基于代谢组学研究肝复乐胶囊抑制LX-2细胞激活机制

目的 研究肝复乐胶囊对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞LX-2激活的影响。方法 LX-2细胞分为对照组、模型组和肝复乐125、250、500μg/mL组。除对照组外,其余各组LX-2细胞给予5 ng/mL TGF-β1刺激24 h建立肝纤维化模型。通过分子生物学手段(RT-qPCR及Western blot等)检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL1A1)表达。结合GC-MS法和代谢组学技术检测各组细胞代谢变化,寻找与肝星状细胞激活相关差异代谢物,进行通路富集,预测可能代谢通路。结果 与模型组比较,肝复乐各剂量组LX-2细胞α-SMA、COL1A1的mRNA及蛋白表达降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。代谢组学分析显示,丙酸、丁酸、苯丙氨酸、L-苏氨酸、肌醇、D-半乳糖、甘油、油酸、D-甘油酯与肝星状细胞激活关系密切,且在给药后回调,并富集得到4条代谢途径。结论 肝复乐胶囊能够剂量依赖性地抑制TGF-β1对LX-2细胞的激活,并缓解其代谢异常,其机制可能是通过调节半乳糖代谢,甘油酯代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢等途径实现的。

生、醋柴胡UPLC-DAD指纹图谱建立及抗肝纤维化作用的谱效关系研究

目的建立生、醋柴胡的指纹图谱,比较生、醋柴胡化学成分差异,考察两者抗肝纤维化作用的差异,探究其与抗肝纤维化药效之间的关联性。方法采用UPLC法建立10批生柴胡和10批醋柴胡的指纹图谱,以TGF-β诱导肝星状细胞(LX-2)建立肝纤维化体外细胞模型,以Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,col1a1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达情况为药效指标,利用MetaboAnalyst 5.0网站,以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选影响生、醋柴胡质量的差异标志物,并采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究生、醋柴胡差异化学成分及与抗肝纤维化作用的谱效关系,筛选生、醋柴胡抗肝纤维化作用的主要成分。结果生、醋柴胡样品的UPLC指纹图谱共有峰有18个,生、醋柴胡的主要差异成分有9个,其中峰9、7、6可以指认为柴胡皂苷d、柴胡皂苷a、柴胡皂苷f。药效结果发现,生、醋柴胡均有抗纤维化活性,且醋柴胡抗纤维化活性更强。通过谱效关联结果发现,柴胡抗肝纤维化作用的主要相关成分为11、12、14、15、18号峰。结论建立生、醋柴胡的指纹图谱方法简单可行,通过谱效关系筛选出抗肝纤维化活性的重要成分,为明确生、醋柴胡抗肝纤维化作用物质基础提供依据。

茅苍术醇提物的肝功能保护作用及其机制研究

目的 基于网络药理学和动物实验探究茅苍术醇提物对胆管结扎肝纤维化小鼠肝功能的保护作用及可能分子机制。方法 选取经文献和实验验证的茅苍术主要活性成分苍术素、白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,通过SwissTargetPrediction数据库获取其靶点;通过在线人类孟德尔遗传数据系统(OMIM)、DisGeNET、GeneCards数据库获取肝纤维化疾病靶点。将靶点导入微生信平台,获取茅苍术抗肝纤维化的交集靶点;采用Cytoscape 3.10.1构建“药物-成分-靶点-疾病”网络图、蛋白-蛋白相互作用核心靶点网络图,进行GO功能富集分析和KEGG通路分析,并将活性成分与核心靶点进行分子对接。采用胆管结扎构建肝纤维化小鼠模型,进行肝功能相关指标检测。结果 共得到苍术素、白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ对应靶点91个,肝纤维化疾病靶点9 296个,交集靶点74个,核心靶点31个;KEGG富集分析显示,主要涉及的信号通路有表皮生长因子受体(EGFR)及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)等炎症通路;分子对接结果显示其活性成分与核心靶点蛋白之间具有较强的结合活性。动物实验结果表明,与假手术组比较,模型组小鼠的肝损伤明显,肝脏指数、脾脏指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、肝纤维化程度、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原α1(COL1A1)的mRNA和蛋白表达水平以及Ⅳ型胶原α2(COL4A2)的m RNA表达水平显著升高,胸腺指数显著降低(P <0.05);与模型组比较,茅苍术给药组小鼠肝损伤情况减轻,肝脏指数、脾脏指数、血清ALT、AST活性、肝纤维化程度、α-SMA、COL1A1的m RNA和蛋白表达水平以及COL4A2的m RNA表达水平显著降低,胸腺指数显著升高(P <0.05)。结论 茅苍术可改善肝功能,减轻肝纤维化小鼠组织病理损伤,这可能与激活PI3K/Akt等通路、抑制氧化应激和炎症反应,进而干预肝纤维化有关。

