医学科研数据管理与分析案例库建设与评价

由于传染病、不明原因疾病的流行,公共卫生领域面临着很大的挑战,医学科研数据管理与分析在公共卫生领域中担负着重要的任务。面对海量数据,如何从数据中找到疾病线索,解决公共卫生的实际问题,是当代公共卫生人才亟须解决的重要科学问题。文章以医学科研数据管理与分析案例库建设和课堂教学为实例,以现况研究、病例对照、队列研究和实验流行病学研究为线索,提炼案例库,并结合课程思政融入点,应用案例法探索应用型人才培养模式,探讨案例库课程思政建设的具体实践。

医院分离铜绿假单胞菌多药耐药与细菌生物被膜之间的关系

目的研究临床分离铜绿假单胞菌耐药现状,分析细菌多药耐药的产生与生物被膜形成之间的关系。方法采用纸片扩散法进行药敏试验,结晶紫染色法定量分析细菌生物被膜形成情况。结果共分离出铜绿假单胞菌菌株202株,对临床常用抗生素阿米卡星、美罗培南、他唑巴坦敏感性较好,其敏感率分别为83.7%、82.7%、80.7%,耐药性较高的是替卡西林、氨曲南、哌拉西林,其耐药率分别为34.7%、28.7%、27.7%,其中多药耐药菌株78株(38.6%);生物被膜形成中等阳性和强阳性者的OR值分别为13.75、16.00,多药耐药铜绿假单胞菌产生的危险性高于生物被膜形成阴性菌株。结论铜绿假单胞菌临床分离菌株多药耐药发生率较高,细菌生物被膜形成可能是细菌多药耐药产生的危险因素。

代谢酶CYP1A1、CYP2D6基因多态性与肺癌易感性的病例对照研究

目的探讨代谢酶CYP1A1基因MspⅠ位点多态性、CYP2D6*10等位基因C188T位点多态性与人群肺癌遗传易感性之间的相关性。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测86例广州市肺癌患者和86例对照的CYP1A1、CYP2D6基因多态性分布频率,分析基因多态性与肺癌遗传易感性之间的相关性。结果 CYP1A1基因CC、TC、TT在病例组的携带率分别为17.44%、38.37%、44.19%,对照组分别为12.79%、29.07%、58.14%。和TT组比较,CC和TC组OR值为1.79(OR95%CI:0.68～4.77)和1.74(OR95%CI:0.84～3.59);CYP2D6基因C188/C、C188/T、T188/T病例组的携带率分别为31.40%、38.37%和30.23%,对照组分别为44.19%、33.72%和22.09%,和T188/T组比较,C188/C、C188/T OR值为1.93(OR95%CI:0.83～4.48)、1.60(OR95%CI:0.75～3.44);CYP2D6与CYP1A1联合作用时,CYP1A1(CC+TC)型基因及CYP2D6(C188/C+C188/T)型基因者患肺癌的风险为2.75(1.06～7.20)。结论 CYP1A1、CYP2D6两种基因单独存在时未显示出与肺癌风险的联系,两种基因多态的联合作用明显提高了肺癌的危险性。

铜绿假单胞菌LasI基因反义核酸载体的构建及生物学作用研究

目的构建LasI基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasIantisense,转化入铜绿假单胞菌并分析其生物学作用。方法PCR扩增LasI基因序列,反向克隆法构建LasI基因的反义核酸原核表达载体pUCP18/lasIantisense,并转化铜绿假单胞菌。通过检测转化菌的LasB和LasR基因表达,测定外毒素的活性和绿脓菌素的表达等指标,分析pUCP18/lasIantisense的生物学作用。结果成功构建pUCP18/lasIantisense并转化铜绿假单胞菌,且有效表达,转化菌的毒力因子弹性蛋白酶、外毒素和绿脓菌素表达水平均降低。结论pUCP18/lasIantisense可以降低铜绿假单胞菌毒力因子表达,提示LasI基因可作为医院内铜绿假单胞菌感染治疗的一个新的靶点。

