患病异育银鲫中嗜冷黄杆菌的分离鉴定及组织病理学观察

为确定越冬期内江苏多地异育银鲫暴发性死亡的原因,本研究利用高通量测序比较了健康样品和患病样品的微生物群落多样性和结构组成的差异,分析了异育银鲫病害暴发过程中的细菌类型及特性。结果显示,在属水平上,患病样品中黄杆菌属丰度最高。在种水平上,患病样品中嗜冷黄杆菌的丰度最高,分别达到63.01%和61.31%,显著高于健康组的1.55%。根据微生物群落特征分析结果,从患病样品体表的病灶处分离出优势病原菌NJ01,通过细菌形态学、生理生化分析、16S rDNA序列比对确定NJ01菌株为嗜冷黄杆菌。人工感染NJ01菌株14 d后,1.7×10^(6)和1.7×10^(7) CFU/mL两组的死亡率达到100%,感染症状和自然发病症状一致。组织病理学观察发现,病鱼的肌细胞坏死,间质中充满了淋巴细胞;肝脏中细胞溶解坏死,细胞核消融;在脾脏中发现脾细胞散在坏死,伴随着充血的症状;肾小管上皮脱落,肾间质存在大量淋巴细胞。药物敏感实验结果显示,NJ01菌株对头孢西叮、头孢哌酮、庆大霉素和克拉霉素等敏感。研究表明,优势菌NJ01是致病菌,可通过扰乱机体正常的免疫和代谢功能导致疾病的发生。本研究首次报道了嗜冷黄杆菌在异育银鲫中的致病性,这将为大宗淡水鱼“越冬综合征”的药物防治及其致病机理研究提供参考依据。

一株鲫鱼致病性普通变形杆菌的鉴定及生物学特性研究

本研究对患病鲫鱼进行发病原因探究,致病菌特性分析,从而为鲫鱼病害的防控提供理论基础。通过从患病鲫鱼肝脏和肠道中分离纯化细菌,对分离菌进行16S rRNA序列分析、人工感染试验、生理生化鉴定、系统发育树构建,并通过纸片扩散法进行药敏试验,筛选敏感药物。从病鱼肝脏和肠道中均分离出菌株A,16S rRNA序列分析和理化特性均与普通变形杆菌Proteus vulgaris基本一致,人工感染试验证实菌株A为致病菌,LD50为9.77×10^(6)CFU/尾。菌株A对头孢唑啉、头孢拉定、氟苯尼考、卡那霉素、阿奇霉素及庆大霉素等6种抗生素高度敏感,对阿莫西林、红霉素、新霉素、克林霉素及多西环素等5种抗生素耐药。本次试验结果表明菌株A为普通变形杆菌,是此次鲫鱼病害的主要元凶,临床治疗可以根据药敏试验选用高度敏感抗生素进行治疗。

沙塘鳢肠道致病菌G-2全基因组测序及信息分析

为探明造成养殖沙塘鳢肠道出血的病原菌G-2的特性,对G-2进行全基因组测序和分析。基因组组分分析和基因功能注释结果显示:G-2的总基因数为5134个,其中蛋白编码基因4977个,非蛋白编码基因157个,非编码基因中tRNA基因107个,rRNA基因42个,sRNA基因8个;分别有5109、3339、3362、2543个基因在对应的Nr、SwissProt、COG、KEGG数据库中获得注释;毒力基因分析表明G-2含有多种肠毒素和溶血素基因、InhA蛋白、磷脂酶及蛋白质毒素,解释了该菌造成养殖沙塘鳢肠道出血的原因。基于G-2菌株的16S rRNA序列信息构建系统进化树,确定其为苏云金芽孢杆菌。

健康与患病河蟹池塘底泥微生物群落特征差异

本研究采集了江苏省扬中地区健康与患病河蟹池塘表层(0~5 cm)和深层(5~10 cm)的底泥,分析了不同池塘底泥的微生物群落特征和主要影响因子。结果表明,患病组底泥的pH(7.77)和全钾(1.78 g/kg)显著低于健康组(7.91和1.95 g/kg),而水溶性盐总量(1.50 g/kg)显著高于健康组(1.05 g/kg)。在0~10 cm深度范围的底泥中,健康组深层微生物多样性(Shannon)显著高于表层(P<0.05),而患病组深层的微生物丰富度(ACE和Chao)、多样性(Shannon)均显著高于表层(P<0.05)。两种池塘底泥微生物中的优势菌群均为变形菌门(Proteobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)和酸杆菌门(Acidobacteriota)。两种池塘存在包括芽孢杆菌属(Bacillus)在内的多种差异菌群。RDA分析结果表明,全氮是影响河蟹池塘底泥微生物群落的主要环境因子。此外,决定健康池塘底泥微生物群落的环境因子还有水溶性盐、碳酸钙和全硫,而决定患病池塘底泥微生物群落的环境因子为有机质和p H。因此,底泥中芽孢杆菌和pH等可能是潜在影响河蟹健康的关键因素。本研究结果可为养殖河蟹池塘的微生态调控提供理论参考。