膜分离技术在果胶提取中的应用

将膜处理技术合理应用到果胶生产中,可以降低生产过程的能耗,降低对果胶胶凝度没有贡献的杂质含量,提高果胶产品质量,并能以较低成本除去盐酸等对后处理工序不利的成分,而使果胶提取液可以通过直接干燥获得高品质的成品果胶,从而大幅度降低果胶的生产成本。

二甲胺基丙撑丙烯酰胺的合成与纸张增强

用丙烯酸酯与N,N二甲基丙二胺为原料合成二甲胺基丙撑丙烯酰胺,并与丙烯酰胺、丙烯酸共聚,可以在聚丙烯酰胺链中引入确定数量的阳离子和阴离子基团,从而获得稳定的两性离子型聚丙烯酰胺。用其与阳离子淀粉混合使用,对纸张干强度有很好的增强作用。

磷酸钙包膜催化剂合成高纯度乙烯基异丁基醚

研究了用无定形磷酸钙包膜催化剂催化分解乙醛缩二异丁醇合成乙烯基异丁基醚,在280℃进料速度60mL/min的条件下,定向转化率为98.4%,原料转化率为94.3%。催化产物经分馏和萃取蒸馏可得98.6%的乙烯基异丁基醚(IBVE),若100g该产物用质量比4∶1的CaCl2-CaO混合物6g在-18℃处理,则可得到异丁醇质量分数<0.4%,IBVE质量分数为99.3%的产品。

超强保水剂的制备及其性能评价

具有合适颗粒结构(毫米级)和组成的保水剂才能充分发挥其保水效力,但制备较困难。以丙烯酸铵或其钾盐和丙烯酰胺与适量的交联剂共聚,采用油柱亚稳定状态成型工艺,选择合适规格的滴头,通过使用较少的表面活性剂,尽量加快料液聚合反应速度的方法,使制备的毫米级颗粒的粒径得到了有效的控制。研究表明:在树脂中加入适量的三乙醇胺,能够显著提高其耐盐性,并对吸水速度及保水效率有一定改善;在满足快速反应,并且聚合物链长足以提供足够交联度的前提下,交联剂用量降低对于提高保水剂的综合性能有显著作用;用质量比为1∶3的丙烯酰胺和丙烯酸共聚得到的树脂,在含有适量三乙醇胺的情况下,成品粒径在0.8mm时具有较好的综合性能。

气相色谱法测定合成产物中诺蒎酸的含量

采用气相色谱法跟踪测定了β-蒎烯氧化反应中主产物诺蒎酸的含量;试验结果表明,在SE-30/Chromosorb W/AW(0.25～0.175 mm)的色谱柱上,诺蒎酸与副产物之间具有较好的分离效果,并且在峰形对称性和出峰时间上,SE-30柱也具有优势;该方法的线性范围在15.0～60.0g·L^(-1)之间,检出限(S/N=3)为3.5 g·L^(-1);对同一试样的5次平行测定的相对标准偏差为1.8%;该方法的标准加入回收率达90%～98%。

高分散松香胶的制备实验

松香系列纸张施胶剂经历了三个阶段:最初是皂化松香胶,目前国内尚大量使用;然后是马来酸酐改性的强化松香胶,其仍未摆脱皂化胶的范畴;80年代起国外大量采用完全游离的分散松香胶.分散松香胶与强化松香胶相比,达到同等施胶度可节约胶用量50%以上,并可在较高p H下施胶,降低矾土用量5 0%以上,提高纸张强度和白度,延缓设备腐蚀,在日美等国市场占有率已逾八成.

补阴佳品——龟鳖甲

“波澜日已浅,龟鳖日复滋。”古人以诗歌抒发对龟鳖生命力的赞叹,这里的龟鳖分别是指乌龟和鳖。它们以甲壳入药。龟甲为龟科动物乌龟Chinemys reevesii(Gray)的背甲及腹甲[1],味咸、甘,性微寒;归肝、肾、心经。鳖甲为鳖科动物鳖Trionyx sinensis Wiegmann的背甲[1],味咸,性微寒;归肝、肾经。乌龟和鳖全年均可捕捉,以秋、冬二季为多,捕捉后杀死,或用沸水烫死,剥取背甲和腹甲,除去残肉,晒干。龟鳖甲被列入湖北的“十大楚药”名册。目前,龟鳖甲开发了许多疗效突出的中成药,比如鳖甲煎丸、复方鳖甲软肝片、龟甲健骨胶囊等,除了药用,保健食品也有许多应用,比如鳖甲胶糕、龟甲胶糕、龟苓膏等。

