半胱胺调控畜禽生长性能及其机制的研究进展

绿色、安全、有效的饲料添加剂能极大地提高畜禽生长性能和改善肉品质。半胱胺在生物学上来源于半胱氨酸代谢,是乙酰辅酶A的组成部分,具有多种生物学功能,在动物生产中作为饲料添加剂被广泛应用。该文就半胱胺作为饲料添加剂调控畜禽生长性能、消化吸收、激素分泌和免疫功能等方面进行综述,以期为半胱胺的使用提供一定的应用借鉴和理论参考。

自适应模糊PID的乒乓球发球机控制系统研究

乒乓球发球机存在精度不高的问题。针对此问题,本文设计了一种基于自适应模糊PID的乓乓球发球机稳定控制系统,通过稳定直流有刷电机的转速,从而使得每一个被发射的乒乓球,出球速度保持一致。首先利用Matlab/Simulink工具箱搭建仿真平台,验证模糊PID较传统PID算法具有更佳的控制性能,然后以STM32微处理器为核心,霍尔编码器检测出球电机转速,上球电机补偿出球电机转速。设计并实现了基于模糊PID算法的硬件实验电路。实验结果表明,相较于传统PID算法,乒乓球落点误差可以精确在±7.0 cm,提高了22%,乒乓球出球电机响应速度由4.7 s降低到了1.66 s,受到干扰时,系统达到稳定的时间由1.76 s降低到1.64 s。

连花清瘟药渣及发酵产物的生物活性研究

旨在研究连花清瘟药渣和发酵产物的生物学活性,探明自然发酵、优化发酵1(4MYL)和优化发酵2(Y4ML)三种发酵方式对药渣中营养成分的改变以及乙醇提取物和水提取物抑菌效果及抗病毒效果的差异。采用肉汤稀释法测定药渣发酵前后不同提取物对猪副嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)、猪链球菌二型(Streptococcus suis type 2,SS2)、肠毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)3种致病菌菌株的最小抑菌浓度(MIC);以伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)分别感染非洲绿猴肾细胞(Vero)、非洲绿猴胚胎肾细胞(MARC-145)、猪肾细胞(PK-15),通过荧光显微镜观察细胞形态病变,同时结合实时荧光定量PCR技术进行病毒核酸检测和定量作为药物体外抗病毒效果的评价指标。结果表明,连花清瘟原药渣的乙醇和水提取物对HPS和SS2均表现出抑制作用,但对ETEC无抑制作用;对3种试验病毒均表现出抗病毒活性,但抗病毒活性存在一定区别。发酵后乙醇和水提取物增强了抗菌抗病毒活性,同时对ETEC表现出抑制作用。综上表明,连花清瘟药渣提取物具有不同程度的抗菌、抗病毒作用,能有效抑制猪养殖过程中HPS、SS2等常见的致病菌和病毒,发酵后能增强抗菌和抗病毒效果,具有开发成动物饲料或饲料添加剂的潜力。

LEPREL1是特发性肺纤维化的潜在治疗靶点

为了寻找特发性肺纤维化(IPF)的潜在治疗靶点,从GEO获取IPF基因芯片数据,用R分析差异表达基因和通路;用STRING和Cytoscape筛选枢纽(HUB)基因;RNA-Seq和单细胞数据验证,肺纤维化小鼠实验验证,筛选具有相关性的基因,分析潜在通路。结果显示:基因芯片数据集GSE10667、GSE53845、GSE48149共116例样本,差异基因132个,主要富集在细胞外基质、胶原等通路。STRING和Cytoscape筛选HUB基因,主要为COL1A1、CXCL12、LEPREL1等基因,其中LEPREL1表达显著下调(GSE10667,P_(adj)=0.00096;GSE53845,P_(adj)=0.0001048;GSE48149,P_(adj)=0.01517)。LEPREL1在RNA-Seq数据集GSE92592(P_(adj)=0.0288)、GSE83717(P_(adj)=0.006268)、GSE150910(P_(adj)=1.9528e-30)中均显著下调;在单细胞数据(GSE135893)中主要在AT2细胞中表达并有下调趋势;在肺纤维化小鼠的RT-qPCR和IHC中也表达显著下调。差异表达基因中有81个与LEPREL1具相关性的基因,主要与细胞黏附、钙离子、胶原形成、Wnt等通路相关。IPF的差异基因主要富集在胶原和细胞外基质通路,且AT2细胞中下调的LEPREL1可能是其潜在治疗靶点。

