疗5例有效。结论特利加压素治疗肝硬化急性食管静脉曲张破裂出血具有较好疗效,安全性高。

雷公藤内酯醇对胰腺癌细胞株SW1990基因表达谱的影响

目的:应用基因表达谱芯片研究胰腺癌细胞株(SW1990)在雷公藤内酯醇作用后其基因表达的差异性。方法:用Cy5和Cy3两种荧光染料通过逆转录反应将加药组和对照组的SW1990细胞的mRNA分别标记成两种探针,并与载有一组靶基因的表达谱芯片杂交,通过扫描荧光强度,计算机软件分析,寻找经雷公藤内酯醇作用后表达有差异的基因。对芯片结果中两个表达有改变的基因行荧光定量PCR验证。结果:胰腺癌细胞SW1990受雷公藤内酯醇作用4h后,共筛选出11条差异表达基因,且全部下调。结论:雷公藤内酯醇可能部分通过下调C-MYC、ETS2、TGIF、RTP801等基因来发挥其有效的抗肿瘤特性。

肝硬化伴自发性细菌性腹膜炎患者血清降钙素原与1型肝肾综合征的关系

目的研究肝硬化伴自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者血清降钙素原(PCT)的变化,并探讨其与1型肝肾综合征(HRS)的关系。方法 2011年1月至2013年11月收治的肝硬化伴腹水患者150例,其中单纯腹水(非SBP组)47例,住院期间无HRS发生;肝硬化并发SBP103例,其中1周内并发1型HRS患者28例(HRS组),另75例住院期间肾功能均正常(SBP组)。150例患者均于入院当天(即第1天)和人院后第3、5、7天抽取外周静脉血测PCT、C-CRP,同时测肝肾功能、血常规,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线。结果肝硬化SBP组及HRS组入院第1、3、5、7天的PCT水平均明显高于非SBP组,差异均有统计学意义(均P<0.05);HRS组入院第1、3、5、7天PCT水平明显高于单纯SBP组,差异均有统计学意义(均P<0.05);SBP组经过治疗1周内病情有不同程度改善,PCT水平也逐渐下降,HRS组治疗效果差,1周内PCT水平逐渐升高。肝硬化伴SBP患者入院第1天检测的PCT、CRP及常规肾功能指标预测1型HRS的ROC曲线AUC依次为PCT 0.904、CRP 0.742、血尿素氮(BUN)0.724、血清肌酐(Scr)0.659,即PCT>CRP>BLiN>Scr。假定检测的灵敏度与特异性同等重要,以两者之和最大值时对应的浓度为截断点,PCT的诊断灵敏度,特异性最高。结论持续监测PCT可评估肝硬化伴SBP患者的严重程度及预后,并可预警HRS发生,从而可以提早实施干预措施。

自拟活血清热方联合内镜下夹闭术治疗消化性溃疡出血疗效及6-Keto-PGF1α、TXB2的影响

目的观察自拟活血清热方联合内镜下夹闭术治疗消化性溃疡出血疗效及对6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、血栓烷素B2(TXB2)水平的影响。方法选取消化性溃疡出血患者120例,以随机数字表法分为对照组与观察组各60例,分别采用给予内镜下夹闭术单用和在此基础上加用自拟活血清热方辅助治疗,比较两组患者临床疗效,呕血和便血频率,止血时间,住院时间,再次出血率,治疗前后主要症状评分、Hb水平、胃液pH值、6-Keto-PGF1α及TXB2水平。结果观察组临床疗效显著优于对照组(P<0.05);观察组呕血和便血频率低于对照组(P<0.05),止血时间及住院时间均显著短于对照组(P<0.05);观察组7d内再出血率显著低于对照组(P<0.05);治疗后观察组主要症状评分均显著低于对照组(P<0.05),Hb水平和胃液p H值改善均显著优于对照组(P<0.05),6-Keto-PGF1α和TXB2水平改善均显著优于对照组(P<0.05)。结论自拟活血清热方联合内镜下夹闭术治疗消化性溃疡出血可有效缓解出血相关症状体征,降低再出血率,改善Hb和胃液PH水平,并有助于调节6-Keto-PGF1α与TXB2水平。

姜黄素联合奥沙利铂治疗转移性结肠癌的疗效及安全性临床分析

目的探讨姜黄素联合奥沙利铂治疗转移性结肠癌(Patients with metastatic colorectal cancer,mCRC)的疗效与安全性。方法选取2014年1月~2019年6月我院确诊为结肠癌的160例患者,将患者随机分为对照组和观察组,每组80例。两组均给予奥沙利铂治疗,观察组在此基础上加用姜黄素治疗,比较两组患者的肿瘤标志物水平、治疗有效率及不良反应。结果观察组治疗总有效率高于对照组,且不良反应发生率低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),两组肿瘤标志物水平均低于治疗前,且观察组更低,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素联合奥沙利铂治疗转移性结肠癌的治疗效果好且安全性较高。