课程思政在新时代中药炮制学实验教学中的应用与探讨

课程思政是新时代高校思想政治教育的工作重点,是培养德才兼备的新时代大学生关键环节,如何在中医药实验课程教学中润物无声地融入课程思政值得深入探讨和研究。中药炮制学实验课程是中药炮制教学的重要环节,是学生通过实践的方式学习中药炮制方法和技艺的关键途径,其思政内涵丰富,可将专业教育和思政进行有效地融合。本文从中药炮制实验教学与课程思政相结合的可行性入手,探究其与课程思政融合育人的策略,塑造当代大学生的社会主义核心价值观,建立中医药文化自信,弘扬中医药工匠精神,培养大学生的创新意识,为中药炮制学实验课程的思政教学改革与应用提供参考。

基于虚拟仿真的线上线下混合教学模式在实验教学中的应用研究——以中药炮制工程学实验为例

根据中药炮制工程学实验教学面临的现实困境,文章通过建立基于虚拟仿真的线上线下混合教学模式,以线上超星平台、虚拟仿真平台及线下中药炮制实验实训中心为依托,以规模化生产麸炒苍术饮片的实验教学为例,利用线上超星平台及微信学习群让学生进行提前学习,再将虚拟仿真技术应用于麸炒苍术饮片实验教学中,最后利用中药炮制实验实训中心进行线下实验教学,有效激发了学生参与实验的积极性,为创新实验教学模式提供了新的思路。

两性离子型聚丙烯酸胺的合成及用于纸张增强

利用丙烯酰胺、丙烯酸、丙烯腈共聚，然后用３－二甲基胺基丙基胺使氰基氨解而引入阳离子基因，获得的两性离子型聚合物与适当阳离子改性淀粉复合使用，具有良好的协同效应。

异丁基乙烯基醚的合成

以乙醛和异丁醇为原料,缩合后,用磷酸钙作催化剂,280℃气相催化脱醇获得标题物与异丁醇混合物,精馏后,再经萃取蒸馏得纯度99.1%的产物,总收率55.4%。

基于调控结肠组织中SCF和c-kit mRNA表达分析苍术燥性效应量效关系

目的:基于结肠组织中干细胞因子(SCF)及其受体c-kit mRNA表达分析苍术燥性效应的量效关系,确定引起小鼠燥性反应的苍术基础剂量,为临床用药提供参考。方法:75只C57BL/6小鼠分为对照组和185、370、555及740 mg·kg^-1苍术挥发油组,每组15只,给药体积为0.015 mL·g^-1,灌胃给药14 d,对照组给予同体积1%吐温-20溶液。测定小鼠日均饮水量和日均尿量,采用免疫组织化学法检测小鼠肾组织中水通道蛋白2(AQP2)蛋白表达水平,计算小鼠脾脏和肾脏系数,采用RT-PCR法检测小鼠结肠组织中SCF和c-kit mRNA表达水平,根据以上指标考察各组小鼠燥性效应。结果:与对照组比较,185和370 mg·kg^-1苍术挥发油组小鼠日均饮水量、日均尿量、肾组织中AQP2蛋白表达水平、肾脏系数和脾脏系数差异均无统计学意义(P>0.05),小鼠结肠组织中SCF mRNA表达水平明显升高(t=4.859,P<0.01;t=6.651,P<0.05),185 mg·kg^-1苍术挥发油组小鼠结肠组织中c-kit mRNA表达水平明显升高(t=2.946,P<0.05),而370 mg·kg^-1苍术挥发油组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,555 mg·kg^-1苍术挥发油组小鼠日均尿量、结肠组织中c-kit mRNA表达水平明显降低(t=7.708,P<0.01;t=8.465,P<0.01),其他指标差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,740 mg·kg^-1苍术挥发油组小鼠饮水量、肾组织中AQP2蛋白表达水平明显升高(t=3.554,P<0.01;t=4.636,P<0.01),日均尿量、脾脏系数、结肠组织中SCF和c-kit mRNA表达水平明显降低(t=7.708,P<0.01;t=4.985,P<0.01;t=7.314,P<0.01;t=28.45,P<0.01)。结论:低剂量(185和370 mg·kg^-1)苍术挥发油对健康小鼠无明显燥性作用,而高剂量(555 mg·kg^-1以上剂量)苍术挥发油可能通过影响SCF/c-kit信号通路对小鼠产生明显的燥性作用。

