Tca8113细胞系耐药性的实验研究

目的 建立耐顺铂 (CDDP)人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113/CDDP ,对其耐药特性进行研究。方法 应用间歇性加药 ,逐步递增剂量 ,体外连续诱导培养方法 ,获得Tca8113耐药细胞。采用MTT法 ,琼脂糖凝胶电泳和免疫组化法对细胞倍增时间、裸鼠成瘤性、化疗药物敏感性、P gp和GST π蛋白表达进行研究。结果 初步建成耐CDDP的人舌鳞癌细胞系 (Tca8113/CDDP) ,其耐CDDP浓度为 10 μmol/L。该细胞同时对卫猛 (Vm 2 6 )、博来霉素 (BLM)、长春地辛 (VDS)、表阿霉素 (E ADM)、泰素 (Taxol)等化疗药物产生交叉耐药。连续传代 1月后 ,倍增时间从 2 9.9h降至16 .7h ,具有裸鼠成瘤性 ,瘤体倍增加速。CDDP作用Tca8113细胞后 ,电泳显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带 ,耐药细胞Tca8113/CDDP则无。P gp(P 糖蛋白 )及GST π表达量升高 ,表明MDR 1mRNA表达水平增高。结论 CDDP能致Tca8113细胞耐药性。Tca8113/CDDP细胞系具有多药耐药特性 ,GSH/GST解毒系统可能参与Tca8113/CDDP耐药性的产生。

对高职教材建设的探讨

一 近年来,随着我国教育改革的不断深入,我国高等职业教育发展迅速,进入到一个新阶段.学校的规模之大,数量之众,专业设置之广,办学条件之好和招生人数之多,都大大超过了历史上任何一个时期.然而,作为高等院校基本建设之一的教材建设,却远远滞后于高等职业教育发展的步伐,以至于许多高职院校的学生缺乏适用的教材,这势必影响高职院校的教育质量,也不利于高职教育的进一步发展.

人舌鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系的建立及其耐药基因表达

目的建立耐顺铂(cisplatin,CDDP)人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113/CDDP,探讨其与亲代细胞耐药基因表达水平的差异。方法以人舌鳞癌Tca8113细胞系为实验对象,采用间歇性加药,逐步递增剂量,体外连续诱导培养,诱导其耐药性。用MTT法测定细胞的耐药指数和IC50。RT-PCR检测MDR-1、MRP、GST-π和Bcl-2的表达状况,测其光密度比值。结果建立顺铂耐药细胞系Tca8113/CDDP,耐药指数为9.2倍。RT-PCR显示:其MDR-1、MRP、GST-π和Bcl-2的表达均升高,光密度比值MRP:Tca8113/CDDP∶Tca8113=6.667∶1.111=6倍,Bcl:Tca8113/CDDP∶Tca8113=0.912∶0.549=1.6倍,GST-π∶Tca8113/CDDP∶Tca8113=2∶1=2倍。结论耐CDDP人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113/CDDP有多种耐药基因的表达上升,提示肿瘤细胞的耐药现象受到多种基因的调节。

