罕见CRISPLD2-NRG1融合突变晚期混合型非小细胞肺癌1例并文献复习

肺癌是中国发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)占全部肺癌的80%以上,NSCLC的基因突变概率高,并且种类繁多。随着基因检测技术的进步,越来越多的罕见融合基因变异被检测出来。神经调节蛋白1(neuregulin 1, NRG1)可促使人表皮生长因子受体3(human epidermal growth factor receptor 3, Her3/ErbB3)介导的通路激活,从而导致肿瘤形成。本文报道了1例罕见CRISPLD2-NRG1融合突变的晚期混合型NSCLC颅内转移的患者,接受阿法替尼治疗1个月后头部磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)显示颅内病灶明显缩小,患者对阿法替尼治疗反应良好。同时,我们对以往报道的NRG1基因融合突变的NSCLC病例进行总结,以供临床借鉴。

肺大细胞神经内分泌癌的综合治疗策略

肺大细胞神经内分泌癌(LCNEC)是一种相对罕见的肺癌亚型,诊断困难,预后差。目前LCNEC的治疗大多参照小细胞肺癌(SCLC)或非小细胞肺癌(NSCLC)方案执行,并且免疫检查点抑制剂(ICIs)在LCNEC治疗中的疗效尚不明确。本文将对近年来LCNEC的化疗、免疫治疗、靶向治疗、放疗等方面的研究进展予以综述。

基于网络药理学和分子对接探讨黑骨藤追风活络胶囊治疗类风湿关节炎的作用机制

目的基于网络药理学和分子对接探讨黑骨藤追风活络胶囊(HZC)治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制。方法通过ETCM数据库和文献查阅获得复方活性成分,运用Swiss Target Prediction平台进行靶点预测。用GeneCards、DisGeNET、OMIM数据库筛选RA相关靶点,绘制韦恩图获取药物和疾病交集靶点。采用STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,利用Cytoscape3.9.1软件中centiscape2.2插件筛选潜在关键靶点。用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,用Cytoscape3.9.1软件绘制药物-活性成分-靶点-通路网络图。最后选取核心成分与核心靶点进行分子对接。结果共筛选出32个有效成分,药物与疾病交集靶点91个,主要活性成分为槲皮素、盐酸青藤碱和杠柳苷元,核心靶点为肿瘤坏死因子(TNF)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)、表皮生长因子受体(EGFR)。作用机制可能与HIF-1信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、JAK-STAT信号通路等有关。分子对接显示主要活性成分与关键靶点具有很好的对接活性。结论HZC可通过多靶点、多通路的作用机理治疗RA。

黑骨藤追风活络胶囊调节NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路改善胶原诱导性关节炎的作用研究

目的:研究黑骨藤追风活络胶囊(Heiguteng Zhuifenghuoluo cupsule,HZC)调节NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路改善胶原诱导性关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)大鼠的作用机制。方法:取24只SD大鼠,随机分组为正常组、模型组、HZC组和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)组。除正常组外,其余三组采用牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂混合乳化剂构建类风湿性关节(rheumatoid arthritis,RA)大鼠模型。按照实验分组分别给予生理盐水、MTX(1 mg/kg)和HZC(243 mg/kg)灌胃,共给药21天。每周测量大鼠足肿胀程度、观察并进行足肿胀评分、检测大鼠血清中前列腺素E 2(Prostaglandin E2,PGE 2),检测大鼠滑膜组织中微粒体前列腺素E2合酶-1(microsomal prostaglandin E synthase 1,mPGES-1)以及p-p65、p-STAT3蛋白表达情况。结果:模型组大鼠足肿胀程度、肿胀程度评分、大鼠血清PGE 2明显增加,HZC和MTX组大鼠足肿胀程度、肿胀程度评分和大鼠血清PGE 2明显降低。进一步机制研究发现模型组大鼠关节滑膜组织中mPGES-1、p-p65、p-STAT3蛋白的表达增加,HZC和MTX组大鼠关节滑膜组织中mPGES-1、p-p65、p-STAT3蛋白的表达明显降低。结论:HZC通过抑制NF-κB/STAT3/mPGES-1信号通路,发挥其对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用。

