呼和浩特地区牛皮蝇蛆病的流行病学调查

在呼和浩特地区牛皮蝇蛆病的病原是牛皮蝇 (Hypodermabovis)和纹皮蝇 (H .lineatum )。该病流行的高峰期是 5～ 7月 ,其中 5月中旬至 6月中旬为最高峰。蒙古牛感染率高 ,平均感染率为 83 .33 % ,平均感染强度为 2 .34条 /头 ;黑白花牛感染率低 ,平均感染率为 0 .5 2 % ,感染强度为 2 .0 0条 /头。引起当地牛皮蝇蛆病流行的主要原因除与当地的自然、地理条件及宿主因素密切相关外 。

布鲁菌S2疫苗株GL_0002189基因原核表达及生物信息学分析

为区分羊种布鲁菌S2疫苗株为疫苗免疫还是自然感染,本课题组对布鲁菌S2疫苗株进行了测序,将测序得到的基因与已在NCBI数据库中提交的布鲁菌基因组进行比对,找出了布鲁菌S2(猪种)疫苗株特有的GL_0002189基因,再对GL_0002189基因进行克隆﹑表达及验证,并采用布鲁菌BP26基因当作阳性对照。同时对GL_0002189基因进行了生物信息学分析。结果发现,以绵羊S2疫苗免疫的血清当作抗体检测,重组蛋白BL21(pETBP26)、BL21(pETGL_0002189)与空菌BL21(DE3)比较,分别在32 kDa和29 kDa处出现条带。结果表明重组蛋白BL21(pETBP26)、BL21(pETGL_0002189)能够与布鲁菌S2免疫血清中的抗体特异性结合,且具有很好的免疫原性。另外,重组蛋白BP26与自然感染的血清发生特异性反应,而重组蛋白GL_0002189与自然感染的血清不发生特异性反应,因此GL_0002189基因在布鲁菌S2疫苗株中存在,而在羊种布鲁菌自然流行株中不存在。通过生物信息学分析发现,GL_0002189基因编码蛋白分子量约为24.1 kDa,含有1个660 bp的完整的开放阅读框,编码219个氨基酸,无跨膜区,有5个抗原表位。由此表明,本研究中的GL_0002189抗原可用于布鲁菌S2疫苗免疫与羊种布鲁菌自然感染的鉴别诊断,为布鲁菌病的诊断提供了理论支持。

介入栓塞术治疗老年脑动脉瘤性蛛网膜下腔出血的效果分析

观察介入栓塞术治疗老年脑动脉瘤性蛛网膜下腔出血的效果。方法 择选2022年4月至2023年5月本院接受治疗的70例老年脑动脉瘤性蛛网膜下腔出血,按照不同治疗方法分为实验组与参照组,比较两组治疗效果。结果 结合治疗情况来看,实验组术后各项免疫指标明显高于参照组(P<0.05);实验组并发症发生率低于参照组(P<0.05);实验组疗效情况好于参照组(P<0.05)。结论 研究总结出,介入栓塞术治疗老年脑动脉瘤性蛛网膜下腔出血效果显著,很大程度上减少术后并发症,改善患者预后,提高其日常生活质量水平。

布鲁氏菌S2疫苗株间接ELISA检测方法的建立

为了区分布鲁氏菌S2疫苗株和布鲁氏菌野毒株,试验通过比对NCBI上公布的布鲁氏菌S2疫苗株和M28野毒株全基因组序列,筛选出S2疫苗株特有基因GL_0002189,对该基因进行克隆、原核表达及蛋白质纯化,以纯化的重组蛋白作为抗原建立间接ELISA检测方法,对该方法的反应条件进行优化后确定判定点,同时对建立的间接ELISA检测方法进行重复性验证、特异性和敏感性试验,并对部分曾接种过布鲁氏菌S2疫苗的83份牛血清进行检测。结果表明:重组蛋白GL_0002189同时以可溶形式和包涵体形式表达,经纯化得到大小为29.2 ku的重组蛋白;在建立的间接ELISA检测方法中,最适重组蛋白包被浓度为2.5 ng/μL,最适血清稀释度为1∶100,最佳酶标二抗稀释度为1∶5 000,判定点为0.586,该方法的特异性为95.0%,敏感性为93.3%,且具有较好的重复性。利用建立的间接ELISA检测方法对83份牛血清进行检测,检出率为7.2%。说明试验建立的间接ELISA检测方法可区分布鲁氏菌S2疫苗免疫牛血清和布鲁氏菌野毒感染牛血清。

防治骆驼阴道蝇蛆病新药剂──“蝇蛆粉”的研制及毒性试验

防治骆驼阴道蝇蛆病新药剂──“蝇蛆粉”的研制及毒性试验呼和巴特尔，李景山，范桂兰，巴勇舸，关红，刘继先（内蒙古农牧学院呼和浩特市，０１００１８）前言人们对防治骆驼阴道蝇蛆病药剂的探求由来已久。过去曾使用＂大六六＂粉，因其残毒大而被禁产禁用。后来又滥用...

