大鼠脑淋巴引流阻断后脑形态学和皮质诱发电位的改变

目的:观察分析脑淋巴引流阻断对脑形态和功能的影响。方法:实验于2003-01/08在泰山医学院脑微循环研究所完成。实验动物选择雄性健康成年Wistar大鼠64只。49只大鼠用于脑淋巴引流对脑形态学的影响实验,随机分成3组;大体观察组14只;光镜观察组21只和电镜观察组14只。每组又分为脑淋巴引流阻断亚组和假手术对照亚组。16只动物用于脑淋巴引流阻断对皮质诱发电位影响的观察,随机分成两组,假手术对照组6只,脑淋巴引流阻断组10只。脑淋巴引流阻断亚组通过摘除颈浅和颈深淋巴结造成脑淋巴引流障碍,假手术对照组不结扎淋巴管和摘除淋巴结,通过大体,光镜及电镜观察不同时间(淋巴引流阻断1,2,3,5,7,10,15d)脑结构变化以及皮质诱发电位潜伏期的改变。结果:64只大鼠在实验过程中无死亡,均进入结果分析,无脱失值。①在脑淋巴引流阻断大鼠,大体观察见脑表面苍白、饱满、脑沟变浅窄、脑回变宽平,光镜下组织间隙增宽,液体郁滞,神经元变性、坏死、并有大量吞噬细胞浸润,形成“卫星现象”,电镜下神经元肿胀,线粒体等亚细胞结构变化明显。②与假手术对照组比较,脑淋巴引流阻断后第5天至第7天皮质诱发电位潜伏期明显延长[(6.28±0.23),(6.97±0.348)ms,P<0.01];(6.23±0.22),(7.12±0.20)ms;P<0.01]。结论:脑淋巴引流阻断对脑形态结构有重要影响,脑淋巴引流的阻断引起脑内感觉冲动传导异常,皮质诱发电位潜伏期明显延长。皮质诱发电位检查简便易行,可作为淋巴引流障碍性脑损伤的一项重要指标。

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA在淋巴滞留性脑病大鼠脑皮质及海马的表达

目的:探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA在淋巴滞留性脑病大鼠脑皮质及海马中的表达情况及其与神经元凋亡之间的关系。方法:选取成年雄性Wistar大鼠88只,随机分为脑淋巴引流阻断组40只、假手术组40只及正常对照组8只。脑淋巴引流阻断组和假手术组分为术后1,3,5,7,14d5个时间点,每个时间点8只。脑淋巴引流阻断组建立淋巴滞留性脑病动物模型,在损伤后各时间点取颞顶皮质、海马区脑组织。假手术组只分离和暴露淋巴结,但不结扎淋巴管,亦不摘除淋巴结。用半定量反转录-聚合酶链反应方法观察淋巴滞留性脑病大鼠损伤后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA的表达情况。结果:88只大鼠均进入结果分析。①在颞顶皮质,Caspase3mRNA在淋巴阻塞后3d内表达上调,以第1天表达最高,淋巴阻塞后3d内Caspase3mRNA表达比假手术组及对照组高,且有统计学意义(F=29.892,P=0.001<0.01)。淋巴阻塞3d后表达接近正常对照及假手术组。对照组与假手术组之间差异无统计学意义。②在海马,Caspase3mRNA较颞顶皮质表达上调更明显,以第1天表达最高,淋巴阻塞后5d内Caspase-3mRNA表达比假手术组及对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),5d后表达接近正常对照及假手术组。结论:在淋巴滞留性脑病大鼠模型中神经元凋亡的发生可能与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3mRNA的激活有关。

大鼠颈淋巴引流阻断后急性期内脑结构、微区脑血流量和体感诱发电位的变化

通过结扎并摘除颈深淋巴结造成脑淋巴引流障碍,观察不同时间脑结构的变化,同时检测大脑皮层微区血流量和体感诱发电位的动态变化。结果示:光镜下见组织间隙增宽液体瘀滞神经元变性、坏死,有大量吞嗜细胞浸润,形成"卫星现象";电镜下见神经元肿胀坏死,大胶质细胞肿胀,线粒体等亚细胞结构变化明显。还发现颈淋巴引流阻塞后1天、5天和7天大脑皮层微区血流最显著降低和阻塞后5天、7天体感诱发电位潜伏期明显延长。结果表明阻断颈淋巴引流对脑结构有明显影响,其结构变化构成了"淋巴性脑水肿",开拓了脑水肿研究的新领域;同时表明颈淋巴引流阻断与脑组织供血有关;体感诱发电位变化是诊断淋巴性脑水肿的一个重要指标。