PNP-TK融合自杀基因系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

目的分析PNP-TK融合自杀基因系统对HepG2肝癌细胞的杀伤作用及其对肝癌细胞的杀伤机制。方法利用重组PCR定点诱变法制备PNP-TK融合基因,将其插入真核表达载体pcDNA3.0中,构建融合基因表达载体pcDNA3.0/PNP-TK,经酶切、PCR及测序鉴定重组体,G418筛选获得稳定转染了pcDNA3.0/PNP-TK的抗性细胞克隆。RT-PCR和Western Blotting检测PNP-TK基因在HepG2细胞中的表达。台盼兰排斥法测定细胞生长曲线,MTT法检测细胞对相应前药的敏感性及分别在一种和两种前药作用下所导致的旁观者效应。结果融合基因片段PNP-TK正确插入了pcDNA3.0载体中,pcDNA3.0/PNP-TK在肝癌细胞株HepG2中实现了表达。细胞抗性克隆对相应的前药十分敏感。在两种前药的联合作用下,pcDNA3.0/PNP-TK对肝癌细胞产生了良好的旁观者效应。结论具有双自杀基因功能的表达载体pcDNA3.0/PNP-TK对肝癌细胞HepG2有着良好的杀伤作用,有望将其应用于肝癌体内治疗。

香鳞毛蕨提取物对红色毛癣菌的抑制作用研究

目的:研究香鳞毛蕨醇提取物对红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶的抑制作用,初步探讨其抗真菌作用机制。方法采用 ELISA测定角鲨烯环氧化酶活性,还原糖法测定β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性。结果香鳞毛蕨提取物不同浓度组均能降低红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性,差异有统计学意义(P<0.05),随香鳞毛蕨提取物浓度增加,红色毛癣菌角鲨烯环氧化酶的活性逐渐降低,香鳞毛蕨提取物中浓度组和高浓度组能降低β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性,差异有统计学意义(P=0.002,P=0.000)。结论香鳞毛蕨提取物抗真菌作用机制可能和角鲨烯环氧化酶和β-(1,3)-D-葡聚糖合成酶活性受到抑制有关。

肺部感染铜绿假单胞菌耐药性与抗菌药物治疗效果研究

目的分析广州地区肺部感染患者分离的铜绿假单胞菌(PA)耐药性及整合子携带情况,探讨其抗菌药物治疗效果及影响因素。方法回顾性调查2008年9月—2010年12月广州市3所三级甲等医院呼吸内科确诊为PA肺部感染患者的病历资料。收集上述患者标本分离的PA菌株,检测其对常用抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应(PCR)法扩增菌株整合子片段,分析整合子的类型;分析影响PA肺部感染患者预后的可能危险因素。结果共收集PA114株,检出多重耐药菌47株(41.23%);71株(62.28%)PA检出Ⅰ类整合子。患者预后:21例(18.42%)治愈,63例(55.26%)好转,30例(26.32%)死亡。除庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、哌拉西林及哌拉西林/他唑巴坦外,Ⅰ类整合子阳性菌株对常用抗菌药物的耐药率明显高于Ⅰ类整合子阴性菌株(均P<0.05)。影响PA肺部感染患者预后的危险因素包括整合子阳性、多重耐药菌株、不适当的经验性治疗、联合使用3类或以上抗菌药物、混合感染、碳青霉烯类抗生素的使用,而联合使用2类抗菌药物是患者预后的保护因素。结论肺部感染患者分离的PA多重耐药率及Ⅰ类整合子携带率较高,整合子与耐药性关系密切,应加强监测。尽量避免使用碳青霉烯类抗生素进行经验性治疗;可联合使用2类抗菌药物进行抗感染治疗。

