基于个性化发展的研究生多元评价体系的实践——以哈尔滨工业大学数学学院为例

全日制专业硕士的教育层次和规模正在不断扩大,学术型硕士和专业型硕士是两类不同的研究生培养类型。文章采用调查问卷的方法,抽样调查近年来哈尔滨工业大学数学学院的部分毕业研究生个性化发展培养现状,提出了个性化的培养措施,以此明确区分两类硕士的培养目标、知识与素养、培养方式与环节、学术与实践成果这四个维度,从而进行多元评价体系的实践,更好地适应研究生个性化发展,为高校采取差异化的培养和评价提供参考。

“宣威”多结节非小细胞肺癌驱动基因突变分析

目的:探讨多结节非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的驱动基因突变情况与临床病理特征的关系,为多结节NSCLC患者治疗提供分子诊断依据。方法:本研究共纳入2018年1月至2023年10月间云南省肿瘤医院分子诊断中心检测的121例多结节NSCLC患者的253个肺结节肿瘤组织标本,以第二代测序(NGS)技术或扩增阻滞突变系统PCR(ARMS-PCR)技术检测多结节NSCLC组织中驱动基因突变情况,分析其与患者临床病理特征的关系,比较不同结节间肺癌驱动基因的突变异质性。结果:与非“宣威”NSCLC相比,“宣威”多结节NSCLC患者驱动基因突变具有显著的地域特点,表现在“宣威”患者具有较低(20%)的EGFR敏感突变(L858R、19-del)及较高(27.26%)的EGFR少见突变(主要为G719/S768I、G719);“宣威”多结节NSCLC患者的KRAS突变率(27.27%)亦显著高于非“宣威”患者突变率(12.59%)(P<0.05)。此外,“宣威”多结节NSCLC患者驱动基因突变不一致率高达69.23%,远高于非“宣威”患者驱动基因突变不一致率(55.07%)(P<0.05)。结论:“宣威”多结节NSCLC患者具有较高的EGFR少见突变及KRAS突变率,同一患者不同病灶之间存在更高的驱动基因突变异质性,本研究将为“宣威”多结节NSCLC的诊疗策略提供更多的选择。

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子包涵体提取、复性和纯化的研究

由基因工程大肠杆菌表达的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）以包涵体的形式存在于细胞中，通过破菌、洗涤获得包涵体，再经过溶解、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换柱层析得到了均一的产品，经高压液相和ＳＤＳＰＡＧＥ电泳测定纯度均大于９８％，ｒｈＧＭＣＳＦ的比活为３２×１０７ＩＵ／ｍｇ，纯化获得的ｒｈＧＭＣＳＦ为一酸性蛋白，等电点约为５２，ＮＨ２末端前２０个氨基酸序列测定结果与文献报道一致。ｒｈＧＭＣＳＦ的ＮＨ２末端不均一，其中带Ｍｅｔ的分子约占５９５％，第一个氨基酸为Ａｌａ的分子约占２４６％，为Ｐｒｏ的分子约占１４６％。纯化过程中蛋白的纯化倍数为３９，生物活性总得率为６９１％，工艺重复性好。

医学研究生科研实践中的普遍问题和对策

为了进一步加强医学研究生对科研实践的重视及提高科研基本素质,从科研意识、生物安全及实验道德等方面浅析了医学研究生在科研实践中存在的普遍问题,并提出了相应的建议和对策。

女性肺癌患者中SOX4的表达及临床意义

全球女性肺癌死亡率从1930年到1997年上升了600％，1987年首次超过乳腺癌，成为美国女性恶性肿瘤的首位死因。2220年我国女性肺癌发病率也持续增长，严重危害女性健康。因此迫切需要探讨女性肺癌发生、发展及转移的分子机制，采取有效的干预措施。

SCID小鼠宣威肺癌原位模型的构建及生物学特性研究

背景与目的宣威女性肺癌发病率居全国首位,亟待深入探讨其发病机制。本研究拟建立SCID小鼠原位宣威肺癌模型,为该病的深入研究提供实验平台。方法将宣威肺癌细胞XWLC-05分别以高低剂量接种于SCID小鼠肺原位,并与皮下移植瘤比较,观察成瘤率、成瘤特性、自发性转移及生存情况。结果原位移植高低剂量组的成瘤率分别为81%和83%,其中高剂量组接种后13天小鼠出现恶液质、对侧肺及胸腔的广泛粘连,无远处转移;低剂量组接种后25天小鼠出现恶液质及远处转移。皮下移植高低剂量组成瘤率分别为100%及94.5%,无远处转移。原位移植组组内及皮下与原位移植组组间的转移率存在统计学差异(P<0.05)。两组组内和组间的生存率比较有统计学差异(P<0.001)。结论成功建立了宣威肺癌的SCID小鼠原位动物模型,为该病的深入研究奠定了实验基础。