脑淋巴引流障碍加重大脑中动脉阻塞大鼠缺血性脑水肿

目的 探讨脑淋巴引流阻滞对脑缺血性的影响。方法 将76只Wistar大鼠随机分为大脑中动脉阻塞(MCAO)组和MCAO加脑淋巴引流阻断组(MCAO+CLO)组,在术后24、48、72h分别检测缺血区脑组织水、电解质含量。结果 在手术后各时间点,MCAO大鼠缺血区脑组织的含水率、Na^+含量、Ca^(2+)含量均显著增加,而K^+显著下降。MCAO+CLO组大鼠的上述指标变化更为显著。结论 脑淋巴引流障碍能明显加重MCAO后缺血性脑水肿。

脑淋巴引流阻滞对大脑中动脉阻塞鼠缺血性脑组织氧自由基的影响

目的 探讨脑淋巴引流阻滞对脑缺血后脑组织氧自由基的影响。方法 将 76只 Wistar大鼠随机分为大脑中动脉阻塞 (MCAO)组和 MCAO加脑淋巴引流阻断 (MCAO+CLB)组 ,在术后 2 4 h、48h和 72 h分别检测 SOD活性和 MDA含量的变化。结果 在手术后各时间点 ,MCAO大鼠缺血区脑组织 SOD活力显著降低而 MDA含量明显增多 ,在 MCAO+CLB大鼠上述指标的变化更加严重。结论 脑淋巴引流障碍能通过增加缺血区脑组织的氧自由基含而加重

无体征脑出血误诊举例

随着CT的普及，人们逐渐更新了对脑卒中的认识。以往“起病急骤、神志障碍、颅压增高、偏瘫失语”即考虑脑出血的常规，已远与临床不符，今举五例。无体征脑出血”，与同遭讨论。

大鼠颈部淋巴引流阻断后海马bcl-2、bax表达和细胞凋亡的动态变化

为了研究淋巴滞留性脑病中海马bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的动态变化,本实验用阻断大鼠颈部淋巴引流的方法制备淋巴滞留性脑病模型,术后1、2、3、5、7和14d处死动物,H&E染色观察海马组织结构变化,TUNEL荧光标记检测原位细胞凋亡,RT-PCR检测海马bcl-2和bax的mRNA表达。结果显示脑组织有水肿的结构变化,第5天最明显。海马TUNEL阳性细胞数从术后2d开始增多,5d达最高值。bax表达于术后1d开始增高,第2天即达最高值。bcl-2表达于术后1d开始降低,5d达最低值。第14天上述指标均恢复到对照组水平。研究表明,阻断颈部淋巴引流所导致的淋巴滞留性脑病中海马bcl-2和bax的表达发生变化,而且海马神经细胞的死亡以凋亡为主。

泰山野生丹参与种植丹参根、茎、叶中三种有效成分含量的分析比较

选用乙醇超声提取法提取丹参酮ⅡA,选用氨水超声提取法提取丹参素和原儿茶醛,用HLPC法测定泰山野生紫花丹参、种植紫花丹参和白花丹参中的丹参素、原儿茶醛、丹参酮ⅡA三种有效成分含量,并进行分析比较。结果表明野生紫花丹参、种植紫花丹参和白花丹参根中均含有丰富的有效成分;丹参叶中丹参素含量较高;丹参茎中三种有效成分含量较低。研究表明泰山三种丹参中有效成分含量无明显差异,丹参叶含丰富的丹参素和原儿茶醛,提示丹参叶也具有一定的药用价值。

