TRPC1与BK-α的表达对大鼠糖尿病肾病的影响

目的 探究瞬时受体电位C1(transient receptor potential channel 1,TRPC1)蛋白和大电导钙离子激活钾通道α亚单位(large conductance Ca^(2+)-activated K^(+)channel α subunit,BK-α)蛋白对大鼠糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组(n=15)和模型组(n=15)。利用高脂饲料和链脲佐菌素(streptozocin,STZ)构建DKD模型。采用血糖分析仪检测大鼠血糖变化;采用全自动生化分析仪检测大鼠肾功能水平;HE染色检测肾组织的病理变化以确定造模成功。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹分别检测肾组织TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白表达水平;免疫组化检测TRPC1和BK-α的分布和表达情况。结果 模型组大鼠空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rates,UAER)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(creatinine,Cr)均显著高于对照组(P <0.01);模型组大鼠肾小管内壁细胞出现膨胀现象,部分细胞脱离;可见肾小管发生病变或死亡;此外,在许多肾小管及肾间质区域发现有中性白细胞及其残骸;以上HE染色结果提示,DKD模型复制成功。TRPC1和BK-α在肾小球部位最为丰富,且模型组大鼠肾组织中TRPC1和BK-α的mRNA和蛋白水平都显著高于对照组(P <0.05)。结论 大鼠糖尿病肾病影响TRPC1和BK-α在肾组织中的分布和表达。

儿童肌部室间隔缺损的介入治疗研究

目的探讨应用Cardi-O-Fix Plug封堵器治疗儿童肌部室间隔缺损(muscular ventricle septal defect,mVSD)的有效性和安全性。方法将昆明医科大学第一附属医院从2015年7月至2021年6月心内科收治的14例mVSD患儿作为研究对象。分为实验组(14例)和对照组(10例),实验组采用Cardi-O-Fix Plug封堵器进行封堵,对照组采用Cardi-O-Fix mVSD封堵器进行封堵。术后1d以及随访1个月、3个月、6个月采用经胸超声心动图和心电图评价封堵疗效及并发症的发生情况。结果24例患儿中22例成功封堵,2例封堵失败(实验组和对照组各1例),实验组成功率92.8%(13/14),对照组成功率90.0%(9/10)。实验组的平均手术时长(71.93±14.85)min,对照组的平均手术时间时长(90.70±19.78)min,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组和对照组在术中及随访期间均未出现严重并发症。比较不同时间点2组的心脏超声指标(包括左室射血分数、左室舒张末期内径以及肺动脉压),差异均无统计学意义(P>0.05)。结论采用Cardi-O-Fix Plug封堵器在经皮导管封堵心尖部及小梁部的儿童mVSD手术安全有效,短期及中长期发生心律失常的概率低。

昆明山海棠提取物对血管平滑肌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨昆明山海棠提取物 (THW 4 )对离体血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖及凋亡的影响。方法培养家兔主动脉平滑肌细胞 ,加入不同浓度的THW 4进行处理 ,用MTT法测定细胞生长曲线 ,以AnnexinV FITC/PI双标记、透射电镜、原位末端标记法检测细胞凋亡。结果THW 4可以明显抑制VSMC增殖 ,呈剂量和时间依赖性 ,作用 4 8h的半有效抑制浓度 (IC50 )为 15 .6 μg/L ;VSMC在含 10～ 10 0 μg/LTHW 4的培养液中孵育 5 6h ,可检测到细胞早期凋亡 ,且凋亡率随THW 4浓度增加而升高 ;延长孵育时间至 72h ,透射电镜下可观察到典型的凋亡细胞形态学改变 ,原位末端标记法显示DNA片段化增多 ,有核碎裂、固缩等改变 ;细胞周期时相分布显示THW 4主要阻滞VSMC于G2 /M期。结论THW 4能有效抑制体外培养的VSMC增殖及诱导其凋亡 ,提示THW