胍丁胺抑制单核-内皮细胞黏附作用及其机制的研究

目的探讨内源性胍丁胺对氧化低密度脂蛋白(OXIDIZED LOW DENSITY LIPOPROTEIN,OX-LDL)诱导的单核-内皮细胞黏附的作用及其可能的机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUMAN UMBILICAL VEIN ENDOTHELIAL CELLS,HUVEC),用不同浓度的胍丁胺作用于OX-LDL诱导的HUVEC24H,加或不加硝基精氨酸甲酯(L-NAME),观察人单核细胞对HUVEC的黏附及ICAM-1在HUVEC的蛋白表达。结果胍丁胺浓度依赖地抑制OX-LDL诱导的单核细胞对HUVEC的黏附及ICAM-1在HUVEC的表达(P<0.01),二者成正相关(R=0.8857,P<0.001),加入L-NAME后AGM的作用减弱(P<0.05)。结论AGM可能通过下调ICAM-1的表达抑制循环单核细胞与内皮细胞的黏附,该作用与一氧化氮合酶(NOS)有关。

心导管技术的发明与诺贝尔奖之启示

德国医生维尔纳.福斯曼(Werner.Forssmann,1904-1979)因其对心导管技术的创造所做的里程碑式的贡献而荣膺1956年度生理学和医学诺贝尔奖。回顾福斯曼创造心脏导管技术的历程带给我们一些启示:科学研究需要强烈的探索欲为动力,无畏的探索精神为保障,科学的辩证法思想为指导。

内源性胍丁胺在动脉粥样硬化炎症中的潜在作用

动脉粥样硬化的发病机制复杂,炎症学说逐渐得到认同并成为主流,因此开发机体内在的抗炎机制对防止动脉粥样硬化具有重要意义。胍丁胺是新近发现的内源性物质,能发挥抗炎、抑制脂质过氧化、改善血流动力学、降低血糖等心血管保护作用,显示潜在的抗动脉粥样硬化炎症、防治动脉粥样硬化的作用。本文拟对内源性胍丁胺在动脉粥样硬化炎症中的作用作一简要综述。

基质信号蛋白CCN1心血管作用研究进展

基质信号蛋白CCN1由381个氨基酸残基构成的4个独立结构模块,富含38个保守半胱氨酸,在心血管系统具有广泛的生物学活性,影响血管内皮细胞、平滑肌细胞以及心肌细胞的分化、增殖和迁移;在血管生成、血管损伤修复、心脏发育、心肌梗死等多种病理生理过程中起重要作用。

有氧、无氧耐力训练对自主神经调节功能的影响及意义

为评价有氧、无氧耐力训练对自主神经功能的影响,提供健全、合理体育锻炼方案的理论依据,我们将41名健康男性青年,随机分为有氧耐力组和无氧耐力组,进行连续8周训练。分别于训练前、训练4周末、训练8周末进行5 m in短程心率变异性(HRV)频域、时域法分析。结果显示,与训练前比较,有氧耐力组迷走神经活动增强(HF、HFnu、RM SSD、PNN 50,P值均<0.05),交感神经活动呈减弱趋势(LFnu),自主神经平衡表现为趋向迷走神经占优势(LF/HF),HRV增大;无氧耐力组自主神经调节功能相对较稳定。本研究表明,有氧、无氧耐力训练对自主神经调节能力的影响取决于训练的负荷强度,与有氧训练相似,严格控制的适当强度的无氧耐力训练也可能有利于增强人体对环境的适应能力。

自主神经功能在急性高原反应发病中的意义

目的探讨自主神经系统(ANS)功能在急性高原反应(AMS)发病中的意义。方法43名健康青年男性在完成进舱前的5min短程心率变异性(HRV)、冷加压试验(CPT)及血浆去甲肾上腺素(NA)浓度检测后,进入低压氧舱模拟急进海拔4500m1天。所有受试者在模拟高原第2、10、20h接受HRV动态检测,并再次接受CPT及NA检测,出舱前进行AMS症状评分。根据AMS评分,25名评分≤10分者定为轻度AMS组,即A组;18名评分>10分者定为中重度AMS组,即B组。结果与A组相比,B组进舱前CPT中收缩压升高幅度较高(P<0.05);B组在模拟4500m第10hHRV中正常RR间期标准差(SDNN)、相邻RR间期差值的均方根(rMSSD)、爱丁堡指数(PNN50)、高频(HF)及总功率(TP)较低(均P<0.05),第20hPNN50及HF也较低(P<0.01,P<0.05),而LF/HF及血浆NA较高(P<0.05)。AMS评分与进舱前SDNN、rMSSD、LF、TP及NA呈显著正相关(均P<0.05);与模拟高原SDNN、rMSSD、PNN50及HF呈显著负相关(SDNN、rMSSD、PNN50P<0.01,HFP<0.05),而与NA呈显著正相关(P<0.05)。结论ANS在AMS的发病中具有重要作用,联合采用多种方法进行ANS功能检测可能在一定程度上预测AMS易感人群,并有助于诊断AMS。