探讨中药剂肝复乐治疗肝硬化基于网络药理学的作用机制

目的 通过网络药理学研究预测中药剂肝复乐的主要活性成分的作用靶点与通路,建立其“化合物-靶点-通路”的网络模型。方法 利用网络药理学,获得肝复乐中抗肝硬化的活性成分及其相关靶点。通过与MalaCards、OMIM数据库中肝硬化相关基因以及从基因芯片筛选比对,选择既关键的靶点基因进行后续分析,靶点经KEGG通路富集分析后,使用Cytoscape软件构建肝复乐“化合物-靶点-通路-疾病”网络。结果 对该网络进行分析发现,预测出60个化合物、16个靶点蛋白和15条通路与肝硬化相关。中药方剂肝复乐可能通过作用于炎症、物质代谢、肿瘤发生相关的蛋白/基因靶点及通路,起到治疗肝硬化的作用。结论 该研究初步揭示了中药剂肝复乐治疗肝硬化的活性成分及其可能的作用机制,为以后的药效物质基础和作用机制实验研究提供了理论依据。

基于GC-MS的枳壳水煎液抑制THP-1源性巨噬细胞泡沫化代谢组学研究

目的:研究枳壳水煎液(AFD)抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人单核白血病细胞(THP-1)源性巨噬细胞泡沫化的代谢组学及其可能机制。方法:THP-1细胞分为对照组,模型组,枳壳低、中、高剂量组。采用油红O染色法检测泡沫细胞的形成,用ELISA法检测细胞内甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及炎症因子水平[单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)],采用GC-MS检测各组细胞代谢组,寻找与药效相关的差异代谢物,并预测相关代谢通路。结果:AFD可抑制泡沫细胞形成,降低TG、TC及炎症因子MCP-1、IFN-γ、TNF-α表达水平(P<0.01,P<0.05)。代谢组学分析显示,L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-甲硫氨酸等7种生物标志物与细胞泡沫化关系密切,给药后显著回调(P<0.05,P<0.01)。结论:AFD可通过调节甘氨酸/丝氨酸代谢、鞘脂代谢、甲硫氨酸代谢抑制巨噬细胞泡沫化,为动脉粥样硬化的治疗提供依据。

基于HPLC指纹图谱不同产地味连质量评价及其细胞活力谱效关系研究

目的建立味连HPLC指纹图谱,研究其与细胞活力之间的谱效关系,探讨不同产地味连品质差异,明确味连寒凉之性活性成分。方法采用HPLC法建立味连的指纹图谱并评价相似度,结合聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对其共有峰进行评价;并且以味连对Hep3B细胞的细胞活力影响为药效指标,采用灰色关联度分析(GRA)和正交偏最小二乘回归分析(PLSR)相结合分析其谱效关系。结果建立了不同产地味连的HPLC指纹图谱,标定了10个共有峰,全部样品的相似度均>0.98,通过比对法归属了其中8个峰。CA结果表明,全部样品被聚为2类,与PCA结果基本一致,结合正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)发现,小檗碱、巴马汀以及格兰地新是黄连样品组间存在差异的3个标志性化合物。不同产地的味连均有不同程度抑制细胞活力的作用,谱效关联结果表明小檗碱、巴马汀以及非洲防己碱是味连醇提物抑制Hep3B细胞活力的主要活性成分。结论不同产地味连具有总体质量一致性与特定成分差异性的特征,小檗碱、巴马汀以及非洲防己碱是味连寒凉之性主要活性成分,为不同产地味连质量评价提供参考依据。

现代化学实验教学的模式创新与体系改革

化学是以实验为基础的学科,化学实验教学在高级应用型人才的培养过程中起着重要作用.结合教学改革的实践对当前化学实验存在教学体系陈旧、各门实验课之间相对独立、教学内容重复等缺陷进行改革研究,对化学实验体系进行模块化改革,整合实验内容,精选实验方案,提高实验质量.

慢性胰腺炎恶性转化的相关信号通路研究进展

胰腺癌是高度恶化的恶性肿瘤,预后极差。慢性胰腺炎是导致胰腺癌的独立危险因素,吸烟、肥胖、胰腺癌家族史等是慢性胰腺炎癌变的危险因素。慢性胰腺炎恶性转化过程中的信号调控通路一直是国内外学者研究的热点。本文就慢性胰腺炎转化为胰腺癌的过程中通路相关的病变机制研究进展进行综述。