雷公藤-甘草配伍干预肾病综合征大鼠AVPR2/AQP2的表达

目的探讨阿霉素诱导的肾病综合征大鼠AVPR2和AQP2的表达以及雷公藤-甘草配伍的干预机制。方法选取成年健康雄性SD大鼠,随机选取10只作为空白组,其余大鼠均接受尾静脉注射给予6.5 mg·kg^(-1)的阿霉素诱导复制大鼠肾病综合征模型。并采用随机数字法将造模成功的大鼠分为4组(n=10):模型组(n=10)、阳性对照组(雷公藤多苷片80 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)、雷公藤组(雷公藤提取物240 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)及雷公藤-甘草组(雷公藤提取物240 mg·kg^(-1)·d^(-1)+甘草提取物80 mg·kg^(-1)·d^(-1),n=10)。测定大鼠24 h尿蛋白含量、血清白蛋白、尿素、肌酐水平、肾脏中AVPR2和AQP2 mRNA表达水平。结果大鼠经阿霉素造模后表现出大量蛋白尿、低蛋白血、高度水肿症候。相比于模型组,雷公藤及配伍给药组大鼠精神状态较好,体质量增加明显。与模型组相比,雷公藤组24 h尿蛋白、尿素、AQP2 mRNA表达均显著下降(P<0.05);雷公藤-甘草组24 h尿蛋白、血清白蛋白、尿素、肌酐、AVPR2 mRNA及蛋白、AQP2 mRNA及蛋白表达均显著回调(P<0.05)。相比于雷公藤组,雷公藤-甘草组的24 h尿蛋白、血清白蛋白、AVPR2 mRNA、AQP2蛋白表达回调更加显著(P<0.05)。结论雷公藤可显著降低肾病综合征大鼠AVPR2和AQP2 mRNA高表达,且与甘草配伍后效果更优,雷公藤-甘草配伍给药干预阿霉素诱导的肾病综合征大鼠的机制与纠正AVPR2与AQP2的高表达、减少水的重吸收有关。

光气法合成苯乙酰氯的工艺研究

采用光气和苯乙酸为原料合成苯乙酰氯,对影响反应的温度、搅拌速度、光气通入速度、原料配比、保温时间及催化剂种类、用量等各类关键因素进行了优化,挖掘出了最佳合成条件,即以N,N-二甲基甲酰胺为催化剂,加入的量为苯乙酸质量的2%,苯乙酸与光气的物质的量比为1∶1.5,搅拌速度控制在90 r/min,在85℃的温度下,以70 g/h的速度通入光气,光气通入结束后保温反应0.5 h。此优化条件下合成的苯乙酰氯纯度达99.74%,收率96.50%,催化剂可循环再利用。相比于二氯亚砜法合成的苯乙酰氯,具有绿色环保、尾气易回收利用以及产品品质较高的优势。

参麦注射液活性成分在正常和心肌缺血Beagle犬体内的药动学研究

目的:研究参麦注射液活性成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Re在正常和心肌缺血Beagle犬体内的药动学。方法:取6只Beagle犬sc盐酸异丙肾上腺素(1.1 mg/kg)以复制心肌缺血模型(模型组),另取6只犬sc等体积生理盐水(2.2 ml/kg)作为对照组。两组犬分别于第1天上午8:00、下午13:00和第2天上午8:00给药。第2天给药后1 h,各组犬iv参麦注射液(1.6 ml/kg),在1h左右滴注完成。各组犬于iv开始后0、0.25、0.5、0.75、1(iv结束)、1.5、2、3、4、6、8、12、24 h取血。采用液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的血药浓度,Win Nonlin 6.3软件计算药动学参数并进行比较。结果:人参皂苷Re在模型组犬体内的t_(1/2)为(2.69±1.12)h,AUC_(0-24 h)为(2 060.78±812.18)h·μg/L,V_z为(46.16±20.98)ml,CL为(9.02±4.45)ml/h;与正常组比较,AUC_(0-24 h)显著升高,V_z、CL显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。而两组犬人参皂苷Rg_1的药动学参数无显著性差异(P>0.05)。结论:心肌缺血会影响Beagle犬体内人参皂苷Re的消除,对人参皂苷Rg_1药动学过程无明显影响。