AF0.3启动子调控的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性肝癌细胞的特异杀伤作用

背景与目的:甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动子调控下的目的基因能在AFP阳性肝癌组织中特异性表达;嘌呤核苷磷酸化酶(Escherichiacolipurinenucleosidephosphorylase,PNP)/6-甲基嘌呤-2′-脱氧核糖核苷(6-methylpurine-2-deoxyriboside,MeP-dR)自杀基因系统具有强杀瘤效应。本研究旨在探讨AF0.3启动子调控下的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤作用。方法:构建甲胎蛋白启动子AF0.3调控下PNP基因表达载体pAF0.3/PNP,导入AFP阳性肝癌细胞HepG2和阴性的肝癌细胞株SMMC7721,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的HepG2/0.3-PNP及SMMC7721/0.3-PNP细胞。RT-PCR检测二者在细胞中的表达。台盼蓝拒染法检测细胞增殖效应,MTT法和流式细胞仪检测两株细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)检测PNP基因产物活性。结果:不论有氧还是缺氧条件,HepG2/0.3-PNP对MeP-dR均较为敏感,SMMC7721/0.3-PNP则对MeP-dR完全不敏感。在任何一种条件下,HepG2/AF0.3-PNP在混合细胞中比例达25%后,就可致明显旁观者效应;而在同样条件下,SMMC7721/0.3-PNP不导致明显的旁观者效应。HPLC结果显示,pAF0.3/PNP在HepG2细胞中可以将MeP-dR转化为6-MP,但其在SMMC7721中则不具有转化活性。结论:AF0.3启动子调控下的PNP/MeP-dR系统对AFP阳性HepG2细胞有较好的杀伤作用。

广州地铁站及车厢物体表面葡萄球菌污染特征分析

目的评估广州地铁环境金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negativeStaphylococci,CoNS)污染现状。方法采用横断面研究,选取广州市地铁7条线路的起始站、终点站及中转站,并随机抽取部分沿途独立站点,每个站点对自动售票机、滚动电梯扶手、车厢座椅、扶手、竖杆进行棉拭子采样,送回实验室进行SA、MRSA和CoNS的分离鉴定。结果 305个样品中分离出208株葡萄球菌(占68.2%),其中4株MRSA(占1.3%),20株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA,占6.5%),182株CoNS(占59.7%)。3种细菌在7条线路的检出率未见统计学差异,但是,MSSA和MRSA在各个采样点间的检出率的差异具有统计学意义,MSSA污染率较高的是拉环(13.1%)和竖杆扶手(9.8%)。MRSA污染率较高的是座椅(3.3%)和竖杆扶手(3.3%)。结论首次在地铁车厢分离出MRSA,MRSA物体表面污染率达1.3%。MSSA污染率达6.5%,CoNS污染率(59.7%)最高,所以地铁环境存在葡萄球菌传播的潜在风险。

甘草的醇沉淀物体外抗RSV有效部位的筛选

目的筛选甘草的醇沉淀物经柱层析后具有体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)感染作用的洗脱部分。方法采用水提醇沉法制出甘草的醇沉物,经大孔吸附树脂HPD722、HPD750、D101柱层析、蒸馏水洗脱出多个部位;以利巴韦林为阳性对照药物,采用MTT法检测洗脱部分与甘草酸在Hep-2细胞中的药物毒性及抗RSV效果。结果 HPD722水部位、HPD750水部位、D101水部位、甘草酸、利巴韦林对RSV感染的治疗指数(TI)依次为13.698、261.578、1.461、1.708、27.895。结论甘草醇沉物在体外对RSV具有显著的抑制作用,HPD750水部位可能是其主要的有效部位,值得进一步深入研究。