急进高原体能变化与急性高原反应关系初探

目的探讨急进高原前后体能变化及其与急性高原反应(AMS)之间的关系,为预防AMS提供可能措施。方法99名健康男性青年,在平原时和急进西藏高原后第4天接受折返跑速度、台阶指数、握力测试,无创检测体脂率、体重指数(BMI)、基础代谢(BM),采集指端血检测台阶运动5min后血乳酸,并调查急进高原后连续5d的AMS症状。结果与平原时相比,急进高原后第4天受试青年基础代谢和体脂率显著增加,折返跑速度显著减慢,握力无显著变化,台阶运动后血乳酸显著降低。AMS症状积分与籍贯、年龄、身高、体重、折返跑成绩、台阶指数以及握力无显著相关关系,但与平原时台阶运动后血乳酸浓度呈负相关,相关系数R为-0.615,P=0.007。结论平原时无氧耐力对急性高原反应具有预测价值。加强平原无氧耐力训练可能有助于预防急性高原反应。

不同海拔健康青年男性心率变异性对比分析

应用短程心率变异性(HRV)时域、频域和非线性分析法,对比进入三个不同海拔高度自主神经系统(ANS)调节功能的特点。发现与进入海拔1856m相比,海拔2800m平均正常RR间期的标准差(SDNN)、相邻RR间期差的均方根(rMSSD)、相差>50ms的相邻RR间期占RR间期总数的百分比(PNN50)、低频成分(LF)、高频成分(HF)以及总功率(TP)均有轻度升高,但无统计学差异;与进入海拔1856m和海拔2800m相比,海拔3040mSDNN、rMSSD、LF和HF显著降低。这表明进入海拔3040m副交感神经活动显著减弱、自主神经系统调节功能显著受抑。自主神经的这种变化有助于进一步阐明进入高海拔机体发生的病理生理学改变。

心率变异性与急性高原反应评分关系初探

目的应用心率变异性(HRV)探讨自主神经功能与急性高原反应(AMS)症状学评分的相关性。方法86例健康汉族男性新兵在平原560m和空运至海拔3675m西藏高原2～4d内,分别接受了短程HRV检测,进藏后当日接受了AMS症状学评分调查。根据该评分将受试者分为基本无AMS组(49例)和AMS组(37例)。结果AMS组平原HRV中平均正常RR间期的标准差(SDNN)、相邻RR间期差的均方根(rMSSD)、低频(LF)以及急进高原rMSSD、SDNN、LF、总功率(TP)、相邻RR间期相差>50ms百分数(PNN50)的下降幅度均显著高于基本无AMS组(P<0.05,P<0.01),但其平原标准化高频(HFnu)则显著低于后者(P<0.05)。AMS症状学评分与平原rMSSD、SDNN、LF/HF以及急进高原rMSSD、SDNN变化幅度均呈正相关(P<0.05),但与平原HFnu呈负相关(P<0.01)。结论自主神经功能与AMS相关,平原自主神经活性较高、交感神经占优势且对应激反应过强者AMS症状较重,检测心率变异性可在一定程度上预测AMS。

男性青年急进高原初期心率变异性的变化及意义

目的采用时域、频域及非线性分析方法探讨急进西藏高原初期心率变异性（heart rate variability，HRV）逐日动态变化及其意义。方法86例汉族男性新兵在海拔560m平原完成5min短程HRV检测后，分为A组（n=12）、B组（n=48）和C组（n=26），飞抵3675m西藏高原。进藏后，A组于第2天、B组于第3天、C组于第4天分别接受了高原HRV检测。结果与平原相比，进藏第2天SDNN、HF、TP均显著下降（P〈0．01），rMSSD、PNN50及HFnu也显著下降（P〈0．05），而LFnu和LF／HF均显著升高（P〈0．01）；进藏后第3～4天，SDNN、rMSSD、HF、TP及HFnu呈逐日回升趋势，LFnu及LF／HF呈逐日回落趋势；FD在进藏第2～4天保持低水平波动。结论急进高原初期，HRV下降、自主神经系统（ANS）调节功能受到抑制，随后ANS功能呈逐日缓慢恢复至类似平原状态。