扶正清毒颗粒对高危型HPV感染宫颈病变患者Cyclin D1表达的影响

目的探究高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染宫颈病变患者应用扶正清毒颗粒治疗对其细胞周期素D1(Cyclin D1)表达的影响。方法150例高危型HPV感染宫颈病变患者,根据治疗方法不同分为观察组和对照组,每组75例。对照组患者应用重组人干扰素α2b栓治疗,观察组患者在对照组基础上联合扶正清毒颗粒治疗。对比两组患者的HPV转阴率,Cyclin D1表达水平,疾病归转情况。结果治疗3个月后,观察组患者的HPV转阴率为40.00%,明显高于对照组的24.00%,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗6个月后,观察组患者的HPV转阴率为66.67%,明显高于对照组的50.67%,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前,观察组患者的Cyclin D1表达水平为(78.63±10.36),与对照组的(77.96±10.56)对比差异无统计学意义(P>0.05);治疗3个月后,观察组患者的Cyclin D1表达水平为(32.56±5.23),低于对照组的(58.69±8.48),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗6个月后,观察组患者的Cyclin D1表达水平为(22.36±5.28),低于对照组的(45.25±5.69),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者均为CINⅠ。治疗6个月后,观察组转为慢性宫颈炎12例(16.00%),与对照组的11例(14.67%)比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组转为慢性宫颈炎伴挖空细胞13例(17.33%),与对照组的10例(13.33%)比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗6个月后,观察组CINⅠ患者5例(6.67%),少于对照组的14例(18.67%),差异具有统计学意义(χ^(2)=4.881,P=0.027<0.05)。结论高危型HPV感染宫颈病变患者应用扶正清毒颗粒后,可以通过调控Cyclin D1表达来实现对宫颈高危型HPV感染控制作用,以及患者的HPV转阴率明显较高,从而有助于诱发高危型HPV感染细胞凋亡,成为部分高危型HPV感染病变患者的治疗手段之一。

铸牢中华民族共同体意识的文化实践——以宁夏为例

文化实践是人类社会实践的基本形式,是推动社会发展的重要动力,为各民族交往交流交融提供了广阔的文化空间。宁夏曾经是北方游牧民族与中原农耕民族交往交流交融的交汇地带,如今保持着民族团结、宗教和顺、社会和谐的良好局面,具有典型的民族互嵌式社会结构。宁夏不断夯实铸牢中华民族共同体意识的文化实践基础,通过文化实践拓宽文化空间、开发文化资源、创新文化媒介,从而增强各族群众对中华文化的高度认同,不断增强中华民族的凝聚力和向心力。

长江江苏段底栖动物群落结构现状及其水质的初步评价

通过2004年9月、12月和2005年3月3次对长江江苏段底栖动物的定量调查及平时的定性补充调查,结果共发现底栖动物58种,其中环节动物门12种、软体动物门16种、节肢动物门30种;平均密度为95.03 ind/m2,不同水期密度分别为丰水期115.74 ind/m2、平水期127.07 ind/m2、枯水期42.27 ind/m2;主要优势种为中华颤蚓、钉螺、日本沙蚕、河蚬和苏氏尾鳃蚓;Shannon-W iener生物多样性指数为3.281,平均水质综合评定为轻度污染。

雌性克氏原螯虾性腺发育及相关系数的周年动态研究

建立了克氏原螯虾(Procam barus clarkii)生殖群体的平均体长、体重、性腺重及肝脏重的周年统计值,并利用怀卵量、抱卵量、相对繁殖力等生态学参数建立性腺发育数学模型。结果显示:雌性螯虾初始怀卵和抱卵的理论体长分别为5.6 cm和5.8 cm,理论最大怀卵量和抱卵量分别为1963粒和1136粒;通过模拟Logistic曲线,得到怀卵量随体重增长的3个关键点即始盛期、高峰期和盛末期,分别为16.87 g、36.53 g和56.18 g;雌性克氏原螯虾理论最大相对繁殖力的体长为9.22 cm,最大值为19.78粒/g;其理论最大体长为15.01 cm且当体长小于3.43 cm时性腺尚未发育。另外,本研究还分析了克氏原螯虾产卵群体的性成熟时间与结构。

中药益髓生血颗粒治疗地中海贫血的临床研究

目的观察中药益髓生血颗粒治疗地中海贫血的临床疗效。方法以益髓生血颗粒治疗血红蛋白H病(HbH病)25例,β地贫156例(重型β地贫45例,重型β地贫复合血红蛋白E18例,中间型β地贫58例,中间型β地贫复合血红蛋白E35例),用药方法为每次1包,每包10g,6岁以下儿童2/d,6岁以上3/d,3个月为1个疗程。结果25例HbH病中21例有效,治疗后有效病例Hb增加5～31g/L,增加>10g/L者16例(其中增加21～31g/L者6例)。156例β地贫中145有效,治疗后有效病例Hb增加5～32g/L,增加>10g/L者97例(其中增加21～32g/L者29例),总有效率91.71%,中药为颗粒冲剂,服用方便,无毒副作用。结论益髓生血颗粒对α地贫和β地贫均有较好的疗效,可以提高患者的Hb水平,使贫血症状得到缓解。