20(R)-人参皂苷Rg_3对肿瘤坏死因子-α诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨20(R)-人参皂苷Rg3对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)损伤的保护作用及其机制。方法用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导HUVEC损伤,采用噻唑蓝(MTT)法观察20(R)-人参皂苷Rg3对HUVEC活性的影响;Fura-2/AM荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定培养的细胞上清液中组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,t-PA)、1型纤溶酶原激活物抑制物(type-1plasminogen activator inhibitor,PAI-1)浓度的变化。结果 (1)TNF-α损伤HUVEC的条件为:TNF-α的质量浓度为20μg/L,损伤时间为24h。(2)20μg/L TNF-α可显著降低HUVEC的吸光度A值,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);而10～80μmol/L的20(R)-人参皂苷Rg3处理后再加入TNF-α的各组细胞吸光度A值与模型组比较,均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)HUVEC受到TNF-α的刺激后细胞内游离钙浓度明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);用10～80μmol/L的20(R)-人参皂苷Rg3预处理,则TNF-α诱导的内皮细胞细胞内游离钙浓度升高的幅度均显著降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01),其半数抑制浓度为67.2μmol/L。(4)TNF-α20μg/L刺激内皮细胞24h后,与对照组比较,培养上清t-PA浓度显著降低,PAI-1浓度明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);20～80μmol/L的20(R)-人参皂苷Rg3预处理后,细胞培养上清中t-PA浓度明显升高,同时可降低PAI-1的分泌,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01),其抑制PAI-1浓度的半数抑制浓度为36.9μmol/L。结论 20(R)-人参皂苷Rg3对TNF-α诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机理可能与降低细胞内钙离子浓度、抑制PAI-1产生和提高t-PA水平密切相关。

室间隔缺损经导管封堵术中及术后并发心律失常的临床分析

目的:分析室间隔缺损(VSD)封堵治疗术中、术后并发的心律失常的类型,探讨其发生的原因及防治措施。方法:选择2003年1月至2006年10月在我科行封堵治疗的115例VSD患者,结合临床资料、心电图、心脏超声、心血管造影资料及随访结果,分析封堵术中及术后并发心律失常的类型、相关因素及转归。结果:术中出现三度房室传导阻滞(Ⅲ°AVB)2例,室性心动过速2例;术后并发各种类型的传导阻滞共37例,其中Ⅲ°AVB8例、不完全性右束支传导阻滞(IRBBB)14例,完全性右束支传导阻滞(CRBBB)5例,完全性左束支传导阻滞(CLBBB)4例,左前分支传导阻滞(LABBB)6例。分析其发病原因,均与封堵器直径≥10mm有密切相关性,而与合并膜部瘤及操作时间无关。结论:心律失常是VSD封堵治疗术常见的并发症,严格选择手术适应证,避免采用直径过大的封堵器是减少VSD封堵术后心律失常的有效措施。

20(R)-人参皂苷Rg_3抗血小板活化因子诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨20(R)-人参皂苷Rg3抗血小板活化因子(PAF)损伤人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其机制.方法采用MTT法测定PAF诱导HUVEC活性;用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用ELISA法测定培养的细胞上清液中t-PA、PAI-1含量.结果 1μmol/LPAF刺激HUVEC 2 h后,可明显降低HUVEC的吸光度值,细胞内钙离子浓度升高,上清液中PAI-1含量明显升高,而t-PA含量无明显变化;20～80μmo/L 20(R)-人参皂苷Rg3可升高HUVEC吸光度值,并呈浓度依赖性显著降低HUVEC内游离钙浓度;20(R)-人参皂苷Rg3降低上清液中PAI-1含量,对t-PA含量无明显影响.结论 20(R)-人参皂苷Rg3对PAF诱导损伤的HUVEC具有抗损伤保护作用,其机理可能与降低细胞内钙离子浓度,抑制PAI-1产生和调节t-PA/PAI-1平衡作用有关.