Cyclin D1反义寡核苷酸对Tca8113/CDDP细胞基因转录表达的影响

目的:构建细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的反义寡核苷酸真核表达载体,并检测其转染Tca8113/CDDP细胞系后的表达情况。方法:以Tca8113/CDDP细胞总RNA为模板,应用RT-PCR法扩增cyclin D1全长,通过克隆至pUCm-T载体中,测序完全正确;经IPTG诱导,可正确表达蛋白。上下游分别利用H ind III和EcoRI的酶切位点插入真核表达载体pcDNA3.1,测序鉴定;并构建表达cyclin D1反义寡核苷酸的2个重组载体,通过Lipofectam ine将其导入Tca8113/CDDP细胞系中,G418筛选获得阳性稳定表达细胞系;通过RT-PCR、免疫组化检测cyclin D1基因转录和蛋白表达。结果:成功构建pcDNA3.1-cyclin D1真核表达载体,分别命名为pcDNA3.1空载体(Co)、cyclin D1m RNA5’端为靶区的反义载体(C5’)、cyclin D1m RNA3’端为靶区的反义载体(C3’)、cyclin D1正义载体(CD1)。3’端反义寡核苷酸转染细胞后,cyclin D1m RNA表达水平降低58.8%,m RNA5’端反义寡核苷酸组无明显抑制。免疫组化结果显示,转导正义寡核苷酸组cyclin D1阳性表达为最高,转导m RNA3’端、m RNA5’端反义寡核苷酸组为弱阳性表达。结论:cyclin D1m RNA3’端反义寡核苷酸能明显抑制cyclin D1在Tca8113/CDDP中的表达,为进一步研究逆转Tca8113/CDDP耐药性提供了实验工具。

顺铂诱导Tca8113细胞凋亡及周期特异性

目的 探讨化疗药物顺铂 (CDDP)对口腔鳞癌细胞凋亡及细胞周期特异性的诱导作用。方法 选用人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113为研究对象 ,应用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞仪等方法进行观察。结果 CDDP作用Tca8113细胞后 ,细胞增殖变慢 ,增殖指数下降 ;细胞变小、变圆 ,失去贴壁性 ,从附着处脱落。DNA染色后荧光显微镜下观察 ,细胞核呈现橙红色、半月形、不规则块状等凋亡形态变化。透射电镜观察 ,细胞固缩 ,染色质浓聚边缘化 ,凋亡小体形成 ;流式细胞仪测定显示细胞周期发生明显改变 ,细胞分裂阻滞在S期。结论 CDDP能诱导Tca8113细胞凋亡 ,其作用有时间依赖性 ;

设施栽培厚皮甜瓜一年两季优质高产栽培技术

厚皮甜瓜一年两季的栽培方式提高了大棚的利用率,同时也增加了种植户的收入。本文主要从厚皮甜瓜种植地选择、品种选择、育苗、整地、移栽、田间管理、病虫害防治等方面,详细介绍新疆五家渠厚皮甜瓜一年两季栽培技术要点,以供参考。

口腔颌面部恶性肿瘤化疗药物敏感性临床分析

目的 恶性肿瘤化疗的一个最大问题是肿瘤对化疗药物的耐药性。MTT肿瘤药敏检测是一种定量比色体外药敏测定方法。本研究的目的是初步评价 MTT药敏检测结果对指导口腔肿瘤个体化化疗的临床意义。方法 应用 30例口腔颌面外科手术或活检的恶性肿瘤标本 ,进行常规 MTT药敏检测 ,同时将检测结果与临床资料进行对比性分析。检测药物共有 6种 :DDP、5 - Fu、VDS、MTX、E- ADM、PYM。结果 (1)病变部位以舌部为主 ,占30 % ,药物敏感性与肿瘤部位有关 ;(2 )检测 30例口腔颌面部恶性肿瘤组织的药敏性 ,所得结果与临床资料进行分析。8例采用传统经验用药方案进行化 ,其疗效与 MTT法检测的药敏结果一致 ;(3)大部分肿瘤对 DDP、5 - Fu有中度以上敏感性 ,但也有少部分存着抗 DDP、5 - Fu现象 ,这也是临床上采用传统经验用药方案 ,有些肿瘤化疗效果不理想的原因之一。结论 通过肿瘤药敏检测 ,找出对恶性肿瘤有效的化疗药物组成联合用药方案 ,可以做到化疗方案的个体化 。

对高等职业教育课程体系改革的思考及探索

一 随着我国的经济体制由传统的计划经济体制向社会主义市场经济体制转变,经济增长方式由粗放型向集约型转变,教育促进社会全面发展的战略地位也更加突出.作为与经济建设联系最紧密的高等职业教育,如何培养出基础扎实、知识面宽、能力强、素质高的生产第一线的技术应用、管理和服务的实用型人才,促进我国的改革开放和经济建设的发展,是我国高等职业教育急需研究的重要课题之一.……

