湖南省部分地区禽致病性大肠杆菌分离鉴定及生物特性分析

为探究湖南省禽致病性大肠杆菌的生物特性,从部分地区规模肉鸡场采集122份病死鸡临床肝脏样品,采用传统细菌培养方法进行分离培养和初步鉴定,利用大肠杆菌持家基因phoA进行PCR扩增,对纯化鉴定后的分离株进行血清型鉴定、种系发育群检测、多位点序列分型(MLST)、毒力基因检测、动物致病性试验及耐药性分析。结果显示:共分离出83株禽致病性大肠杆菌,鉴定出15种血清型,其中O2、O1、O78、O14为优势血清型,种系发育群分为B2、B1、A和D群,高致病性株主要来自B2、B1群;MLST分析共得到12种ST型,其中ST95、ST481、ST350为主要ST型;分离株irp2、fyuA、iutA、fimC毒力基因携带率为100%,其中38.55%菌株同时携带irp2、afa、fyuA、iutA、hlyF、iss、papC、fimC毒力基因;雏鸡致病性试验检出高致病性菌株46株(55.42%)、中等致病性菌株31株(37.35%)、低等致病性菌株6株(7.23%);分离株对10种常用抗生素有不同程度耐药,其中对四环素和新生霉素耐药最严重,耐药率分别为96.38%和92.77%。结果表明,湖南省禽致病性大肠杆菌遗传关系整体复杂多态,且致病性较高,耐药广泛,提示该地区应加强对禽大肠杆菌病的防控。

中药复方制剂对奶牛乳房炎主要病原菌体外抑菌活性及治疗效果评价

为探究中药复方制剂对奶牛乳房炎病原菌抑菌活性、临床疗效及免疫功能开展了本试验。根据中医辨证理论,将蒲公英、紫花地丁、金银花、丝瓜络等15味中草药自拟4个复方,以临床型奶牛乳房炎样品分离鉴定的金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌为受试株进行体外抑菌试验。将30头患病奶牛分成3个组,选用抑菌作用较强的复方IV进行临床治疗试验,分别为高剂量组(40mL)、中剂量组(30mL)和低剂量组(20mL),并设健康组作为阴性对照。检测乳体细胞数和乳清ALT、AST、LDH、SA及淋巴细胞刺激指数(SI)、嗜中性粒细胞吞噬力。结果表明,中药复方IV对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌的MIC值为31.25mg/mL,抑菌活性优于复方Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ;临床治疗试验显示,高、中、低三个剂量组对临床型奶牛乳房炎有效率分别为93.3%、85.7%、78.6%,治愈率分别为80%、78.6%、71.4%;治疗组给药7d后体细胞数、乳酶及白蛋白含量均极显著低于治疗前(P<0.01),其中高、中剂量组显著低于低剂量组(P<0.05);治疗后各组淋巴细胞刺激指数及嗜中性粒细胞吞噬率均极显著高于治疗前(P<0.01),而高剂量组嗜中性粒细胞吞噬率极显著高于低剂量组(P<0.01),显著高于中剂量组(P<0.05),与健康组比较无显著差异。综合表明,中药复方IV对奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌有较强的抑菌活性,临床治疗效果良好;能修复乳腺上皮细胞,降低体细胞数,提高患病奶牛免疫机能。

湖南某规模奶牛场乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

为明确湖南某规模奶牛场临床型乳房炎病原菌种类及耐药情况,对32份临床型乳房炎患牛乳样进行传统细菌培养、生化试验、16S rDNA核苷酸序列检测和药敏试验。结果共分离鉴定大肠杆菌23株,乳房链球菌12株,肺炎克雷伯氏菌5株,样品检出率分别为71.9%(23/32)、37.5%(12/32)、15.6%(5/32);药敏试验显示,大部分大肠杆菌和乳房链球菌对青霉素、阿莫西林、头孢他啶、庆大霉素、林可霉素耐药严重,耐药率达50%~86.9%,对亚胺培南、四环素及红霉素较敏感,敏感率达75%~82.6%;肺炎克雷伯氏菌对大部分抗生素耐药程度较低,对亚胺培南、阿米卡星、四环素、红霉素敏感率为100%。建议该养殖场抓好环境卫生、提高生物安全,建立科学、合理治疗方案。

