参杞强精颗粒对慢性疲劳综合征脾肾阳虚证大鼠免疫调节作用研究

目的:探讨参杞强精颗粒对慢性疲劳综合征(CFS)脾肾阳虚证模型大鼠的影响以及免疫调节作用。方法:将50只无特定病原体(SPF)级健康雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,参杞强精颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组,采用游泳力竭实验造成大鼠体力疲劳,慢性束缚应激造成大鼠心理疲劳,同时给予番泻叶煎煮液灌胃造成脾肾阳虚证候,构建CFS脾肾阳虚证大鼠模型,造模成功后分别按照各组剂量灌胃,连续给药21 d后,测定各组大鼠的胸腺和脾脏指数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)浓度以及细胞因子白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)含量,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞法检测各组大鼠外周血T淋巴细胞亚群分布情况。结果:行为学结果显示,模型大鼠的体质量增长缓慢,精神萎靡,摄食水量减少,活动减少,便质稀软,力竭游泳时间减少,悬尾静止时间增加。药物干预后,与模型组比较,各给药组大鼠精神状态、体质量、摄食水量均显著改善,力竭游泳时间增加、悬尾静止时间减少(P<0.01或P<0.05);参杞强精颗粒各剂量组能显著提升大鼠胸腺和脾脏指数,提高IgG、Ig M、IgA浓度和IL-2、IL-6、IFN-γ的含量,显著提高脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,也能提高CD3+、CD4+T淋巴细胞百分率和CD4+/CD8+T比值,降低CD8+T淋巴细胞百分率,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:参杞强精颗粒能显著改善慢性疲劳综合征脾肾阳虚证大鼠免疫功能,缓解疲劳症状,且具有很好的免疫调节作用。

参杞强精颗粒成型工艺优化与稳定性研究

目的探讨参杞强精颗粒成型工艺优化方案,并考察其成品稳定性。方法采用单因素试验考察湿法制粒工艺。以浸膏粉与辅料的配比(A)、乙醇浓度(B)、润湿剂用量(C)为主要影响因素,以吸湿率、溶化率、成型率、休止角为评价指标,采用L9(34)正交试验法优选参杞强精颗粒成型工艺。同时,考察参杞强精颗粒的长期稳定性和加速稳定性。结果正交试验法优选的最佳成型工艺为浸膏粉与辅料配比为1∶1,乙醇浓度为65%,0.3%甜菊素的颗粒口感较好,润湿剂用量为15~20 mL,生产环境的相对湿度应控制在70%以下。在稳定性考察过程中加速试验和长期试验均符合规定。结论优化后的成型工艺方法科学合理,稳定可行,操作简便,所制得颗粒符合各项指标的相关规定,且稳定性好,可为参杞强精颗粒的生产及其后续研究开发提供实验依据。

葫芦茶苷对四氯化碳致肝纤维化模型小鼠的保护作用及机制研究

目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化模型小鼠的保护作用,并探讨其可能机制。方法:将昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(阳性对照,0.2 mg/kg)和葫芦茶苷低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg),每组10只。除正常组小鼠腹腔注射橄榄油外,其余各组小鼠均腹腔注射10%CCl4橄榄油溶液(5 m L/kg)以复制肝纤维化模型,每周2次,连续8周。自第3周起,各给药组小鼠灌胃相应药物,正常组和模型组小鼠均灌胃等体积2%羧甲基纤维素钠溶液,每日1次,连续6周。采用酶联免疫吸附测定法检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、白细胞介素6(IL-6)的含量;采用分光光度法、逆转录-聚合酶链反应法、Western blotting法分别检测其肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、TIMP-2 mRNA以及基质金属酶2(MMP-2)、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,模型组小鼠ALT、AST、HA、IL-6、MDA、Hyp含量,Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 m RNA以及MMP-2、TGF-β1蛋白的表达水平均显著升高,SOD、GSH-Px含量均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠ALT、AST、HA、IL-6、MDA、Hyp含量,Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA以及MMP-2、TGF-β1蛋白的表达水平均显著降低,SOD、GSH-Px含量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对肝纤维化模型小鼠具有肝保护和肝纤维化抑制的作用,其机制可能与抑制脂质过氧化和胶原蛋白合成,下调Col-Ⅰ、TIMP-1、TIMP-2 mRNA以及MMP-2、TGF-β1蛋白的表达等有关。