模拟降雨条件下城市污泥养分和重金属的淋出特征

通过探明城市污泥养分和重金属的淋洗释放特征,可以用某一地区和时段内的降雨量预测污泥养分或重金属的释放量,指导污泥合理间接施用。采用人工模拟降雨淋洗3种城市污泥,得到养分和重金属的释放浓度和累计释放量。结果表明,东莞深度脱水污泥比江门普通脱水污泥释放更高浓度的N和COD;江门干燥污泥与原始污泥相比,降低了P、K和Cu的淋出量,表现出一定的老化作用。东莞污泥淋滤液Cu、Zn、Pb、Cd浓度始终未超过农田灌溉水质标准,而Cu超标的江门污泥其淋滤液Cu浓度也超过农田灌溉水质标准。污泥养分或重金属累计淋出量与模拟累计降雨量的对数呈显著正相关关系。根据广州的年降雨量和青枣作物养分需要量,推算得出满足青枣一年生长所需要的N养分而需要间接施用的东莞污泥(含水率455 g/kg)为46.7 kg/株或43240 kg/hm^(2)。

结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备

以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。

数据中台:撬动石油金融企业数字化转型的新杠杆

目前,数字经济快速发展,工业技术和信息技术高度融合,给企业的生产组织模式和运作模式带来了深远的影响,推动了传统行业的转型升级。在此背景下,加快金融数字化转型已成为石油金融企业一项十分紧迫的工作。一、石油金融企业现状分析石油金融企业是指为石油产业提供金融服务的企业。这些企业的主要业务包括提供石油开采、生产、运输、销售等各个环节的融资服务,如短期贷款、长期贷款、信用证、保理、供应链金融等。

结核分枝杆菌分泌蛋白MPT53基因的克隆、表达和纯化

目的构建结核杆菌分泌蛋白MPT53原核表达载体并进行表达和纯化。方法以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增MPT53基因,产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化,酶切鉴定,克隆到pET32a原核表达载体,测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠埃希菌BL21,诱导表达MPT53融合蛋白,亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果成功构建PET32a-MPT53重组质粒,转化BL21后经IPGT诱导成功表达分子质量单位为36ku的MPT53蛋白,与理论值相符。结论成功表达结核分枝杆菌MPT53蛋白,为其应用打下了基础。

基于云服务的工业机器人状态监测系统设计

随着智能制造技术的推广,工业机器人在各行业得到了广泛应用。这不仅极大提升了企业的生产效率,也改善了劳动人员的工作环境。但专业维护技术人员缺乏导致维护质量不高的问题也日益凸显。为此,文章提出了一种采用工业控制器作为数据采集器,经由工业互联网上传云服务器,最终通过微信小程序进行工业机器人远程监测的技术方案。该方案可对工业机器人进行有效的状态监测和故障诊断,显著提升机器人工作站的运维质量和工作效率。

检测结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6分泌蛋白双抗体夹心ELISA的建立

用重组蛋白CFP10-ESAT-6免疫新西兰大白兔,通过ELISA方法检测抗体效价水平;高效价抗体用DEAE-32阴离子交换柱纯化后,一部分抗体为包被所用,另一部分抗体用辣根过氧化物酶标记后,作为检测用,建立双抗体夹心法,进行了初步鉴定,确定该方法的可行性。结果表明:抗CFP10-ESAT-6多克隆抗体的效价在1∶16000稀释后D450值基本都达到1.0左右,在纯化、酶标记后,分别以1∶5000为包被工作浓度,1∶3000为酶标工作浓度时,能较高特异性检测结核杆菌培养上清分泌的CFP10-ESAT-6抗原。

IL-15参与调控肌肉与脂肪组织代谢的新进展

骨骼肌分泌的白细胞介素15(IL-15)能调控多种细胞的增殖与分化,并以内分泌和旁分泌的方式调节肌肉和脂肪组织代谢,从而维持整个机体的稳态。该领域的研究,有助于从分子水平上揭示畜禽生产中肉品质的调控途径,并提出其在治疗人类疾病(如肥胖、糖尿病、恶病质、肌肉萎缩等)方面的潜在意义。