西地那非同系物逆转人乳腺癌MCF-7/ADR细胞的耐药性研究

目的肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)是肿瘤化疗失败和患者死亡的一个主要原因,研发无毒的MDR逆转剂是治愈肿瘤的一项探索性研究。文中探讨2种西地那非同系物对人乳腺癌MCF-7/ADR细胞耐药性的逆转作用。方法采用MTT法检测西地那非、西地那非同系物、多柔比星以及西地那非同系物与多柔比星联合作用对人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR和敏感株MCF-7的抑制率及IC50值;运用流式细胞术观察分别经西地那非同系物处理前后,人乳腺癌MCF-7/ADR细胞内Rhodamine 123浓度的改变情况,并分析该2种同系物对乳腺癌细胞P-gp蛋白外排功能的影响。结果 MTT结果显示10μmol/L的2种西地那非同系物对MCF-7/ADR细胞耐药性的逆转倍数分别是6.36和5.58;20μmol/L的2种西地那非同系物对MCF-7/ADR细胞耐药性的逆转倍数分别是11.83和13.47;流式细胞术结果显示经10、20μmol/L的西地那非同系物处理后的MCF-7/ADR细胞内Rhodamine 123浓度明显增强。结论一定浓度的西地那非同系物可抑制乳腺癌MCF-7/ADR细胞P-gp蛋的外排功能,并显著逆转其对多柔比星的耐药作用。

PNP/MeP-dR系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨新型嘌呤核苷磷酸化酶/6-甲基嘌呤-2′-脱氧核糖核苷(PNP/MeP-dR)自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用。方法构建PNP基因真核表达载体pcDNA3.0/PNP,脂质体介导法将其导入HepG2细胞,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的细胞株HepG2/PNP。采用台盼蓝拒染法测绘细胞生长曲线,MTT法和FCM检测细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,HPLC检测PNP酶活性。结果HepG2/PNP细胞对MeP-dR十分敏感,作用4d后MeP-dR对HepG2/PNP的IC50为4.5μmol/L,而100μmol/L的MeP-dR即可最大限度地杀死HepG2/PNP细胞。100μmol/L MeP-dR作用8d后,混合细胞中HepG2/PNP比例仅占5%即可导致所有细胞死亡。HPLC结果显示,PNP基因产物能够将MeP-dR转化为6-MP。结论PNP/MeP-dR系统对肝癌细胞的杀瘤效果明显优于传统的自杀基因系统。本研究为该系统应用于肝癌体内治疗打下基础。

铜绿假单胞菌LasR基因反义核酸原核表达载体的构建及对该菌毒力的影响

PCR扩增LasR基因,用反向克隆法构建LasR基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasRantisense并转化铜绿假单胞菌,经酶切、PCR及测序鉴定重组载体.RT-PCR检测LasB基因和LasI基因mRNA的表达,NAD法测定外毒素A的活性,紫外分光光度计测定绿脓菌素的产生水平.用转化pUCP18/lasRantisense质粒菌株感染大鼠呼吸道并进行病理组织切片检查.PCR扩增出约720bp片段,与GenBank(No:NC_002516)报道的基因片段大小一致,构建了LasR基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasRantisense,并成功转化铜绿假单胞菌,且有效表达,使转化菌的毒力因子弹性蛋白酶、外毒素A和绿脓菌素表达水平均降低.与标准株感染的大鼠比较,转化pUCP18/lasRantisense质粒菌株感染的大鼠支气管炎症明显减轻.上述结果表明,LasR基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasRantisense可以降低铜绿假单胞菌的毒力.

ESBLs与MDR铜绿假单胞菌流行现状及其关系研究

目的探索产ESBLs与MDR铜绿假单胞菌流行现状及相互关系。方法2008年7月-2009年6月对广州市某两个三级甲等医院进行为期1年的铜绿假单胞菌感染的监测，对分离出的铜绿假单胞菌采用CLSI（2009年版）推荐的纸片扩散法筛选试验和确证试验检测其超广谱JB．内酰胺酶，并按照NCCLS标准进行药物敏感试验。结果监测获得235株铜绿假单胞菌，其中产ESBLs67株（28．5％），它们对氨曲南、头孢吡肟、美罗培南、氧哌嗪青霉素、头孢他啶100％耐药。67株产ESBLs菌株共有42株为多药耐药铜绿假单胞菌（MDRPA），25株非多药耐药铜绿假单胞菌（NMDRPA）；168株非产ESBLs菌中共有51株多药耐药铜绿假单胞菌，117株非多药耐药铜绿假单胞菌。ESBLs与MDR之间的关联程度为OR=3．85（95％C12．13-6．98）。结论广州市三级甲等医院产ESBLs铜绿假单胞菌发生率及MDR发生率均具有较高水平，并且两者之间存在密切关联，产ESBLs铜绿假单胞菌发生多药耐药的风险为不产ESBLs菌株的3．85倍。

内黄县大枣生长立地条件与无公害生产管理分析

介绍沙地内黄县大枣品质及其生长的立地条件,总结其高产优质的管理技术,包括定植、整形梳理、田间管理、修剪、喷激素、枷枣、疏花保果、着色管理、采摘、晒制、清园、病虫害防治等方面内容,为内黄大枣广大消费者和无公害生产种植户提供参考.