葫芦茶苷对肝损伤大鼠肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响及保肝作用研究

目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠的保护作用及对肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,肝损伤模型组,阳性对照组(水飞蓟宾胶囊),葫芦茶苷低中高剂量组(3、6、12 mg·kg-1),每日灌胃给药1次,连续给药14 d,正常组与模型组每天灌服等体积的生理盐水,末次灌胃给药1 h后,除空白对照组外,皮下注射CCl4原液建立急性肝损伤大鼠模型,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和γ-氨基酰转肽酶(γ-GT)、胆碱酯酶(CHE)、总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL);检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和肝微粒体一氧化氮(NO)的含量,并检测肝组织Caspase-3,Caspase-8活性。结果:与模型组比较,葫芦茶苷能降低血清ALT,AST,LDH,γ-GT活性及TBA和TBIL含量(P<0.05或P<0.01),升高血清CHE含量;降低肝微粒体NO含量和MDA含量,增加肝组织SOD,GSH-PX活性和GSH含量,并降低肝组织Caspase-3,Caspase-8的活性(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对四氯化碳致急性肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用以及下调Caspase-3和Caspase-8的活性有关。

木棉花总黄酮对CCl_4致肝纤维大鼠ColⅠ表达的影响

目的研究木棉花总黄酮(TFG)对CCl4致肝纤维大鼠Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)mRNA和ColⅠ蛋白表达的影响。方法采用50%CCl4花生油溶液灌胃诱导Wistar大鼠肝纤维化造模,将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只随机分成5组,分别为模型对照组(模型组),秋水仙碱阳性对照组(阳性组),木棉花总黄酮高、中、低剂量组,另外设空白组,空白组和模型组给予等剂量的生理盐水,每日灌胃给药1次,连续4周。末次给药24 h后处死大鼠,RT-PCR检测肝组织中ColⅠmRNA的表达,用免疫组化方法观察肝组织ColⅠ蛋白质的表达,运用实时荧光定量PCR方法对肝组织ColⅠmRNA表达进行相对定量。结果 RT-PCR和实时荧光定量PCR结果均表明TFG能显著下调ColⅠmRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。免疫组化结果显示,TFG能显著降低肝组织ColⅠ蛋白质的表达(P<0.05,P<0.01),且表现一定的剂量依赖性。结论 TFG对CCl4诱导的肝纤维大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其下调ColⅠmRNA及蛋白表达有关。

葫芦茶乙醇提取物对肝损伤小鼠的保护作用

目的研究葫芦茶乙醇提取物(TTOE)对四氯化碳(CCl4)诱导肝损伤小鼠的保护作用。方法将昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、联苯双酯滴丸组和葫芦茶乙醇提取物小、中、大剂量组,除正常对照组外。其他各组建立化学性肝损伤模型,观察肝脏指数,脾脏指数和胸腺指数,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)活性,血清清蛋白(Alb)含量以及总抗氧化能力(T-AOC),检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并测定还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和肝微粒体一氧化氮(NO)及肝微粒体细胞色素P450(Cyt P450)含量。结果与模型对照组比较,葫芦茶乙醇提取物各剂量组肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数降低,其中葫芦茶乙醇提取物大剂量组分别为57.13±0.71,32.44±0.24,27.78±0.16,与对照组比较均差异有统计学意义(P<0.01);葫芦茶乙醇提取物各剂量组血清ALT、AST、LDH和ALP活性均显著降低,其中葫芦茶乙醇提取物大剂量组分别为65.59±8.23,141.38±15.52,2 462.4±253.6,172.51±20.64,与对照组比较均差异有统计学意义(P<0.01);葫芦茶乙醇提取物各剂量组血清Alb含量及T-AOC水平升高肝微粒体NO含量和MDA含量降低,肝组织SOD、GSH-PX活性、GSH含量及Cyt P450含量增加(P<0.05或P<0.01)。结论 TTOE对CCl4所致肝损伤小鼠具有保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、降低肝微粒体NO含量和抑制脂质过氧化作用有关。