青壮年缺血性脑血管病血清同型半胱氨酸水平的研究

目的 探讨血清同型半胱氨酸 (Hcy)水平与缺血性脑血管病的关系。方法 研究对象为青壮年缺血性脑血管病患者 182例 ,分为 3组 :短暂性脑缺血发作 (49例 )、脑梗死急性期 (74例 )和脑梗死恢复期 (5 9例 ) ,正常对照组 38例。应用高效液相色谱法 ,测定空腹血清同型半胱氨酸浓度 ,应用自动生化分析仪测定血糖、血脂 ;同时对脑梗死急性期患者进行病灶体积计算。采用 SPSS软件分析。结果 脑梗死急性期血清同型半胱氨酸水平显著高于脑梗死恢复期及短暂性脑缺血发作组 (P<0 .0 1) ;3组均明显高于对照组 (P<0 .0 5～ 0 .0 1) ;血清 Hcy水平与病灶体积大小呈正相关 (r=0 .4 5 ,P<0 .0 5 ) ;高血压、糖尿病和高脂血症病史与血清 Hcy水平无明显的相关。结论 高 Hcy血症可能为青壮年缺血性脑血管病发病的独立危险因素 ,且血清同型半胱氨酸水平能反映脑梗死急性期病灶的大小。

低分子肝素钙、阿司匹林联合治疗急性脑梗死的临床研究

目的观察低分子肝素钙、阿司匹林及其联合应用治疗急性脑梗死的疗效及其安全性。方法共选择240例急性脑梗死患者,随机分为低分子肝素钙治疗组、阿司匹林治疗组、低分子肝素钙与阿司匹林联合治疗组及对照组,每组各60例。治疗前后分别作神经功能缺损程度评分及临床疗效判定,并观察每组的不良反应。结果低分子肝素钙治疗组、阿司匹林治疗组、低分子肝素钙与阿司匹林联合治疗组神经功能恢复均明显优于对照组,低分子肝素钙与阿司匹林联合治疗组临床疗效明显优于低分子肝素钙治疗组与阿司匹林治疗组,各组出血发生率无显著差异性。结论脑梗死急性期给予低分子肝素钙联合阿司匹林治疗安全有效,且明显优于单药治疗。

内皮素-1与脑血管痉挛缺血性脑损害的关系及银杏叶制剂的保护作用

目的 :探讨内皮素 1 (endothelin 1 ,ET 1 )与蛛网膜下腔出血 (subarachnoidhem orrhage,SAH)后缺血性脑损害的关系和银杏叶制剂 (ginkgobilobaextract,GBE)的防治作用。方法 :应用非开颅大鼠模型 ,对SAH组和GBE组测量基底动脉 (basilarartery ,BA)管径并观察2 4h内微区脑血流量 (regionalcerebralbloodflow ,rCBF)和颅内血浆ET 1水平动态改变 ,3天后对海马CA1区行病理检查。结果 :SAH后rCBF迅速而持续降低 ,血浆ET 1浓度显著增加 ,BA痉挛 ,海马CA1区神经元明显受损。GBE使上述改变均减轻。结论 :SAH时ET 1增加是导致缺血性脑损害的重要因素 ,GBE通过拮抗ET 1病理性增多而减轻缺血性脑损害。

银杏叶制剂对蛛网膜下腔出血鼠体感诱发电位和一氧化氮的影响

目的 :探讨蛛网膜下腔出血 (SAH)后体感诱发电位 (SEP)和一氧化氮 (NO)变化及银杏叶制剂 (EGb)的影响。方法 :对假手术对照组、SAH模型组和EGb处理组大鼠检测 2 4h内局部脑血流量 (rCBF)、SEP和血清及脑组织NO含量动态变化。结果 :SAH模型组大鼠于SAH后rCBF立即降低 ,在 2 4h内无恢复趋势 ,SEP潜伏期于SAH后 1h开始明显延长 ,血清和脑组织NO含量于SAH后 1h开始分别显著减少或明显增加 ,并持续 2 4h。‘EGb处理组大鼠上述指标的异常变化均较轻。结论 :SEP对SAH后脑缺血损害的判断有重要意义。血清NO减少、脑组织NO增加分别在脑血管痉挛发生及加重脑缺血损害中起重要作用。