生脉注射液与参麦注射液在心绞痛患者体内的药代动力学

目的:比较研究生脉注射液与参麦注射液中人参皂苷类成分在稳定型心绞痛患者内的药代动力学变化。方法:20名稳定型心绞痛患者分成2组,交叉试验,两组分别一次性滴注生脉注射液与参麦注射液,采用质谱法检测人参皂苷类成分不同时间点的血药浓度,计算药代动力学参数并对其进行比较。结果:两组患者分别静脉滴注生脉注射液和参麦注射液后,人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1和人参皂苷Rc的达峰血药浓度参麦组均高于生脉组,且有统计学意义(P≤0.05);人参皂苷Rg_1的半衰期,人参皂苷Rc的表观分布容积和清除率,人参皂苷Rd达峰时间两组间亦均有差异(P≤0.05);而其他药动参数均无显著性差异。结论:两组患者分别一次性滴注生脉注射液与参麦注射液,人参皂苷Rg_1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb_1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd在患者体内的药代动力学特征存在差异,临床用药应对患者辨证施治。

醉鱼中菌种的分离筛选与鉴定研究

为优化醉鱼的加工工艺,从传统发酵方法制作的醉鱼中分离纯化获得14株乳酸菌和9株葡萄球菌。通过形态学鉴定、生化鉴定以及糖醇发酵试验,筛选出2株戊糖乳杆菌、2株米酒乳杆菌、1株干酪乳杆菌及2株木糖葡萄球菌。5株乳酸菌和2株葡萄球菌都可作为水产制品的发酵剂。

壬基酚对多刺裸腹溞连续世代的毒性效应

为探讨典型环境激素壬基酚（nonylphenol,NP）对枝角类浮游动物多刺裸腹溞连续世代的毒性效应,在实验室条件下,暴露连续3个世代（F0、F1、F2）多刺裸腹溞于0.02～0.10 mg·L-1的NP。15 d后测定成体死亡率、首胎繁殖时间、后代数目、成体蜕皮次数以及终点体长。研究结果表明,NP对F0代多刺裸腹溞具有很高的致死率;随着世代的增加,在相同NP质量浓度暴露下,与母代成体的死亡率相比,子代多刺裸腹溞成体的死亡率增高,致死毒性放大;NP对多刺裸腹溞连续3个世代的繁殖力都有显著抑制作用（P〈0.05）,并随着世代递增,NP对子代繁殖力的抑制增强;在NP暴露下,多刺裸腹溞F0首胎繁殖时间明显推迟,NP暴露浓度与延迟程度呈正相关,呈现出剂量-效应关系,首胎繁殖时间延迟的趋势也存在于F1、F2世代中且存在放大效应;但是连续3个世代多刺裸腹溞成体的蜕皮次数都不受NP暴露影响;F0和F1世代多刺裸腹溞终点体长降低,并呈现明显的剂量-效应关系,但与F1相比,F2低浓度处理组受试个体终点体长呈增加趋势。对结果进行分析,认为多刺裸腹溞在NP暴露后的母代DNA或DNA完整性遭到破坏导致子代在相同NP质量浓度暴露下更容易受到NP致死性的影响;NP化合物具有的苯酚结构抑制枝角类体内葡萄糖、硫酸盐与类固醇的结合,从而引起体内荷尔蒙水平异常,最终对诸如生殖等生理行为造成不利影响;多刺裸腹溞成体的蜕皮次数都不受NP暴露影响表明蜕皮激素系统未受到干扰,且NP对生长的影响显然存在蜕皮外的其他作用机制。

阿司镁铝胶囊在健康人体的药代动力学

目的研究健康受试者口服阿司镁铝胶囊(抗血栓药)的药代动力学特点。方法 30名健康受试者随机分为3组,单次口服3个剂量阿司镁铝胶囊(81,162,324 mg)及多次口服其162 mg,连续7d。采用LC-MS/MS内标法测定健康人血浆中阿司匹林及其代谢产物水杨酸的浓度,并计算其药代动力学参数。结果阿司匹林及其代谢产物水杨酸的药代动力学参数符合二室模型,健康受试者单次口服阿司镁铝胶囊3个剂量(81,162,324 mg)及多次口服阿司镁铝胶囊(162 mg)后的药代动力学参数,阿司匹林:Cmax分别为(0.91±0.35),(1.82±0.61),(2.95±1.38)mg·L-1及(2.17±0.79)mg·L-1;t1/2分别为(0.32±0.08),(0.40±0.09),(0.38±0.10)h及(0.39±0.11)h;AUC0-t分别为(0.64±0.13),(1.66±0.55),(2.51±0.84)mg·h·L-1及(1.65±0.44)mg·h·L-1。水杨酸:Cmax分别为(4.61±0.41),(8.44±2.06),(15.98±1.86)mg·L-1及(11.36±2.01)mg·L-1;t1/2分别为(2.18±0.84),(2.55±0.93),(2.51±0.58)h及(2.60±0.74)h;AUC0-t分别为(16.34±5.04),(43.55±22.71),(85.56±25.55)mg·h·L-1及(57.37±21.89)mg·h·L-1。结论在81～324 mg内,口服阿司镁铝胶囊的体内过程呈线性药代动力学,并且连续口服后在人体内无明显蓄积。