由大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的纯化和鉴定

由重组大肠杆菌表达的人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (rh GM- CSF)通过包涵体抽提、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换层析获得纯度达到 97%的产品 ,比活为 3.2× 10 7IU/ mg,分子量为 14.84 k D.纯化获得的 rh GM- CSF为一酸性蛋白 ,等电点约为 5.2 ,NH2 ,-末端序列测定与文献报道一致 ,NH2 -末端不均一 ,其中带 Met的分子约占 59.5% ,成熟蛋白分子约占 2 5%。蛋白的纯化倍数为 3.9,生物活性回收率为 85.3%。

人基因工程γ-干扰素发酵过程的研究

分析大肠杆菌 K802(pLY-4)生产人γ-干扰素的发酵过程后发现,采用丰富培养基(改良 LB+M9),既适合于细菌生长,又适合于γ-干扰素的表达。采用逐步升温、控制不同发酵阶段的 pH 及保持高的溶解氧浓度,可提高重组质粒的稳定性和细胞的生长速率,使γ-干扰素的表达量达4.0×10~6IU/ml,表达水平约占菌体蛋白的55%。

DC疫苗联合CIK细胞治疗非小细胞肺癌疗效观察

背景与目的探讨自体肿瘤抗原负载的树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效。 方法采集70例非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞，加入细胞因子定向诱导成CIK及DC细胞，培养的第5天用自体肿瘤抗原（Ag）负载DC细胞，第8天将DC与CIK细胞共培养，14天后将联合培养的细胞（Ag-DC—CIK）分次回输给患者，每疗程回输细胞总数为（5．10）×10^9个。治疗4周后，流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群及细胞因子水平，以评价细胞免疫功能，结合临床指标综合评价疗效，同时观察不良反应；以35例单纯的CIK细胞治疗作为对照。

国内外生物制药的现状及我国基因工程制药产业发展对策

目的 :为促进我国基因工程制药产业快速健康发展提供对策及政策建议。方法 :1997年对全国452个从事生物技术研究开发和生产的单位进行问卷调查 ,1999年又对30个已有基因工程药物或疫苗上市的企业进行跟踪问卷调查 ,并实地考察部分生物制药企业。结果 :介绍了国内外生物制药的现状及特点 ,分析了我国基因工程制药产业发展所面临的困难和存在的问题。结论 :较之国外生物制药产业规模差距很大 ,奋起直追 ,一方面需要制定合理的产业发展战略规划和政策 ;另一方面亟待规范国内医药市场。

Sox4在女性肺癌细胞上皮-间质转化中的作用及其机制

目的探讨Sox4在女性肺癌细胞上皮-间质转化(EMT)中的作用及其机制。方法 76例行肺癌根治术的女性肺癌组织标本为观察组,49例癌旁肺组织标本为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)和Western印迹法检测Sox4的表达水平;采用RNA干扰技术下调Sox4表达,利用脂质体2000向肺癌细胞系XWLC-05转染Sox4-si RNA,同时以未转染XWLC-05为对照,采用q PCR和Western印迹方法检测两组Sox4表达水平及内镜下黏膜切除术(EMR)上皮标记β-catenin、E-cadherin,间质标记Fibronectin、vimentin、N-cadherin的表达情况,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氯唑溴盐(MTT)、Transwell及细胞划痕实验检测转染组与未转染组细胞增殖、侵袭、迁移能力。结果观察组Sox4 m RNA水平及蛋白水平表达均明显高于对照组(P<0.05);转染组Sox4 m RNA水平及蛋白水平表达均明显低于未转染组(P<0.05);q PCR结果显示,转染组β-catenin、E-cadherin水平明显高于未转染组(P<0.05),转染组Fibronectin、vimentin、N-cadherin水平明显低于未转染组(P<0.05),Western印迹结果与q PCR检测结果相一致;MTT实验结果显示,转染Sox4-si RNA细胞后,XWLC-05细胞增殖能力与未转染组无明显差异(P>0.05),Transwell实验结果显示,转染Sox4-si RNA细胞后,XWLC-05细胞侵袭、迁移能力较未转染组明显降低。结论 Sox4可能是通过下调β-catenin、E-cadherin表达及上调Fibronectin、vimentin、N-cadherin表达促进EMT发生,诱导人肺癌细胞发生侵袭转移。