雷公藤内酯醇诱导胰腺癌细胞凋亡及对5-脂氧合酶和凋亡基因表达的影响

目的探讨雷公藤内酯醇（TL）在胰腺癌化学预防和治疗中的应用价值。方法采用人胰腺癌细胞株SW1990作为研究对象，MTT法和吖啶橙（AO）染色分别检测SW1990细胞的增殖和凋亡，采用半定量RT—PCR法检测5-脂氧合酶（5-LOX）mRNA、bcl-2mRNA和baxmRNA的表达。结果10ug／ml的TL对SW1990细胞生长的抑制率达30％以上，0．1ug／ml TL处理24h后，SW1990细胞凋亡指数达38．5％，显著高于对照组的14．97％。5-LOX、bcl-2、baxmRNA表达从0．7160±0．0251，0．2446±0.0311和0.0260±0．0065分别变化为0．2400±0．0316，0．0700±0．0158和0．0700±0．0158。结论TL能抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡，其凋亡机制可能与下调5-LOXmRNA和bcl-2mRNA、上调baxmRNA基因表达有关。

浙江省义乌地区幽门螺杆菌感染流行病学调查

目的了解义乌地区本地居民幽门螺杆菌(Hp)感染情况及相关影响因素。方法通过对浙江省义乌地区城区及农村1 850例居民进行Hp抗体检测及14C呼气试验以了解本地区Hp的感染情况,结合问卷调查对一些相关因素进行分析。结果义乌地区Hp感染阳性率为72.6%,Hp感染率男女性别间差异无统计学意义(>0.05);随着年龄增加,Hp感染率呈现上升趋势(<0.05);农民、商人及医务工作者感染率高于其他职业(<0.05);不同年收入人群Hp感染率差异无统计学意义(>0.05)。Hp感染与吸烟、饮酒、蔬菜水果是否清洗无关(均>0.05),与饭前、便后是否洗手有关(<0.05)。本调查215对夫妻中,共同感染有170对,35对无感染,只有1方感染的10对。其中689例进行胃镜检查,结果异常,Hp阳性621例,阳性率为90.1%。结论义乌地区Hp感染率维持在高水平。Hp感染与年龄、受教育程度、职业、家庭和个人饮食卫生习惯以及上消化道疾病有关。

雷公藤内酯醇抑制胰腺癌细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的:探讨雷公藤内酯醇(TL)对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:胰腺癌细胞SW1990与TL共同孵育,采用MTT法观察TL对胰腺癌细胞增殖的抑制作用,以流式细胞仪AnnexinⅤ/碘化丙啶(PI)双染法检测TL对SW1990细胞的凋亡的诱导作用和对细胞周期的干预作用。结果:TL抑制SW1990细胞增殖和促进细胞凋亡,呈现为浓度和时间依赖性,TL阻滞胰腺癌细胞周期于G0/G1期。结论:TL能抑制胰腺癌细胞增殖、诱导细胞凋亡及干预胰腺癌细胞周期,TL具有潜在的肿瘤治疗作用。

柴芍承气汤对脓毒症大鼠胰腺损伤的影响及机制研究

目的观察柴芍承气汤对脓毒症大鼠胰腺损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法36只Wistar大鼠随机分为对照组、脓毒症组和柴芍承气汤组,脓毒症组和柴芍承气汤组采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症模型,柴芍承气汤组于造模前1 h及造模后6 h各灌胃1次。生化法检测大鼠胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)、脂质过氧化物(LPO)、谷胱甘肽(GSH)水平,免疫组化和Western blot检测胰腺组织半胱氨酸白三烯受体1(CysLTR1)、核因子(NF)-κB蛋白表达,TUNEL染色检测胰腺组织细胞凋亡情况。结果与对照组比较,脓毒症组大鼠胰腺组织MPO、LPO水平显著升高,GSH水平显著降低(P<0.001),CysLTR1、NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.001);与脓毒症组比较,柴芍承气汤组大鼠胰腺组织MPO、LPO水平显著降低,GSH水平显著升高(P<0.05,P<0.01),CysLTR1、NF-κB蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论柴芍承气汤对脓毒症大鼠胰腺损伤具有一定保护作用,其机制与抑制细胞凋亡,下调CysLTR1介导的NF-κB信号通路有关。