微小RNA-122在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌诊断及预后中的意义

目的探讨血清微小RNA(microRNA,miR)-122在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(hepatitis B virus associated hepatocellular carcinoma,HBV-HCC)诊断和预后中的意义。方法以2019年3月至2020年9月在汉中市中心医院就诊的126慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者、128例HBV-HCC患者作为研究对象,以128例健康人作为健康对照组。实时荧光定量-PCR法测定血清miR-122水平,评价miR-122联合甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、维生素K缺乏/拮抗剂II诱导的蛋白质(protein induced by vitamin K absence/antagonist II,PIVKA-II)诊断HBV-HCC的临床价值及miR-122在HBV-HCC预后中的意义。结果相较于健康对照组,CHB组和HBV-HCC组丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、PIVKA-II水平显著升高(P均<0.05),且HBV-HCC组较CHB组升高更明显(P<0.05)。另外,HBV-HCC组AFP水平高于其余2组(P均<0.05)。MiR-122在健康对照组、CHB组和HBV-HCC组的相对表达水平逐渐降低(P均<0.05)。经受试者工作特征曲线分析,miR122对HBV-HCC具有较高的诊断价值,尤其是联合AFP、PIVKA-II时诊断价值最高。以miR-122中位值分层,miR-122低表达组患者中肝纤维化患者比例明显更高,并且HBV DNA水平更高(P均<0.05)。此外,存在肝纤维化的HBV-HCC患者miR122水平显著低于未存在肝纤维化的HBV-HCC患者(P<0.05)。随访期间,33例HBV-HCC患者死亡,3例失访。肝癌巴塞罗那分期B期、不完整肿瘤包膜、手术切缘>1 cm、miR-122低表达是影响HCC患者死亡的独立性因素(P均<0.05)。HCC患者中miR-122高表达组(≥0.521)总生存时间[33.3(17.5,46.8)个月]显著长于miR-122低表达组[15.0(6.5,32.4)个月](χ^(2)=49.349,P=0.001)。结论MiR-122可能参与HBV相关肝炎向HCC的进展,并可能作为HBV-HCC和预后的生物标志物。

血栓弹力图联合常规凝血指标在流行性出血热患者内源性肝素检测中的应用

目的应用血栓弹力图(thromboelastography,TEG)联合常规凝血指标(conventional coagulation tests,CCTs)检测流行性出血热(epidemic hemorrhagic fever,EHF)患者内源性肝素物质,探讨TEG联合CCTs对该类患者凝血功能异常的检测价值,为临床治疗提供指导依据。方法对35名EHF患者分别在轻/中症期、重症期和恢复期进行APTT、TT、血栓弹力图普通杯R值和血栓弹力图肝素酶杯R值检测。使用Friedman方差分析进行统计学处理。结果EHF轻症病例的R值和肝素杯R值均数为7.5和6.7,恢复期病例的TT、R值和肝素酶杯R值分别为16.9、6.2和6.1,轻症病例的普通杯R值和肝素酶杯R值,以及恢复期病例的TT、R值和肝素酶杯R值均为正态分布,其余均为非正态分布。EHF患者在不同疾病进展期APTT、TT的变化,具有统计学差异(P<0.05),同时患者的血栓弹力图R值(凝血反应时间)也显示在轻中症、重症和恢复期的差别有统计学意义(P<0.05),与轻中症期相比,重症期的APTT、TT和R值延长,说明患者凝血功能继续降低;在轻中度、重度和恢复期,EHF患者的R值减去肝素酶杯R值的差异具有统计学意义(P<0.05),重症期内源性肝素样物质的残留积累高于轻中症和恢复期。结论EHF患者在不同疾病进展期APTT、TT和R值的变化具有显著性差异,TEG联合CCTs检测显示内源性肝素样物质的蓄积是可能导致EHF患者凝血功能紊乱的重要原因之一。采用TEG与CCTs组合检测的方法可以及时发现内源性肝素样物质的累积,为临床医师采取有针对性的治疗方案提供实验室依据。

