低磷胁迫对‘浙粳22’等8个晚粳稻品种苗期性状和养分吸收的影响

以浙江省晚粳稻主栽品种‘浙粳22’、‘浙粳27’、‘秀水110’、‘秀水09’、‘秀水128’、‘秀水63’、‘嘉991’和‘嘉花1号’为材料,研究了低磷胁迫(0.5 mg/L)下根系和秧苗生长情况。结果表明,不同品种的根长、干物质重、氮、磷、钾养分吸收、根系磷素吸收动力学参数Imax(最大吸收速率)、Km(吸收速率=1/2 Imax时介质中离子的浓度)和Cmin(根系净吸收速率为零时介质中离子的浓度)均存在显著差异,‘浙粳22’、‘浙粳27’、‘秀水110’、‘秀水09’和‘秀水63’低磷胁迫时Km和Cmin较小,Imax较大,对磷的亲和力和利用效率较高,具有一定的耐低磷特性;相反,‘嘉花1号’、‘嘉991’和‘秀水128’的Km和Cmin较大,Imax较小,对磷的亲和力较低,对低磷胁迫表现较为敏感。

肿瘤局部湿热治疗乳腺癌实验动物模型的建立及意义

目的:探讨局部湿热治疗对肿瘤生长的影响及意义。方法:建立Balb/c乳腺癌4T1实验动物模型,并以不同温度和作用时间对肿瘤进行局部湿热处理。结果:结果发现43℃作用35min,每周1次,局部湿热治疗可有效控制肿瘤生长,减少肺转移的发生。结论:局部湿热治疗可以有效抑制肿瘤生长,具有潜在的临床推广应用价值。

Inverse-Heusler合金Ti_2Co_(1-x)Ni_xGa的磁性和半金属性

利用第一性原理计算了Inverse-Heusler合金Ti_2Co_(1-x)Ni_xGa的半金属性、磁性和电子性质.计算结果表明Ti_2Co_(1-x)Ni_xGa的原胞总磁矩和晶格常数随着x的增加而增加.由于过渡金属原子之间的直接杂化和sp电子的调节,原胞总磁矩和晶格常数随掺杂浓度x的改变而改变,并与Slater Pauling规则形成一定的差异.当Ni的掺杂浓度x=0.5时,Ti_2Co_(1-x)Ni_xGa合金的费米面在自旋向下带隙的中间位置,因而可以判定Ti2Co0.5Ni0.5Ga将具有最佳的半金属稳定性.

局部湿热联合微波消融对乳腺癌荷瘤小鼠CD4^+ CD25^+调节性T淋巴细胞比例和功能的影响

目的探讨局部湿热联合微波消融对乳腺癌荷瘤小鼠脾细胞中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)比例和功能的影响。方法小鼠随机分为荷瘤组、局部湿热/微波消融处理组和局部湿热联合微波消融处理组共4组,每组12只。先建立小鼠乳腺癌实验动物模型,分别进行局部湿热、微波消融或局部湿热联合微波消融处理。用FACS检测脾细胞中Tregs的比例变化;real-time PCR检测Foxp3 mRNA水平;FACS检测CTLA-4和GITR的表达;ELISA法检测TGF-β和IL-10的含量;增殖抑制实验观察CD4+CD25-T细胞体外增殖。结果与单一局部湿热处理组和微波消融处理组相比,Tregs在局部湿热联合微波消融处理组中的比例显著降低(P<0.05)。并且,Tregs细胞的Foxp3、CTLA-4和GITR的表达也明显降低(P<0.05),同时TGF-β和IL-10的分泌及抑制功能也显著削弱(P<0.05)。结论湿热联合微波消融可以较单一治疗方法更有效的抑制肿瘤生长,这与其降低CD4+CD25+调节性T细胞的比例和功能密切相关。

医学物理学教学改革探讨

医学物理学是现代医学理论和技术快速发展的重要基础,其教学改革推动了高等医学教育改革的发展。该研究结合相应的实践活动对其教学目标、模式、手段及内容的改革进行了初步的探讨,以期为高等医学教育改革的顺利进行提供帮助。

局部湿热联合微波消融对小鼠乳腺癌动物模型中T淋巴细胞的比例和功能的影响

目的:研究局部湿热联合微波消融对乳腺癌荷瘤小鼠脾细胞中T淋巴细胞的比例和功能的影响,并探讨其意义。方法:建立小鼠乳腺癌实验动物模型;用FACS检测局部湿热联合微波消融处理后荷瘤小鼠脾细胞中T细胞及其CD4亚群和CD8亚群的比例变化;体外增殖实验观察脾细胞中T淋巴细胞增殖功能;FACS检测T淋巴细胞IFN-γ的表达水平。结果:局部湿热联合微波消融处理组荷瘤小鼠脾细胞中T淋巴细胞的比例明显增高(P<0.05),其中CD4+T细胞比例变化最显著,并且T淋巴细胞的增殖能力和IFN-γ的表达也明显增加(P<0.05)。结论:局部湿热联合微波消融术可以较单一热疗方法更有效的抑制肿瘤生长。

