肠球菌β-内酰胺酶的测定及耐药性分析

目的 研究肠球菌 β-内酰胺酶与耐药性的关系。方法 采用纸片扩散法 (K- B法 )检测 32株肠球菌对 8种抗生素的耐药性 ,采用 nitrocefin法测定 β-内酰胺酶。结果 药敏测定结果显示肠球菌对链霉素、红霉素、庆大霉素的耐药率分别达到 96 .9%、93.8%、84.4%,对万古霉素、替考拉宁的耐药率都为 0。对青霉素类抗生素的耐药性 ,屎肠球菌对氨苄西林、青霉素 G、氨苄西林 /舒巴坦耐药率分别为 71.4%、85 .7%、5 7.1%,粪肠球菌则分别为 8.7%、13.0 %、0 ;屎肠球菌产 β-内酰胺酶阳性率为 71.4%,粪肠球菌为 31.1%。结论 肠球菌对氨基糖苷类抗生素、红霉素具有高度耐药性 ,对万古霉素、替考拉宁全部敏感 ,屎肠球菌对青霉素类抗生素的耐药性与产 β-内酰胺酶率明显高于粪肠球菌 ,且屎肠球菌、粪肠球菌对青霉素类抗生素的耐药性与 β-内酰胺酶的产生呈正相关系。

荧光定量聚合酶链反应技术检测痰结核分枝杆菌DNA及其临床应用研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)技术在肺结核诊断中的临床价值。方法对144例活动性肺结核的痰及30例健康对照者的痰进行 FQ-PCR 检测,并与痰涂片检查法、改良罗氏培养法结果进行比较。结果 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率、痰涂片抗酸检查法阳性率、改良罗氏培养法阳性率分别为61.1%(88/144)、51.4%(74/144)、55.6%(80/144),以 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率为最高,FQ-PCR 检测特异性为100%。结论 FQ-PCR 技术检测痰结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,该方法快速、准确,对肺结核的诊断有一定价值。

初治肺结核患者外周血CD4^+/CD8^+T细胞、IgG/IgM抗体与感染程度的相关性

目的探索外周血CD4+,CD8+T淋巴细胞、免疫IgG,IgM抗体在初治肺结核患者外周血的改变及其结核杆菌感染程度的关系。方法选择72例初治肺结核患者和25例正常人,采用免疫金斑点渗滤法检测其血清抗结核抗体;分别用流式细胞术和淋巴细胞转化试验测定外周血T淋巴细胞的亚群水平。结果患者CD4+/CD8+T细胞水平较正常人低,CD4+/CD8+比值和结核易感性呈负相关;IgM抗体与CD8+T细胞水平呈正相关;机体感染结核杆菌的程度与外周血IgG抗体、CD8+T细胞水平呈正相关。结论初治肺结核患者外周血CD4+,CD8+T细胞免疫与IgG,IgM抗体免疫存在客观的关联,但其相互影响机制有待进一步研究。

ERCC1表达水平与晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效的相关性

目的:研究Ⅲb、Ⅳ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织内核苷酸切除修复交叉互补组1(excision repair cross complementation group1,ERCC1)基因mRNA表达水平与含铂类方案化疗疗效的相关性。方法:符合入选条件的患者56例,均为Ⅲb、Ⅳ期患者。所有的患者经皮肺穿刺或经纤支镜活检病理证实为NSCLC。化疗前利用RNA提取技术及RealtimeRT-PCR技术对其组织学标本进行ERCC1 mRNA相对定量分析。患者分别给予4～6个周期的含铂类方案化疗(吉西他滨/顺铂、紫杉醇/顺铂方案),对患者化疗后的总生存期(overall survival,OS)、肿瘤进展时间(time to progression,TTP)及化疗后反应率(response rate,RR)进行评估。结果:56例患者活检标本的ERCC1 mRNA相对于内控管家基因GAPDH mRNA表达的平均表达水平为6.1×103。以ERCC1 mRNA表达水平≥6.1×103的22例患者作为高表达组,以ERCC1 mRNA表达水平<6.1×103的34例患者作为低表达组。高表达组患者化疗后RR、OS及TTP分别为22.7%、(144.62±95.21)d及(104.25±89.78)d,与低表达组患者RR(55.9%)、OS[(432.45±134.43)d]、TTP[(278.56±104.34)d]比较,差异均有显著性(均P<0.05)。结论:ERCC1 mRNA表达水平是评估晚期NSCLC患者应用铂类药物化疗疗效的一个重要因素。