富钒鹰嘴豆芽对糖尿病大鼠血糖和血脂的影响

目的:研究富钒鹰嘴豆芽降糖作用及可能机制。方法:以链脲佐菌素诱导形成糖尿病大鼠模型,饲喂不同浓度的富钒鹰嘴豆芽4周,观察大鼠血糖和血脂等的变化。结果:与正常对照组比较,糖尿病模型大鼠的血糖升高了4倍,血浆胰岛素降低了57.63%、糖化血红蛋白(GHb)升高了42.28%,谷丙转氨酶、谷草转氨酶和血浆脂质水平明显升高。而分别饲喂不同浓度富钒鹰嘴豆芽4周后,糖尿病大鼠的上述指标都得到改善,其中以中等剂量(100μg/ml)富钒鹰嘴豆芽治疗组的效果最明显:血糖水平降低了58.60%(P<0.05);血浆胰岛素水平明显增高(P<0.05)且接近正常;GHb降低了32.81%,血浆低密度脂蛋白、甘油三酯和总胆固醇明显下降(P<0.05),谷丙转氨酶和谷草转氨酶分别降低了39.98%和41.37%。而葡萄糖耐量得到显著改善,2h的血糖值降低了38.46%。结论:富钒鹰嘴豆芽能阻止糖尿病大鼠高血糖的进展和血浆脂质水平的改变;这种钒的有机复合物形式达到了减毒增效的目的,具有较佳的应用前景。

三七总皂甙对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的 研究三七总皂甙(PNS)对大鼠局灶性脑缺血的保护作用.方法 阻断大鼠大脑中脉造成可逆性脑缺血模型,观察PNS对缺血脑组织的保护作用.结果PNS 20、40mg·kg^(-1)·d^(-1)×10d能显著改善大鼠MCAO后的神经功能障碍,缩小脑梗塞面积,减轻脑水肿,并能降低缺血脑组织的总钙含量,明显提高SOD活力,降低MDA含量.结论 PNS对局灶性缺血脑组织具有保护作用,其机理推测与降低脑组织钙含量及抗氧自由基损伤有关.

白花丹参对小鼠血小板粘附功能及血液流变学的影响

目的:探讨白花丹参对血小板的粘附及血液流变学的作用。方法:用不同浓度的白花丹参给予小鼠灌胃,以生理盐水做对照,采用体外血液灌流的方法,在低切变率(300S-1)下观察血小板在胶原蛋白表面上的粘附面积。利用血液流变仪测定高切、低切变率下全血粘度。结果:浓度为0.5、1.0、2.0 g/m l白花丹参组血小板的粘附面积分别是7.48±3.43,6.83±1.11,4.39±0.93;生理盐水组20.66±1.10。白花丹参血小板粘附面积与生理盐水对照组比较均有显著性差异,P<0.001;且白花丹参与生理盐水对照比较血小板粘附的形态发生的显著较化,实验组血小板粘附较疏松,并有较伸展的单个散在;而对照组血小板的粘附聚集成块,单个粘附少见。不同浓度白花丹参组的高切、低切全血粘度、红细胞压积均显著于生理盐水对照组,P<0.01。结论:利用胶原蛋白包被的玻片进行体外灌流实验,具有方便、直观的研究血小板的体外粘附的优点。白花丹参具有明显的抗血液凝集作用,是良好的抗凝血的药材。

银杏叶制剂对蛛网膜下腔出血早期大鼠脑缺血的影响

目的 :探讨银杏叶制剂 (GBE)对蛛网膜下腔出血 (SAH)早期缺血性脑损伤的防治作用。方法 :对假手术组 (SO组 )、SAH组和SAH +GBE组大鼠检测 2 4h内局部脑血流量 (rCBF)、脑组织内皮素 - 1(ET - 1)含量和Ca含量改变 ,并对海马CA1区组织作光镜检查。结果 :SAH组于术后rCBF迅速而持续降低 ,脑组织ET - 1含量和Ca含量在诱导SAH 1h后均显著高于SO组 ,3d后海马CA1区神经元明显受损。SAH +GBE组的上述改变均较轻。结论 :GBE可减轻SAH后缺血性脑损伤。

大鼠海马CA_1区锥体细胞的急性分离和鉴定

目的：建立一种适用膜片钳技术的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞的急性分离方法，并对其进行鉴定。方法：采用酶加机械分离法制备７～１０ｄ鼠龄的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞，用免疫荧光技术鉴定神经元，其电生理学特性测定用全细胞膜片钳技术。结果：分离的锥体细胞是海马ＣＡ１区锥体细胞，且具有正常的电生理学特性，并保存了某些主要的电压依赖性和受体依赖性离子通道特性。结论：成功地建立了一种简单、快速、高产的适用于膜片钳技术的大鼠海马ＣＡ１区锥体细胞的急性分离方法。