防己诺林碱抑制黑色素瘤的增殖转移

目的观察防己诺林碱对黑色素瘤细胞生长转移的影响。方法通过MTT实验,观察不同浓度防己诺林碱对A375细胞增殖的影响;利用Transwell实验,检测不同浓度防己诺林碱对A375细胞转移功能的影响。通过Western blot和RT-PCR,检测防己诺林碱对A375生长转移相关蛋白的影响。结果防己诺林碱可以抑制黑色素瘤细胞A375的增殖转移。10、20、40μM/L防己诺林碱处理A375细胞后,对其增殖的抑制率分别为43.81%±1.53%、48.64%±4.65%、50.69%±4.99%。20、40μM/L防己诺林碱处理A375细胞作用24 h后,对其转移的抑制率分别为14.95%±4.31%、33.03%±5.46%。防己诺林碱显著抑制细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、CDK4、CDK6、基质金属蛋白酶-2(MMP2)的表达(P<0.05)。结论防己诺林碱能显著抑制A375细胞的增殖转移,可作为治疗黑色素瘤的潜在化疗药物进行深入研究。

芹菜素通过抑制Src通路抑制黑色素瘤细胞增殖

目的探讨芹菜素如何通过调节Src通路来抑制黑色素瘤细胞增殖。方法采用不同浓度的芹菜素处理黑色素瘤细胞系A375,使用HEK293细胞系(正常细胞系)作为对照,通过MTT实验观察芹菜素是否可以特异性抑制肿瘤细胞的增殖。进一步通过Western blot以及实时PCR检测芹菜素对A375细胞中Src通路增殖相关蛋白CDK4和CDK6的影响。结果 MTT检测结果发现芹菜素对HEK293细胞的增殖抑制作用不明显,但是10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L与80μmol/L的芹菜素分别作用于A375细胞后对细胞增殖的抑制率分别为(22.12±7.20)%、(27.08±4.37)%、(37.39±2.72)%和(39.00±1.57)%,而且随着药物的浓度增加对A375细胞增殖的抑制率增加。Western blot和实时PCR检测发现,20μmol/L、40μmol/L与80μmol/L的芹菜素均可以抑制A375细胞中Src通路下游CDK4和CDK6蛋白的表达。结论芹菜素可以通过抑制Src通路显著抑制黑色素瘤细胞系A375的增殖,对正常细胞作用较小,可以作为潜在的化疗药物应用于黑色素瘤的化疗。

移动教育在医学检验教学中的应用

目的:探讨移动教育在医学检验教学中的应用模式与效果。方法:将基于课堂即时反馈系统、短信息、3G的移动技术应用于生化、微生物、免疫学检验的教学中。结果:移动教育提高了学生的学习成绩,实现了随时随地学习和跨地域交流。结论:在医学检验的教学中,移动教育优于传统教育。

青藤碱增强表柔比星对黑色素瘤细胞侵袭的抑制作用

目的初探青藤碱如何增强表柔比星对黑色素瘤细胞侵袭的抑制作用。方法应用Transwell方法检测不同处理因素对A375细胞侵袭的影响。处理因素分为4组,分别为:生理盐水组(对照),表柔比星处理组、青藤碱处理组和两种药物联合处理组。通过Western blot及Real-time PCR检测不同因素作用下侵袭相关蛋白的变化。结果 5μg/mL表柔比星、10μg/mL青藤碱以及两种药物联合处理组24 h后对A375细胞侵袭的抑制率分别为20.40%±4.63%、14.40%±2.67%和50.32%±3.02%。药物联用后对A375细胞侵袭的抑制作用显著高于各单药组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。青藤碱可以增强表柔比星对侵袭相关蛋白MMP-2和MMP-9的抑制作用。结论低浓度青藤碱(10μg/mL)可以显著增强低浓度表柔比星(0.1×PPC)对黑色素瘤细胞A375细胞侵袭的抑制作用,青藤碱可以作为化疗过程中的辅助用药,起到优化治疗效果的作用。

miR-489通过打靶PAK5抑制黑色素瘤的迁移

目的 探讨miR-489对黑色素瘤迁移的抑制作用。方法 通过Transwell实验检测miR-489对黑色素瘤迁移的影响;荧光素酶报告基因实验检测A375细胞中miR-489对PAK5的靶向作用;进一步通过Western blotting以及实时PCR检测miR-489对于A375细胞中PAK5的影响。结果 Transwell实验发现miR-489过表达后可以显著抑制A375细胞的迁移,当miR-489受到抑制后,A375细胞的迁移受到促进。荧光素酶报告基因实验证明,miR-489可以直接作用于PAK5。Western blotting和实时PCR检测发现,过表达miR-489可以抑制A375细胞中PAK5蛋白的表达;当miR-489受到抑制后蛋白表达有所增加。结论 miR-489可以通过打靶PAK5抑制黑色素瘤细胞的迁移。