参杞强精颗粒质量标准提升研究

目的:提高参杞强精颗粒内控标准,更好地控制颗粒质量。方法:新增黄芪和续断的薄层色谱鉴别,采用高效液相色谱法对淫羊藿苷、毛蕊异黄酮苷的定量测定。结果:黄芪和续断的色谱斑点清晰,阴性无干扰;淫羊藿苷、毛蕊异黄酮苷分别在0.31~3.1μg/μL、0.0344~0.344μg/μL范围内呈良好线性关系,平均加样回收率分别为103.43%(RSD=1.77%)、92.56%(RSD=1.43%)。结论:黄芪和续断的薄层色谱鉴别方法专属性较强;淫羊藿苷和毛蕊异黄酮苷的含量测定方法准确性较高,为参杞强精颗粒的质量提升提供了依据。

葫芦茶苷体内抗鸭乙型肝炎病毒及保肝作用研究

目的考察葫芦茶苷对鸭乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的体内抑制作用及其保肝作用。方法以广西麻鸭为实验动物,建立感染鸭乙肝病毒的鸭乙肝动物模型,随机分为模型组、拉米夫定阳性对照组和葫芦茶苷低、中、高剂量组,每组10只,每日灌胃给药1次,连续给药14天,模型组每天灌服等体积的生理盐水。采用ELISA法检测鸭血清乙型肝炎表面抗原(DHBsAg)和鸭血清乙型肝炎E抗原(DHBeAg)的含量。采用实时荧光定量PCR法检测鸭血清鸭乙肝病毒DNA的含量。并检测鸭血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的变化,检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。苏木精-伊红染色法(HE)观察鸭肝组织病理学变化。结果与模型组比较,葫芦茶苷各剂量组能显著降低血清DHBsAg和DHBeAg的滴度以及DHBV DNA的含量(P<0.05或P<0.01)。而且能降低鸭血清ALT、AST活性和MDA含量,增加肝组织SOD、GSH-PX活性和GSH含量。病理学检查结果提示葫芦茶苷能显著减轻肝细胞损伤程度。结论葫芦茶苷对鸭乙型肝炎病毒具有体内抑制作用,对DHBV引起肝损伤具有保护作用。

葫芦茶苷对大鼠肝星状细胞增殖和细胞外基质的影响及机制研究

目的研究葫芦茶苷对大鼠肝星状细胞增殖和细胞外基质分泌的影响,并探讨其可能机制。方法以大鼠肝星状细胞(HSC-T6)为体外细胞模型,采用CCK-8法检测葫芦茶苷对HSC-T6增殖的抑制作用,ELISA法测定细胞上清液中Hyp、HA和TIMP-1的含量,FQ-PCR检测Col I、TGF-β1、α-SMA、PDGF-BB mRNA的表达,Western blot法检测细胞内TGF-β1、α-SMA和PDGF-BB蛋白的表达。结果葫芦茶苷对HSC-T6细胞的增殖有较强的抑制作用。与空白组比较,葫芦茶苷各剂量组能降低细胞上清液中Hyp、HA和TIMP-1的含量,下调细胞内Col I、TGF-β1、α-SMA、PDGF-BB mRNA的表达,而且能降低细胞内TGF-β1、α-SMA和PDGF-BB蛋白的表达。结论葫芦茶苷体外具有抗肝纤维化作用,其机制可能是抑制HSC-T6细胞的增殖,下调TGF-β1、α-SMA和PDGF-BB蛋白的表达,从而减少肝细胞外基质的合成和沉积。

