KED碰撞模式-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定血液、尿液中8种重金属和准金属元素

在金属中毒与死亡案件中,实验室常用的标准曲线法对人体内重金属和准金属元素定量分析的准确性易受不同人群血液、尿液基质差异以及基质效应的影响,为此建立了直接稀释-电感耦合等离子体质谱结合标准加入法测定人体血液和尿液中Cr、Co、Ni、As、Cd、Sb、Pb、Tl等8种重金属和准金属元素含量的方法。优化了碰撞气流量和载气流速,提高了对8种目标元素定性定量的灵敏度;探究了不同体积分数下ICP-MS增敏剂Triton X-100和乙醇对元素响应值的影响,采用0.1%HNO 3-0.05%Triton X-100混合溶液作为血液稀释剂稀释检材50倍,0.1%HNO 3-1%乙醇混合溶液作为尿液稀释剂稀释检材10倍,提高样品溶液中元素的响应值的同时避免了未消解有机物对仪器信号的影响。标准加入法的应用避免引入其他空白样品定量目标元素,保持定量过程中基质的一致性从而克服了样品中的基质效应,采用动能歧视(KED)模式对直接稀释后的目标元素进行测定,干扰离子与He碰撞裂解有效降低了多原子离子干扰,并选择60 s的清洗时间降低了元素的记忆效应。结果表明,各元素检出限(LOD)为0.006~0.063μg/L,定量限(LOQ)为0.02~0.21μg/L,血液和尿液中的加标回收率为78.8%~118%,日内和日间精密度均小于8.7%。建立的方法快速准确、灵敏度高、操作安全,方法及相关数据可以为相关案件中血液、尿液检材中重金属和准金属元素的检验鉴定提供方法参考和数据支撑。

毛发中海洛因代谢物的释放与分析方法研究

通过对海洛因吸食者毛发和空白添加标准品毛发的碱消解、酸消解、甲醇超声提取、甲醇-5mol/LHCl超声提取、甲醇-三氟乙酸超声提取5种毛发中毒品及其代谢物的释放方法考察,确立了甲醇超声提取-液液萃取-气相色谱/质谱-选择离子检测的方法。本方法可最大程度地抑制海洛因的中间代谢物6-单乙酰吗啡的水解,其水解率仅为2.63%,极大地提高了海洛因滥用的毛发证据作用。利用本方法对添加6-单乙酰吗啡的毛发进行萃取和检测,6-单乙酰吗啡的回收率为52.6%,相对标准偏差RSD为4.6%;对添加不同浓度的吗啡、可待因、6-单乙酰吗啡3种毒品的毛发进行萃取和检测,其线性良好(r>0.99),相对标准偏差均小于15%。此外,考察了甲醇消解的影响因素,吸毒者毛发中的毒品释放效果随毛发的细碎程度和超声时间延长而提高。

海洛因滥用者毛发中毒品代谢物的固相萃取-GC/MS分析

考察了采用固相萃取技术时毛发中海洛因毒品及其代谢物的原形释放方法。通过对海洛因吸食者毛发和空白添加标准品毛发的碱消解、酸消解、甲醇超声提取、甲醇-5 mol/L HCI超声提取、甲醇-TFA超声提取5种毛发中毒品及其代谢物的释放方法考察,确立了甲醇超声提取-固相萃取-气相色谱/质谱-选择离子检测的方法为稳定、有效的海洛因滥用者毛发中毒品及其代谢物的释放与检测方法。利用该方法对添加6-单乙酰吗啡的毛发进行萃取和测试,6-单乙酰吗啡的回收率为78.7%,相对标准偏差RSD为2.4%,该方法可有效地检出海洛因滥用者毛发中的6-单乙酰吗啡。

血液中吗啡类毒品硅烷化气相色谱-质谱分析

建立和确证了血液中吗啡类毒品（吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因）的液相萃取-硅烷化-GC/MS-SIM检测的方法。以乙基吗啡为内标,以V（CHCl3）∶V（异丙醇）∶V（正庚烷）=50∶17∶33混合溶剂为萃取溶剂,以MSTFA为硅烷化试剂,采用GC/MS-SIM检测方式,吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因的线性相关系数均大于0.99,最低血液检测浓度可达到5 ng/mL;定量范围10~1000 ng/mL;日内重复性小于15%。该方法可用于海洛因吸食者血液中的毒品及其代谢物的检验。