荧光定量PCR在结核分枝杆菌检测中的应用价值

目的比较荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)与抗酸染色、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,探讨FQ-PCR检测痰标本中结核分枝杆菌的应用价值。方法对311例临床确诊的肺结核病患者和40例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用FQ-PCR法、痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌。结果FQ-PCR、抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的阳性率分别为47.0%(146/311)、28.3%(88/311)、35.4%(110/311),特异性分别为100.0%、100.0%、95.2%,以FQ-PCR检测的阳性率最高。结论FQ-PCR是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。

流式细胞术在临床微生物学中的应用

流式细胞术是目前一种快速定量分析细胞和分选细胞的先进技术,具有速度快、精确度高、准确度好、计数细胞量大及多参数分析等特点,在临床已应用于微生物的药敏试验及其检测。目前,该技术虽处于初步阶段,但极具发展潜力。

结核抗体、腺苷脱氨酶与癌胚抗原检测对鉴别结核性和癌性胸腔积液的意义

目的探讨胸腔积液、血清结核抗体(TB-IgG)、腺苷脱氨酶(ADA)、癌胚抗原(CEA)联合检测对良恶性胸腔积液的诊断价值。方法对155例胸腔积液患者(A组110例是结核性,B组45例是癌性)采用斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)检测TB-IgG、电化学发光法检测CEA、酶速率法检测ADA。结果110例结核性胸膜炎患者胸腔积液、血清中TB-IgG阳性率分别是90.9%、80.9%,特异性分别是88.9%、91.1%;ADA活性测定分别是(52.3±24.21)U/L、(20.3±10.20)U/L,CEA在癌性胸腔积液、血清的检测值是(168.2±82.3)ng/mL、(16.2±2.61)ng/mL,与相应的对照组比较差异有显著性(P<0.01)。以胸腔积液CEA>10ng/mL、ADA>18.64U/L,4倍以上检测值有临床意义,结核抗体阴性/阳性,进行组合分析,可大大提高检测的特异性。结论胸腔积液和血清TB-IgG、ADA、CEA的联合检测对良恶性胸腔积液的诊断和鉴别诊断具有较好的临床意义。

DNA指纹技术检测耐多药结核分枝杆菌的应用研究

目的 应用结核分枝杆菌DNA指纹技术,了解耐多药结核分枝杆菌的基因型状况并探讨耐多药结核病的分子流行病学.方法 以结核分枝杆菌插入序列IS6110序列为模板,设计一对特异外向引物,建立一种结核分枝杆菌DNA指纹技术方法,对临床标本中分离的220株耐多药结核分枝杆菌进行DNA指纹基因分析.同时对实验数据进行聚类分析,进行耐多药结核病分子流行病学研究.结果 根据结核分枝杆菌DNA指纹图谱分析,220株耐多药结核分枝杆菌均产生特征DNA指纹图谱,DNA指纹图谱变异很大.每一菌株DNA指纹的拷贝数介于3至18之间.其中大部分菌株,即205株(93.2%)包含6～13个拷贝,平均为11个带.这205株DNA指纹图谱中,162株为特异的,提示它们在流行病学上是独立的.有58株(26.4%)指纹图谱组成了15个簇,每簇2～8株,它们的IDNA指纹图谱相同,可能代表了近期的传播.尤其是在此DNA指纹图谱中,其中分子量为200 bp扩增带频率最大,在220株耐多药结核分枝杆菌均出现.结论 结核杆菌DNA指纹技术检测可应用耐多药结核分枝杆菌DNA指纹图谱分型,并可用于耐多药结核病分子流行病学调查.