结核分枝杆菌CFP-10/ESAT-6融合蛋白模拟抗原表位的筛选

目的探讨噬菌体展示随机肽库技术在结核分枝杆菌培养滤过蛋白10（CFP-10）／早期分泌抗原靶点6（ESAT-6）融合蛋白（CE融合蛋白）模拟抗原表位筛选中的应用。方法以抗CE融合蛋白多克隆抗体为靶分子，对随机噬菌体7肽库进行筛选，经3轮生物淘选后，随机选取18个单噬菌体进行测序分析。采用双抗体夹心和竞争ELISA方法对测序后噬菌体进行阳性克隆及其活性鉴定。采用间接ELISA方法，选取阳性单噬菌体与CE融合蛋白分别对20份活动性肺结核患者和10份有卡介苗接种史健康人的血清标本抗体进行检测。结果经过3轮生物淘选，能与靶分子特异性结合的噬菌体得到了明显富集。18个单噬菌体测序共获得9种序列，其中单噬菌体5、6、18的氨基酸序列均包含Trp-Asp-Ala-Thr（WDAT）保守序列，该序列与ESAT-6第58-61位氨基酸的序列一致。9种序列中各取1个单噬菌体经双抗体夹心和竞争ELISA检测，有7个单噬菌体（1、5、6、10、13、14、18，S／N值依次为9.2、9.7、9.4、8.9、9.6、9.9、9.0）确定为具有免疫活性的阳性克隆。选取含有WDAT保守序列的阳性单噬菌体5与CE融合蛋白分别对2种血清标本抗体进行间接ELISA检测结果显示，单噬菌体5对2种血清标本抗体检测的吸光度值均高于CE融合蛋白（分别为0．931±0．298 vs 0．317±0．157、0．496±0．073 vs 0．118±0．026，均P〈0．05）；单噬菌体5对活动性肺结核患者血清标本抗体的检出率（95％，19／20）明显高于CE融合蛋白（60％，12／20），而对有卡介苗接种史健康人血清标本抗体的检出率（9／10）低于CE融合蛋白（10／10）。结论利用噬菌体展示随机肽库技术成功筛选出7个CE融合蛋白的模拟抗原表位，并获得了定位于ESAT-6第58-61位氨基酸序列的CE融合蛋白的1个线性B细胞抗原表位，提高了ELISA检测的敏感性，为进一步研究CE融合蛋白的其他抗原表位及以特异性抗原表位为基础开发结核抗体检测试剂奠定了基础。

紫菀有效成分分析及生物碱的提取与体外抑菌研究

采用试管法和圆形滤纸层析法分析鉴定了紫菀的化学成分,结果表明,紫菀主要含有生物碱、有机酸、黄酮类、多糖、酚类、鞣质、植物三萜和挥发油等。用醇类溶剂提取法从300 g生药中提取总生物碱0.4520 g,得率为0.1506%。用试管稀释法和纸片法对紫菀乙醇提取物和生物碱提取物进行了体外抑菌效果试验,结果表明,紫菀乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏杆菌都有较强的抑菌作用,其抑菌圈直径分别为18.20±1.30 mm、17.00±2.55 mm、12.40±2.07 mm、14.60±1.82 mm、16.00±4.36 mm;最低抑菌浓度分别为0.80 g/m l、0.05 g/m l、0.50 g/m l、0.20 g/m l和0.20 g/m l;紫菀生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏杆菌的最低抑菌浓度分别为4 mg/m l、2 mg/m l、6 mg/m l、4 mg/m l和4 mg/m l。

禽流感病毒NP基因的酵母双杂交饵载体表达及自激活检测

目的构建H5N1亚型禽流感病毒NP基因的酵母双杂交诱饵载体,验证其在酵母中的表达并检测其自激活作用。方法以PCR法从pGEMT/H5NP扩增NP基因编码区序列,将其定向克隆到PGBKT7载体,经测序鉴定后,PEG/Li-Ac法转化酵母菌株AH109,用表型筛选法及颜色筛选法检测其自激活作用同时Westernblot验证诱饵蛋白的表达。结果获得NP编码区基因,并成功构建酵母双杂交系统中的诱饵载体pGBKT7-NP,对宿主细胞酵母菌株AH109无毒性和自激活作用,并能在酵母细胞中稳定表达。结论诱饵载体pGBKT7-NP可用于GAL4酵母双杂交系统钓取与禽流感病毒核蛋白相互作用的蛋白。

猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析

猪链球菌溶血素(SLY)是较早确定的猪链球菌毒力因子之一,具有细胞毒性,在猪链球菌致病过程中发挥重要作用。利用同源重组技术成功构建了猪链球菌2型(SS2)sly基因缺失的突变株SS2-Δsly,缺失株的体外溶血活性消失,对小鼠脑血管内皮细胞的细胞毒性显著低于亲本菌株(P<0.01),但不影响猪链球菌2型在巨噬细胞中的存活。该菌株可以用于研究SS2溶血素在感染细胞中的作用机制。

不同猪瘟疫苗类型及剂量的抗体反应特性研究

随机选择3个猪场,从9头母猪生下的仔猪中挑选81头仔猪。随机分成9组,每组又分为3个小组,每小组3头,分别免疫猪瘟组织苗(A)、猪瘟细胞苗(B)和猪瘟脾淋苗(C),各疫苗分别采用1头份、2头份和3头份3个剂量。于25日龄首免疫前后不同时间点采血,分离血清。应用ELISA和IHA两种方法分别对采集的540份血清检测猪瘟抗体。不同类型的猪瘟疫苗免疫试验结果表明:猪瘟脾淋苗免疫效果较好,但不同疫苗之间的抗体水平差异不显著。不同免疫剂量的试验结果显示:3种疫苗以3头份的剂量免疫后抗体反应略高于1头份和2头份,二免后都能获得较高的抗体水平。

