恶性肿瘤染色体端粒行为异常与癌变发生的关系研究

目的 探讨恶性肿瘤染色体端粒行为异常与癌变发生的关系。方法 粒端联合采用微量全血培养法制备淋巴细胞染色体 ;端粒长度用 Southern杂交法 ;端粒酶活性用 TRAP- PCR法。结果 食管癌、鼻咽癌、肺癌染色体端粒联合率分别为 1 4.38%、35.0 7%、2 4 .40 % ,均高于对照组9.83%、2 0 .2 7%、1 5.60 % (P<0 .0 1 ) ;鼻咽癌、肺癌端粒长度变化分别为伸长 1 6.67%、1 6.67% ,缩短 76.67%、69.0 4 % ,长度无变化 6.66%、1 4.2 9% ;端粒酶活性阳性率为鼻咽癌 82 .1 4% ,肺癌 (非小细胞肺癌 NSCLC 78.3% ,小细胞肺癌 SCLC 1 0 0 % )。结论 端粒联合率的增高、端粒长度的缩短及端粒酶活性表达与细胞癌变密切相关。

鼻咽癌患者瘤组织及淋巴细胞染色体畸变特点分析

作者对100例鼻咽癌患者瘤组织及43例外周血淋巴细胞染色体畸变特点进行了分析,研究结果发现,无论在癌症组和非癌组的两种组织之间,还是两组同一组织之间,染色体数目及结构畸变率,均具有显著的差别(P<0.01)。这一特点对临床诊断及阐明发病的染色体机制都有一定的参考价值。

普通型脆性部位与食管癌易感性的相关性

自Yunis(1983)首次报告了染色体脆性部位与肿瘤细胞染色体重排相关以来,大量研究结果表明,某些肿瘤患者的脆性部位、肿瘤相关断裂点及癌基因位点这三者在人类基因组中具有定位的相关性。本文对四川盐亭县食管癌患者的一级亲属的染色体畸变率(CAR)及脆性部位进行了检测,着重对普通型脆性部位(Common fragile sites,c-fra)与食管癌易感性的相关性作了探讨。材料与方法一、研究对象 4个食管癌高发家族(即连续两代以上有两名患者的家族)的一级亲属(父母、兄弟、姐妹、子女)15例(男13例、女2例),年龄16～84岁;

食管癌高发家族成员脆性部位，SCE与DNaseI敏感区的相关研究

采用延长培养时间的低浓度对酸诱导及Ｂｒｄｕ替代２～４个细胞周期的方法及染色体原位切口移位技术，对３０例高发家族成员，２４例低发家族成员及２０例正常人进行脆性部位、ＳＣＥ及ＤＮａｓｅＩ敏感区的观察分析。结果表明：高发家族的脆性部位和ＳＣＥ检出率（６．９０％；７．５６±１．４１）明显高于低发家族（３．５０％；５．２４±０．９２）及正常人（３．２０％；４．８６±１．５１）Ｐ＜０．０５。ＳＣＥ发生在１６个高发染色体位点上，多居于染色体Ｇ显带的浅带区并与脆性部位、癌基因位点及ＤＮａｓｅＩ敏感区有一定的相关性。

鼻咽癌患者染色体端粒联合与染色体畸变关系的研究

为了探讨鼻咽癌染色体端粒联合与染色体畸变的关系，采用Ｇ显带技术，对２５例鼻咽癌患者外周血的染色体端粒联合频率进行观察，同时与染色体畸变的关系进行了分析。结果表明：鼻咽癌患者染色体端粒联合频率（３５．０７％）及染色体畸变率（１２．３３％）均显著高于对照组（２０．２７％及２．４６％），２者有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。端粒联合的位点与染色体畸变断裂点在染色体上的分布密切相关（γ＝０．８１４９，Ｐ＜０．０５），说明染色体端粒联合发生是染色体畸变形成的机理之一。