局部湿热对小鼠乳腺癌组织中miRNA-7和miRNA-126表达的影响

目的:观察局部湿热对乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤局部miRNA-7和miRNA-126表达的影响,并探讨其意义。方法:建立小鼠乳腺癌实验动物模型,进行局部湿热处理。28 d后,用Real-time PCR探针法分别检测肿瘤局部miRNA-7和miRNA-126的表达变化;同时用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡变化。结果:与对照组相比,局部湿热处理组中肿瘤组织miRNA-7和miRNA-126的表达均显著上调(P<0.05)。同时,肿瘤局部细胞凋亡率也明显增加(P<0.05)。结论:湿热治疗可改变肿瘤局部中特定miRNAs分子的表达,这可能是其导致肿瘤细胞凋亡的重要原因。

一个水稻黄绿叶突变性状的遗传分析及基因定位

通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变晚粳稻品种秀水09,获得了1个稳定遗传的全生育期黄绿叶突变体Ygl,遗传分析表明该突变性状由1对隐性核基因控制。利用突变体与籼稻品种珍汕97杂交,构建F2群体对突变基因进行定位,发现目的基因与第11号染色体上的SSR标记RM2459连锁,在该标记附近发展了14对InDel标记,将突变基因定位在约82kb区间内。通过在线最新水稻注释系统的基因功能预测分析,寻找候选基因,经测序发现突变体发生单碱基突变。

miRNA-126基因敲减小鼠肠系膜淋巴结T淋巴细胞比例的变化

目的:研究miRNA-126基因敲减小鼠肠系膜淋巴结T及B淋巴细胞数量的变化。方法:检测miRNA-126基因敲减(KD)小鼠肠系膜淋巴结的体积、重量和淋巴结细胞总数;HE染色检测小鼠肠系膜淋巴结的病理形态学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中T及B淋巴细胞数量的变化。结果:与野生型(WT)小鼠相比,miR-126KD小鼠肠系膜淋巴结体积、重量和淋巴结细胞总数均显著增加(P<0.05),且病理形态学发生异常;肠系膜淋巴结中B淋巴细胞比例和数量无变化(P>0.05),CD4+T细胞数量无变化,而CD4+T细胞百分数明显减少(P<0.05),CD8+T细胞百分数和绝对数量均显著增加(P<0.05)。结论:miRNA-126敲减后可显著影响肠系膜淋巴结中T淋巴细胞的数量,提示miRNA-126可能影响肠系膜淋巴结的免疫功能。

miR-126敲减增强小鼠CD4^+T细胞体内活性并促进其向Th1细胞分化

目的观察miR-126基因敲减(KD)小鼠体内CD4+T细胞活性的变化并探讨其意义。方法利用磁珠活化细胞分选技术(MACS)分选miR-126KD小鼠脾脏CD4+CD62L+T细胞,实时定量PCR检测细胞内miR-126成熟体的表达水平;荧光激活细胞分选术(FACS)检测CD4+T细胞表面活化标志CD69、CD62L和CD44分子以及Ki-67的表达变化;膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ/PI)双染色法结合流式细胞术检测CD4+T细胞的凋亡情况;实时定量PCR检测CD4+T细胞功能相关细胞因子白细胞介素4(IL-4)、IL-10、IL-12、转化生长因子β(TGF-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的mRNA水平变化。结果与野生型(WT)小鼠组相比,miR-126KD小鼠组CD4+T细胞内miR-126成熟体的表达显著下调;FACS结果显示miR-126KD小鼠CD4+T细胞表达CD62L的比例明显减少,而表达CD69、CD44以及Ki-67细胞的比例显著增加,CD4+T细胞的体内凋亡比例显著减少;CD4+T细胞中IL-4、IL-10的mRNA水平明显降低,而IL-12、TGF-β、TNF-α以及IFN-γ的mRNA水平显著增加。结论 miR-126KD小鼠体内CD4+T细胞的活性显著增强并促进其向Th1细胞分化。