超声萃取-三氟乙酰胺衍生化气相色谱-质谱法测定血液中阿片类毒品

在pH 9的磷酸盐缓冲介质中,人血试样(其中加乙基吗啡为内标)用氯仿、异丙醇及正庚烷(50+17+33)的混合溶剂进行超声萃取10 min,使其中吗啡、6-单乙酰吗啡和可待因进入有机相。离心分离,取上清液常温下吹干。残渣溶于乙酸乙酯中并用MBTFA试剂进行衍生化,取经衍生化的溶液1μL作气相色谱-质谱测定。人体血液中吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因的检出限(3S/N)分别为1,2,3μg·L^(-1),标准曲线线性范围均为10～1 000μg·L^(-1)。1 mL血液中添加10,100,1 000 ng 3个浓度药物,平均相对回收率吗啡为82.4%～85.5%,6-单乙酰吗啡为95.7%～99.1%,可待因为97.5%～101.2%。相对标准偏差(RSD,n=5),RSD_(日内)为4.1%～11.2%,RSD_(日间)为4.9%～12.1%。

鸦片类毒品酰化与硅烷化在GC-MS分析中的比较

比较了鸦片类毒品采用气相色谱/质谱分析前通过MSTFA硅烷化处理和MBTFA乙酰化处理后的分析结果;用乙基吗啡作内标,比较了血液中添加吗啡、6-单乙酰吗啡、可待因经过液相萃取后,再分别进行硅烷化和乙酰化处理后的检测结果;并比较了通过两种衍生化方法所测得的真实海洛因吸食致死者血样中上述3种毒品的浓度。结果说明,上述鸦片类毒品硅烷化后的响应高;乙酰化后的6-单乙酰吗啡和3-单乙酰吗啡的分离效果好;血液中乙酰化后的吗啡检测灵敏度高,而硅烷化后的6-单乙酰吗啡检测灵敏度高。两种方法各有特点,可以根据分析需要选择不同的方法。

电感耦合等离子体质谱-标准加入法测定中毒尸体中镉元素的含量

为研究镉元素在中毒尸体内的分布情况,提出了电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)-标准加入法测定中毒尸体中镉元素含量的方法。收集镉中毒尸体的生物体液(心脏全血、胆汁、胸腔积液)和固体组织(心、脾、肺、肾、脑、胃),取6份250μL生物体液或组织匀浆,各加入6个浓度水平的镉标准溶液系列(以铟为内标)和硝酸,在最高消解温度170℃下消解10 min,用2%(体积分数)硝酸溶液定容至10 mL,采用ICP-MS测定,以镉含量为横坐标,镉与铟的信号强度比值为纵坐标进行线性回归,工作曲线延长线与x轴交点的绝对值为样本中镉的含量。结果显示:中毒尸体中镉含量分布不均匀,肾中镉的质量分数为7 200.32 ng·g^(-1),而脑中镉的质量分数仅为24.88 ng·g^(-1);镉回收率为82.5%~94.1%,日内和日间测定值的相对标准偏差(n=6)均小于10%。

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱测定血液和肝脏中12种拟除虫菊酯类农药

建立了超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-QE-Orbitrap HRMS)测定血液和肝脏中12种拟除虫菊酯类农药的分析方法。血液和肝脏样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Hypersil GOLD VAN⁃QUISH色谱柱(1.9μm,2.1 mm×100 mm),以5 mmol/L乙酸铵溶液(含0.1%甲酸)和甲醇作为流动相进行梯度洗脱分离,采用全扫描及自动触发二级质谱(Full MS/dd-MS2)进行检测。结果显示:12种拟除虫菊酯类农药在各自线性范围内线性良好(r2≥0.9904),血液和肝脏中的检出限分别为1~18 ng/mL和1~18 ng/g,定量下限分别为2~20 ng/mL和2~20 ng/g,基质效应为82.3%~117%,回收率为74.1%~120%,日内精密度(In⁃tra-RSD)≤11%,日间精密度(Inter-RSD)≤12%。该方法满足公安机关办理实际案件要求,适用于血液和肝脏样本中拟除虫菊酯类农药的检验鉴定。

QuEchERS结合GC-MS/MS检测血液中的13种拟除虫菊酯类农药

本研究应用QuEchERS法提取净化血液中拟除虫菊酯类农药,拟建立13种拟除虫菊酯类农药在血液样本中的GC-MS/MS检测方法。血液样品采用乙酸乙酯萃取、无水MgSO_(4)盐析振荡离心后,取上清液并移入装有20 mg PSA、30 mg C18、15 mg GCB粉末的离心管中净化,氮吹复溶后,使用GC-MS/MS多重反应监测(MRM)模式对检材进行定性定量分析。结果表明,13中拟除虫菊酯类农药的血液样本均能通过GC-MS/MS技术进行检测,在5~500μg·L^(-1)范围内,相关系数(R 2)在0.9937~0.9993之间,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别在0.2~2μg·L^(-1)、0.5~2μg·L^(-1)之间,平均回收率为73.49%~108.09%,日内精密度为1.30%~10.31%,日间精密度为1.70%~10.80%。该方法操作简便、检出限低、结果可靠,适用于法庭科学中血液样品中拟除虫菊酯类农药的检测。