多倍体、核内复制与乳腺癌的发生

Hansemann等早在本世纪初对肿瘤细胞有丝分裂进行了详细观察,发现肿瘤细胞有丝分裂不正常,胞浆和胞核有不均等分裂和多极分裂。迄今众多学者已证实肿瘤细胞存在染色体异常(包括数目和结构),染色体数目异常是瘤细胞最重要和最易查见的特征。最常见的有非整倍体、多倍体及核内复制,本文主要对后两者与乳腺癌的发生与早期监测的意义进行了探讨。

食管瘤高发区肿瘤遗传易感性的研究

目的：探讨食管癌高发区肿瘤遗传易感性的遗传基础。方法：应用病例对照配对调查及细胞遗传学技术，对四川省盐亭县食管癌高发区患者遗传度、染色体畸变率（CAR）、脆性部位（fra）及SCE频率、染色体端粒联合率等进行检测。结果：遗传度为18．20％；CAR、fra及SCE检出率高发家族成员为11.94±5．92％、6．9％及7．56±1．41／细胞，低发家族成员为5．71±3．91％、3．5％及5．24±0．92／细胞，正常人为5．92±3．42％、3．20％及4．91±151／细胞。高发家族与低发家族、正常人比较有显著差异（CARP＜0．01，fraP＜0．05，SCEP＜0．05）。染色体端粒联合率食管癌组为14．38％、正常对照组为9．38％，两者间具有显著差异（P＜0．01）。染色体端粒联合率食管癌组为14．38％、正常对照组为9．38％，两者间具有显著差异（P＜0．01）。结论：食管癌是与遗传因素密切相关疾病，其遗传易感性的遗传基础是染色体不稳定性的增高。

实体肿瘤瘤组织染色体制作的探讨

本文用直接制作法和胶元酶处理后短期培养法,比较分析了对实体瘤瘤组织染色体制备的效果。结果发现用胶元酶处理后培养48小时后制片,获得了足够数量,分散良好的中期分裂相,作者认为实体瘤瘤组织染色体制作法的突破。对阐明肿瘤发生的染色体机制有着重要作用。

视网膜母细胞瘤患者及其父母SCE自发及MMC诱发频率的相关研究

目的 探讨RB患儿与其父母自发及MMC诱发SCE的相关性 .方法 采用微量全血培养法制备淋巴细胞染色体及姐妹染色单体分化染色 (SCD)法进行SCE分析 .结果RB患儿自发和诱发频率 (10 .81/细胞 ,2 9.35/细胞 )高于小儿对照 (7.50 /细胞 ,2 3.2 6 /细胞 ) ,P<0 .0 1;RB患儿SCE自发频率 (10 .81/细胞 )与其父母 (10 .6 2 /细胞 )无统计学意义 ,P >0 .0 5;RB患儿SCE诱发频率 (2 9.35/细胞 )高于其父母 (2 6 .2 4 /细胞 ) ,P <0 .0 1;RB患儿父母SCE自发诱发频率 (10 .6 2 /细胞 ,2 6 .2 4 /细胞 )均高于成人对照 (8.6 6 /细胞、2 2 .2 5/细胞 ) ,P<0 .0 1.结论 RB患儿SCE自发及诱发频率与其父母自发及诱发频率相关性不明显 ,P >0 .0 5,RB患儿的染色体不稳定性和潜在不稳定性可能由其父母遗传而来 .

有丝分裂紊乱与先天性畸形的发生

有丝分裂紊乱与先天性畸形的发生华西医科大学肿瘤研究所（６１００４１）周宏远，高秀坤人类染色体异常包括数目和结构异常，迄今国内外已报道有２万余种，在流产、死产及新生儿调查中，染色体异常占流产胚胎的６０％，占死产婴的８‰，占新生儿死亡者的６‰［１，２］，...