抗-CD47单抗对输血相容性检测的干扰及处理

目的 评估抗-CD47单克隆抗体对输血相容性检测的干扰,研究去干扰方法,并对受试者输注效果进行评价。方法 收集本院参与接受天境和信达公司生产的抗-CD47单克隆抗体药物治疗的8名临床试验受试者标本,使用缺乏IgG4的抗人球蛋白试剂Gamma-clone、ZZAP试剂和药物独特型中和试剂等进行血型检测、意外抗体筛查、直接抗人球蛋白试验和交叉配血试验。结果 使用抗-CD47单抗治疗后,8名受试者中有5名ABO血型检定受到干扰;所有受试者直接抗人球蛋白凝集强度呈现2+~4+,且所有受试者意外抗体筛查结果都呈3+~4+。采用缺乏IgG4的抗人球蛋白试剂Gamma-clone的试管法进行意外抗体筛查试验,结果均呈现阴性,交叉配血试验均相合。采用药物独特型中和抗体进行意外抗体筛选,试验结果显示均为阴性,交叉配血试验均相合。使用CD47单抗药物导致贫血的患者均输注2U悬浮红细胞,评价经抗干扰处理后配血相合患者的输血效果,结果显示患者输血有效。结论 受试者使用CD47单抗药物后会干扰输血相容性检测,使用缺乏IgG4的抗人球蛋白试剂和药物独特型中和抗体可去除抗-CD47干扰,受试者输血效果良好。

茵陈蒿汤对免疫小鼠ABO血型抗体产生的抑制作用研究

目的:研究茵陈蒿汤对ABO血型抗体分泌细胞的抑制作用。方法:以人A型红细胞免疫BALB/c小鼠,通过间接抗人球蛋白试验,吸收放散试验和IgG型抗-A效价的检测等观察A型红细胞免疫组和茵陈蒿汤治疗组中BALB/c小鼠体内IgG型抗-A抗体的水平变化。结果:对照组BALB/c小鼠均未捡测出IgG型抗-A抗体,免疫组BALB/c小鼠均产生IgG型抗-A抗体,茵陈蒿汤治疗组中有5只没有检测到IgG型抗-A抗体,11只BALB/c小鼠产生了IgG型抗-A抗体。间接抗人球蛋白试验,吸收放散试验和IgG型抗-A效价的检测结果显示免疫组和茵陈蒿汤治疗组IgG型抗-A水平均高于对照组(P<0.05),茵陈蒿汤治疗组抗-A水平低于免疫组(P<0.05),茵陈蒿汤治疗组抗-A效价与对照组比较无差异(P>0.05)。结论:小鼠动物试验证实茵陈蒿汤可抑制ABO血型抗体的分泌。

人RHD基因Rhesus盒的检测及其意义

为了解人RHD基因的组合情况 ,进一步研究RHD基因遗传结构和预测新生儿溶血病 ,采用PCR SSP方法 ,设计 4条引物 ,用同一PCR反应条件同时检测人RHD基因的上游、下游和杂交的Rhesus盒。结果显示 :RHD- RHD- 纯合子个体只检出杂交Rhesus盒 ,无上、下游Rhesus盒 ,RHD+ RHD- 杂合子个体能同时检出上、下游和杂交Rhesus盒 ,RHD+ RHD+ 纯合子个体只检出上、下游Rhesus盒 ,无杂交Rhesus盒。 5 0例RhD阳性样本中5例 (10 % )为RHD+ RHD- 型 ,其余 (90 % )均为RHD+ RHD+ 型。 98例无血缘关系RhD阴性汉族人样本中 ,5 4例(5 5 .1% )为RHD- RHD- 纯合子 ,36例 (36 .7% )为RHD+ RHD- 杂合子即RHD基因单体型 (可用于对RHD基因单体型进一步分析 ) ,8例 (8.2 % )为RHD+ RHD+ 纯合子。 2例弱D型样本同时检出上、下游和杂交Rhesus盒 ,为RHD+ RHD- 型。 16例Del型中 10例 (6 2 .5 % )同时检出上、下游和杂交Rhesus盒 ,为RHD+ RHD- 型 ,6例 (37.5 % )只检出上、下游Rhesus盒 ,无杂交Rhesus盒 ,为RHD+ RHD+ 型。这些样本RHD基因 10个外显子的检测结果验证了本方法的正确性。结论 :本方法所需引物少 ,操作简便 ,结果判断直观 ,适合临床应用。在RhD阴性中国汉族人中存在为数不少的RHD无效基因

