针对HLA-I类分子高效基因编辑方法的建立及其应用

目的:建立一种HLA-I类分子高效基因编辑的方法,以制备编辑HLA-I类通用型造血干细胞。方法:针对β2微球蛋白基因设计并合成sgRNA,将NLS-Cas9-NLS核酸酶与sgRNA按照不同的摩尔比(1∶1-1∶4)形成RNP复合物,分别设置对照组和四个转染组,通过核转染方式转入HEK-293细胞或者CD34+造血干细胞。培养72 h后,应用流式细胞术检测转染细胞表面HLA-I类分子表达情况,T7E1酶切反应鉴定切割作用,DNA直接测序方法鉴定序列套峰出现情况。结果:流式细胞术检测发现转染后HEK-293细胞或者CD34+造血干细胞有不同程度的HLA-I类分子阴性表达细胞群,直接测序不同转染组在sgRNA PAM序列附近均有明显套峰出现。在HEK-293细胞转染中,NLS-Cas9-NLS核酸酶与sgRNA摩尔比为1∶4时HLA-I类分子阴性表达细胞群比例最高(87.69±0.83)%,摩尔比为1∶3时T7E1酶切割效率最高(38±2.0)%。在CD34+造血干细胞转染中,NLS-Cas9-NLS核酸酶与Easyedit sgRNA摩尔比为1∶2时,HLA-I类分子阴性表达细胞群比例为(91.56±3.39)%,摩尔比为1∶1时T7E1酶切割效率为64±8.45%。结论:本研究提供了一种针对HLA-I类分子进行高效基因编辑的方法,该方法可以有效地将细胞表面的HLA-I类分子进行沉默表达,并成功应用于编辑CD34+造血干细胞。

纳米包装材料对酱鸭贮藏品质的影响

[目的]研究纳米包装材料对酱鸭的保鲜效果。[方法]分别采用纳米银聚乙烯保鲜袋和普通聚乙烯保鲜袋对新鲜酱鸭进行包装,在4和25℃贮藏28 d,每7 d对酱鸭进行一次感官评价,并测定其中的挥发性盐基氮含量、菌落总数等指标。[结果]纳米包装材料能较好地保持酱鸭的风味,降低鸭肉挥发性盐基氮的产生,并抑制微生物的生长繁殖。[结论]与普通聚乙烯包装材料相比,纳米包装材料对酱鸭的保鲜效果较好。

食品和化妆品中氯霉素的检测

本文简述了食品和化妆品中的氯霉素的特点和危害,详细介绍了检测氯霉素的微生物学方法、色谱法、免疫分析法、电化学方法、生物芯片法等,综述了食品和化妆品中氯霉素检测方法的最新进展,为建立灵敏度高,特异性强,简便易行的食品和化妆品中氯霉素残留的检验方法提供依据。

仪器分析-科研实践与创新能力的培养

创新能力的培养是一个长期和系统的工程,在仪器分析课程实验教学过程中,应转变培养模式,使学生在科学研究实践中,提升创新能力;实施开放型实验,进一步培养学生的创造思维和科研能力。

乳酸链球菌素脂质体的研究

乳酸链球菌素是一种具有良好防腐效果的天然生物保鲜剂,但其易被水解并与食品基质发生反应,不太稳定等问题降低了其保鲜效果,而利用脂质体包埋技术可有效地解决乳酸链球菌素使用中存在的问题,本文将对乳酸链球菌素脂质体的特点及其制备的影响因素进行阐述。