基于分子对接虚拟筛选铜绿假单胞菌胞外酶exoS抑制剂的研究

铜绿假单胞菌是引起宿主防御机制受损患者严重感染的重要原因。胞外酶S(exoS)为铜绿假单胞菌III型分泌系统(T3SS)分泌的毒力因子之一,是维持细菌在宿主体内繁殖的重要步骤。因此,本文首先运用虚拟筛选的方法学研究,确定exoS的6GNJ靶点蛋白为应用于分子对接虚拟筛选的最佳对接模型。随后利用分子对接、结构相似性筛选和类药性评价等多种策略,从中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库中筛选出4个命中分子。分子对接显示MOL008550和MOL001870与exoS受体蛋白具有强氢键作用和疏水相互作用,表现出较高的结合亲和力,为前2位最佳命中分子。结合分子动力学模拟分析发现,MOL008550和MOL001870与exoS受体蛋白的复合物比参考化合物(F4W501)具有更有利的动态稳定性。结合自由能计算显示,MOL008550和MOL001870的结合自由能强于F4W501,且与exoS受体蛋白的作用方式和F4W501类似,主要为静电、疏水作用及范德华力促进两者间的结合,其可能对exoS表现出更高的抑制活性,为潜在的exoS靶向小分子抑制剂。虚拟筛选活性化合物并探究其与胞外酶S的互作模式及动力学稳定性,为开发新型的高效靶向exoS抑制剂提供了研究思路和物质参考。

利福喷丁在健康人体的药代动力学和生物等效性

目的:研究利福喷丁胶囊在健康人体的药代动力学及生物等效性。方法:20名健康志愿者随机双交叉、单剂量口服受试制剂和参比制剂,剂量均为0.6g,洗脱期为1周。采用内标法测定血浆中利福喷丁的浓度,应用DAS2.0药动学程序进行有关药代动力学参数、相对生物利用度计算,并评价两种制剂生物等效性。结果:受试制剂与参比制剂的药代动力学参数如下。利福喷丁:tmax分别为(4.700±2.364)和(4.700±1.750)h,t1/2分别为(16.215±2.356)和(16.825±4.595)h,Cmax分别为(11.774±5.134)和(10.771±4.868)mg·h·L-1,AUC0-t分别为(346.539±160.580)和(322.286±147.345)mg·h·L-1,AUC0-∞分别为(363.137±167.807)和(339.309±154.212)mg·h·L-1。利福喷丁的相对生物利用度为(110.5±25.6)%。结论:两种制剂具有生物等效性。

醉鱼中乳酸菌的分离与鉴定研究

为优化醉鱼的加工工艺,从传统发酵方法制作的醉鱼中分离纯化获得14株乳酸菌。通过形态学鉴定、生化鉴定以及糖醇发酵试验,初步鉴定出9株戊糖乳杆菌、2株米酒乳杆菌、1株弯曲乳杆菌、1株鼠李糖乳杆菌及1株干酪乳杆菌。

自制疝带治疗小儿腹股沟斜疝的疗效观察

目的观察自制疝带治疗小儿腹股沟斜疝的疗效。方法将62例小儿腹股沟斜疝患儿随机分为2组,治疗组31例行手法复位后用自制疝带治疗,对照组31例行手法复位后用棉线束带治疗,比较2组临床疗效及痊愈时间。结果 2组临床疗效和痊愈时间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论用疝带治疗小儿腹股沟斜疝疗效确切,能有效缩短自愈时间,减少复发率。