禽源沙门氏菌荧光定量PCR方法的构建及应用

试验旨在建立一种快速检测禽源沙门氏菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR(qPCR)的方法,即根据沙门氏菌invA基因的保守序列设计引物,利用普通PCR方法扩增沙门氏菌invA基因保守基因片段,将其克隆到pMD18-T载体上,将获得的重组质粒pMD18-T-invA作为标准阳性模板。经qPCR条件优化后,进行特异性、灵敏性和重复性试验。结果显示,所建立的SYBR Green Ⅰ qPCR方法的Ct值与标准品在1.4~1.4×10^(10)拷贝/μL范围内呈良好的线性关系,R2为0.9963,扩增效率为95%,检测下限为1.4拷贝/μL;与大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、痢疾志贺菌、多杀性巴氏杆菌无交叉反应;该方法组内变异系数和组间变异系数均小于2.5%;对44份粪便样本和132份蛋液样本进行qPCR方法和常规PCR方法检测,结果显示该qPCR方法的阳性检出率分别为22.7%(10/44)、0.8%(1/132),常规PCR的阳性检出率分别为9.1%(4/44),0%(0/132)。结果表明:试验成功建立禽源沙门氏菌qPCR检测方法,可为禽源沙门氏菌的快速检测提供技术支撑。

奶牛乳房炎病原菌研究进展

奶牛乳房炎是危害奶牛业健康发展的最重要的疾病之一,该病可引起奶牛产奶量下降,乳汁成分改变,导致奶农收入减少。无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是当前奶牛乳房炎最主要的病原菌。文章就奶牛乳房炎在全球的流行情况、主要致病菌特征进行归纳、概述,以期为日后净化此病,制定科学、合理、有效的综合防制措施提供参考依据。

禽源大肠杆菌荧光定量PCR方法的构建及应用

为建立一种灵敏、准确且快速检测禽源大肠杆菌的方法,根据禽源大肠杆菌uidA基因的一节特异性保守序列设计引物,建立用于禽源大肠杆菌的荧光定量PCR(qPCR)检验方法,并对其各方面进行评价。试验数据表明所建立的qPCR方法的Ct值与标准品在4.69×10^(2)~4.69×10^(9 )copies/μL范围内存在优良的线性关系,线性相关系数为R2=0.993;该方法标准曲线方程为y=-3.2786x+39.032,熔解曲线表现为单峰,不存在非特异性扩增。对重组质粒标准品的最低检测浓度为4.69×10^(2) copies/μL,是普通PCR方法的1000倍。该方法检测临床样本阳性率为68.3%(41/60),普通PCR阳性检出率为23.3%(14/60),阳性检出率高出45%。此次研究建立的检测禽源大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法可用于禽源大肠杆菌的快速诊断,对于禽大肠杆菌病的监测具有重要意义。

湖南生猪屠宰加工现状与发展建议

文章通过实地考察生猪屠宰加工企业,与当地政府相关部门、生猪屠宰加工企业负责人进行座谈交流,总结屠宰加工现状、屠宰行业特点,对存在问题进行分析并提出发展建议,为加强生猪管理,加快形成布局合理、产出高效、产品安全、高质量发展新格局,为推进湖南由畜牧大省向畜牧强省转变提供参考。

2009-2022年湖南省奶牛生产性能测定成效

通过对2009-2022年湖南省奶牛生产性能测定(DHI)数据进行汇总分析,发现14年间湖南DHI参测规模不断扩大,参测牛群生产性能稳步提升,日产奶量、乳成分、体细胞数、尿素氮等生产性能指标明显改善。与2009年相比,2022年奶牛日产奶量提高了95.42%,乳脂率提高了0.22个百分点,乳蛋白率提高了0.14个百分点,干物质含量较2015年增加了0.23个百分点,奶牛群体改良成效显著。