生物检材中有机磷农药代谢物检测技术研究进展

有机磷农药代谢物检测分析在有机磷农药中毒、投毒案件定性、临床诊断和生物监测等方面发挥着重要作用。发展精确检测痕量甚至超痕量有机磷农药代谢物的技术,建立检测生物样本复杂基质中有机磷农药代谢物的方法,成为法庭科学领域亟待解决的问题之一。目前国内外常见的实验室检测方法有气相色谱、气相色谱-质谱联用、液相色谱-串联质谱等,本文重点综述了这些检测方法在有机磷农药代谢物检测方面的研究进展,以及血液、尿液等生物检材所需的液-液萃取、固相萃取、QuEChERS等前处理技术和毛发生物检材所需的固-液萃取等前处理技术。此外,本文还介绍了荧光探针法、免疫分析法、生物传感器法等快速检测技术的原理及应用进展,并对现有检测技术存在的问题进行了总结。

氧化乐果在血液中的分解动力学

目的研究氧化乐果在血液中的分解动力学变化规律。方法血液中加入乙腈沉淀蛋白,色谱柱采用Waters BEH C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为5 mmol/L乙酸铵水溶液-甲醇,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为2μL;电喷雾离子(electrospray ionization,ESI)源,正离子检测,采用多反应监测模式进行定性定量分析。取空白人血液分别添加氧化乐果标准品至质量浓度为0.78、1.40、2.30、4.50、7.20μg/mL,每种质量浓度均分别置于-20℃、4℃、20℃三种温度条件下保存,于不同时间点(0、1、3、4、7、11、15、24、32、40、48、64、80、96和120 d)检测其中氧化乐果的含量。结果在不同温度环境下,不同质量浓度的氧化乐果在人血液中均呈下降趋势,在-20℃、4℃、20℃保存环境下分解符合一级动力学过程一室开放模型,可以采用C_t=C_oe^(-αt)表示,根据C_t=C_oe^(-αt)计算的各样品中氧化乐果含量理论值与实测值接近。结论不同质量浓度的氧化乐果在血液中均存在分解现象,且在不同保存环境条件下存在很大差异,实际检案中对疑似氧化乐果中毒的案件,提取检材后应冷冻保存并及时送检。

毛细管电泳pH 碱修饰在线富集方法检测唾液中吗啡类毒品

本文建立了吗啡、可待因和6-单乙酰吗啡的毛细管电泳pH碱修饰在线富集方法,并进行了方法学考察。采用pH 3浓度为100mmol/L的磷酸盐缓冲液(含20%甲醇和5%异丙醇)作为背景缓冲液,0.2psi压力下引入3s含12.5%氨水的甲醇:水(50:50)混合溶液,10kV电压下电迁移进样99s,最后施加25kV电压进行分离检测。3种毒品在20-1000ng/mL范围内具有良好的线性关系,线性相关系数(r)均大于0.99,检出限均为7g/mL,相对标准偏差(RSD)在5.7%-12.2%(n=5)之间。该方法样品前处理简单,只需用甲醇稀释样品便可进样分析,方法灵敏度较高、稳定性较好,可用于唾液中吗啡类毒品的检验。

敌敌畏在血液中的分解动力学研究

目的研究敌敌畏在血液中的分解动力学变化规律。方法分解动力学的研究:空白人血分别添加敌敌畏至浓度为0.36、0.72、1.5、3.0、5.3μg/mL,每种浓度再平均分成3组,分别置于20、4、-20℃三种温度条件下保存,于不同时间(1、2、4、6、8、12、16、20、24、28、32、40、48、64、80、96、120d)取样,检测其中敌敌畏的含量;样品的处理:血液中加入乙腈沉淀蛋白,采用Waters BEH C 18(1.7μm 2.1×50mm)柱子,流动相为5m M乙酸铵水溶液-甲醇;流速:0.3mL/min;进样量:2μL,电喷雾离子源(ESI),正离子检测,采用多反应监测方式进行定量分析。结果在不同温度环境下不同浓度的敌敌畏在人血中均存在分解,在-20℃和4℃保存环境下分解符合一级动力学过程一室模型,可以用Ct=Coe-αt表示,在20℃保存环境下分解过快,不宜用动力学方程表示。结论不同浓度的敌敌畏在血液中均存在分解,且在不同保存环境条件下存在很大差异。提示法医工作中对疑似敌敌畏中毒案件,应冷冻保存并及时送检。