miR-489抑制黑色素瘤细胞的增殖

目的检测miR-489对黑色素瘤细胞增殖的影响。方法在黑色素瘤细胞A375中分别过表达或沉默miR-489后,通过MTT实验观察miR-489对细胞增殖的影响。进一步通过Western blotting和实时PCR检测miR-489对A375细胞中增殖相关蛋白CDK2和cyclin E的影响。结果 MTT检测发现,miR-489过表达后可以显著抑制A375细胞增殖,miR-489受到抑制后A375细胞的增殖受到促进。Western blotting和实时PCR检测发现,过表达miR-489可以抑制A375细胞中增殖相关蛋白CDK2和cyclin E蛋白的表达;miR-489受到抑制后蛋白表达增加。结论 miR-489对黑色素瘤细胞的增殖有一定的抑制作用,可能作为黑色素瘤诊疗的新靶点。

防己诺林碱增强吉西他滨诱导的黑色素瘤细胞凋亡

目的观察防己诺林碱对吉西他滨导致的细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法将人黑色素瘤细胞A375分为4组,分别用生理盐水(对照),吉西他滨、防己诺林碱以及两种药物联合处理,通过MTT的方法检测不同时间不同处理因素作用下细胞的光密度值(OD490),确定药物对细胞增殖的作用;用AV-PI染色的方法用流式细胞仪检测不同组凋亡细胞比例;Hoechest 33258染色的方法观察不同组别下细胞的凋亡情况;通过Western Blot以及Realtime PCR检测不同因素作用下凋亡相关蛋白的变化。结果对细胞作用24 h时,10μg/ml防己诺林碱,1μg/ml吉西他滨,以及两种药物联合处理组A375细胞增殖的抑制率分别为4.07%±1.95%,45.22%±2.25%和75.71%±1.01%。两种药物联用A375细胞增殖的抑制作用显著强于各单药组作用,各组数据间差异显著(P<0.05)。对细胞作用24 h时,不同处理组细胞凋亡的百分比分别为2.07%±0.27%,3.35%±0.20%,4.15%±0.07%和6.12%±0.51%。药物联用作用下细胞凋亡率增加。各组数据之间有显著差异(P<0.05)。防己诺林碱也可以显著增强吉西他滨对凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX和Caspase 3的调控。结论低浓度防己诺林碱(10μg/ml)可以显著增强极低浓度的吉西他滨(0.01×PPC)对抑制黑色素瘤细胞A375细胞凋亡的促进作用,联合应用可达到更好的治疗效果。

苦参碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长的抑制作用实验研究

目的:研究苦参碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其相关作用机制。方法:通过收集手术切除的瘢痕疙瘩进行体外培养成纤维细胞,将细胞分为3组,分别加入10μmol/L,20μmol/L的苦参碱以及对照组(0.9%NaCl)进行实验。MTT实验检测细胞增殖情况;流式细胞技术进行细胞周期分析;Hoechest33258染色检测细胞凋亡情况;Westernblot实验检测苦参碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡和自噬相关调控蛋白表达的影响。结果:通过不同浓度的苦参碱处理细胞后,MTT结果发现成纤维细胞的增殖受到抑制,抑制作用具有剂量依赖性;细胞周期分析发现,苦参碱作用后细胞的G1-S期转化受到了不同程度的抑制;Hoechest 33258染色发现苦参碱可以促进凋亡细胞的增加;Western blot实验结果发现苦参碱可以抑制CDK4、CDK6、Bcl-2和LC3-I蛋白的表达,促进Bax、LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达。结论:苦参碱对瘢痕疙瘩成纤维细胞具有抑制增殖、促进凋亡的作用,能够影响细胞增殖、凋亡和自噬相关调控蛋白的表达。

氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的作用

目的探讨氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法从人的增生性瘢痕组织中提取成纤维细胞进行培养,通过MTT实验观察不同浓度的氧化苦参碱对成纤维细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测经氧化苦参碱处理后成纤维细胞的周期变化,并通过Annexin V-FITC/PI双染色法和Hoechst 33258染色观察细胞的凋亡情况。通过Western Blot和RT-PCR检测氧化苦参碱对细胞周期蛋白CDK4、CDK6,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的作用。结果与对照组相比,氧化苦参碱的浓度为10μmol·L^(-1)时,24 h细胞增殖的抑制率为(18.92±3.77)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(3.28±2.56)%和(2.98±1.78)%;氧化苦参碱的浓度为20μmol·L^(-1)时,24 h细胞增殖的抑制率为(32.93±2.68)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(6.89±0.76)%和(1.47±2.57)%。氧化苦参碱能够通过抑制细胞周期蛋白CDK4、CDK6和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,诱导促凋亡蛋白Bax的表达来影响细胞周期进程,将细胞周期阻滞于G1期,使细胞增殖受到抑制,凋亡率增加。结论氧化苦参碱能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,可作为预防和治疗增生性瘢痕的潜在药物。