参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤的作用

目的探讨参杞强精颗粒对过氧化氢H_(2)O_(2)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激损伤的作用。方法以小鼠睾丸间质细胞为细胞模型,用MTT法检测参杞强精颗粒对正常TM3的细胞毒性作用;以500µmol/L H_(2)O_(2)诱导损伤TM3细胞4 h后复制氧化应激损伤模型,采用CCK-8法检测不同浓度参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)损伤TM3细胞增殖活力的影响;分别给予参杞强精颗粒(0.4、0.8和1.6mg/mL)干预处理24h后,用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中睾酮分泌水平、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量及谷胱甘肽-S转移酶(GST)的活性;同时检测细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(TAOC)的含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测睾酮合成酶类固醇合成快速调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、17β-羟基固醇脱氢酶(17β-HSD)mRNA表达。结果参杞强精颗粒在浓度为0.05~2.50 mg/mL时对正常TM3细胞无毒性作用。与H_(2)O_(2)损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高TM3细胞增殖活率(P<0.05)。与H_(2)O_(2)模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组提高细胞上清液中睾酮水平和NO含量,增加GST活性,降低LDH和8-OHdG含量(P<0.05)。与H_(2)O_(2)损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组降低细胞内ROS、MDA含量,同时增强CAT、SOD和TAOC的活性(P<0.05)。与H_(2)O_(2)模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高睾酮合成酶StAR、P450scc、17β-HSD mRNA相对表达量(P<0.05)。结论参杞强精颗粒对H_(2)O_(2)诱导睾丸间质细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能通过清除氧自由基、抗氧化应激损伤及促进睾酮合成有关。

木棉花化学成分及药理作用研究进展

对木棉花化学成分及其药理作用研究进展做系统分析,为其深入开发与利用提供参考依据。文章对大量国内外相关文献进行查阅、整理与分析,并对其进行归纳与综述。木棉花的化学成分主要有挥发油类、黄酮类、苯丙素类、甾体类、脂肪酸类、微量元素、三帖类化合物、酚酸类化合物等,具有抗炎抗菌、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、保肝等多种药理作用。在医药卫生、保健品、食品和日化品行业应用日趋广泛,但有关木棉花化学成分研究还不够深入和全面,药理作用的机制目前并不十分明确,建议将其化学成分研究和药理活性研究相结合,多层次、多方位、多靶点深入探讨其作用机制和功效,为进一步深入开发利用木棉花提供依据。

白花丹醌对瘦素刺激人肝星状细胞转化生长因子-β_1表达的影响

目的研究白花丹醌对瘦素刺激体外培养人HSC-LX2TGF-β1 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养HSC-LX2,瘦素(leptin)刺激24h,各药物与细胞共孵育24h后,采用荧光PCR检测各组TGF-β1 mRNA的表达和免疫组织化学方法检测TGF-β1蛋白表达情况。结果与leptin组比较,白花丹醌各剂量组作用24h后,HSC-LX2细胞中TGF-β1 mRNA的水平明显降低,尤以中、高剂量组明显(P<0.01);免疫组化结果显示白花丹醌各剂量组对HSC-LX2细胞TGF-β1蛋白表达有一定的抑制作用,且作用呈剂量依赖性。结论白花丹醌抗肝纤维化作用机制之一是从mRNA和蛋白水平抑制TGF-β1表达,从而抑制HSCECM的合成,发挥抗肝纤维化作用。

六月青皂苷对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响

目的研究六月青皂苷(LYQS)对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)所致大鼠肝纤维化的治疗作用,并探讨其作用机制。方法 Wistar大鼠随机分成两组,模型组大鼠采用50%CCl4花生油溶液灌胃造模,共7周,空白对照组用生理盐水代替。将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只,随机分成5组,分别给予相应药物进行干预,1次/d,连续4周。末次给药24 h后处死大鼠,采集血清及肝组织,检测大鼠血清中ALT、AST,肝组织中Hyp、SOD、MDA和GSH-Px的水平。结果各剂量的六月青皂苷及阳性药能显著降低大鼠血清中CCl4所致异常升高的ALT(P<0.01);高、中剂量六月青皂苷及阳性药可降低大鼠血清中CCl4所致异常升高的AST(P<0.01);同时,各剂量的六月青皂苷能显著提高肝组织中异常降低的SOD、GSH-Px水平(P<0.05或P<0.01),并显著降低异常升高的Hyp、MDA含量(P<0.05或P<0.01)。随着药物浓度的增加,其作用逐渐增强,呈现明显的量效反应关系。结论六月青皂苷对大鼠化学性肝损伤具有一定程度的治疗作用,其机制可能与其清除自由基,抑制脂质过氧化有一定的关系。