在鼻内镜下使用单极带吸引器电凝棒对老年顽固性鼻出血患者进行治疗的效果

目的 :探讨在鼻内镜下使用单极带吸引器电凝棒对老年顽固性鼻出血患者进行治疗的效果。方法 :选取近几年某院收治的36例老年顽固性鼻出血患者作为研究对象。对所有患者均在鼻内镜下使用单极带吸引器电凝棒进行治疗,然后观察其治疗的效果及并发症的发生情况。结果 :这些患者的一次止血成功率为88.89%,其术后住院4~7天,其术后1个月内均未再次发生鼻出血的情况,未发生鼻中隔穿孔、鼻腔粘连等局部并发症和全身严重并发症。结论 :在鼻内镜下使用单极带吸引器电凝棒对老年顽固性鼻出血患者进行治疗的效果显著,其病情的复发率及并发症的发生率均较低。

试论高职院校学报的建设

学报在高职院校有着十分重要的地位与作用。然而,一些高职院校对此认识不够,以致使高职院校的学报资金不足,队伍不稳,定位不明,特色不够突出,质量不高。阐述了高职院校学报的重要意义,较为全面地分析了影响高校学报质量的因素,并提出了如何加强学报的建议。

新型城镇化进程中的文化产业转型与协调发展

城镇化是经济、文化、政治等层面上多种因素共同作用的一个复杂动态过程。文化产业是经济、文化、技术等要素相互融合的产业类型。新型城镇化建设与文化产业的发展是我国当前两大重要发展战略,二者具有相互促进相互作用的耦合关系。文化产业的发展应顺应新型城镇化的进程实现转型和升级,在与新型城镇化建设的协调发展中充分发挥"产城一体"的互动优势。

论文化创意产业的审美经济力——以故宫博物院文化创意产业为例

大审美经济时代倡导实用与审美、产品与体验的结合,在文化创意产业中充分发挥审美经济理念,将对提升文化创意产业起到重要的作用,形成一种助推产业发展的驱动力。近年来故宫博物院的文化创意产业取得了不错的经济效益和宣传效果,笔者以故宫文创为案例,结合审美经济理念,从设计研发到经营推广等方面,分析故宫博物院发展文化创意产业的模式和经验,以期对博物馆相关类型的文化创意产业起到借鉴作用。

声像档案管理存在的问题及其对策

声像档案是指具有保存价值的照片及其底片、录音、录像磁带、数码照片和录像光盘、电影拷贝及有关的文字说明。也常被称为声像资料。它是一个单位档案的重要组成部分，有强烈的时间感和空间感．依赖先进的科学技术和快速的传送手段．把在工作中有重要意义的事件以最直观的画面记录下来并予以再现．具有现时性和不可重复性。

5例神经纤维瘤病的临床表现、家系调查和基因分析

国外学者对NF-1做了大量的调查和基因连锁分析。已明确NF-1基因的位置定在17号染色体长臂或短臂近着丝点区。通过对国人5个家系25个成员的调查和采用4个基因探针作遗传基因连锁分析,结果见PUC10、41探针的Lod Scorc大于3,表明与NF-1基因有紧密连接,与国外研究结果相符,从而排除了种族差异的可能性。

提高高校学报质量的思考与对策

高校的学报在高校有十分重要的地位和作用,然而,一些高校的领导对此认识不够,给力不大,以致使学报资金不足,编辑队伍不稳,学报特色不显,学报质量不高。本文较为深入地阐述了高校学报的重要意义,较为全面地分析了影响高校学报质量的因素,并提出了提高学报质量的对策。