TAPP与开放式腹膜前间隙腹股沟疝无张力修补术的临床效果比较

目的对比腹腔镜经腹膜前疝修补术(TAPP)与开放式腹膜前间隙腹股沟疝无张力修补术的临床应用价值。方法回顾性分析2013年3月至2015年3月汉中市中心医院普通外科收治的78例腹股沟疝(均为单侧腹股沟疝)患者的临床资料,依据治疗方法不同分为观察组和对照组,各39例。观察组行TAPP治疗,对照组行开放式腹膜前间隙腹股沟疝无张力修补术治疗。对两组患者的临床疗效进行比较分析。结果观察组手术时间短于对照组[(52±12)min比(60±15)min],排气时间晚于对照组[(16.8±1.9)h比(12.4±1.6)h],镇痛药应用比例低于对照组[17.9%(7/39)比38.5%(15/39)],差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者术后并发症、复发及慢性疼痛发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TAPP与开放式腹膜前间隙腹股沟疝修补术是安全有效的,各有优势,临床上应根据患者的病情、医疗单位条件及患者经济情况等综合因素来选择相应的手术方式,均能达到良好的治疗效果。

人RHD基因外显子多态性研究

目的研究人RHD基因外显子多态性,探讨中国人RhD阴性个体遗传学机制。方法用PCR-SSP法检测40例RhD(+)、120例RhD(-) 和2例弱D型样本的10个外显子。结果40例RhD阳性和2例弱D型样本均检出RHD 基因的10个外显子,120例RhD阴性样本中28例样本的10个外显子全存在(占23.33%),19例样本10个外显子部分存在(占15.83%),大部分为中间缺失型,73例样本10个外显子全缺失(占60.83/%)。从120例RhD阴性样本中检出的19例Del型样本均能检出RHD 基因的10个外显子。结论RhD表型阴性个体的RHD基因外显子结构具有多态性,主要表现为RHD基因全缺失、RHD基因部分缺失、RHD基因不缺失3种。

ABO血型不合异基因造血干细胞移植患者ABO血型抗体的监测

目的:监测ABO血型不合造血干细胞移植患者IgM型和IgG型ABO血型抗体的变化,研究这些变化在移植患者血型转变中的作用。方法:用凝聚胺法和微柱凝胶法监测32例移植患者ABO血型,IgM型和IgG型ABO血型抗体的变化。结果:32例ABO血型不合患者血型全部转变为供者型,造血重建时间结果分析表明血型不合对于粒系和血小板的恢复无影响;患者血型转为供者血型后,其血清中缺乏相对应的抗体;32例ABO血型不合患者中有6例供受者移植模式为A→O,其中有3例发生PRCA,且均检出IgG型抗A抗体,其余29例未检测到IgG血型抗体;3例PRCA患者红系造血恢复时间明显延长。结论:IgG型ABO血型抗体可能会抑制ABO血型不合骨髓移植患者的红系分化成熟,在PRCA的发生中可能起重要作用。监测ABO血型不合移植患者体内的ABO血型抗体变化可指导输血治疗,避免溶血性输血反应。

肠内营养与肠外营养支持对胃肠道肿瘤患者围手术期的影响研究

目的:分析肠内和肠外营养对胃肠道肿瘤患者围术期的影响。方法:选取我院胃肠道肿瘤患者122例为研究对象,依照营养支持方法不同分为EN组和PN组,EN组患者给予肠内营养,PN组患者给予肠外营养,分析营养支持效果。结果:术后患者体重、血红蛋白水平等显著下降(P<0.05),术后第7天开始逐渐恢复,两组患者指标变化无明显差异(P>0.05)。经过营养支持,生化指标明显改善,EN组各指标改善情况显著高于PN组(P<0.05),EN组首次排气时间(2.18±0.75)d、排便时间(3.26±0.85d)显著短于PN组(3.25±0.87d)、(5.26±1.26d,P均<0.05)。常见并发症为恶心呕吐、腹泻、静脉炎以及伤口感染等,EN组患者静脉炎发生率(1.6%)显著低于对照组(6.6%,P<0.05)。结论:肠内营养能够更好地改善胃肠道肿瘤患者营养状况。