先天性室间隔缺损经导管封堵术后心律失常的临床分析

目的通过分析先心病室间隔缺损封堵治疗术后心律失常的原因,以期降低术后心律失常的发生率。方法分析2003年1月至今我科成功封堵治疗96例先心病室间隔缺损患者封堵术前后心律失常类型及其相关因素。结果96例室间隔缺损患者术前共有28例心律失常,均表现为束支阻滞。术后共有30例出现心律失常,其中7例为完全性房室传导阻滞,随访中,2例出现新的心律失常。分析其发病原因,与封堵器直径≥10mm具有密切相关性,与合并膜部瘤及操作时间无关。结论心律失常是室间隔缺损封堵治疗术后常见的并发症,严格选择手术适应症,尽量避免选择过大的封堵器可能是降低室间隔缺损封堵术后心律失常的有效措施。

雷帕霉素涂层支架预防血管内再狭窄的研究进展

如何防治冠状动脉介入治疗术后再狭窄形成已成为当今介入心脏学界面临的一大挑战 ,近年来的研究表明雷帕霉素涂层支架可有效预防再狭窄形成 ,为解决这一难题提供了新的治疗手段。本文就目前雷帕霉素涂层支架在临床防治再狭窄研究的最新进展作一综述。

青年人急性心肌梗死的临床特征及冠脉造影结果分析

目的观察青年人急性心肌梗死(AM)I的危险因素、临床表现及冠状动脉病变特点,探讨青年人发生AMI的易患因素,为预防青年人发生AMI提供理论依据。方法观察收住院的首次AMI患者(青年人组76例;老年组80例),对两组间的主要危险因素(吸烟、高血压、血脂异常、糖尿病、冠心病阳性家族史、肥胖及饮酒史等)及冠状动脉病变特点等进行对比分析。结果青年组中吸烟有54例(71.1%)、高甘油三脂血症24例(31.6%)、冠心病家族史11例(14.5%)、肥胖20例(26.3%)及长期大量饮酒史45例(59.2%)均高于老年组(P<0.05);青年组以男性为主(88.2%)。冠状动脉造影检查青年组单支冠脉病变比例明显高于老年冠心病组,两支及三支冠脉病变所占的比例明显低于老年冠心病组(P<0.01)。结论青年人AMI有较多的冠心病危险因素,冠心病阳性家族史及肥胖是青年人发生AMI最主要的重要危险因素之一;青年AMI患者临床症状典型,以单支病变为主,并发症少,预后较好。

松胞菌素D对血小板聚集和血小板—中性粒细胞间相互作用的影响

目的探讨松胞菌素D对血小板聚集及血小板—中性粒细胞间相互作用的影响。方法应用玫瑰花结试验和Born方法观察松胞菌素D对血小板—中性粒细胞之间相互作用及体内外对血小板聚集功能的影响。结果松胞菌素D在体内外对花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集无明显抑制作用,而对腺苷二磷酸(ADP)诱导的血小板聚集则有明显的抑制作用;松胞菌素D可以阻抑血小板与中性粒细胞间的黏附作用;松胞菌素D明显抑制PAF(1μmol/L)激活的中性粒细胞悬液引起的洗涤血小板聚集。结论松胞菌素D在体内外均具有选择性抑制ADP诱导的血小板聚集作用,且明显阻抑血小板与中性粒细胞间的相互作用。

9种类型冠状动脉支架的临床应用体会

对 4 0例冠心病患者的 4 1支冠状动脉 4 2处病变植入 51枚冠脉内支架。植入的支架类型包括 :Bestent支架 ,BardXT支架 ,Angio支架 ,AVE支架 ,Devon支架 ,Multi-link支架 ,Wiktor支架 ,CVD支架及Gianturco -RoubinⅡ支架等 9种。支架选择按靶病变长度、近端血管内径大小及病变特点进行。支架释放压力为 6～ 14个atm ,时间为 30～ 6 0秒 ,之后经 2个以上的相互垂直平面造影证实支架充分扩展 ,远端血流达TIMIⅢ级为手术成功 ,手术成功率 96 .1%。其中 5例病人拔除动脉鞘管后压迫股动脉时出现窦缓伴血压下降 ,经静脉推注阿托品后好转 ,2例穿刺部位出现血肿。术后随访 1～ 2 9个月 ,有 4例再发心绞痛 ,其中 3例经造影证实植入支架血管血流正常 ,其它支发生再狭窄导致。我们认为冠状动脉支架术是安全而有效的冠心病介入性治疗方法 ,手术成功率高 ,并发症少。根据靶血管病变特征合理选用不同类型的支架是保证支架植入成功的重要环节。