“蝇蛆粉”治疗骆驼阴道蝇蛆病的试验观察

“蝇蛆粉”治疗骆驼阴道蝇蛆病的试验观察呼和巴特尔，白音巴图，巴勇舸，郭媛华社跃峰（内蒙古农牧学院动物医学系呼和浩特）（内蒙古阿拉善盟兽医站巴彦浩特）骆驼阴道蝇蛆病是内蒙古养驼业中最常见的一种蝇蛆病。已查明，引起该病的病原主要是黑须污蝇（Ｗｏｈｌｆａｈ...

倍硫磷浇泼剂防治牛皮蝇蛆病的扩大试验

自１９９４～１９９６年对５０００多头牛应用倍硫磷浇泼剂防治牛皮蝇蛆病。经治疗过的牛食道中或背部皮下所发现的幼虫数不到未治疗对照牛的３％，杀虫率达９７％以上。此外，并发现此种药剂的杀虫效率高于倍硫磷注射剂７％，被治疗牛只未出现任何中毒症状。

用皮肤浇泼剂治疗羊痒螨的疗效观察

用皮肤浇泼剂治疗羊痒螨的疗效观察呼和巴特尔，范桂兰，巴勇舸，白音巴图（内蒙古农牧学院）螨病对畜牧业的危害是很严重的，目前在我国兽医临床上对螨病的防治尚无理想的剂型，大多为喷浴与药浴，而这些给药途径受季节、设备的限制。我们经过反复试验，制成了二嗪农浇泼...

灭虫丁注射液治疗山羊疥螨病的疗效报告

"灭虫丁"注射液是近年来由江苏农科院畜牧兽医研究所和化工部上海生物化工研究中心联合研制的新型广谱抗寄生虫药物,对家畜多种体内外寄生虫有高驱杀作用。试验结果表明,对山羊疥螨病治疗效果好,对人畜安全,临床使用无毒副作用。

烯虫磷防治绵羊痒螨的试验

烯虫磷防治绵羊痒螨的试验呼和巴特尔宝音达来（内蒙古农牧学院呼和浩特０１００１８）（内蒙古兽医工作站）为了验证烯虫磷对绵羊痒螨病的防治效果，我们于１９９４年１０月２５日至１９９５年１月２５日在呼和浩特市郊区进行了烯虫磷防治绵羊痒螨病的疗效试验。１试验材...

布鲁氏菌疫苗株S2全基因组测序及牛羊布鲁氏菌比较基因组学研究

目的为了了解布鲁氏菌S2疫苗株全基因组结构及分子生物学功能。方法对布鲁氏菌疫苗株S2进行全基因组测序,并与GenBank公布的6株牛羊布鲁氏菌进行比较基因组学研究。结果与结论通过全基因组测序发现S2基因组大小为3 331 982bp,预测基因有3 243个,GC含量为57.23%。S2预测基因中大多数基因功能主要与糖代谢﹑氨基酸代谢﹑氨基酸转运和膜转运有关。通过比较基因组学研究发现S2有20个特有基因。另外S2与GenBank公布的S2序列进行比对发现有19个差异基因。

影响A型流感病毒样颗粒包装及释放的关键结构蛋白研究

【目的】流感病毒样颗粒在病毒学研究和新型疫苗开发方面发挥着巨大作用。本研究旨在建立一种简便的包装病毒样颗粒的方法来阐明影响流感病毒样颗粒包装及释放的关键结构蛋白。【方法】构建同时表达HA、NA和M1 3个蛋白,同时表达HA和NA两个蛋白以及只表达HA蛋白的真核表达质粒,然后转染293 T细胞,检测细胞培养上清血凝效价初步判断是否包装并释放出病毒样颗粒,并采用透射电子显微镜观察病毒样颗粒的形态。【结果】表达HA和NA或表达HA、NA和M1蛋白的真核表达质粒转染293 T细胞后,检测细胞上清血凝价均为24;而转染单独表达HA蛋白质粒的细胞上清没有血凝活性。电镜观察表明单独表达HA蛋白没有可见的病毒样颗粒,而表达上述两个或3个蛋白均可观察到病毒样颗粒。【结论】本研究采用同时表达多个结构蛋白的真核表达载体来研究病毒样颗粒包装及释放的必须蛋白,研究结果表明M1在病毒样颗粒包装及释放过程中是非必须蛋白,而NA和HA蛋白是影响流感病毒样颗粒形成及释放的关键蛋白。