有和无甘油的聚丙烯酰胺胶在检测突变时的差别

有文献报道在非变性的聚丙烯酰胺中加入甘油可提高SSCP检测的灵敏度。我们的实验结果建议研究者在进行SSCP筛查未知突变时最好采用不加甘油的非变性的聚丙烯酰胺胶 ,这既省力省钱 ,又灵敏。在判读SSCP胶时 ,千万不要看到在双链带位置有一条比正常迁移率慢的带就判定为插入突变。此时要判定突变的性质 ,最好测序。

丹参酮诱导人宫颈癌ME180细胞的分化

人宫颈癌ＭＥ１８０细胞经丹参酮（１ｍｇ·Ｌ－１）作用后，形态趋向良性分化；生长受到明显抑制；集落形成率和［３Ｈ］ＴｄＲ参入率明显降低；染色体数目有向正常细胞转化的趋向；银染核仁形成区（ＡｇＮＯＲ）数目接近正常，并由散在型变为正常的聚合型；加药后的细胞在裸鼠体内成瘤能力降低，瘤细胞趋向良性分化；细胞ＲＮＡ斑点杂交发现，ｃ－ｍｙｃ，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因表达水平受到明显抑制．上述结果表明，丹参酮可逆转ＭＥ１８０细胞的某些恶性表型，具有诱导分化作用．

体外诱导成熟树突状细胞的研究

目的 :探讨在体外从干细胞中诱导出成熟DC的适宜环境。方法 :分别将人胎肝、骨髓和脾细胞以及小鼠骨髓和脾细胞在体外用GM CSF和TNF α诱导 ,观察了第 3、5、7天DC的收获情况。进一步用S P免疫细胞化学染色检测了mBmDC和fLDC有关分子表达。结果 :在体外通过GM CSF和TNF α的作用 ,小鼠骨髓、人胎肝、骨髓细胞呈典型的毛刺状胞浆突起 ,第5天的收获率分别为 :39 5 %、6 7 2 %、12 9% ,而基本不能从脾细胞中诱导出成熟DC ,获得的DC能与MAbCD80、MAbCD40呈强阳性反应。结论 :在GM CSF和TNF α的共同作用下 ,能在体外从人胎肝、骨髓和小鼠骨髓干细胞中获得成熟DC ,其DC能表达高水平的B7 1和CD40分子 ,这为大量获取DC提供了一种简便可行的手段 ,为研究DC的生物学特征及其抗原提呈功能提供了丰富的材料 。

肺癌组织端粒酶活性的定量研究及其临床意义

目的 研究肺癌组织中端粒酶活性的表达及其临床意义。方法 采用定量放射端粒重复序列扩增法 (TRAP)检测 74例肺组织中 ( 4 5例为NSCLC ,15例SCLC ,结核 7例 ,炎性假瘤 7例 )端粒酶的活性。结果 NSCLC端粒酶阳性率为 73 .3 % ,且活性较弱 ( 172TPG) ,SCLC端粒酶的阳性率为 93 .3 % ,且活性较强 ( 2 88TPG)。结核与炎性假瘤端粒酶活性全为阴性。SCLC端粒酶活性显著高于NSCLC(P <0 .0 5 ) ,且酶的活性水平与肺癌组织分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论 端粒酶可能是判断肺癌预后不良的指标之一。

HGPRT缺陷型Lewis肺癌细胞株的筛选及其生物学特征

目的 为细胞融合等实验提供次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (HGPRT)缺陷细胞株。方法 用 8 氮杂鸟嘌呤 ( 8 AG)对Lewis肺癌细胞株L3 8进行长期渐进式给药 ,从中克隆筛选出HGPRT缺陷细胞株 ,并观察其体内成瘤和肺转移特性。结果 经过 1年的筛选鉴定 ,获得了在 2 0mg/L 8 AG和 16 40培养液中能长期稳定生长 ,在HAT选择性培养基中不能形成克隆的AL990 1细胞株。AL990 1和L3 8的染色体众数分别为5 8和 6 2 ,在C5 7BL/ 6小鼠体内成瘤率均为 10 0 % ( 10 / 10 ) ,肺转移率分别为 30 % ( 3/ 10 )和 70 % ( 7/ 10 )。结论 HGPRT缺陷型AL990 1细胞株基本保持了L3 8细胞的生物学特征 ,可作为制备Lewis肺癌DC融合疫苗的亲本抗原细胞。