昆明山海棠提取物对人脐静脉血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的探讨昆明山海棠提取物(THW-4)对人脐静脉血管内皮细胞增殖的抑制作用.方法培养人脐静脉血管内皮细胞,加入不同计量的THW-4进行处理,细胞计数、MTT、细胞周期测定观察THW-4对HUVEC增殖的影响.结果THW-4可以明显抑制HUVEC增殖,呈剂量依赖性,作用24h的半有效抑制浓度(IC5)0为1.09ng/mL;THW-4(0.5～10ng/mL)作用HUVEC24h后,THW-4主要阻滞HUVEC于G0/G1期.结论THW-4能有效抑制体外培养的HUVEC增殖。

超声心动图在特殊类型房间隔缺损封堵术中的应用

目的报告利用超声心动图引导下经导管房间隔缺损封堵术(TCASD)治疗特殊类型房间隔缺损(ASD)的体会。方法收集ASD病例229例,经胸和(或)经食管超声心动图(TTE、TEE)行术前筛选、ASD残边评估、封堵器(ASO)型号选择和术后随访观察。结果①边缘不全型ASD141例,其中前上缘残端不全型123例,成功封堵119例(96.75%);上腔静脉残端不全型10例,均成功封堵(100%);下腔静脉残端及后壁残端不全型8例,成功封堵4例(50.00%);②巨大房缺9例,6例封堵成功(66.67%)。TEE测ASD最大径(36.30±1.90)mm(34～38mm),植入ASO大小为(39.60±2.20)mm(36～42mm);③多孔型房缺11例,其中双孔型8例,三孔型3例,均成功封堵(100%),残余分流3例(27.27%),术后12个月均消失;④合并ASA12例,其中多孔型4例,均成功封堵(100%),术后即刻残余分流2例,术后12个月随访均消失。结论TCASD治疗特殊类型ASD是安全、可行的,术前尽可能采用TEE了解ASD解剖细节是此类手术顺利成功的保证。

牙周炎对动脉粥样硬化影响的动物实验研究

目的建立牙周炎和动脉粥样硬化(AS)动物复合模型,探讨牙周炎对AS的影响。方法 36只日本大耳白兔随机分为4组,包括单纯牙周炎(CP)组、牙周炎合并AS(CP+AS)组、单纯AS组和对照组,采用结扎结合涂牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)的方法建立牙周炎动物模型,单侧髂动脉球囊内皮损伤术建立AS模型。建模成功后,采用苏木精-伊红(HE)染色观察样本的组织病理学改变;Elastica van Gieson(EVG)弹力纤维染色进行形态分析,计算髂动脉横断面内膜与中膜面积的比值。采用巢氏聚合酶链反应(PCR)法检测受损动脉壁中P.gingivalis 16S rDNA。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测系统炎性因子的表达,包括C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)。结果 CP+AS组的CRP、IL-6及IL-1β表达水平较其他组明显升高(P<0.01),血管的内膜与中膜面积比均较其余组大(P<0.01)。在CP和CP+AS组的髂动脉中检出有P.gingivalis 16S rDNA存在。结论牙周炎对患AS的动脉内膜的增厚可能起促进作用,其作用主要通过系统炎性因子的上调和细菌局部感染的作用来实现。

缺血后处理对猪心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察缺血后处理对猪心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其对炎性细胞因子的影响,并探讨可能的保护机制。方法:滇南小耳猪15只,随机分为假手术组(S组,n=5)、缺血后处理组(IPC组,n=5)和缺血再灌注组(IR组,n=5)。用球囊封堵冠脉建立猪闭胸式心肌梗死动物模型,监测心电及血压,用ELISA法测定缺血前及再灌注2、24h的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)的浓度,再灌注72h采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色确定心肌梗死面积。结果:再灌注2h和24h,IPC组和IR组的TNF-α、IL-6和IL-10的浓度均明显高于缺血前基础值(P<0.05);组间比较,再灌注后IPC组TNF-α和IL-6水平均较IR组明显降低(P<0.05),而IL-10值明显增高(P<0.05)。经TTC染色测心肌梗死的面积,S组未发生心肌梗死,IPC组为(10.89±2.02)%,IR组为(23.26±3.13)%,IPC组的心肌梗死面积较IR组明显降低(P<0.05)。结论:缺血后处理可能通过调控炎性细胞因子平衡发挥心肌保护作用。