牛源大肠杆菌Ⅰ类整合子分子特征及其与耐药性关系的研究

本试验旨在了解牛源大肠杆菌中Ⅰ类整合子的流行情况和分子特性,并分析其与细菌耐药性的关系。本研究选取92株从肉牛非重复分离的大肠杆菌,经全自动药敏分析仪对11种常用抗生素进行了药敏检测分析,并利用PCR技术和直接测序法对牛源大肠杆菌中Ⅰ类整合酶基因及Ⅰ类整合子阳性菌株中可变区基因盒进行了调查、分析及鉴定。结果显示,92株牛源大肠杆菌中有29株检测到Ⅰ类整合酶基因,检出率为31.5%;2种可变区基因盒排列最为流行,分别为aadA1和dfrA17+aadA5;92株大肠杆菌对氨苄西林、链霉素、磺胺异恶唑和四环素的耐药率均大于45.0%,Ⅰ类整合子阳性菌株对氨苄西林、氯霉素、链霉素、磺胺异恶唑和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑的耐药率均显著高于Ⅰ类整合子阴性菌株(P<0.05)。结果表明本试验分离的牛源大肠杆菌耐药现象非常严重,整合子/基因盒分布广泛,已成为耐药基因储库,对耐药基因传播起重要作用,提示应严格控制动物饲料中抗生素添加剂的滥用。

“灭虫丁”注射液驱除几种牛消化道线虫的试验报告

"灭虫丁"注射液是近年来由江苏省农科院畜牧兽医研究所和化工部上海生物化工研究中心联合研制的一种新型广谱抗寄生虫药物,对家畜的多种体内外寄生虫有极高的驱杀作用。本项试验的结果表明,该药对牛胃肠道四种线虫病疗效高、安全性好。

福氏志贺菌5a型M90T株GAPDH蛋白多克隆抗体的制备和鉴定

目的制备高效的福氏志贺菌5a M90T3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的多克隆抗体,并对其特异性进行评价。方法提取M90T的全基因组,采用PCR法扩增M90T中的基因gapA克隆到原核表达载体pET-24中,重组质粒转入到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,条件优化后纯化GAPDH-His融合蛋白。以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备该蛋白的多克隆抗体。Western blot法、ELISA鉴定获得的抗血清。结果成功构建了原核表达载体pET24a-gapA,通过一系列诱导条件的优化,确定可溶性条件为30℃、1 mmol/L IPTG诱导2 h。用纯化的融合蛋白GAPDH-His作为抗原免疫小鼠制备多克隆抗体,Western blot法、ELISA证明多克隆抗体制备成功。结论成功制备了福氏志贺菌5a M90T特异性的小鼠多克隆抗体。

表达3个外源基因真核表达载体的构建

为构建可以同时表达3个外源基因的真核表达载体,本实验以pCAGGs载体为骨架,引入SV40启动子及单疱疹病毒(HSV)TK基因的polyA序列,并且在β-actin启动子下游插入内部核糖体进入位点序列(IRES),构建了能够同时表达3个外源基因的真核表达质粒pCAGGs-IRES。本研究将PR8流感病毒的M基因、绿色荧光蛋白基因EGFP及H1N1猪流感病毒的HA基因,分别克隆于pCAGGs-IRES载体的3个启动子下游,转染细胞后,通过间接免疫荧光和western blot表明本实验构建的pCAGGs-IRES载体能同时表达3个外源基因。该载体有望为基因疫苗、基因操作及蛋白质相互作用等研究提供新的真核表达载体。

牛皮蝇幼虫抗原基因原核表达条件的优化

分别对构建的3种牛皮蝇幼虫抗原(Hypodermin A,B,C)基因重组表达菌BL21(pETHA)、BL21(pETHB)、BL21(pETHC)在不同的诱导时间、诱导剂浓度和诱导温度等条件下的表达情况进行了研究。结果表明,重组表达菌BL21(pETHA)、BL21(pETHB)、BL21(pETHC)最佳诱导时间均为4 h,最佳诱导剂浓度均为0.05 mmol/L,最佳诱导温度分别为37、37、30℃。研究结果为进一步获得大量重组抗原用于牛皮蝇蛆病的血清学诊断和免疫防控研究提供了依据。

布鲁氏菌A19疫苗株全基因组测序及比较基因组学分析

目的探索布鲁氏杆菌A19疫苗株全基因组的结构、分子生物学的功能,并对其生物信息学进行研究。方法采用Illumina Hiseq 4000和PacBio对A19进行全基因组测序,并与GenBank上的8株菌进行比较基因组学解析。A19基因组3286167 bp,预测3371个基因,GC含量57.25%。通过注释COG库,对应基因有2560个,将其归入22类COG中;根据比对KEGG库,得到2544个基因,共参与33类代谢通路。结果综合两个数据库结果发现,大多数A19预测基因中的基因功能主要与膜运输、氨基酸转运及碳水化合物代谢有关。结论通过分析发现,A19和猪羊牛种布鲁氏菌之间存在一定差异,并找出牛种毒力基因。本实验通过测序A19全基因组,为布鲁菌疫苗的研究提供思路。