纳入突发公共卫生事件应急处理课程完善流行病学教学体系

目的:预防医学生未来必须掌握应对突发公共卫生事件的基本知识和技能,为了教育我们的学生,我们特别设置了新发传染病、自然灾害和生物恐怖等应急处理课程。方法:抽取部分国内外重点医学院校,查看其课程设置,并结合当前新发传染病和生物恐怖应急处理的有关文献,经教研室和部分CDC工作人员的研讨,制定了相应的医学生授课规划。结果:形成以小组为基础的三小时突发公共卫生事件的现场模拟训练和两周的突发公共卫生事件课程。结论:通过论证,各参评专家一直认为本课程必将为医学生应对可能的新发传染病和生物恐怖提供最基本的应对知识和技能,此课程的设置必将推动流行病学教学体系的完善。

结核分枝杆菌对吡嗪酰胺的药物敏感性试验分析

目的研究吡嗪酰胺对结核杆菌的药物敏感性,分析结核分枝杆菌对吡嗪酰胺的耐药现况,为结核病的临床用药和防治工作提供参考。方法对复活传代成功的结核分枝杆菌进行抗酸染色后,采用绝对浓度法的间接法,选用含缓冲对的蛋黄琼脂培养基,对结核杆菌菌株进行吡嗪酰胺的药物敏感性测定。结果测定的60株结核分枝杆菌中有15株敏感,44株耐药,一株未生长。结核分枝杆菌对吡嗪酰胺敏感率为25.42%(15/59),耐药率为74.58%(44/59)。结论随着吡嗪酰胺被广泛使用治疗,结核分枝杆菌对吡嗪酰胺的耐药性不断增高,目前耐药性比较高,临床用药时必须谨慎使用或联用其他药物有效治疗。

突发状态下传染病控制课程在预防医学本科专业中设立的效果及评价

突发状态可由自然和非自然情况引起,由突发状态导致的传染病流行严重危及人们健康,突发状态下传染病的控制处理是预防医学专业学生必须掌握的知识和技能。本研究得出学生已经了解突发状态下传染病防控的意义,平均分为(15.17±3.26)分;对如何进行传染病快速评估掌握较佳,平均分为(17.54±1.85)分;对如何进行传染病监测和针对特定的传染病的防控措施有了深入的了解,平均分为(28.93±1.81)分;基本掌握了突发状态下流行性感冒的处置方法,平均分为(27.97±2.11)分。但是在模拟感染性腹泻发生现场处理中,学生对如何搭建避难场所、资料的分析与利用、媒体的沟通能力等掌握欠缺,建议在预防医学本科教学中增加相关课程。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在我国流行现状概述

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillinresistantstaphylococcusaureus，MRSA）是金黄色葡萄球菌（StaphylococcusAureus，SA）的一种耐药形式。SA主要定植在人皮肤表面，也存在于约三分一的健康人群的鼻前庭。他能引起各种感染，从轻微的皮肤感染到术后伤口感染、以及严重的肺炎和败血症等。青霉素应用以后，金葡菌感染死亡率迅速下降。

关于厅堂建筑声学设计要点和手段综述

一般来说,厅堂建筑它们的的建筑空间相对于其他建筑来说其空间都比较大,所以在设计的过程中对于建筑内部的声学设计必须要设计合理,以保证其听音质量,所以只有了解掌握厅堂建筑声学设计中的要点和手段,才能保证厅堂建筑在最终建成之后能够具有良好的听音质量。