液相色谱-质谱联用法同时测定生脉注射液中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1和五味子醇甲在健康人血浆的浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法测定生脉注射液(心血管系统药)中人参皂苷Rg1、Re、Rb1和五味子醇甲在健康人血浆的浓度。方法血浆样品用乙腈沉淀法处理,用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方法,检测人参皂苷Rg1、Re、Rb1和五味子醇甲。结果 Rg1、Re、Rb1和五味子醇甲的线性范围分别为0.64～509.000,.62～501.00,1.180～4725.00,0.10～153.00μg.L-1;定量下线分别为0.64,0.62,1.18,0.10μg.L-1;方法回收率分别为78.55%～91.65%7,8.57%～104.98%,79.62%～93.17%,82.50%～104.80%;日内、日间RSD值均小于15%。结论该法准确、灵敏、特异,适用于血浆中生脉注射液中4种成分浓度的同时测定。

银杏内酯B注射液在健康人体的药代动力学

目的研究中国健康志愿者单次静滴银杏内酯B(抗脑梗塞药)的药代动力学。方法26名健康志愿者随机分成3组,分别单次静滴银杏内酯B注射液20、40、60mg。用LC-MS-MS法测定给药后不同时间点血浆中的银杏内酯B浓度,并用DASver2.0软件计算其药代动力学参数。结果血药浓度-时间曲线符合二房室模型,药代动力学参数中,3组的t1/2z无显著性差异,并与给药剂量无关;3组的AUC0-t随给药剂量的加大而增加;3组的AUC/dose,c/dose间差异具有统计学意义。结论在20～60mg内,银杏内酯B注射液的体内过程,基本符合线性动力学特征。

LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的不确定度评定

目的:评定LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的不确定度。方法:对LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的全过程进行分析,建立数学模型评定其不确定度,确定影响不确定度的因素并对各个因素进行评估,计算合成不确定度并进行扩展。结果:置信概率P为95%时,血浆中低(4.73μg/L)、中(94.50μg/L)、高(7 560μg/L)浓度人参皂苷Rb_1的扩展不确定度分别为11.64、15.42、820.58μg/L。结论:本方法适用于LC-MS法测定人血浆中人参皂苷Rb_1浓度的不确定度评定,不确定度主要由线性回归过程引入。

尼麦角林在健康人体中的生物等效性

目的:研究两种尼麦角林片剂在健康人体的生物等效性。方法:20名健康志愿者随机双交叉、单剂量口服受试制剂尼麦角林片和参比制剂尼麦角林片,剂量均为20mg,剂间间隔为1周。其中尼麦角林在体内的最主要的代谢产物为10α-甲氧基-9,10-二氢麦角醇(MDL),故用LC-MS内标法测定血浆中MDL浓度,应用DAS药动学程序进行有关药代动力学参数、相对生物利用度计算,并根据新药审批指导原则评价两种制剂的生物等效性。结果:表明该分析方法专属性强,方法简便。受试制剂与参比制剂的药代动力学参数,尼麦角林:tmax分别为(3.3±0.9)和(3.2±0.7)h,t1/2分别为(12.9±4.0)和(12.8±2.4)h,Cmax分别为(23±6)和(22±6)μg/L,AUC0-t分别为(291±51)和(282±44)μg.L-1.h,AUC0-∞分别为(316±50)和(299±46)μg.L-1.h。尼麦角林的相对生物利用度为(104±17)%。结论:两种尼麦角林片剂在健康人体具有生物等效性。

挥发油对黄芩中主要黄酮成分的透皮影响

目的考察陈皮油、莪术油、川芎油、石菖蒲油4种挥发油对黄芩中黄酮成分的透皮影响。方法采用体外透皮试验方法,以接受液中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素为指标,建立稳态扩散模型,从累积渗透-时间方程求得渗透速率常数,并计算增渗倍数。结果 4种挥发油对黄芩中3种黄酮成分透皮影响不同,陈皮油对黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素均有促透作用;莪术油对黄芩苷、汉黄芩苷有促透作用;石菖蒲油对黄芩素有促透作用;川芎油不但未显示促透作用反而抑制了3种成分的透皮。综合指标显示4种油对黄芩促透作用强度顺序为:陈皮油>莪术油>石菖蒲油>川芎油。结论陈皮油、莪术油对黄芩具有促透作用。

