UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

乳酸与肿瘤生物学特性的研究进展

代谢重编程使肿瘤细胞在正常含氧量的条件下仍选择以糖酵解作为能量来源的主要方式,在这个过程中产生了大量的乳酸。乳酸不再被视为自发酵的废物,它作为重要的信号分子影响周围细胞的生物学特性。乳酸也可以作为"替代燃料"在癌细胞与癌旁细胞间建立代谢偶联以维持肿瘤生长,同时乳酸能够通过调节肿瘤的发生发展来增加肿瘤的恶性程度。本文概述了乳酸与各种肿瘤生物学效应之间的关系。

乳酸通过GPR81介导的Nrf2/LDHA通路促进非小细胞肺癌H1299细胞的迁移

目的:探讨乳酸诱导GPR81、Nrf2、LDHA等相关蛋白表达对非小细胞肺癌H1299细胞迁移的影响。方法:体外培养H1299,加入乳酸、siGPR81、PI3K-AKT通路抑制剂LY294002和Nrf2 siRNA处理,采用Western blot检测乳酸对GPR81、Nrf2和LDHA的调控作用;构建不同片段LDHA启动子质粒,通过双荧光素酶报告基因实验检测Nrf2对LDHA转录水平的影响;采用Transwell实验检测乳酸对H1299细胞迁移的影响,细胞划痕实验检测LDHA对H1299细胞迁移的影响。结果:乳酸诱导GPR81、Nrf2和LDHA蛋白表达并促进迁移;GPR81通过PI3K-AKT通路正调控Nrf2;Nrf2在转录和翻译水平正调控LDHA的表达;沉默LDHA的表达可以抑制H1299细胞的迁移。结论:乳酸可以通过GPR81介导的Nrf2/LDHA通路促进非小细胞肺癌H1299细胞的迁移。