巢式PCR技术在输入性疟疾监测中的应用

目的评价巢式PCR技术在高疟区回国人员疟疾监测中的应用价值。方法收集2007-2009年自非洲、东南亚等疟疾流行区回国人员中疟疾现症患者及其他无症状高危人群的滤纸血,采用巢式PCR技术检测疟原虫ssRNA基因,并与血片镜检结果进行比对。结果巢式PCR检测53例血检确诊的疟疾现症患者均为阳性,两法的阳性符合率为100%,其中PCR检出恶性疟、间日疟混合感染6例,高于镜检检出的3例。检测疟疾流行区返回的高危人群157人,镜检阳性3例,阳性率1.91%;巢式PCR阳性5例,阳性率为3.18%;其中,镜检阳性、巢式PCR阴性的1例,镜检阴性、巢式PCR阳性的3例,两种方法的阳性符合率为66.7%,阴性符合率为98.1%,两法检测结果一致的血样占检测血样的97.5%。结论巢式PCR技术对输入性疟疾的监测具有实用价值。

血吸虫间接血凝试验质量控制效果评价

目的评价血吸虫病血清学检测室间质量,探讨影响实验室结果相关因素,提高检验人员的质控意识及免疫学实验室的水平和质量。方法全年组织室间质评2次,一次发放5个血清质控样,要求各实验室按规定的时间检测并汇报结果,一次现场抽取10%查病血样复查,计算符合率及Kappa值,采用鱼骨图法对血吸虫病血清流行病学调查质量控制进行评价。结果2002～2006年武汉市血吸虫病外质控血清样总符合率和Kappa值分别为82.8%、87.8%、92.6%、93.5%、91.4%和0.61、0.73、0.82、0.86、0.82;复查血清样品符合率和Kappa值分别为86.1%、91.2%、96.7%、95.5%、93.9%和0.70、0.73、0.93、0.90、0.88。结论武汉市室间质控结果有一定的可比性,血吸虫病查病质量显著提高,能反映出血吸虫病检测水平。

非洲输入性恶性疟病例裂殖子表面蛋白1等位基因型检测

目的了解输入性恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(MSP1)等位基因型特征。方法采集非洲疟疾流行区回国人员中恶性疟现症患者血样,采用巢式PCR方法,用恶性疟原虫MSP1基因特异引物扩增疟原虫虫株MSP1基因第2区与第3区部分片段,并对MSP1等位基因型进行分析。结果 135例输入性恶性疟患者中检出MSP1等位基因117例,检出率为86.7%。117例扩增阳性的患者中,MAD20、K1、RO33、MAD20+K1、MAD20+RO33、K1+RO33和MAD20+K1+RO33型的检出率分别为6.0%(7/117)、36.8%(43/117)、20.5%(24/117)、6.8%(8/117)、3.4%(4/117)、17.1%(20/117)和9.4%(11/117),其中混合型感染占36.8%(43/135),MSP1等位基因多重感染平均数(MOI)为1.46。MAD20型、K1型和RO33型恶性疟患者中重症患者比例差异无统计学意义(P>0.05);74例单一型和43例混合型感染者中重症患者比例分别为25.7%(19/74)和32.6%(14/43),2种感染者回国前在国外停留的平均天数分别为(241±176)d和(285±216)d,两者间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论非洲输入性恶性疟患者感染的疟原虫MSP1基因的3种基因型和4种混合型均存在,以K1型和RO33型为优势基因型。

PCR-RFLP检测输入性恶性疟原虫Pfcrt基因多态性

目的了解来自不同流行区输入性恶性疟原虫Pfcrt基因K76T的点突变情况,探讨恶性疟原虫Pfcrt基因多态性。方法采集2008-2012年从非洲(尼日利亚、赤道几内亚、刚果、利比里亚、安哥拉和马里)和东南业(缅甸和印度尼西亚)等疟疾流行区回国人员恶性疟现症患者血样共72份,根据恶性疟原虫Pfcrt基因序列设计巢式PCR引物,以血样中的恶性疟原虫DNA为模板,进行巢式PCR,扩增产物经限制性内切酶ApoⅠ酶切后鉴定。结果 72份输入性恶性疟现症患者血样中,71份扩增出目的条带。扩增产物酶切结果显示,突变型Pfcrt等位基因41份(57.7%,41/71),野生型Pfcrt等位基因30份(42.3%,30/71)。其中非洲6国.50份血样中,野生型和突变型各25份(50%,25/50);缅甸和印度尼西亚21份血样中,野生型5份(23.8%,5/21),突变型16份(76.2%,16/21)。结论来自不同流行区的恶性疟原虫分离株Pfcrt基因突变出现率不同。