microRNA-7敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响

目的:观察microRNA-7(miR-7)敲减对内毒素诱导小鼠急性肺损伤的影响并探讨其意义。方法:利用脂多糖(LPS)腹腔注射(10 mg/kg体重)野生型(Wild type,WT)小鼠和miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠建立急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)模型;HE染色观察肺组织病理学变化;计算肺泡灌洗液(BAL)中的细胞总数;Real-time PCR检测肺组织炎症相关因子表达变化;流式细胞术(FACS)进一步检测BAL中固有免疫细胞γδT细胞、F4/80巨噬细胞(Macrophages,Mφ)和适应性免疫细胞CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例和绝对数变化;FACS检测CD4^+T细胞活化相关分子CD62L和CD69的表达水平。结果:相对野生型(Wild type,WT)小鼠,HE染色显示miR-7KD小鼠的肺组织小血管充血和炎性细胞浸润明显减少,病理性损伤明显减轻;Real-time PCR结果显示促炎性细胞因子IL-6的表达水平显著降低(P<0.01),而抗炎性细胞因子IL-4、TGF-β的表达水平明显增加(P<0.05);同时,BAL中总细胞数显著减少(P<0.05);FACS检测进一步显示miR-7KD小鼠的BAL中F4/80^+Mφ细胞的比例及绝对数均明显下调(P<0.05),而γδT细胞的比例上调(P<0.05),但其细胞绝对数无差异(P>0.05);BAL中CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例及其绝对数均显著降低(P<0.05);最后CD4^+T细胞活化膜分子CD62L的表达水平明显上调(P<0.05),而CD69的表达水平显著下调(P<0.05)。结论:miR-7敲减可减轻ALI模型小鼠的肺部损伤,提示其可能在ALI发生中发挥了重要调控作用。

水稻矮秆突变体Zj88d的鉴定与基因定位

用甲基磺酸乙酯诱变处理常规粳稻浙粳88,获得了矮秆水稻突变体Zj88d,多代自交稳定遗传。遗传分析表明突变体Zj88d的矮秆性状受一对隐性核基因控制。采用图位克隆方法,将目的基因定位在水稻第7染色体短臂末端7-44w和RM5344间的603kb区间。排查该区间包含的100个候选基因,发现已克隆的矮秆基因OSH15也位于其中。测序结果显示,突变体Zj88d中的OSH15基因在第2内含子最末位发生"g→a"单碱基突变。

microRNA-7对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞组成的影响

目的:研究miR-7(MicroRNA-7,miRNA-7)对小鼠肠系膜淋巴结αβT淋巴细胞比例的影响并初步探讨其意义。方法:利用miR-7基因敲减(Knockdown,KD)小鼠模型,观察其肠系膜淋巴结大小、重量和淋巴结细胞总数,以及HE染色的病理学变化;流式细胞术(FACS)检测淋巴结中αβT淋巴细胞亚群(CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞)以及CD4+T细胞和CD8+T细胞的活化相关分子CD69、CD62L和功能相关因子IFN-γ表达的情况。结果:与野生型(Wild type,WT)小鼠相比,miR-7KD小鼠肠系膜淋巴结大小、重量指数和淋巴结细胞总数均显著增高(P<0.05),且HE染色显示MLNs有病理性改变;肠系膜淋巴结中αβCD3+T细胞比例增加显著,其中以CD4+T细胞比例变化最为明显(P<0.05),而CD19+B淋巴细胞比例明显下调(P<0.05),但各亚群细胞总数均明显增加(P<0.05);最后,CD4+T细胞和CD8+T细胞中的CD62L+细胞的比例均显著下调(P<0.05),而CD69+细胞和IFN-γ+细胞比例均显著上调(P<0.05)。结论:miR-7敲减后可显著影响肠系膜淋巴结中αβT淋巴细胞的组成比例,提示其对肠系膜淋巴结中淋巴细胞的组成和功能具有重要的调控作用。

水稻鸟嘴状颖壳突变体bsg1的稻米品质特性研究

为评价花器官突变对稻米品质的影响,以浙粳22辐射诱变产生的鸟嘴状颖壳bsg1突变体为材料,研究了花器官的变化对稻米的外观品质、碾磨品质、营养品质和蒸煮食味品质的影响。结果表明,与野生型浙粳22相比,bsg1突变体的花器官主要在内外稃的形状上发生变化:内外稃均变直,尤其是内稃;内外稃上的表皮毛变短,籽粒变小,垩白粒率和垩白度极显著下降,糙米率、精米率和直链淀粉含量显著降低,胶稠度极显著提高,但整精米率、蛋白质含量没有变化,口感较软。表明bsg1突变体花器官内外稃的变化对稻米品质有所改善。本研究为通过辐照诱变进行水稻的品质育种奠定了基础。

浙粳22等晚粳稻品种对^(60)Co-γ射线的辐照敏感性研究

对浙粳22等晚粳稻品种干种子进行了60Co-γ射线400G的辐照处理,发芽率比较结果显示,不同晚粳稻品种间的辐照敏感性存在着一定程度的差异。浙粳22、浙粳27和秀水110对60Co-γ射线较敏感,而浙粳30、嘉991和秀水63对60Co-γ射线的敏感性相对较弱。