利用微流控芯片技术进行人类精子优选的效果分析

目的:通过使用微流控芯片技术对男性不育症患者的精子进行选择,观察该方法优选精子的效果。方法:选择80例男性不育症患者,选择其中精子活力a级+b级<35%的患者30例,分别采用自行设计和制造的微流控芯片进行优选以及采用改良后的上游法进行优选,对于剩余50例患者采用微流控芯片法进行优选,观察优选后精子活力、畸形率等参数。结果:50例患者经过微流控芯片优选后,精子活力显著提高,精子畸形率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。对于30例中度弱精子症患者两种方法优选后精子活力显著提高、畸形率显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),且微流控芯片法优于改良后上游法。结论:微流控芯片法优选精子效率高、操作简便、对精子几乎无损害,适合在临床辅助生殖中普及和推广。

知识分子健康体检人群幽门螺杆菌感染情况调查分析

目的 了解知识分子健康人群幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori,Hp）感染特征.方法 选择2013年8月至2013年11月知识分子健康体检人员作为调查对象,使用血清IgG抗体免疫比浊法检测Hp.结果 2038名体检人员中,Hp感染694人,感染率34.05％,其中女性感染阳性率52.72％,男性感染阳性率23.12％;年龄分布以31～40岁组Hp感染率最高,达42.68％;吸烟及经常饮酒人群感染率分别为57.36％及50.81％.结论 Hp在广州地区知识分子健康人群中感染率低于全国平均水平,对该人群防治重点在31～50岁在职人员.

宫颈上皮内瘤变中精子相关抗原9的表达及意义

目的：探讨精子相关抗原9（SPAG9）在各级别子宫颈上皮内瘤变（CIN）中的表达情况及其诊断价值。方法：收集广东省妇幼保健院病理科2011年12月～2013年6月病理诊断为CIN的宫颈上皮活检或手术标本，应用免疫组织化学两步法检测正常宫颈（20例）、CINI（30例）、CINII（34例）、CINⅢ（26例）宫颈上皮组织标本中SPAG9蛋白的表达。结果：@SPAG9蛋白在CINI～Ⅲ各组中的阳性表达率（91．18％～93．33％）均高于正常宫颈组（P均〈0．01），CINI、CINII及CINII组间蛋白阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。②SPAG9免疫反应评分，CINII组织中SPAG9蛋白的表达评分高于CINⅡ组织（P〈0．05），后者的表达评分又高于CINI组织（P〈0．05）。结论：SPAG9蛋白在CIN各级组织中均呈高表达，且表达强度与CIN的组织学分级相关，SPAG9蛋白可以作为宫颈上皮内瘤变的诊断标记物。

3种衣原体血清学标记物在输卵管性不孕症筛查中的价值

目的探讨衣原体IgG抗体(CT-IgG)、C反应蛋白(CRP)和衣原体热休克蛋白60的IgG抗体(C-HSP60 IgG)与输卵管性不孕症和衣原体(CT)感染的关系,探求更为准确的输卵管性不孕的初筛指标及其组合。方法选择经腹腔镜确诊的43例输卵管性不孕症患者,48例非输卵管性不孕症患者进行CT-IgG、CRP和C-HSP60 IgG检测,并对实验结果进行单个指标、两两联合和三者联合共7种筛查方法的分析。结果 CT-IgG、CRP和C-HSP60 IgG单项检测的敏感性和特异度分别为55.81%、2.38%、23.26%和91.67%、93.75%、77.08%;CT-IgG、CRP和C-HSP60 IgG两两联合检测的敏感性和特异度分别为55.81%、62.79%、23.26%和85.42%、68.75%、72.92%;CT-IgG、CRP和C-HSP60 IgG三项联合检测的敏感性和特异度分别为62.79%和64.58%。结论单项检测中以CT-IgG的阳性预测值和约登指数最高,CT-IgG在输卵管性不孕症初筛中的效能优于CRP和C-HSP60 IgG;联合检测中以CT-IgG+C-HSP60 IgG组合的临床诊断价值最高。该组合的敏感性达62.79%,阴性预测值达67.35%,是输卵管性不孕较为准确和经济的指标。