长沙地区禽源mcr-1肠杆菌流行病学调查

为研究湖南长沙地区禽源肠杆菌中黏菌素耐药基因mcr-1的流行情况,试验以湖南长沙某生鲜市场和禽源屠宰场采集的123份禽源泄殖腔拭子和环境样本为研究对象,通过耐药菌株筛选试验、采用PCR方法鉴定mcr-1耐药基因试验和药敏试验,分析禽源粪便及周围环境中大肠杆菌mcr-1阳性细菌耐药率。结果显示:分离到119株大肠杆菌,耐药基因mcr-1检出率13.8%(17/123),并对17株耐药菌株进行药敏试验,其结果显示,耐药率分别为:林可霉素100%,阿莫西林100%,氯霉素94%,庆大环素88%,氧氟沙星76%,噻胞霉素65%,头孢吡肟29%,替加环素0%;对两种药物耐药的菌株为41.2%(n=7),对三种及以上的药物耐药菌株为35.3%(n=6)。此研究为掌握长沙地区禽源mcr-1耐药菌株的耐药情况和耐药特征奠定了研究基础。

产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的多重PCR检测方法构建

为了建立一种可同时检测禽产肠毒素大肠杆菌(ETEC)和沙门氏菌(Salmonella)的多重PCR方法,针对产肠毒素大肠杆菌致病基因Hly E、沙门氏菌特异基因inv A的基因保守区域合成两对特异性引物(目的片段为550 bp和825 bp),通过优化反应条件建立多重PCR检测方法,并反复验证分析其特异性、灵敏性和重复性,同时应用该方法对临床样本进行初步应用。结果显示:该方法可从同一样品中同时特异性扩增产肠毒素大肠杆菌Hly E基因、沙门氏菌inv A基因目的条带,对其他菌株均不能扩增出目的条带;检测沙门氏菌和产肠毒素大肠杆菌的灵敏度分别为0.078 ng/μL和0.78 ng/μL,且重复性良好。用建立的多重PCR方法对采集的59份粪便样品进行检测,分别检出产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本为13份和7份,同时携带产肠毒素大肠杆菌和沙门氏菌的样本检出7份。该方法特异性、灵敏性、重复性良好,为鉴别诊断这两种细菌所致鸡腹泻病提供了一种快速准确的检测途径。

禽源耐碳青霉烯大肠杆菌耐药基因的鉴定及其耐药性分析

为了解湖南省长沙地区禽源碳青霉烯耐药大肠杆菌携带基因blaNDM及耐药情况,试验通过PCR方法对不同来源的大肠杆菌进行耐药基因检测。结果显示,采集的152份样本中分离出84株耐碳青霉烯大肠杆菌,其中24株携带耐药基因以blaNDM-1为主。同时应用肉汤稀释法分析24株大肠杆菌对8种抗菌药物的敏感性。结果显示,24株大肠杆菌对阿莫西林的耐药率高达83.3%,对其他抗生素的耐药率分别为林可霉素70.8%、氯霉素37.5%、噻孢霉素37.5%、庆大霉素33.3%、氧氟沙星12.5%、头孢吡肟8.3%、替加环素4.2%,且50%(n=12)的菌株至少3种药物耐药,表现为多重耐药表型。试验结果为了解该地区禽源耐碳青霉烯类药物情况及临床上用药提供参考依据。

复合微生态制剂对雏鸡实验性感染鸡白痢沙门菌病的预防实验

实验用200羽伊莎B-380雏鸡，随机分为5组，在1～3组雏鸡日粮中分别添加0．5％、1．0％、1．5％HM-强效复合微生态制剂，第4组日粮中添加0．2％氟哌酸，第5组饲料中不添加任何药物作为空白对照，用鸡白痢沙门菌进行人工感染，以观其药物的保护作用。结果显示添加0．5％HM．强效复合微生态制剂有98％的保护率，添加1．0％、1．5％HM-强效复合微生态制剂和添加0．2％氟哌酸有100％的保护率，检查发现添加HM．强效复合微生态制剂组雏鸡肠道中大肠埃希菌明显减少，而乳酸杆菌和双歧杆菌有益微生物明显增多。