TGF-β_1对耐药细胞系Tca8113/CDDP增殖和凋亡影响的研究

目的 研究TGF β1对耐药细胞系Tca8113/CDDP增殖与凋亡的影响。方法 以人舌鳞状细胞癌细胞系Tca8113诱导产生的耐药细胞系Tca8113/CDDP为研究对象。应用ELISA法检测转化生长因子TGF β1在Tca8113/CDDP细胞中的表达水平。另在体外用不同浓度的TGF β1对Tca8113/CDDP细胞进行作用 ,通过吉姆萨(Giemsa)染色、MTT比色法和DNA琼脂糖凝胶电泳 ,观察Tca8113/CDDP细胞的凋亡情况。结果 ELISA检测可知Tca8113/CDDP细胞内和无血清培养液中的TGF β1的表达水平均低于Tca8113(P <0 .0 1)。体外诱导凋亡实验 ,TGF β1的浓度高于 0 .1ng/ml时 ,Tca8113/CDDP即有显著的凋亡特征出现 ,细胞皱缩脱落。Geimsa染色可见凋亡小体形成 ;MTT法显示Tca8113/CDDP细胞的凋亡与TGF β1的浓度有一定的相关性 ;DNA琼脂糖凝胶电泳有典型的梯状条带。结论 Tca8113/CDDP自身的TGF β1的表达水平与其增殖状态有关 ;外源TGF β1(0 .1ng/ml)可以显著的诱导Tca8113/CDDP凋亡。

开发电子档案管理系统应注意的问题

一、电子档案管理系统要与政府机关政务内网连为一体、同时开发 政府机关政务内网是电子档案管理的源头，因此电子档案管理是政府机关政务内网建设不可缺少的重要内容，所以，在理论或实践上将政府机关政务内网与电子档案管理隔裂开来是不科学的。政府机关政务内网所产生的电子文件要能成为电子档案，档案部门就必须将其职能延伸至政务内网中，对电子文件进行前端管理、全程管理和文档一体化管理，也就是说电子档案管理系统一定要与政府机关政务内网同时开发。

新形势下事业单位档案管理规范化探析

在我国市场经济快速发展的背景下,对于办公室的档案保护和管理工作也提出了更高的要求,不论是事业单位的稳定运转,还是在提高人才的配置上,档案的管理工作起着推动作用,这需要我们加强对档案的管理工作的重视。本文主要通过深入地分析当前新形势下我国档案管理工作中普遍存在的问题,并结合实际情况提出了建立和完善档案管理工作的关对策,希望以此为基础能够推动档案管理工作平稳发展的目标。

人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞系的建立及其生物学特性

舌癌高发于东南亚,尤其是印度。在我国,据上海市区1963～1977年恶性肿瘤死亡统计,舌癌占口腔癌肿死亡率的26.4％;上海第二医学院附属第九人民医院口腔颌面外科,1957～1976年舌癌占口腔鳞癌住院病人的37.2％。口腔癌组织体外培养的研究,国外开展较早,Hela细胞株建立后1954年就有口底癌的KB细胞株和颊粘膜癌的HEp-3细胞株的建立;

中药“益肾清火”方对骨髓基质细胞生物学活性的影响

目的采用血清药理学方法,观察中药“益肾清火”方对骨髓基质细胞(BMSCs)生物学活性的影响,探索该方在牙周炎骨修复中的作用和机理。方法选择12—15月龄SD大鼠,分为A、B、C、D、E共5组。A组为空白对照组,B组为牙周炎造模组,C组为造模后灌服中药高剂量组,D组为造模后灌服中药中剂量组、E组为造模后灌服中药低剂量组。牙周炎造模后灌胃10d,采集大鼠血清作用于体外培养的BMSCs,观察BMSCs增殖活性和碱性磷酸酶产生情况的变化。结果C组最后一次灌胃后0.5h采集的血清与A组血清作用相近,对细胞增殖作用最强,与其余各组有统计学差异(P<0.01),而B组作用最差;C组最后一次灌胃后1h采集的血清对细胞碱性磷酸酶的产生及活性影响较其余各组更强(P<0.01)。结论中药“益肾清火”方对牙周炎动物BMSCs有促增殖和诱导成骨分化的作用。