急进高原自主神经功能变化与急性高原反应的关系

目的研究急进高原前、后心血管自主神经（autonomic nervous system, ANS）功能变化及其与急性高原反应（acute mountain sickness, AMS）之间关系，揭示ANS在AMS发病中的作用，探求预防AMS的可能途径。方法对99名健康男性青年在海拔450m平原和空运急进3700m高原后2～4d内进行心率变异性（ heart rate variability, HRV）和冷加压试验（cold pressor test ,CPT）检测；在急进高原后l～5d接受AMS发病情况调查。结果急进高原后第1天AMS发病率92％，其中，中重度AMS占10％、轻度占36％、基本无反应占54％。LF/HFn随AMS程度减轻而减少，HFn随AMS程度加重而增加。中重度、轻度、基本无AMS反应组平原时收缩压（SBP）分别为（123．42±7．14）mmHg、（120．6±11．22）mmHg、（122．58±10．92）mmHg，均显著高于无反应纽（111．31±9．48）mmHg，（P〈0．05）；中重度AMS组在平原CPT后心率（tm）变化幅度[（7．57±8．22）b/min]显著低于基本无反应组[（25．47±19．26）b/min，（P〈0．05）]。急进高原后，中重度、轻度、基本无AMS反应纽CPT后SBP变化幅度分别为（8．14±4．95）mmHg、（9．56±7．77）mmHg、（9．97±6．80）mmHg，均显著低于无反应组[（17．00±12．75）mmHg，（P〈0．05）]；HR变化幅度分别为（11．13±6．08）b/min、（10±7．5）b/min、（12．25±8．14）b/min，均显著低于无反应组（[19．71±9．35）b/min，P〈0．05]。AMS症状积分与平原时LF/HF正相关（r=0．437，P〈0．01），与平原时CVF后HR变化幅度呈负相关（r=-0．35，P=0．01）。结论平原交感神经活动较高者其ANS的应激调节能力相对较小，对AMS易感性较高。改善ANS功能可能有助于预防AMS。

不同强度耐力训练对新兵自主神经调节功能的影响

目的评价不同强度的耐力训练对新兵自主神经功能的影响,为优化军事训练提供科学的依据。方法72名健康男性新兵,随机分为现行军体训练组、有氧耐力组、无氧耐力组,进行连续8周训练。分别于训练前、训练末进行5 min心率变异性(HRV)分析、冷加压试验(CPT)及血浆去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(EPI)、肾素活性(RA)及神经肽Y(NPY)检测。结果训练前各指标组间差异无显著性。训练8周末,现行训练组HFn(52±11)较训练前(59±12)显著降低(P<0.05),但LFn(43±12)、LF/HF(0.87±0.35)均较训练前(36±11)、(0.67±0.32)〕有显著增加(P<0.05);有氧耐力组HFn(62±11)均较训练前(53±14)显著增加(P<0.05),但LFn(36±8)、LF/HF(0.64±0.28)与训练前(39±12)、(0.77±0.33)相比呈下降趋势;无氧耐力组HRV无显著变化。训练8周末与静态时比较,无氧耐力组CPT中HR增加值〔(6.46±6.79)b.min-1〕显著低于现行训练组〔(24.00±22.64)b.min-1〕和有氧耐力组〔(17.11±15.22)b.min-1〕的增加值(P<0.05)。现行训练组的NE〔(152.17±31.51)pg.mL-1)〕显著高于有氧耐力组〔(109.31±18.77)pg.mL-1〕和无氧耐力组〔(104.92±19.36)pg.mL-1)〕(P<0.01)。现行训练组RA〔(4.33±2.08)pg.mL-1)〕显著高于有氧耐力组〔(1.97±1.79)pg.mL-1)〕和无氧耐力组〔(2.74±1.06)pg.mL-1)〕(P<0.01)。结论耐力训练对自主神经调节能力的影响主要取决于负荷强度,现行军体训练接近极限强度,其对机体有潜在危害,故应进行规范的有氧、无氧耐力训练。

