DRP1调控线粒体稳态对人视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转化的影响

目的探讨线粒体动力相关蛋白(DRP1)对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响。方法构建H_(2)O_(2)干预ARPE-19细胞模型,将ARPE-19细胞分为3组,NG组:采用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养细胞6 h;H_(2)O_(2)组:先采用650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预细胞,此后培养方式及时间与NG组相同;H_(2)O_(2)+Mdivi-1组:先采用10μmol·L^(-1)Mdivi-1处理ARPE-19细胞2 h,再给予650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预,此后培养方式及时间与NG组相同。Western blot检测各组细胞p-DRP-1/DRP1、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波型蛋白(Vimintin)及紧密连接蛋白(ZO-1)表达水平;线粒体红色荧光探针检测各组细胞线粒体形态;线粒体超氧化物红色荧光探针检测各组细胞线粒体活性氧(ROS)水平;JC-1染色试剂盒检测各组细胞线粒体膜电位;免疫荧光检测各组细胞中ZO-1表达水平。结果H_(2)O_(2)组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值高于NG组,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值低于H_(2)O_(2)组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞较H_(2)O_(2)组线粒体碎片化程度得到改善。H_(2)O_(2)组细胞线粒体ROS水平(4.42±0.29)与NG组(1.00±0.17)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(2.15±0.18)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞红/绿荧光强度比值(0.16±0.12)与NG组(1.00±0.09)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(0.42±0.05)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞上皮样标志物表达下降,间质样标志物表达上升,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞上皮样标志物表达上升,间质样标志物表达下降。各组细胞α-SMA、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、Vimintin及ZO-1相对表达量比较,H_(2)O_(2)组与NG组及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ZO-1免疫荧光染色实验显示,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组的细胞连接紧密程度优于H_(2)O_(2)组。结论DRP1可调控线粒体动态平衡,靶向DRP1可改善线粒体功能并抑制EMT进展,从而减轻H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞功能障碍。

湖南省永州市大学生近视眼抽样调查分析

目的:了解永州地区大学生近视眼成因,为大学生眼保健提供一条可行性思路。方法:采取群体抽样方法,通过问卷与客观检查相结合的方式对永州地区具有代表性的部分高校在校大学生最常见的屈光不正(近视)进行流行病学调查,并对调查结果进行统计学分析处理。结果:此次抽样人数17384例,应答17030例,应答率97.96%,符合抽样调查要求,其中近视眼患病率高达63.08%,不同系部学生近视眼患病率存在显著统计学意义(P<0.01),大学生近视屈光状态与其父母屈光状态有显著统计学意义(P<0.01)。大学生学习环境、个人生活习惯均影响近视眼的发生和发展。结论:永州地区高校大学生近视眼患病率高,眼保健意识淡薄,希望社会和相关政府部门加强重视,改善大学生学习环境,提高大学生眼保健意识,从而降低永州地区大学生近视眼发病率,促进永州地区防盲治盲工作进展。

532nm激光联合Nd:YAG激光周边虹膜切除术治疗早期瞳孔闭锁性青光眼

目的:探讨532nm激光+Nd:YAG激光周边虹膜切除术治疗早期瞳孔闭锁性青光眼的安全性和有效性。方法:将符合标准的56例瞳孔闭锁性青光眼患者按完全随机对照顺序编号,分成A,B两组。A组28例接受ND:YAG激光治疗,B组28例接受532nm激光+ND:YAG激光治疗,通过对视力、眼压、激光孔洞、视野和房角等观察,重点观察眼压控制情况。结果:经过2a的临床随访观察,眼压:A组术前(28.32±3.43)mmHg,术后(24.82±3.27)mmHg,采用配对t检查(tA=3.256)差异无统计学意义,A组眼压控制不理想;B组术前(28.79±3.63)mmHg,术后(15.31±3.18)mmHg,采用配对t检查(tB=26.315,P<0.05)差异有统计学意义;A,B两组激光治疗后眼压控制情况比较,差异有统计学意义(χ2=42.23,P<0.05)。视力:A,B两组治疗前后经t检验,A组:tA=2.375,B组:tB=2.362,视力变化无统计学意义,A,B两组间比较差异也无统计学意义(χ2=3.845)。并发症:A,B两组均无较严重并发症发生。结论:532nm激光+ND:YAG激光周边虹膜切除术是治疗早期瞳孔闭锁性青光眼的安全、有效方法,能明显降低眼压,保存视功能。