人RHD基因结构研究及意义

目的 :研究RHD基因结构 ,重点检测启动子区 ,探究RHD基因的表达机制 .方法 :采用PCR SSP方法 ,设计 3对序列特异性引物 ,对 6 0例无血源关系RhD(+)汉族人样本、98例无血源关系RhD(- )汉族人样本和 2例弱D型汉族人样本RHD基因启动子区约 10 0 0bp范围内的 4个RHD基因特异性多态性位点进行检测 .结果 :RhD表型 (- ) /RHD基因型 (- )个体启动子区全缺失 ,表型RhD阴性基因型为部分缺失或不缺失型个体启动子区都不缺失 .结论 :RhD表型 (- ) /RHD基因型 (- )个体符合RhD阴性的普遍机制 ,表型RhD阴性基因型为部分缺失或不缺失型个体存在另一种RhD阴性机制 .

稀有血型与稀有血型患者的输血

稀有血型患者的输血问题是临床输血的难点和重点,解决稀有血型患者的输血问题是摆在输血工作者面前的一个重大课题。近年来,随着临床医学、免疫学和药理学等学科的飞速发展,许多新方法、新技术和新策略被广泛用于解决医学中的免疫问题。将这些新技术和新方法引入输血医学中,用于解决稀有血型患者的输血问题,不失为一种新思路而有必要进行尝试。

无淋巴结转移胃癌患者的生存状况研究

目的研究无淋巴结转移胃癌患者的生存状况,探寻影响患者生存率和生存时间的因素。方法选择2008年1月至2010年6月在我院接受根治手术切除且术后病理证实为无淋巴结转移的胃癌患者180例。统计患者的生存率和生存时间,应用Log-Rank检验及Cox模型分析影响患者生存率的因素。结果 180例无淋巴结转移胃癌患者根治术后随访时间为60-94个月,半数生存期为67个月,1年生存率78.89%,3年生存率68.33%,5年生存率57.78%。应用单因素分析筛选出影响无淋巴结转移胃癌患者术后生存状况的相关因素：年龄、病期、肿瘤大小、Borrmann分型、分化程度、TNM分期、围手术期输血、血红蛋白、血清白蛋白、术后综合治疗、浸润深度。多因素分析显示,肿瘤大小、浸润深度、分化程度、TNM分期和术后综合治疗的有无是影响结无淋巴结转移胃癌术后生存状态的重要因素。结论肿瘤大小、浸润深度、分化程度、TNM分期和术后综合治疗的有无是影响患者术后生存状况的重要因素。早诊断,早治疗,积极手术治疗,术后进行综合治疗,可提高生存率。

RHD等位基因37bp和RHC等位基因109bp插入序列检测

目的研究RHD等位基因37bp插入序列和RHC等位基因109bp插入序列是否存在多态性。方法应用PCR—SSP技术检测82例汉族RhD阳性样本，206例汉族和70例维族RhD阴性样本RHD等位基因37bp插入序列和RHC等位基因109bp插入序列。结果上述样本均检测不到RHD基因37bp插入序列，即无RHDψ假基因。82例汉族RhD阳性样本中有76例样本有RhC抗原，其中3例（3．95％）检测不到109bp插入片段；206例RhD阴性汉族样本中有75例样本有RhC抗原，其中4例（5-33％）检测不到109bp插入片段；70例RhD阴性维族样本中，无RhCC表型，3例RhCc样本均检测到109bp插入片段；其余204例Rhcc表型样本均未检测到109bp插入序列。结论中国人RHC等位基因109bp插入序列存在多态性，尚不能肯定中国人是否不存存RHDψ假基因。