轻微型肝性脑病中医病因病机探析

轻微型肝性脑病在肝硬化患者中有较高发病率,但目前临床上存在套用显性肝性脑病中医病因病机来诊治本病的误区。研究组在长期临床实践基础上认为本病病因病机应至少包含如下几个方面:长期肝硬化基础不可忽视,脾胃功能日渐衰微应作为发病基础,痰浊上蒙心神脑窍是致病关键,肺与大肠肃降失常是其重要病机,总结起来本病的基本病机可概括为:脾胃衰微、痰浊盘踞、上蒙心神脑窍。

六味醒神颗粒治疗轻微型肝性脑病临床研究

目的:观察六味醒神颗粒治疗轻微型肝性脑病的临床疗效。方法:将诊断为轻微型肝性脑病的肝硬变患者56例,随机分为对照组和治疗组各28例,两组患者均采用西医基础治疗,对照组使用乳果糖口服治疗,治疗组给予六味醒神颗粒治疗,连续治疗14 d,在治疗第7天,第14天检测两组患者NCT-A和DST分值变化情况。结果:连续使用中药治疗7 d后,治疗组患者NCT-A分值和DST分值均明显改善,与治疗前比较差异具有统计学意义(P<0.05),14 d后NCT-A分值和DST分值仍持续好转,但与乳果糖治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:六味醒神颗粒可有效改善轻微型肝性脑病患者精神神经功能障碍,短期疗效与乳果糖治疗疗效基本相当。

含羞草总黄酮对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究含羞草总黄酮(TFM)对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法用四氯化碳建立小鼠肝损伤模型,相应药物灌胃后测定小鼠血清ALT、AST的活性,血清白蛋白(Alb)含量以及总抗氧化能力(T-AOC);并测定肝匀浆丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,同时观察肝脏组织病理学变化。结果与模型对照组相比,含羞草总黄酮(TFM)各剂量组ALT、AST和MDA含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),Alb含量和T-AOC活性均明显增加(P<0.05或P<0.01),SOD活力明显增强(P<0.05或P<0.01)。结论含羞草总黄酮(TFM)能明显改善肝组织病理损伤程度,对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用。

葫芦茶苷通过调控Nrf2/HO-1信号通路抑制肝星状细胞增殖活化的作用

目的分析葫芦茶苷对肝星状细胞(HSC)增殖活化的抑制作用,并基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路探讨其可能的作用机制。方法将人肝星状细胞系LX-2细胞分为空白对照组、模型组和葫芦茶苷不同剂量组。除空白对照组外,其余各组加入含转化生长因子β1(TGF-β1)的培养液使细胞增殖活化;刺激24 h后,葫芦茶苷不同剂量组加入相应剂量的葫芦茶苷干预24 h。检测各组LX-2细胞的增殖情况,细胞上清液Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,以及细胞中α-SMA、ColⅠ、Nrf2、HO-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果(1)与空白对照组比较,模型组细胞增殖明显(P<0.05);与模型组比较,葫芦茶苷各剂量组LX-2细胞的增殖均受到抑制,且随着药物剂量的增加抑制效果越明显(均P<0.05)。选取抑制率适宜的剂量20、40、80μg/mL(葫芦茶苷低、中、高剂量组)进行后续实验。(2)与空白对照组比较,模型组细胞上清液ColⅠ、ColⅢ和α-SMA表达水平升高,α-SMA和ColⅠ的mRNA和蛋白表达水平上调,Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白表达水平下调(均P<0.05);与模型组比较,葫芦茶苷各剂量组细胞上清液ColⅠ、ColⅢ和α-SMA表达水平降低,α-SMA和ColⅠ的mRNA和蛋白表达水平下调,Nrf2和HO-1 mRNA和蛋白表达水平上调(均P<0.05);葫芦茶苷低、中、高剂量组细胞上清液ColⅠ和α-SMA表达水平、细胞中ColⅠ的mRNA表达水平依次降低,Nrf2和HO-1蛋白表达水平依次升高(均P<0.05)。结论葫芦茶苷可显著抑制HSC的活化与增殖,具有抗肝纤维化的作用,其可能是通过调节Nrf2/HO-1信号途径的表达而发挥作用。