生化分析仪总胆汁酸试剂的携带污染对总二氧化碳测定的干扰分析

目的分析COBAS 400生化分析仪总胆汁酸(TBA)试剂的携带污染对409 nm酶法总二氧化碳(TCO2)测定的干扰,并提出消除措施。方法通过将TBA试剂各组分与TCO2校准液、TCO2质控液及患者血清按不同比例混合后,检测TCO2结果并进行分析。调整测试顺序,设置附加清洗程序,观察TCO2试剂稳定性。结果调整前试验标本检测结果低于预期值(理论计算值),按要求调整后,TCO2试剂稳定性提高,校准周期从1 d延长到7 d。结论 TBA试剂对409 nm酶法TCO2的测定产生携带污染,调整分析顺序,设定清洗程序,可有效提高试剂的稳定性与准确性。

广州市南沙区农村中老年男性健康现状调查

目的开展农村地区中老年男性健康现状调查,为中老年男性保健服务模式提供数据支持。方法于2014年12月~2015年11月期间采用整群抽样方法在广州市南沙区6个农村开展了中老年男性健康现状调查及普查,选取40~79岁中老年男性1134人,签署知情同意书,开展健康问卷调查、健康体检。结果 (1)40~79岁中老年男性中吸烟、饮酒、高嘌呤饮食人群比例较高,健康意识较差,缺乏对自我健康状况的正确评价及认识。(2)当地中老年男性中肥胖症、高血压、高三酰甘油、高胆固醇、高尿酸血症、疑似和确诊糖尿病比例均较国内报道水平高,分别为12.88%(按BMI标准)、40.79%、22.65%、73.98%、43.19%、11.15%。(3)前列腺钙化灶检出率、良性前列腺增生(BPH)、PSA筛查阳性率分别为26.31%、14.20%、5.06%,随着年龄增加的特征与国内外报道一致,但也具有地区特征。结论针对严重危害男性中老年健康的常见病、慢性病、具有地区特征的高发疾病,通过问卷和常规普查,可以为今后开展健康教育及制订中老年男性保健相关服务措施提供循证医学依据。

广州地区婚前孕前人群珠蛋白生成障碍性贫血基因检测结果分析

目的了解广州地区婚前和孕前人群珠蛋白生成障碍性贫血的基因突变类型和构成比,并对其防控效果进行探讨。方法选取2018年参加广州市免费婚前和孕前优生健康检查项目中血细胞检测初筛阳性夫妇12572对,进行血红蛋白电泳及基因检测。随访高风险家庭至孕后,并追踪其产前诊断结果。结果①经基因确诊珠蛋白生成障碍性贫血携带者10209例,其中α-为7026例,β-为2805例,αβ复合型为378例。②α-珠蛋白生成障碍性贫血基因以缺失型为主,基因型以--SEA/αα为主,占64.59%,β-珠蛋白生成障碍性贫血基因型以CD41-42/N为主,占38.97%。③在αβ复合型珠蛋白生成障碍性贫血携带者中共检出46种基因型,以--SEA/αα和CD41-42/N双重杂合子最常见,占19.84%。④478个高风险家庭中已孕197个,最终确诊重型珠蛋白生成障碍性贫血胎儿42例,均知情选择终止妊娠。结论广州地区是珠蛋白生成障碍性贫血的高发区,对婚前和孕前人群开展珠蛋白生成障碍性贫血筛查,可更有效预防重型珠蛋白生成障碍性贫血患儿出生。

CD-610型血细胞计数分类仪WBC/HGB测试堵孔后重测对实验结果的影响

近年来,血液分析仪,特别是多参数血液分析仪广泛应用于临床,不但为临床提供更多的实验指标,同时提高了工作效率.使用过程中一旦出现问题,影响实验结果的准确性.其中堵孔(clog)是CD-610型血细胞计数分类仪常发生的问题.为了解堵塞对其准确性的影响,作者对同一标本进行复测和重采复测.现将结果报道如下.