胶体染料试纸条法诊断血吸虫病应用效果观察

目的 探讨胶体染料试纸条法 ( DDIA)诊断血吸虫病应用价值。方法 用 DDIA检测急性、慢性血吸虫病和健康人 ,观察其敏感性和特异性 ;用 DDIA、IHA和 EL ISA筛查 5个血吸虫病流行村的 677人 ,比较 3种方法的结果。结果 急性、慢性血吸虫病人 DDIA阳性率分别为 10 0 %和96.2 % ,健康人均为阴性。 DDIA、IHA和 EL ISA在 5个流行村的阳性率分别为 2 5 .8%、2 4.2 %和2 4.1% ,三者间差异无显著性。结论 DDIA具有较高的敏感性和特异性 ,操作简便快速 。

2002～2006年武汉市血吸虫病间接血凝试验质量控制效果评价

目的:通过分析血吸虫血清学室间质量评价,探讨影响实验室结果相关因素,提高检验人员的质控意识及免疫学实验室的水平和质量。方法:全年组织室间质评两次,一次发放5个血清质控样,要求各实验室按规定的时间检测并回报结果,一次现场抽取10%查病血样复查,计算符合率及Kappa值,采用鱼骨图法对血吸虫病血清流行病学调查质量控制进行评价。结果:2002～2006年武汉市血吸虫病外质控血清样和Kappa值分别为82.8%、87.8%、92.6%、93.5%、91.4%和0.61,0.73,0.82,0.86,0.82;复查血清样品符合率和Kappa值分别为86.1%、91.2%、96.7%、95.5%、93.9%和0.70,0.73,0.93,0.90,0.88。结论:全市的室间质控结果有一定的可比性,为全市血吸虫病实验室提供了技术和信息平台,对于提高实验室检测水平有一定帮助,血吸虫查病质量有了显著提高,能反映出血吸虫病检测水平。

武汉市血吸虫病流行现状及防治对策

武汉市地处长江中游,长江汉水交汇处,由于河流纵横,湖泊众多,雨量充沛,气候适宜,极为适宜钉螺孳生繁殖,是典型的湖沼型血吸虫病疫区.

1例输入性恶性疟、间日疟、卵形疟混合感染重症病例报告

患者，男，44岁，河南省信阳市新县人，农民工。于2012年10月19日赴非洲安哥拉务工，于2012年11月4日自行回国．在安哥拉期间无疟史、无其他疾病，出国前后均未进行抗疟预防性服药。11月5日开始出现不规则发热，伴寒战、呕吐和头晕等症状，11月7日至8日曾在当地乡镇卫生院以感冒病因治疗．11月9日至信阳市某医院住院治疗，未明确诊断，

金黄色葡萄球菌食物中毒分离株毒素基因的PCR分析

目的:应用PCR方法对武汉市近年来收集的19株金黄色葡萄球菌食物中毒分离株进行毒素基因检测并分析其分布情况。方法:PCR扩增经鉴定的金黄色葡萄球菌的毒素基因SA、clfA、nuc、coa、MRSA、mecA和肠毒素基因sea-seq,电泳检测扩增产物。结果:19株金黄色葡萄球菌食物中毒分离株均检出SA、clfA、nuc、coa基因,均未检测到MRSA、mecA基因,均检测到肠毒素基因,同时检出2种以上肠毒素基因的菌株占79%,检出sea基因的占58%,检出sem基因的占68%,检出sen基因的占89%,检出seq基因的占53%。结论:PCR方法可在金黄色葡萄球菌毒素基因的检测上发挥重要作用。

相关物理因素影响氯硝柳胺杀灭钉螺的试验研究

目的通过实验找出相关物理因素对氯硝柳胺杀螺效果的影响程度,有利于指导实际灭螺工作。方法将氯硝柳胺干粉剂和1%氯硝柳胺溶液分别暴晒阳光下6、12、24、48和72 h后在实验室做毒杀钉螺试验,其结果采用SPSS11.0软件处理,计算各时间组LC50,比较试验组与对照组杀螺差异。结果2个试验组随着暴晒时间的延长,其杀螺效果呈下降趋势,LC50呈上升趋势,0.125 mg/L浓度组与对照组杀螺效果比较,氯硝柳胺干粉组的48、72 h组和1%氯硝柳胺溶液组的24、48、72 h组有统计学意义,其P值均为0.044。结论阳光对氯硝柳胺的杀螺效果有较大的影响,在实际灭螺工作中应使药物与地面及钉螺尽早充分接触,以提高灭螺效果。