牛粪中高温纤维素降解菌的性能研究

对从牛粪中分离出来的高温单孢菌(Thermomonospora sp.)SQ3菌株的生物学特征进行了研究,包括菌种生化鉴定培养和产纤维素酶及其培养条件等的研究。降解纤维素结果显示SQ3在纤维素刚果红培养基上4天可见明显的分解纤维素透明圈。产酶条件研究显示:SQ3在发酵时间5天,发酵温度55℃,pH7.0～8.0,尿素氮源,玉米秸秆碳源的条件下产CMC酶性能最佳,在发酵8天时,产FPA酶达到最高峰值。

湖南省部分地区禽隐孢子虫感染情况调查

从湖南省长沙、益阳、常德 3市 6个鸡场的 43 6只鸡 ,2个鸭场的 160只鸭 ,2个鸽场的 3 2只鸽 ,1个鹌鹑场的 3 0只鹌鹑采粪样检查。结果 ,3个市的鸡和鸭均有隐孢子虫感染 ,感染率分别为 4.5 9%和 3 .75 %。其中 2 18周龄鸡的感染率为 7.14%,2 5 60周龄鸡的感染率为 1.5 1%;AA鸡、伊莎鸡和艾维茵鸡的感染率分别为 5 .5 6%、5 .2 1%和 3 .3 3 %。罗曼鸡、长沙黄鸡为阴性。鸽和鹌鹑未查到隐孢子虫。剖检 2 0只隐孢子虫阳性鸡 ,取盲肠、腔上囊、小肠前段和中段、气管粘膜涂片镜检 ,感染隐孢子虫的标本分别占所检标本数为 85 .0 0 %、40 .0 0 %、45 .0 0 %和 0。

以标准化促进畜牧产业化发展

近年来,标准化工作受到各方面的普遍关注,国家和湖南省委、省政府反复强调要加强农业标准化工作,推行标准化生产和标准化管理,将标准化工作落到实处。笔者现就加快本省畜牧业标准化工作,从实施畜牧业标准化的意义、畜牧业标准化存在问题及如何实施畜牧业标准化谈几点认识。

人畜共患住肉孢子虫病

人畜共患住肉孢子虫是一种寄生在人和动物的肌肉或肠道中的原生动物寄生虫,需要在两个不同种的宿主循环,才能完成其生活史。无性发育阶段通常发生在中间宿主完成,有性发育阶段在终末宿主完成。林氏住肉孢子虫人为其中间宿主,人住肉孢子虫人是终末宿主。本文根据文献和自己的研究成果综述了人畜共患住肉孢子虫发现史、形态生活史、发病机制、症状体征与治疗、人和动物流行病学及防治措施。

HM-强效复合微生态制剂防治断奶仔猪下痢效果的观察

用不同剂量的HM-强效复合微生态制剂和氟哌酸散剂对196头断奶仔猪分8组进行防治下痢效果的对比试验,结果显示:HM-强效复合微生态制剂对断奶仔猪拉稀有较好的治疗和预防效果,0.5g/头次HM-强效复合微生态制剂与500mg/头次氟哌酸对仔猪拉稀临床效果相当,治愈率达90%以上;预防以日粮中添加0.2%HM-强效复合微生态制剂与日粮中添加0.05%氟哌酸的效果接近,预防保护率分别为96.4%和92.9%。

HM-强效复合微生态制剂对雏鸡实验性感染鸡白痢沙门氏杆菌病的预防试验

本试验用200羽伊莎B-380雏鸡,随机分为5组,在1～3组雏鸡日粮中分别添加0.5%、1.0%、1.5%HM-强效复合微生态制剂,第4组日粮中添加0.2%氟哌酸,第五组饲料中不添加任何药物作为空白对照,用鸡白痢沙门氏杆菌进行人工感染,以观其药物的保护作用。结果显示添加0.5%HM-强效复合微生态制剂有98%的保护率,添加1.0%、1.5%HM-强效复合微生态制剂和添加0.2%氟哌酸有100%的保护率,检查发现添加HM-强效复合微生态制剂组雏鸡肠道中大肠杆菌明显减少,而乳酸杆菌和双歧杆菌有益微生物明显增多。