广州市出生缺陷干预工程标本库的建立与管理

目的开发广州市出生缺陷干预工程标本管理信息系统,探讨标本库的建立与管理方法。方法采集干预人群的全血标本,按分子生物学要求分装处理,于-80℃低温冷冻保存。结果采集和保存广州市出生缺陷干预工程血液标本49 950份,包括病残儿鉴定血液880份、免费孕前检测血液1 000份,实现了对标本的统一规范化管理,使有限的临床科研资源得到充分有效的利用。结论标本库的建立对广州市出生缺陷干预工程管理工作及科研水平的提升起到了巨大的推动作用。

二胎备孕男性精液质量与年龄、体质量指数以及肥胖生化指标的相关性分析

目的:探讨广州地区二胎备孕男性的年龄、体质量指数(BMI)以及肥胖生化指标对精液质量的影响。方法:对2017年8月15日至2018年7月18日在广州市妇女儿童医疗中心就诊咨询准备生育二胎的632例男性进行问卷调查,所有参与者采取静脉血进行脂代谢等相关指标检测,并按照WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)的要求进行精液常规分析以及改良巴氏染色后精子形态分析,分析年龄、BMI、脂代谢指标、生活环境、职业等因素与精液质量的相关性。结果:年龄、BMI、取精季节、生活环境、职业等因素均可影响男性精液的质量。年龄与前向运动精子百分率呈负相关(r=-0.109,P<0.05);BMI与精液量呈正相关(r=0.103,P<0.05),并且与正常形态精子百分率呈负相关(r=-0.138,P<0.05);高密度脂蛋白(HDL)与前向运动精子百分率呈负相关(r=-0.168,P<0.01),与不活动精子百分率呈负相关(r=-0.135,P<0.05);低密度脂蛋白(LDL)与精液量呈明显负相关(r=-0.124,P<0.01),与前向运动精子百分率呈负相关(r=-0.127,P<0.05),与不活动精子百分率呈正相关(r=0.140,P<0.01),与精子浓度呈负相关(r=-0.121,P<0.05),与精子总数呈明显负相关(r=-0.210,P<0.01);进一步多因素回归分析显示:BMI和LDL是精液量的独立影响因素;尿酸(UA)是液化时间的独立影响因素;年龄、HDL和LDL是前向运动精子百分率的独立影响因素;年龄、HDL是不活动精子百分率的独立影响因素;LDL是精子总数的独立影响因素;而BMI和TG则是正常形态精子百分率的独立影响因素。结论:年龄、BMI、取精季节、生活环境、职业等因素均可能影响男性精液的质量。

自制铕标记Free β-hCG—TRFIA试剂盒的临床应用研究

目的对自制铕标记Freeβ—hCG—TRFIA定量测定试剂盒进行临床应用研究，为该试剂盒的临床应用提供科学依据。方法收集血清样本1000份，用自制试剂盒进行测定，对照试剂盒选用PE公司钐标记Free β-hCG TRFIA试剂盒，复核试剂选用美国Diognastic Automation公司ELISA试剂盒，获取相关目标实验数据，进行“符合率”、“相关性”等统计学分析。结果以PE公司钐标记法为对照实验，自制试剂盒的高值符合率为78．4％；低值符合率为100％，正常值符合率为95．1％，总符合率为93．8％；两种试剂盒测定值相关性良好，相关系数为0．985。结论自制试剂盒临床检测性能与现行临床广泛应用的方法相仿，可以满足临床应用的需要。

三种红细胞指标在地中海贫血出生干预筛查中的价值

目的:探讨平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、红细胞计数与平均红细胞体积比值(RBC/MCV)在地中海贫血出生干预筛查中的应用价值,探求更准确的地中海贫血出生干预的初筛指标。方法:选择经分子生物学技术确诊的426例地中海贫血携带者,56例非地中海贫血携带者以及464例健康对照者进行MCV、MCH和RBC/MCV检测,并对实验结果进行单个指标、两两联合和三者联合共7种筛查方法的分析。结果:取MCV<82fL、MCH<26pg、RBC/MCV﹥5.9为截断值,MCV、MCH和RBC/MCV单项检测的敏感度和特异度分别为95.77%、91.78%、97.42%和80.38%、83.27%、82.88%;MCV与MCH、RBC/MCV两两联合检测的敏感度和特异度分别为95.77%、98.59%、98.12%和80.38%、80.19%、81.15%;MCV、MCH和RBC/MCV三项联合检测的敏感度和特异度分别为100%和80%。结论:单项检测中以RBC/MCV的阳性率最高,RBC/MCV在地中海贫血的筛查评价中优于MCV和MCH;MCV+MCH+RBC/MCV联合检测是地中海贫血出生干预筛查中更为准确的指标。