鼻咽癌患者染色体断裂热点与SCE高发位点、脆性部位、原癌基因位点的相关研究

采用在染色体标本上同时显示ＳＣＥ及Ｇ带带型的方法，对鼻咽癌患者染色体断裂热点与ＳＣＥ高发位点、染色体脆性部位及原癌基因位点之间的相关性进行了分析。结果表明：患者的ＳＣＥ频率、染色体畸变率均显著的高于对照组（Ｐ＜０．０１），患者的染色体断裂点和ＳＣＥ位点都主要分布在染色体的Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组和浅带上，且两者所累及的染色体号存在着明显的相关（ｒ＝０．９５７６，Ｐ＜０．０１），患者的１５个断裂热点与ＳＣＥ高发位点的一致率为５３．３３％，与脆性部位的一致率为８０％，与原癌基因位点的一致率为４０％

人肺癌染色体端粒联合的比较观察

目的 探讨人肺癌细胞染色体端粒联合异常的规律。方法 应用染色体制备法检测人肺腺癌细胞株A5 49细胞、15例肺癌患者外周血淋巴细胞的端粒联合率 ,并以 15例良性疾病和正常人作对照。结果 肺癌组和非癌对照组的端粒联合率存在显著差异 (P <0 .0 0 5 ) ,人肺腺癌细胞株A5 49中端粒联合率显著高于肺癌组和非癌对照组 (P <0 .0 0 5 ) ;肺癌组细胞染色体中B、C、D组的端粒联合率明显高于非癌对照组 (B组P <0 .0 5 ,C、D组P <0 .0 0 5 )。结论 与非癌对照组比较 ,人肺腺癌细胞株A5 49及肺癌患者外周血淋巴细胞染色体存在着更显著的端粒联合现象 ,且多发于染色体的B、C、D组 ,可为肺癌诊断和预后的进一步研究提供有价值的细胞遗传学资料。

体外培养人成纤维细胞转化生长因子-β_1自分泌规律的研究

目的 探讨体外培养人成纤维细胞转化生长因子 -β1 (TGF-β1 )的自分泌规律。方法 应用健康人包皮环切术所得包皮 ,通过体外成纤维细胞传代培养共 12代 ,运用 EL ISA法 ,分别检测不同代次成纤维细胞 TGF-β1 浓度 ,并测定第 6代成纤维细胞在不同时间培养上清液中 TGF-β1 的浓度。结果 自第 3代开始 ,成纤维细胞培养上清液可检测到 TGF-β1 ,并逐渐升高 ,至第 6代达分泌高峰 (45 0 ng/ L ) ,第 11、12代不能测到 ;而第 6代成纤维细胞 ,培养上清液中 TGF-β1 含量以第 5天的检测值最高 (6 80 ng/ L ) ,是第 1天检测值 (2 80 ng/ L )的 2 .5倍。结论 成纤维细胞 TGF-β1 自分泌能力 ,是由弱到强再逐渐减弱的过程 。

芳硝基物水合肼催化氢转移还原研究

采用自制廉价催化剂、水合肼为清洁还原剂研究了不同结构芳硝基物的水合肼催化氢转移还原反应,发现取代基的性质及位置对水合肼还原反应均有影响,苯环上吸电子基的存在有利于硝基还原;水合肼还原法不还原蒽醌结构中的醌式羰基。在水合肼用量接近理论量的前提下,N-甲基-4-硝基苯胺、N-甲基-N-(4'-硝基苄基)-4-甲基苯磺酰胺、4,4'-二硝基二苯砜的水合肼还原产品收率分别达到99%、97%、92%。实验中以高效液相色谱对还原反应过程进行跟踪分析,分别采用大气压离子化质谱(APCI-MS)、核磁共振谱及红外光谱对还原产物的结构进行了表征。