3个水稻叶色突变体的遗传分析及基因定位

利用甲基磺酸乙酯对常规粳稻‘秀水09’进行诱变处理,获得了3个黄叶突变体Yl-1,Yl-2和Yl-3,多代自交稳定遗传。突变体与野生型‘秀水09’相比,分蘖减少、植株变矮、苗期叶片表现明显的黄色,随着生长发育的进行,叶片逐渐返绿。遗传分析表明这3个突变体的黄叶性状均受1对隐性核基因控制。利用SSR分子标记,将突变基因Yl-1定位在第3号染色体RM282与RM6080之间的7.5 cM范围内,将突变基因Yl-2和Yl-3定位在第5号染色体分子标记5-43w与RM1237之间,遗传距离分别为2.0 cM和6.8 cM。

乳腺癌患者CD4^+CD25^(high)CCR6^+调节性T细胞的变化

目的检测临床乳腺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)和外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞的变化,并探讨其意义。方法分离22例乳腺癌患者PBMCs和TILs,用流式细胞仪检测CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞的比例,同时检测其Foxp3的表达;进一步用流式细胞仪检测CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞记忆分子CD45RO、CD44和CD62L的表达水平;用3H-TdR增殖实验观察CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用。结果乳腺癌患者PBMCs和TILs中CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞的比例明显增加,并在肿瘤局部存在显著的富集;CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞高表达Foxp3,在体外能有效抑制CD4+CD25-T细胞的增殖,并高表达记忆分子CD45RO、CD44,低表达CD62L,显示了效应/记忆样表型。结论 CD4+CD25highCCR6+调节性T细胞在乳腺癌患者肿瘤局部有明显富集,这可能是肿瘤长期免疫逃逸的重要原因。

小鼠CD25分子胞外段的原核表达载体的构建及表达鉴定

目的构建小鼠CD25分子胞外段的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法从BALB/c小鼠脾细胞中提取总RNA,利用RT-PCR方法获得CD25分子胞外段序列;将其亚克隆入原核表达载体PET-32a,构建好PET-32a-CD25胞外段,并进行酶切及测序鉴定;将PET-32a-CD25胞外段转染大肠杆菌BL21进行表达,并对表达产物进行纯化和鉴定。结果RT-PCR扩增出708 bp的CD25胞外段的基因片段;pET32a-CD25胞外段/BL21经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示有新生的蛋白表达条带,相对分子质量约为47×103,重组蛋白用镍树脂纯化后经Western blot检测显示具有良好的免疫反应性,并且可以在体外有效刺激自体T细胞疫苗免疫小鼠脾细胞的增殖并高分泌IL-4。结论CD25胞外段蛋白在原核细胞中成功表达,纯化后的蛋白保持良好的免疫反应性。

丙型肝炎病毒载量与疾病进程相关性分析

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)感染的献血者疾病进程与感染的HCV病毒载量的关系。方法选择27名发生HCV感染18年的献血者,在感染初期(1年内)的病毒血症期抽取血液标本进行了HCV分型的测定。感染初期至今,18年内持续追踪测定感染者的HCV-RNA。同时,在感染的第8年和16年采用肝组织活检,确定肝脏疾病的进程;此外,测定ALT和PT,即时监测感染者的肝功能。从而进一步分析丙型肝炎病毒载量与疾病进程的相关性。结果1993～2006年间HCV-RNA测定为定性测定。27名感染者中8名的HCV-RNA呈间隙性阴阳交替。

CD25分子胞外段基因免疫应答中B淋巴细胞的变化及意义

目的用鼠CD25分子胞外段基因疫苗免疫Balb/c小鼠,观察其诱导的体液免疫应答中B淋巴细胞的变化并探讨其意义。方法用pcDNA3.1-CD25胞外段真核表达质粒分别在第0天、第10天和第20天肌肉注射免疫同系Balb/c小鼠,酶联免疫法(ELISA)检测抗CD25胞外段的抗体水平及亚型,FACS检测脾细胞中B淋巴细胞的比例变化及细胞因子IL-4、IL-10和IFN-γ的表达变化。结果与对照组相比,CD25胞外段基因免疫组小鼠血清抗CD25抗体在免疫后逐渐升高,第30天达最高峰;抗CD25抗体主要以IgG1为主;免疫小鼠脾细胞中B细胞的比例变化不显著(P>0.05),但高分泌IL-4和IL-10(P<0.05),而低分泌IFN-γ(P<0.05)。结论 CD25胞外段蛋白基因免疫中B细胞功能变化显著,这为后续深入研究体液免疫应答在T细胞疫苗中的作用提供了前期实验基础。