CD_3^+ CD_(56)^+ NKT细胞在中晚期胃癌治疗中的临床疗效观察

目的:评估CD3+CD56+NK T细胞治疗73例中晚期胃癌的疗效及不良反应。方法:血细胞分离机采集患者外周血单个核细胞,加入细胞因子rhINF-γ、rhIL-2、rhIL-1及CD3McAb培养,10 d后定向诱导成CD3+CD56+NKT细胞,分次回输给患者,每疗程回输细胞总数为(5~10)×109个。治疗4 w后,用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群状态及细胞因子水平,以评价细胞免疫功能,结合临床指标综合评价疗效,同时观察不良反应。结果:在73例接受治疗的患者中,部分缓解(PR)+微效(MR)为37例(50.68%),稳定(SD)21例(28.76%),进展(PD)15例(20.54%);CD3、CD4、CD8T细胞的百分比在治疗后均较治疗前显著增高(P<0.05),且72.60%(53例)的患者CD4/CD8比例调整至正常;80.82%(59例)的患者治疗后Th1类细胞因子分泌增加,61.64%(45例)的患者Th1/Th2细胞因子比例恢复平衡;治疗后42例食欲增加,51例体力及睡眠改善,23例体重回升大于治疗前体重的5%;输注后的副反应包括寒颤、发热、呕吐、兴奋失眠、皮疹、疲乏,经对症处理后短时缓解,无1例出现毛细血管渗漏综合征(SCLS)及实质脏器的损害。结论:过继性CD3+CD56+NKT细胞输注治疗能显著调整中晚期胃癌患者的免疫功能,改善临床症状,是一种安全、有效的辅助治疗手段。

DC疫苗联合CIK细胞治疗非小细胞肺癌疗效观察

目的探讨自体肿瘤抗原负载的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效.方法采集70例非小细胞肺癌患者外周血单个核细胞,加入细胞因子定向诱导成CIK及DC,培养的第5天用自体肿瘤抗原(Ag)负载DC,第8天将DC与CIK细胞共培养,14d后将联合培养的细胞(Ag-DC-CIK)分次回输给患者.治疗4周后,流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群及细胞因子水平,以评价细胞免疫功能,结合临床指标综合评价疗效,同时观察不良反应;以35例单纯的CIK细胞治疗作为对照.结果(1)培养的第14天,Ag-DC-CIK细胞的增殖达(20.6±2.16)倍,对照组仅为(12.2±2.65)倍(P<0.05);CD3+CD8+细胞及CD3+CD56+细胞的表达也明显高于对照组(P<0.05);(2)70例接受治疗的患者中CD3、CD4、CD8T细胞的百分比均较治疗前有不同程度的提高,Ag-DC-CIK组57.14%(20例)的患者CD4/CD8比例调节至正常,与对照组(42.85%,15例)相比差异有统计学意义(P<0.05);(3)Ag-DC-CIK治疗后51.42%(18例)的患者Thl/Th2细胞因子比例恢复正常,而对照组恢复正常者仅占37.14%(13例)(P<0.05);(4)Ag-DC-CIK治疗组中Ⅱ、Ⅲ期患者的有效率分别为39.30%和28.60%,与对照组的相应期别(Ⅱ期26.90%,Ⅲ期22.20%)相比差异有统计学意义(P<0.05);(5)治疗后的副反应包括寒颤、发热及兴奋失眠,无1例出现毛细血管渗漏综合征及实质脏器的损害.结论肿瘤抗原负载的DC细胞可增强CIK细胞在非小细胞肺癌治疗中的临床疗效,有推广运用的价值.

网络环境下高校图书馆文献信息资源的共建与共享

从当前网络环境的发展现状,对高校图书馆文献信息资源共建共享理念意义进行了分析,提出了文献信息资源共建共享存在的主要问题及网络环境下高校图书馆文献信息资源共建共享的新思路。

sox4基因与肺癌关系的研究进展

肺癌发病率及病死率居恶性肿瘤首位,严重威胁着人类的健康,但目前仍存在早期诊断率低、治疗效果差及预后不良等问题,开发新的肺癌标志物及治疗位点成为迫切的需要。近年的研究显示,sox4基因在各类型肺癌中均呈异常的高表达,与肿瘤的生物学行为密切相关,因此深入研究该基因与肺癌的关系对肺癌的早期诊断、预后判断和治疗具有重要意义。