以球囊封堵法建立猪心肌梗死模型的可行性研究

背景:国外20世纪90年代开始采用球囊封堵建立闭胸式心肌梗死动物模型,但术中室颤及血栓形成等因素降低了制作心肌梗死动物模型的成功率。目前国内建立球囊封堵闭胸式心肌梗死大动物模型的报道较少。目的:应用球囊封堵法建立闭胸式猪心肌梗死模型,探索提高建模成功率的方法。设计、时间及地点:随机对照动物实验,病理观察,于2008-07/2009-05在昆明医学院第一附属医院心内科及昆明医学院病理教研室完成。材料:8～11月龄健康滇南小耳猪15只,体质量19～25kg,随机数字表分为3组:假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组,每组5只。方法:冠脉封堵后和再灌注期预防性静滴利多卡因1.0～2.0mg/kg,以减少恶性心律失常的发生率,使用肝素防治血栓形成,在X射线监控下将球囊导管送至冠状动脉左前降支第一对角支的远端,假手术组只放置球囊至冠状动脉左前降支,不封堵;缺血再灌注组行球囊充气堵闭冠状动脉左前降支60min后撤除球囊;缺血后处理组行球囊充气堵闭冠状动脉左前降支60min后,球囊放气30s,充气30s(循环8次)后撤除球囊。主要观察指标:行冠脉造影、心电图及心肌酶检测评价心肌梗死模型的建立情况。3d后行心肌三氯四氮唑染色及病理学检查验证心肌梗死。结果:假手术组猪全部存活;缺血再灌注组4只成功建立心肌梗死模型,1只死于顽固性室颤;缺血后处理组全部成功建立心肌梗死模型。堵闭左前降支远端后,心电图V1～3导联上ST段抬高,有病理性Q波形成;心肌酶谱演变过程与人体心肌梗死过程基本一致。心肌梗死部位分别位于心尖、左心室前壁、前间隔部。三氯四氮唑染色后正常心肌呈砖红色,梗死区心肌颜色暗淡,呈灰白色;病理学检查显示,梗死区心肌正常结构破坏,胞浆浓缩,染色加深,横纹消失,核浓缩、溶解、碎裂,梗死区内有较多的红细胞,梗死区周围有较多肉芽组织增生及大量炎性细胞浸润。结论:球囊封堵冠脉建立猪闭胸式心肌梗死模型对动物创伤性小,且最为接近临床实际的过程,术中使用利多卡因及肝素防治心律失常及血栓形成是成功建立该模型的有效方法,缺血后处理可能是提高建模成功率的因素之一。

缺血后处理对减小猪急性心肌梗死面积的作用

目的探讨缺血后处理限制猪心肌梗死范围的作用。方法滇南小耳猪10只,随机分为2个组。实验组(n=5):在X线的监控下,经右股动脉置入冠状动脉球囊导管至左前降支,球囊扩张阻断血流60min,予8次球囊放气30s、充气30s短暂缺血再灌注即缺血后处理;对照组(n=5):不行缺血后处理,直接撤除球囊。测定缺血前、再灌注2h及24h心肌酶学指标。再灌注72h采用2,3,5氯化三苯基氯四氮唑(TTC)染色确定心肌梗死面积。结果再灌注后2h,两组的磷酸肌酸激酶(CK)及乳酸脱氢酶(LDH)较缺血前明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);再灌注后24h,实验组的CK、LDH较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。病理学检查显示缺血后处理组梗死面积明显小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺血后处理有缩小猪急性心肌梗死面积的保护作用。

云南汉族人群CYP2C19基因多态性分析

目的调查云南地区汉族人群CYP2C19基因多态性分布特征.方法采用基因芯片法(DNA microarray)对96例云南健康汉族人群CYP2C19基因多态性进行分析.结果云南汉族人群CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3、CYP2C19*2/*2、CYP2C19*2/*3和CYP2C19*3/*3基因型出现频率分别为41.7%、37.5%、6.3%、10.4%、3.1%和1.0%.结论云南汉族人群基因型分布与我国的畲族、蒙古族及其他各地区的汉族人群相似;而与维吾尔族、回族、撒拉族、哈萨克族人明显不同.