汉族、藏族和维吾尔族人群RHD基因启动子区检测

目的探讨汉族、藏族和维吾尔族RHD基因启动子区多态性与RhD阴性机制相关性。方法对476例汉族(200例RhD阳性、228例RhD阴性、6例弱D和42例Del型)、57例藏族(50例RhD阳性和7例RhD阴性)和120例维吾尔族(50例RhD阳性和70例RhD阴性)标本,使用PCR-SSP方法检测RHD基因的Upstream盒、Down-stream盒和hybrid盒,使用PCR-SSP法和多重PCR法检测RHD基因启动子区-1^-1 246 bp内的4个RHD基因多态性位点。结果 348例RhD阳性标本(含6例弱D和42例Del型)、76例表型为RhD阴性但RHD基因型为RHD+/RHD-杂合子和RHD+/RHD+纯合子标本中均检测到4个RHD基因特异性多态性位点;而所有229例表型为RhD阴性基因型为RHD-/RHD-纯合子标本均未检测到RHD基因启动子区多态性位点。结论汉族、藏族和维吾尔族RHD基因启动子区多态性可能与RhD阴性机制无关;本研究所建立的RHD基因启动区4个多态性位点PCR-SSP检测方法可用于RHD基因启动区多态性位点研究。

中国汉族Rh血型基因多态性观察

为了观察中国汉族非血缘关系随机个体和家系Rh血型的基因多态性 ,采用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)扩增技术 ,扩增Rh血型C/E基因 ,D基因外显子 ,内含子 2和 10 ,插入片段以及RhBox ,检测 16 0例Rh阳性个体 ,71例Rh阴性个体及 7个先证者为Rh阴性的家系的血样品。研究结果显示 ,带有C抗原的RhD阴性个体D基因结构具有多态性 ,D基因外显子有完整的、部分缺失和完全缺失的 3种形式 ;先证者为RhD阴性的家系中 ,大部分成员均出现插入片段和RhBox ,且在遗传上符合孟德尔遗传定律 ,插入片段或RhBox并未影响D基因的表达 ;全部RhD阴性和阳性个体中没有发现“正常的”RhD外显子 4。结论 :中国人带C抗原的RhD阴性者的基因结构具有多态性 ,具有完全缺失、部分缺失和不缺失 3种情况 ,并可能存在特殊的D(nf)Ce单体型 ;本组样本不能确定插入片段和RhBox与D基因表达有关 ,插入片段和RhBox的生物学功能尚需进一步研究 ;中国汉族的Rh血型基因序列不同于白种人 ,应建立本民族的Rh基因文库。

婴儿ABO血型的鉴定及应用于临床输血

为了研究 6个月内婴儿ABO血型正确定型方法及影响因素 ,采用常规血清学法、凝胶柱法及PCR SSP 3种方法对 6个月以内的婴儿进行血型鉴定。结果表明 :在使用不同方法检测婴儿ABO血型结果不符的 33例中 ,常规血清学方法 32例红细胞定型与血清定型不符 ,1例是由细菌感染产生类B抗原所致的假相合。凝胶柱法可正确定型 2 7例 ,正确率 84 .4 %。PCR SSP法可对所有标本做出正确定型。凝胶柱法与PCR SSP法有显著性差异。结论 :对 6个月以内的婴儿进行ABO血型鉴定 ,推荐采用凝胶柱技术。凝胶柱法红细胞定型与血清定型相符的婴儿输血采用同型输注 ,但若婴儿患有感染性疾病时 ,应考虑到类B抗原引起的假相合。凝胶柱法红细胞定型与血清定型不符的婴儿输血时使用O型洗涤红细胞等成分血 ,待PCR SSP法分型结果做出后 。

患者输血前感染性指标的检测结果及其意义

目的通过对患者输血前血清乙肝表面抗原(HBsAg)、丙肝抗体(抗-HCV IgG)、艾滋病病毒抗体(抗-HIV Ab)、抗梅毒螺旋体抗体(TRUST)的检测,了解患者输血前的感染情况,预防医护人员职业暴露,判断医院内感染,避免医疗纠纷的发生。方法对4 823例患者输血前检测,HBsAg、抗-HCV IgG、抗-HIV Ab应用ROCHE e601全自动化学发光免疫分析仪检测;TRUST应用凝集法检测。结果 HBsAg、抗-HCV IgG、抗-HIVAb和TRUST阳性率依次为11.45%、0.68%、0.07%和1.06%;梅毒阳性率有逐年上升趋势;按入住科室分类,消化科的HBsAg、HCV阳性率最高;40～60岁组HBsAg、HCV阳性率最高,小于40岁和大于60岁组TRUST阳性率高。结论输血前检测感染性指标,有利于患者感染性疾病病的早期诊治、预防医护人员职业暴露,减少医院内感染,避免医疗纠纷。