lncRNA MEG3靶向miR-130a-5p调控人视网膜色素上皮细胞损伤的研究

目的探讨lncRNA MEG3在年龄相关性黄斑变性(AMD)患者中的表达及其靶向miR-130a-5p对人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的影响。方法选取2020年6月至2021年8月永州职业技术学院附属医院收治的AMD患者38例以及同期的健康体检者38例,收集其空腹静脉血,qRT-PCR检测其血清lncRNA MEG3表达水平。不同浓度(0μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L)过氧化氢(H2O2)处理人RPE细胞系ARPE-19细胞构建RPE细胞损伤模型,并检测lncRNA MEG3在H2O2处理的ARPE-19细胞中表达。双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验分析lncRNA MEG3与miR-130a-5p的靶向关系。ARPE-19细胞分为对照组(常规培养,不进行任何特殊处理)、H2O2组(200μmol/L H2O2处理24 h)、Vector组(转染pcDNA3.1-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3组(转染pcDNA3.1-lncRNA MEG324 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-NC组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-NC 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h)、lncRNA MEG3+miR-130a-5p组(共转染pcDNA3.1-lncRNA MEG3和miR-130a-5p mimics 24 h后200μmol/L H2O2处理24 h),qRT-PCR检测各组细胞中lncRNA MEG3、miR-130a-5p表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡,2,7-二氯二氢代荧光黄二醋酸(DCFH-DA)荧光探针法、硫代巴比妥酸(TBA)法、水溶性四唑盐1(WST-1)法分别检测各组细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,ELISA法检测各组细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、β-淀粉样蛋白(Aβ)水平,Western blot检测各组细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)通路相关蛋白表达。结果与健康体检者比较,lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达(P<0.05)。与0μmol/L H2O2处理组比较,100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L H2O2处理ARPE-19细胞均可降低细胞存活率以及下调细胞中lncRNA MEG3表达水平(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验和RIP实验证实lncRNA MEG3与miR-130a-5p存在靶向关系。过表达lncRNA MEG3通过下调miR-130a-5p表达提供了H2O2诱导的ARPE-19细胞存活率、SOD水平及Nrf2、HO-1蛋白表达水平,降低了细胞凋亡率及ROS、MDA、IL-6、TNF-α、Aβ水平(P<0.05)。结论lncRNA MEG3在AMD患者血清中呈低表达,上调lncRNA MEG3可靶向负调控miR-130a-5p表达,激活Nrf2/HO-1通路,减轻人RPE细胞氧化应激和炎症反应,保护细胞免受损伤。

枸杞多糖对高糖环境下HRCEC增殖及VEGF表达的影响

目的观察不同浓度的枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对体外高糖环境下培养的人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells,HRCEC)增殖及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法获取人眼球摘除术后的HRCEC,予以体外培养,选取最佳状态的3~4代细胞;CCK8法检测在不同浓度LBP体外高糖环境下分别作用12、24、36 h后HRCEC的增殖情况;Western blot法检测各组HRCEC的VEGF表达情况。结果同一时间组间比较,高糖组HRCEC活性及VEGF的表达量均高于低糖组(P<0.05);不同浓度LBP实验组HRCEC活性及VEGF表达量均明显低于高糖组(P<0.05),80μg/mL LBP组HRCEC活性及VEGF表达低于20μg/mL LBP实验组与40μg/mL LBP实验组(P<0.05);各实验组在干预36 h时,HRCEC活性及VEGF表达低于干预12 h与24 h(P<0.05)。结论LBP能抑制高糖环境下HRCEC的增殖并下调VEGF的表达,并与LBP浓度和作用时间正相关。