芒柄花黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用

目的探讨芒柄花黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞生长的作用。方法获取手术切除的人增生性瘢痕组织以及局部皮瓣转移修复后剩余的正常皮肤,提取成纤维细胞。通过MTT试验检测不同浓度的芒柄花黄素对成纤维细胞增殖的作用,应用流式细胞术对芒柄花黄素处理后的成纤维细胞周期进行分析。通过Annexin V-FITC/PI双染色法和Hoechest 33258染色观察成纤维细胞的凋亡情况。通过Western blot与RT-PCR试验,检测芒柄花黄素对细胞周期蛋白Cyclin D1和凋亡调节蛋白Bcl-2的作用。结果与对照组比较,芒柄花黄素对正常皮肤成纤维细胞的增殖影响较小,对增生性瘢痕成纤维细胞的增殖具有明显的抑制作用,且药物浓度越高、作用时间越长,抑制作用越强。成纤维细胞大部分阻滞于G_1期,S期的细胞减少,细胞周期的进程受到阻断。芒柄花黄素能够通过抑制细胞周期蛋白Cyclin D1来影响细胞周期的进程,将细胞周期阻滞于G_1期;通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达诱导成纤维细胞的凋亡,从而实现对细胞生长的抑制作用。结论芒柄花黄素能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,可考虑用于增生性瘢痕的预防与临床治疗。

射频技术用于面部年轻化的疗效观察

目的 探讨热塑射频用于面部年轻化治疗的有效性和安全性.方法 对32例来诊的面部老化患者给予治疗,输出功率为单极75 -110W,双极45-60W,眼周50-60W.所有患者每2周治疗1次,共5次.治疗后随访1-3个月,通过主观满意度、皮肤科医师评价和VISIA皮肤分析仪对射频治疗的有效性和安全性进行综合评定.结果 FitzptrickⅢ型患者治疗前后皮肤皱纹评分为8.32±0.68和5.68±1.18,FitzpatrickⅣ型患者治疗前后皮肤皱纹评分为8.49±0.74和5.81±1.07,对FitzpatrickⅢ型皮肤治疗效果更显著.皮肤皱纹得到改善,无组织损伤、色素沉着等不良反应发生.结论 热塑射频作为一种非剥脱性方法用于面部年轻化的治疗安全有效,患者满意度较高.

PRP联合CO2点阵激光用于面部年轻化的疗效观察

目的肉眼观察与量化测定评估富血小板血浆（PRP）联合CO2点阵激光用于面部年轻化的临床疗效。方法11例女性面部老化者，左侧面部给予PRP联合CO2点阵激光治疗作为治疗组，右侧面部只给予CO，点阵激光治疗作为对照组。治疗后1个月，采用受治疗者满意度评分及VISIA软件测量，对临床疗效进行综合评定。结果治疗后1个月，求美者面部皱纹明显改善，治疗组与对照组皱纹数分别为10．91±4．48和12．55±5．79，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PRP联合CO2点阵激光用于面部年轻化的治疗效果更佳。

先天性多指畸形

先天性多指畸形在先天性手部畸形中较为常见,可合并并指、短指等畸形,不仅影响正常的手部功能,还给患者带来了巨大的心理负担。先天性多指畸形的发生主要受遗传因素的影响,以拇指多指最为常见,分为综合征型与非综合征型,临床上主要采取手术治疗。现结合国内外的研究对其发生机制与临床分型作一综述,以期对手术治疗及术后评估等提供参考。

传染病四项在医学整形美容手术中检测的临床意义

乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒、人类免疫缺陷病严重威胁着人类健康,而血液传播、交叉感染引起的医源性传播,是其常见的医院内传播途径[1].由于手术具有创伤性,因此,出血或使用被污染的医疗器械等,会给医患双方带来感染传染病的风险[2],从而引发医疗纠纷.因此,手术前进行传染病四项的检测,充分了解患者携带传染病的情况,尤为重要.笔者对自2013年3月至2014年3月,在沈阳军区总医院整形美容外科进行医学整形美容手术的2963例患者的传染病四项检测结果进行回顾性统计分析.现报道如下.