输入性恶性疟原虫Pf60.1基因多态性初步研究

采用PCR方法扩增武汉市2010-2013年经镜检和巢式PCR确诊的101份国外输入性恶性疟病例血样的Pf60.1基因,研究Pf60.1基因多态性。PCR结果显示,共92份血样扩增出3类基因片段,其中52份扩增出313 bp片段,占56.5%;34份扩增出340 bp片段,占37.0%;6份扩增出313 bp和340 bp混合型片段,占6.5%。83份自非洲地区输入病例血样中,46份扩增出313 bp片段,占55.4%,31份扩增出340 bp片段,占37.1%,6份扩增出混合型片段,占7.2%;9份自东南亚地区输入病例血样中,6份扩增出313bp片段,3份扩增出340bp片段。提示输入性恶性疟Pf60.1基因以313 bp基因型较多,并且可能存在多克隆感染情况。

改良奎因法检测抗菌织物效果评价

对 8 9件抗菌织物用改良奎因法进行抗菌功能检测 ,重现性好 ,重复试验数据经统计学处理P值 =1.0 0 0 0 ,差异无显著性。改良奎因法操作简单 ,便于观察 。

综合治理垸内钉螺孳生地控制血吸虫病效益分析

目的评价垸内钉螺孳生地全面综合治理控制血吸虫病的效益。方法以环境改造为主，辅以药物杀灭对垸内钉螺孳生地进行全面综合治理，对综合治理进行费用-效益分析。结果2004年春季-2006年春季，全市共施工349处，410、87万平方米；对331处，395．00万平方米垸内钉螺孳生地进行了综合治理。全市有螺面积由2004年的349．67万平方米降至49．90万平方米，居民感染率由0．85％降为0．35％；耕牛感染率由3．50％降为0．94％。项目总费用2835．86万元，治理后2年总效益8280．13万元，净效益5444．27万元，费用效益比1：2．92，净效益费用比1．92。结论垸内钉螺孳生地全面综合治理既控制了钉螺，减少了人畜发病，又促进了水利建设、农田灌溉和农业生产，有显著的经济效益和社会效益。

2006年武汉市血吸虫病监测结果

目的掌握武汉市血吸虫病流行状况及影响因素,为制定进一步的防治对策提供依据。方法以行政村为单位,采用分层整群随机抽样方法确定30个监测点。对远城区监测点6岁以上居民和家畜病情及螺情进行监测;对中心城区监测点沿江居民或沿江中小学校学生以及流动人口进行病情监测。结果全市30个监测点,共调查居民21992人,耕牛878头,调查有螺及可疑环境43处1145.13hm2。居民血吸虫感染率0.58%,较2005年下降了34.09%。耕牛粪检阳性率1.59%,较2005年下降了44.01%。垸内有螺框出现率1.18%,活螺平均密度0.0260只/0.1m2,钉螺感染率为0;垸外有螺框出现率5.92%,活螺平均密度0.0748只/0.1m2,钉螺感染率为0.71%。结论武汉市结合《全国血吸虫病综合治理重点项目》的实施,采取的综合防治措施取得了较明显的防治成效。

武汉市综合治理垸内钉螺孳生地效果及效益分析

目的对武汉市垸内综合治理控制血吸虫病流行的效果及费用效益进行分析,为决策和评价提供科学依据。方法根据不同地理特点,以环境改造为主,采用沟渠硬化、开新填旧、建鱼池等方法,辅以药物杀灭对垸内钉螺孳生地进行全面综合治理。收集治理前后螺情、人畜病情以及项目费用、疫区经济状况等相关资料,计算螺情、病情指标下降率以及单位效果费用、净效益、费用效益比,进行防治效果评价和费用-效果、费用-效益分析。结果经综合治理,全市有螺处数、有螺面积分别下降了79.93%,85.73%;垸内各流行村人群粪检阳性率下降了58.82%;耕牛粪检阳性率下降了73.14%。项目血防综合效果指数为71.50,费用效益比为1∶2.92,净效益费用比为1.92。结论垸内钉螺孳生地综合治理,有效控制了血吸虫病流行,是湖沼型垸内亚型地区控制并消灭血吸虫病的有效对策和措施。