不同方案训练对新兵耐力素质的影响

目的:评价不同方案训练对新兵耐力及运动成绩的影响,为优化部队体能训练方案提供理论依据。方法:72名健康男性新兵随机被分为现行训练组、有氧耐力组、无氧耐力组,均进行连续8周训练。分别于训练前、训练4周末、训练8周末进行最大耗氧量(VO2max)、台阶试验及PWC150耐力指标测定和3 000 m、50 m跑考核。结果:与训练前相比,3个组别所有指标均随时间显著进行性提高。且至训练8周末有氧耐力组台阶指数、VO2max3、000 m成绩显著优于现行训练组(P值分别为0.013、0.029、0.001);无氧耐力组台阶指数、50 m跑成绩显著优于现行训练组(P分别为0.012、0.026);各组间PWC150无显著差异。结论:科学、合理、规范的耐力训练更利于提高战士耐力素质,基层部队应根据担负任务特点有针对性的加强有氧耐力和/或无氧耐力训练。

慢病毒介导shRNA沉默E2-2基因促进内皮前体细胞增殖

目的构建小鼠转录因子基因E2-2 RNA干扰（RNA interference,RNAi）慢病毒载体,并观测其沉默E2-2基因对内皮前体细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）增殖的影响。方法 SPF级昆明小鼠20只,雌雄不拘,4周龄,体质量18-20 g。分离、培养小鼠骨髓EPCs,并予以鉴定。针对E2-2基因mRNA序列,筛选3个siRNA干扰靶点并予以合成;将合成的siRNA导入EPCs,用RT-PCR法检测其对靶基因的抑制效果,以确定最佳siRNA。设计并合成针对最佳siRNA靶序列的shRNA,连入FT203-PLVX载体,构建慢病毒载体FT203-PLVX/E2-2shRNA,并予以测序鉴定。测序正确者经293细胞包装,形成具高效感染力的FT203-PLVX/E2-2shRNA慢病毒。将该重组慢病毒感染EPCs,倒置显微镜观测被感染细胞的绿色荧光蛋白（GFP）的表达变化、CCK-8法检测被感染细胞的增殖情况;在mRNA和蛋白水平分别检测并定量分析被感染细胞的E2-2及核抗原PCNA基因及其编码蛋白的表达变化。结果小鼠骨髓EPCs得以分离、培养与鉴定。筛检到E2-2基因的最佳干扰靶序列为CGTCAGCTAGTGTTTCTAA;测序证实,成功构建FT203-PLVX/E2-2 shRNA慢病毒载体。荧光观察显示,被慢病毒感染的EPCs明显表达GFP。CCK-8检测表明,与对照细胞比较,沉默E2-2的EPCs的增殖加快,48 h开始变得更为明显（P〈0.01）;mRNA和蛋白水平检测及定量分析结果显示,E2-2 shRNA慢病毒能有效沉默EPCs的E2-2,并上调其核抗原PCNA基因及其编码蛋白的表达。结论小鼠骨髓EPCs得以分离、培养与鉴定;成功构建E2-2基因RNAi慢病毒载体,该载体能有效沉默EPCs的E2-2基因,促使EPCs的增殖并上调其核抗原PCNA的表达。

提高培养内皮祖细胞成功率的探讨

目的探讨培养大鼠内皮祖细胞的最佳适宜条件。方法通过密度梯度离心法分离培养来源于大鼠骨髓及脾脏的单核细胞,观察在不同条件下[pH值、二氧化碳(CO2)浓度、血清浓度、取材大鼠月龄、内皮祖细胞来源]培养内皮祖细胞的成功率。结果 pH 7.两组内皮祖细胞培养的成功率明显高于pH 7.4组(P<0.05),5.5%CO2浓度组内皮祖细胞培养的成功率明显高于5.0%CO2浓度组(P<0.05),1月龄组内皮祖细胞培养的成功率明显高于2月龄组(P<0.05),血清浓度及内皮组细胞来源对细胞培养的成功率无明显影响(P>0.05)。结论大鼠内皮祖细胞适宜在pH 7.2的DMEM-L培养液及培养箱CO2浓度为5.5%的环境下生长,且年幼的大鼠取材培养的成功率高。