LNG低温储罐绝热性能的探究

探讨LNG低温储罐的绝热性能,详细分析影响LNG低温储罐自然漏热量的各种因素,并给出计算方法,为LNG储罐的绝热保冷系统设计提供依据。

地塞米松脑内缓释对脑水肿和一氧化氮合酶的影响

目的探讨地塞米松(Dex)脑内缓释给药对实验性脑水肿和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法采用液氮冷冻雄性SD大鼠制备脑水肿模型,测量大剂量Dex脑内缓释给药、腹腔给药及不给药的各组脑组织含水量和NOS活性变化。结果Dex脑内缓释给药、腹腔注射和不给药组脑组织含水量分别为80.93%±2.27%、81.29%±2.22%和85.54%±2.69%,NOS活性则分别为(11.50±2.41)U/m l、(12.55±2.66)U/ml和(15.84±3.74)U/ml。两种给药方法之间无显著性差异,但与不给药组比较,均有显著性差异。结论Dex脑内缓释给药对脑水肿的疗效与大剂量腹腔注射类似,其机制可能与降低脑内NOS活性有关。

脐带血单个核细胞体外诱导成CIK细胞及其抗肿瘤效应的实验研究

目的:探索建立CIK细胞的原代培养方 法并阐明其生物学特性,为该细胞在肿瘤生物过 继免疫治疗中的运用奠定基础。方法:通过加入 4种细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1及OKT3)将脐带 血单个核细胞(CBMNCs)诱导成CIK细胞;利用 流式细胞仪测定细胞表型、细胞增殖情况及细胞 周期的分布;利用改良的MTT法测定效应细胞 的体外细胞毒活性。结果:四种细胞因子的联合 运用,可诱导出大量的CIK细胞,其相对百分率 增长了163倍(从0.14%到22%),增殖高峰位 于第10～12天,针对K562、Hela和YTMLC肿瘤 细胞株,CIK细胞在效靶比为64∶1时的杀伤活 性分别为78.57±3.48、77.7±1.90和81.2± 1.51,在32∶1时分别为62.00±2.31、60.83± 2.80和64.07±2.87,在16∶1时分别为51.43± 2.51、52.87±2.91和54.10±3.11,均显著高于 LAK细胞及CBMNCs,P=0.001;而在效靶比为 8∶1(25.10±2.66、21.4±1.55和28.77±3.56) 及4∶1(17.10±2.10、11.93±1.86和9.49±2.92) 时与后两者差异无统计学意义,P=0.083。结 论:1)脐带血可作为诱导CIK细胞的重要来源 2)联合运用细胞因子能诱导出大量的CIK细胞 其增殖高峰位于培养的第12天,适宜在此期进 行临床运用;3)

微创手术治疗皮质运动区中小量脑出血的效果

目的探讨微创颅内血肿清除术治疗皮质运动区中小量脑出血的临床效果。方法对皮质运动区中小量脑出血的患者进行随机分组,分别采取常规药物治疗和显微镜下小骨窗微创开颅手术治疗。两组分别在治疗前以及治疗后第3天、10天、1个月、3个月随访并进行肌力评估。结果两组治疗前肌力无统计学差异,治疗后第3天、10天、1个月和3个月,两组之间肌力比较差异有统计学意义。药物治疗后第3天的肌力与治疗前比较,无统计学差异(P>0.05),而手术组差异有统计学意义(P<0.05)。治疗10天以后,两组分别与同组治疗前肌力比较,差异具有统计学意义。结论采取微创开颅手术治疗皮质运动区中小量脑出血能促进肌力的恢复,降低了致残率,改善患者的预后,有效地提高了临床治疗效果。

兔骨髓间充质干细胞分离培养及体外诱导分化为成骨细胞

【目的】建立兔骨髓间充质干细胞（MSCs）的分离、纯化及鉴定方法，观察体外成骨潜能。【方法】应用密度梯度离心联合贴壁筛选的方法，体外分离培养兔骨髓来源的M SCs ，培养过程中倒置显微镜下观察其生物学特性，流式细胞仪检测细胞表型，所得的细胞进行成骨诱导分化后进行碱性磷酸酶（alkaline phos‐phatase ，ALP）染色及茜素红染色鉴定，并对成骨分化指标进行检测。【结果】原代分离培养的贴壁细胞呈长梭形，漩涡状排列。传代后增殖迅速，细胞为单一的梭形，排列更加有序。培养的细胞CD44呈阳性表达，而CD34呈阴性表达。成骨诱导后ALP染色和茜素红染色均呈阳性。诱导组成骨分化后成骨标志物含量较对照组明显要高。【结论】密度梯度离心结合贴壁的方法可以获得高纯度MSCs ，增殖旺盛，体外具有成骨潜能。