富血小板血浆在慢性创面修复中的应用

慢性创面的愈合是临床常见的难题,常规疗法通常不能达到良好的效果,富血小板血浆治疗作为一种新型疗法,展现了独特的优势。现通过检索慢性创面相关的中、英文文献,结合富血小板血浆实验研究及临床应用报道,对富血小板血浆在慢性创面治疗方面的研究和应用作一综述。

游离足内侧皮瓣在复杂手部皮肤缺损中的应用

目的观察足内侧皮瓣修复手部缺损的效果。方法对复杂手部缺损患者，体表标记足内侧皮瓣的形状及大小，解剖出供养皮肤动静脉，游离移植于手部与受区血管吻合。结果本组共11例患者，术后皮瓣全部成活。术后平均随访3个月，皮瓣质地柔软。臃肿的皮瓣一般在术后3～6个月逐渐平整。结论足内侧皮瓣供区隐蔽，创伤小，皮肤质地与手掌及指腹相似，是修复复杂手部皮肤缺损的理想选择。

数字化3D打印技术在巴马小型猪下颌角截骨模型中的应用

目的建立小型巴马猪的下颌角3D打印模型,为模拟临床复杂下颌角截骨术的新型治疗方法提供全面的预手术设计方案。方法选择12个月龄巴马小型猪3只,采用螺旋CT在术前、术后扫描巴马小型猪的头部骨骼形态,应用Mimics 10.01、Geomagic stodio 2013等软件进行下颌骨的三维重建并进行3D打印,设计改良的下颌骨截骨导板,在导板引导下,完成下颌角截骨术。结果经术中验证,巴马小型猪下颌骨3D打印模型能够精确模拟下颌角形态,术前设计的截骨导板能够在术中辅助进行精确截骨。结论数字化3D打印技术对于模拟下颌角形态,辅助术前手术方案设计,进行精确下颌角截骨,有较大的临床应用价值。

应用负压植皮法治疗全层皮肤缺损12例临床分析

目的观察应用负压创面辅助自体皮肤移植治疗全层皮肤损伤的效果。方法对大面积皮肤软组织缺损者，应用负压创面辅助自体皮肤移植治疗，观察移植皮肤存活效果，并发症及预后效果等指标。结果本组共12例患者。皮肤移植全部成活，1例发生局部感染，经换药后愈合。术后随访1～12周，愈合效果满意。结论负压创面辅助自体皮肤移植是治疗全层皮肤缺损，特别是慢性感染性创面的有效的治疗方法，值得临床推广应用。

氧化苦参碱增强多西他赛对黑色素瘤细胞增殖的抑制作用

目的观察氧化苦参碱对多西他赛抑制黑色素瘤细胞增殖的作用。方法将传代的A375细胞分为4组：生理盐水组、多西他赛组、氧化苦参碱组和两种药物联合组，在不同的时间点通过MTT的方法检测药物对细胞增殖的作用；流式细胞仪检测细胞周期；通过WESTERN BLOT以及PCR的手段检测不同因素作用下相关蛋白的变化。结果对细胞作用24h，5μg／ml多西他赛、10μg/ml氧化苦参碱以及两种药物联合处理组对A375细胞的增殖抑制率分别为（22．41±11．96）％、（12．96±4．33）％和（64．42±0．74）％。药物联合使用对A375细胞的抑制作用显著高于各单药组相同剂量药物，各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。生理盐水组以及不同药物处理组细胞周期G1期的百分比分别为（68．09±6．75）％、（72．19±5．44）％、（76．65±1．88）％和（86．51±3．41）％。药物联用组对G1期阻滞作用增强。各组数据间差异具有统计学意义（P〈0．05）。氧化苦参碱也可增强多西他赛对蛋白CyclinD1、CDK4和CDK6的抑制作用。结论氧化苦参碱（10μg/ml）可显著增强低浓度的多西他赛（0．01×PPC）对黑色素瘤细胞增殖的抑制作用，联合应用能够降低多西他赛的使用浓度，减少其引发的不良反应。

黑色素瘤靶向治疗的现状与展望

在皮肤肿瘤中,约有80%的死亡是由黑色素瘤造成。黑色素瘤极易发生转移,一旦发生转移5年生存率极差。黑色素瘤中常存在多种蛋白的突变,导致多条信号通路异常激活,这些都可以在细胞增殖、细胞存活、上皮-间质转化、细胞侵袭转移等方面调节黑色素瘤细胞,进而影响其发生发展;与此同时,这些异常的信号通路或者蛋白也会对某些药物造成抵抗,影响黑色素瘤的治疗和预后。随着分子生物学和基因组学的最新进展,各种针对黑色素瘤的分子靶向治疗药物不断被研发出来。现结合国内外的研究进行综述,通过阐述黑色素瘤的各种靶点和作用方式,以期对黑色素瘤的诊断和治疗等提供参考。