参麦润目组方超声雾化治疗睑板腺功能障碍相关性干眼的疗效

目的:探讨参麦润目组方超声雾化治疗睑板腺功能障碍(MGD)相关性干眼的临床效果。方法:收集120例MGD相关性干眼患者,随机分为2组:治疗组(参麦润目组方超声雾化)与对照组(OPT强脉冲光疗)各60例,两组均联合睑板腺按摩。采用眼表综合分析仪检测各项指标:非侵入性平均泪膜破裂时间(NITBUTav)、下泪河高度(LTMH)、睑板腺评分等,对患者眼部的主观症状以问卷调查进行评分,将所得临床数据进行统计学处理。结果:治疗组与对照组的治疗前性别、年龄、病程及治疗开始至结束后6mo的各项检测指标无差异(P>0.05);治疗组总有效率94.9%,对照组96.6%(P>0.05)。结论:参麦润目组方超声雾化联合睑板腺按摩可改善MGD相关性干眼患者的主观症状及客观指标。该治疗方法与现代医学治疗方法疗效基本等同,安全并且有效,但更为便捷、经济。

兜带式后巩膜加固术治疗病理性近视眼的临床疗效

目的观察兜带式后巩膜加固术治疗病理性近视眼的临床疗效。方法采用兜带式后巩膜加固术治疗35例（66只眼）病理性近视眼患者，通过术后2年临床随访，主要观察患者视力、屈光度、眼压、眼轴、眼底血流速等改变。并经统计学处理分析。结果在观察66只眼中，术后第1、3、6、12、24月最佳矫正视力与术前比较基本是稳中有升，且随着观察时间延长，视力有上升趋势；屈光度、眼压、眼轴与术前比较差异无统计学意义；通过后巩膜加固手术后视网膜中央动脉（CRA）、睫状后短动脉（SPCA）收缩峰值流速（PSV）增加，舒张期最小流速（EDV）减少，血流阻力指数（RI）降低，眼底血流状态得到改善。结论只要精细手术操作，规范手术流程，采用改良兜带式后巩膜加固术可以稳定病理性近视眼视力、屈光度、眼压，阻止眼轴延长，改善眼底血流状态，提高患者视功能。

改良小切口非超声乳化白内障囊外摘除联合人工晶状体植入治疗硬核白内障的临床观察

目的评价改良小切口非超声乳化白内障囊外摘除联合人工晶状体植入治疗硬核白内障在白内障复明手术中的疗效.方法选择2014年4月至2016年4月在永州市第一人民医院眼科参加白内障复明手术的120例(214只眼)Ⅳ级及以上硬核白内障患者,行改良小切口非超声乳化白内障囊外摘除术(双手“跷跷板”法出核,联合手工劈核,小切口不缝合白内障囊外摘除),观察术中并发症、术后裸眼视力、眼压及术眼恢复情况.结果术中无后囊膜破裂及虹膜脱出发生,所有术眼均植入人工晶状体,切口不需缝合,术后部分患眼(21只眼)角膜出现轻度水肿,三天后消失.角膜内皮细胞计数丢失率约20%,无l例出现大泡性角膜病变.结论白内障手术虽然已经由复明手术逐渐转向屈光性手术,但是在偏远地区,很大一部分患者均是Ⅳ级及以上硬核白内障患者,对于这部分患者,如果拥有良好的超乳设备和高超的超乳技术也能完成手术,术后会有一定的角膜水肿发生.如果设备和手术技术一般,超声乳化手术可能会出现较严重的并发症.本研究对这部分患者采用改良小切口非超声乳化白内障囊外摘除联合人工晶状体植入术,取得了手术并发症少、术后反应轻、术眼恢复快的良好疗效.