氯喹抑制自噬对呕吐毒素诱导的仔猪生长性能和血液指标变化的影响

本试验旨在探究氯喹(CQ)抑制自噬对摄入呕吐毒素(DON)污染饲粮的仔猪生长性能、血液生理生化指标和抗氧化能力的影响。选择24头初始体重[(7.10±0.58)kg]相近的健康长×大二元杂交猪,随机分为3组,分别为对照组(CON组,基础饲粮)、DON组(饲粮中含1.5 mg/kg DON)、DON+CQ组(饲粮中含1.5 mg/kg DON+灌服10 mg/mL CQ),每组8头,每头为1个重复。试验开始时各组均饲喂常规基础饲粮,CON和DON组灌服8 mL生理盐水;DON+CQ组灌服8 mL CQ,试验开始后第7天,DON和DON+CQ组饲喂含1.5 mg/kg DON的霉变饲粮,持续1周(保持CQ的灌服),试验期共14 d。结果表明:1)与CON组相比,DON组仔猪平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)显著降低(P<0.05),DON+CQ组仔猪ADG和ADFI与其他2组均无显著差异(P>0.05),料重比(F/G)显著低于DON组(P<0.05)。2)与CON组相比,DON组血清尿素氮(UN)含量及谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)活性显著提高(P<0.05),DON+CQ组血清UN含量和ALP活性显著低于DON组(P<0.05)。与CON组相比,DON组血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)含量显著降低(P<0.05);DON+CQ组血清GH和IGF-Ⅰ含量显著高于DON组(P<0.05)。3)与CON组相比,DON组血浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著降低(P<0.05),而丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);DON+CQ组血浆SOD、GST、GSH-Px活性和T-AOC显著高于DON组(P<0.05)。结果提示,CQ抑制自噬能提高DON处理仔猪的生长性能,改善血液生化指标,提高机体抗氧化能力,一定程度上缓解DON对断奶仔猪的毒害作用。

N-氨甲酰谷氨酸、脯氨酸及腐胺对仔猪空肠和回肠Na^(+)依赖性中性氨基酸转运载体2表达及营养感应信号的调控作用

本研究旨在探讨Na^(+)依赖性中性氨基酸转运载体2(SNAT2)介导多胺及其前体物质对仔猪肠黏膜营养感应信号的调控作用。试验选取32头哺乳仔猪,随机分为4组,每组8头猪,自出生当日开始,每日2次分别灌服生理盐水(对照组)、腐胺(5 mg/kg BW)、脯氨酸(25 mg/kg BW)和N-氨甲酰谷氨酸(NCG,8 mg/kg BW)。14日龄断奶,断奶第3天采血后屠宰,采集空肠和回肠样品。结果表明:与对照组相比,灌服腐胺、脯氨酸和NCG显著提高仔猪平均日增重(P<0.05);灌服腐胺和NCG显著提高空肠和回肠黏膜SNAT2的蛋白表达水平(P<0.05);灌服脯氨酸和NCG显著提高了空肠黏膜氨基酸转运感应相关基因[质子耦合氨基酸转运蛋白1(PAT1)、钙感应受体(CasR)、磷脂酶Cβ2(PLCβ2)和味觉受体1家族成员3(T1R3)]的mRNA相对表达量(P<0.05),NCG还显著上调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关基因[促分裂原活化蛋白激酶3(MAP4K3)和mTOR]的mRNA相对表达量(P<0.05);灌服NCG显著提高了血清中胆囊收缩素(CCK)含量(P<0.05)及空肠黏膜CCK受体mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,NCG可通过上调仔猪肠道氨基酸转运载体相关基因的表达,调节氨基酸感应途径信号分子的释放和基因表达。

基于对称非线性函数的变步长LMS自适应滤波算法

为解决自适应最小均方误差(least mean squares,LMS)滤波算法难以平衡稳态误差和收敛速度的问题,提出了基于对称非线性函数的变步长LMS自适应滤波算法。通过自变量取绝对值、叠加非线性拉伸量改进Sig-moid函数,构造一个对称非线性函数用于刻画步长因子与稳态误差的非线性关系。该对称非线性函数具有能够根据误差动态调整步长、更快达到收敛状态的特点。根据构造的对称非线性函数和输入信号功率生成归一化变步长因子,解决噪声逐级放大的问题,进一步提高算法的滤波效果同时,加速收敛。实验表明:该算法在低信噪比、信噪比变化、信号频率变化、滤波器阶数变化、延迟采样点数变化条件下均具有更好的滤波效果、更优的稳定性和更快的收敛速度。