白花丹醌对大鼠肝星状细胞活性氧及TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的 研究白花丹醌对大鼠原代分离肝星状细胞(HSC)活性氧(ROS)水平、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达的影响。方法 分离原代大鼠HSC,接种活化期HSC,进行α-SMA免疫荧光鉴定,分为空白组、TGF-β1组、NADPH氧化酶抑制剂组(DPI)、白花丹醌低、中、高剂量(2、4、8 μmol·L -1 )组。MTT检测白花丹醌对HSC增殖的影响;显微镜下观察白花丹醌对HSC形态学的影响;荧光探针法测定HSC内ROS表达水平;Western blot检测HSC中Smad2/3、p-Smad2/3和Smad7蛋白表达。结果 经α-SMA免疫组织荧光鉴定,阳性率达91%,表明获得高纯度的大鼠原代HSC。MTT测定白花丹醌最佳给药浓度为2、4、8 μmol·L -1;DPI组和白花丹醌各浓度组可不同程度下调HSC内ROS的表达;Western blot结果显示,与模型组比较,DPI和白花丹醌给药组Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白表达降低,Smad7蛋白表达增加。结论 白花丹醌可能是通过下调ROS水平,进而降低Smad2/3和p-Smad2/3的表达,从而发挥抗HSC活化的作用。

参杞强精颗粒制备工艺优化及质量标准的建立

采用正交试验法优化参杞强精颗粒水煎煮工艺,并采用单因素试验确定最佳制剂成型工艺。采用薄层色谱法(TLC)对处方中的淫羊藿、五味子药材进行定性鉴别,初步建立了参杞强精颗粒的质量标准。结果表明,最佳提取工艺为药材加10倍量水,煎煮提取3次,每次1.5 h;最佳成型工艺为稠膏与糊精比例1∶1,65%乙醇为润湿剂,0.3%甜菊素为矫味剂,所得颗粒溶化性、成型性好,口感适宜;淫羊藿、五味子定性鉴别的斑点清晰,鉴别方法简单可行、专属性强,可作参杞强精颗粒质量的内控标准。

葫芦茶水提物镇咳祛痰平喘作用的实验研究

目的:研究葫芦茶水提取物镇咳、祛痰、平喘的药效学作用。方法:分别以昆明种小鼠、Wistar大鼠和豚鼠为实验动物,采用小鼠氨水引咳法和豚鼠枸橼酸引咳法观察葫芦茶水提物的镇咳作用,采用小鼠酚红祛痰法和大鼠毛细管祛痰法观察其祛痰效果,采用豚鼠组胺引喘法观察其平喘作用。结果:与模型组比较,葫芦茶水提物高、中剂量组对浓氨水致小鼠咳嗽反应的咳嗽潜伏期显著延长,2 min内咳嗽次数显著减少(P<0.05),而葫芦茶水提物低剂量组效果不明显(P>0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组对枸橼酸致豚鼠咳嗽反应的咳嗽潜伏期显著延长,5 min内咳嗽次数显著减少(P<0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组小鼠的气管段酚红排泄量显著增加(P<0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组大鼠的排痰量显著增加(P<0.05);葫芦茶水提物高、中低剂量组可延长组胺致豚鼠哮喘潜伏期(P<0.05)。结论:葫芦茶水提物具有镇咳、祛痰、平喘的作用。