萃取方式对海洛因滥用者毛发中代谢物分析的影响

目的比较液相萃取和固相萃取对毛发中海洛因毒品代谢物分析的影响。方法对海洛因吸食者毛发和空白添加标准品毛发经甲醇超声后的提取液分别进行液相萃取、固相萃取,然后进行衍生化和GC/MS-SIM检测。结果利用固相萃取法对添加6-单乙酰吗啡的毛发进行萃取和测试,6-单乙酰吗啡的回收率为32.0%,相对标准偏差(RSD)为2.4%;而液相萃取回收率为52.6%,相对标准偏差(RSD)为4.6%。结论固相萃取较之液液萃取,有更好的重复性,更少的杂质干扰和有机溶剂消耗等优势,但甲醇超声液需要挥干后才能进行固相萃取,而且6-单乙酰吗啡的水解率高。

血液中13种有机磷农药代谢产物的QuEChERS-超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道离子阱高分辨质谱法检测

建立了QuEChERS结合超高效液相色谱-四极杆静电场轨道离子阱高分辨质谱(UPLC-Q Exactive Orbitrap HRM S)同时检测血液中13种有机磷农药代谢产物的方法。血液样品经甲醇-乙腈溶液(3:2,V/V)提取,优化的QuEChERS方法净化后,进行UPLC-Q Exactive Orbitrap HRM S检测。实验结果显示:13种有机磷农药代谢产物在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))均大于0.9969,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别在0.2~10 ng/mL和0.5~10 ng/mL之间;在20,50,100 ng/mL 3个添加水平下,13种有机磷农药代谢产物的回收率为60.6%~119.0%,基质效应为54.4%~122.1%,日内和日间精密度RSD均小于11%。该方法适用于公安机关在办理有机磷农药中毒案(事)件中对血液里多种有机磷农药代谢产物的检测鉴定。

拟除虫菊酯类农药残留检测技术研究进展

拟除虫菊酯类农药的使用对食品安全、环境安全及人类健康造成了严重的隐患,加强农药残留检测成为多方关注的焦点。概述了当前应用于拟除虫菊酯农药检测的主要仪器检测方法,气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用技术、液相色谱-串联质谱技术,同时介绍了免疫分析法、表面增强拉曼技术等快速检测方法。对当前拟除虫菊酯类农药实际检测工作中存在的问题及今后研究发展的方向进行讨论与展望。

UPLC-MS/MS检测人血中18种有机磷及氨基甲酸酯类农药

目的建立人血中18种有机磷及氨基甲酸酯类农药超高压液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的检测方法。方法血液中加入乙腈沉淀蛋白,采用Waters BEH C18(1.7μm 2.1×50mm)柱子,流动相为5mmol/L乙酸铵水-甲醇,流速:0.3m L/min;进样量:2μL,电喷雾离子源(ESI),正离子检测,采用多反应监测方式进行定量分析。结果药物最小检测限(LOD)在0.1~40ng/m L之间,定量限(LOQ)在0.5~50ng/m L之间,各药物浓度在定量限到500ng/m L范围内线性良好,回收率均在64.3%~111.9%之间,相对标准偏差为3.9%~10.3%。结论该方法专属性强、灵敏、准确,可以适用于法庭与临床毒物分析。

甲胺磷在人血中的分解动力学研究

建立人血中甲胺磷的分解动力学模型,研究甲胺磷在人血中的分解动力学变化规律。取空白人血分别添加甲胺磷至浓度为0.8、1.4、2.2、4.4、6.4μg/m L,每种浓度再平均分成3组,分别置于20℃、4℃、-20℃3种温度条件下保存,于不同时间(0d、1d、3d、5d、7d、11d、15d、24d、32d、40d、48d、64d、80d、96d、120d)取样,检测其中甲胺磷的含量,并采用多反应监测方式进行定量分析。在不同温度环境下,不同浓度的甲胺磷在人血中均存在分解,20℃、-20℃保存环境下分解符合一级动力学过程二室开放模型,可以用Ct=Coe-αt+C1e-βt表示;4℃保存环境下分解符合一级动力学过程一室模型,可以用Ct=Coe-αt表示。不同浓度的甲胺磷在血液中均存在分解,且在不同保存环境条件下存在很大差异,在法医工作实践中,对疑似甲胺磷中毒案件应冷冻保存并及时送检。