生脉注射液与参麦注射液在健康人体的药代动力学

目的比较研究健康志愿者单次静脉滴注生脉注射液(益气养阴中药)和参麦注射液(治疗心脏病的急救中药)的药代动力学。方法 16名健康受试者分成2组,交叉试验,分别单次静滴相同剂量生脉注射液和参麦注射液;用液相色谱-质谱仪检测法测定给药后不同时间点的血药浓度,用DAS 2.0软件计算药代动力学参数。结果两者的血药浓度-时间曲线均符合二房室模型,健康受试者单次静滴生脉注射液和参麦注射液后主要的药代动力学参数如下。Rg1:Cmax分别为(0.89±0.52),(0.81±0.53)mg.L-1;t1/2分别为(2.01±0.82),(1.78±0.98)h;AUC0-144分别为(1.15±0.44),(1.24±0.84)mg.h.L-1。Re:Cmax分别为(0.26±0.15),(0.27±0.19)mg.L-1;t1/2分别为(0.59±0.34),(0.60±0.44)h;AUC0-144分别为(0.26±0.13),(0.33±0.25)mg.h.L-1。Rb1:Cmax分别为(10.57±8.92),(16.54±11.70)mg.L-1;t1/2分别为(47.98±7.26),(47.17±8.75)h;AUC0-144分别为(346.67±267.89),(525.45±387.32)mg.h.L-1。结论单次静滴相同剂量的生脉注射液和参麦注射液其药代动力学参数无显著性差异。

生脉拆方系列注射液中人参皂苷Rg_1和Re药代动力学研究

目的:研究生脉及其系列拆方注射液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re在Beagle犬体内的药代动力学。方法:采用拉丁方实验设计方法给药,进行交叉试验,清洗两周,给药剂量1.6mL.kg-1;应用高效液相色谱-串联质谱联用分析方法,测定血浆中人参皂苷Rg1和Re浓度,并用DAS ver 2.1软件计算其药代动力学参数。结果:人参皂苷Rg1和Re线性范围分别为1.27～1018.00μg.L-1和1.25～1002.00μg.L-1,方法回收率在74.39%～88.08%和78.57%～104.98%,日内、日间RSD值均小于15%。其中生脉注射液中人参皂苷Rg1、Re药代动力学参数如下:tmax为(0.95±0.73)、(0.74±0.57)h;t1/2为(1.63±1.12)、(2.22±1.34)h;Cmax为(297.28±144.90)、(485.90±471.30)μg.L-1。AUC0-t为(433.87±247.65)、(1163.07±1188.78)μg.h.L-1;AUC0-∞为(442.34±248.10)、(1180.56±1202.42)μg.h.L-1。结论:该法简便、灵敏、特异,适用于血浆中人参皂苷Rg1和Re浓度的测定。4种注射液中人参皂苷Rg1和Re在Beagle犬体内药代动力学行为均符合三房室模型,各制剂之间药动参数没有显著性的差异。

雷公藤提取物与甘草提取物配伍对肾病模型大鼠血液学指标的影响

目的:探讨雷公藤提取物与甘草提取物配伍的减毒增效作用。方法:采用雷公藤提取物及雷公藤提取物与甘草提取物的不同剂量配比,干预肾病模型大鼠,检测对大鼠体重、24 h尿蛋白、血液学主要指标的影响,观察雷公藤与甘草配伍的减毒增效作用。结果:阿霉素造肾病模型对大鼠体重、24 h尿蛋白量、血液系统有明显的毒性作用。使大鼠体重下降,24 h尿蛋白量升高,血液红细胞、血红蛋白、血小板明显减少。对于上述毒性表现,雷公藤提取物和雷公藤提取物与甘草提取物配伍均能显示一定的治疗和改善作用,在治疗和改善程度上雷公藤提取物与甘草提取物配伍优于雷公藤提取物。结论:甘草提取物对雷公藤提取物具有一定的减毒增效作用。

生脉拆方注射液中人参皂苷Rb_1药代动力学研究

目的:研究生脉拆方系列注射液人参皂苷Rb1在Beagle犬体内的药代动力学。方法:采用拉丁方实验设计和交叉试验,应用LC/MS/MS分析方法测定Beagle犬血浆中人参皂苷Rb1浓度,并用DAS ver 2.1软件计算其药代动力学参数。结果:人参皂苷Rb1线性范围为0.002 36～9.45μg/L,方法回收率在73.31%～100.12%,日内、日间RSD值均小于15%。4种生脉拆方注射液(生脉、参麦、参味、红参注射液)中人参皂苷Rb1药代动力学参数t1/2如下:(45.63±11.85)、(40.48±11.76)、(32.31±12.60)和(28.37±8.87)h。结论:该法简便、灵敏、特异,适用于血浆中人参皂苷Rb1浓度测定;4种注射液中人参皂苷Rb1在Beagle犬体内药代动力学行为均符合三房室模型;复方与单方注射液的人参皂苷Rb1的t1/2有显著性差异(P<0.05),表明复方配伍影响其在体内药代动力学行为,显示了药物间相互作用。