IgG亚型检测对高效价抗体孕妇的临床意义

目的探讨高效价IgG抗体孕妇血清中的IgG抗体亚型与新生儿溶血病的发生及危重程度的关系。方法对血清IgG抗-A(B)效价持续≥512,ABO以外IgG抗体效价持续≥256的孕妇,用德国欧盟公司的亚型试剂盒测定其血清IgG亚型,对其出生后的新生儿脐血进行新生儿溶血系列检测。结果 10例高效价IgG抗体孕妇中5例检出IgG1或IgG3亚型,其生产的新生儿均发生不同程度的高胆红素血症,给予静滴白蛋白,兰光箱治疗,2周后黄疸渐退;5例检出IgG2或IgG4亚型孕妇生产的新生儿未发生高胆红素血症。结论对高效价抗体孕妇进行检测IgG抗体亚型,对检出IgG1或IgG3亚型的给予药物预防性治疗,必要时进行血浆置换;对检出IgG2或IgG4亚型孕妇可以不进行预防性干预治疗,从而有效提高预防性治疗的准确性。

UHPLC-Q-TOF/MS技术应用于中药旱莲草化学成分研究

目的通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)对中药旱莲草的化学成分进行系统、全面研究。方法采用Agilent SB-C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)柱,流动相为乙腈-甲酸溶液系统梯度洗脱,质谱采用ESI正离子模式,分别对桂林阳朔、桂林荔蒲、湖南邵阳、南宁和湖北襄樊五个产地的旱莲草药材进行分析。结果该方法共鉴别出旱莲草中29个化学成分。结论本实验为建立旱莲草药材的质量控制标准提供了参考依据。

HPLC法同时测定淫羊藿药材中的5个黄酮类成分

目的：建立同时测定淫羊藿药材中5种成分的HPLC方法。方法：采用Diamonsil—C18柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈和甲酸水（pH=3．0），梯度洗脱；流速：0．9mL／min；DAD检测，检测波长：270nm。结果：淫羊藿药材中5个主要黄酮类成分朝藿定A、朝藿定c、淫羊藿苷、箭藿苷A、宝藿苷1分别在0．7800～83．20μg/mL、2．081～222．0μg／mL、3．288～350．7μg／mL、0．8311～88．65μg／mL、0．3518～37．52μg／mL的浓度范围内呈良好的线性关系，最低检测限分别为0．50、0．75、0．87、0．32、0．12μg／mL。重复性、稳定性实验结果的RSD〈3％；各成分平均回收率均小于107％，RSD〈6％。结论：该方法快速简便、准确可靠，各主要化学成分均能达到基线分离，适用于淫羊藿药材的质量控制。

毛细管区带电泳分离特布他林对映异构体

目的 :考察毛细管区带电泳法 (CZE)中各种因素对β-环糊精衍生物分离肾上腺素类药物特布他林的影响。方法 :采用 CZE对特布他林的手性分离进行研究。未涂渍熔融石英毛细管 5 0μm× 5 8.5 cm (有效长度 5 0 cm ) ;温度 2 0℃ ,操作电压 2 0k V,正极进样 5 k Pa× 3s,检测波长 2 0 4 nm。β-环糊精的两种衍生物作为手性添加剂。结果 :2 ,3,6 -三甲基 -β-环糊精为手性选择剂时使特布他林得到了基线分离 ,羧甲基 -β-环糊精为手性选择剂时却不能得到基线分离。特布他林在三甲基 -β-环糊精环境下 ,分离度随 p H变小逐渐增大 ,p H在 2 .5～ 4 .0范围内变化明显 ;而在羧甲基 -β-环糊精环境下分离度随 p H变化不明显 ,且当 p H>5 .5时特布他林不能分离。环糊精体积分数从 0 .4 %～ 1.6 %时 ,环糊精与特布他林形成的复合体随环糊精的增加而增加 ,使该手性物质更容易拆分。结论 :β-环糊精的类型、浓度以及缓冲液的 p H是影响特布他林手性拆分的主要因素 ;

不同脂肪源饲料培育的大型溞对中华绒螯蟹仔蟹发育和变态的影响

2003年5月20日至6月22日，研究了不同脂肪源饲料培育的大型潘对中华绒螯蟹发育和变态的影响。采用纯酵母（酵母组）、酵母添加10％豆油（豆油组）和酵母添加10％鱼油（鱼油组）三组饲料培养的大型潘作为大眼幼体发育到仔蟹Ⅳ期的生长和蜕壳的饵料。实验期间水温为室温，温度为20～24℃。结果表明，鱼油组培养的大型潘能显著地加速仔蟹发育阶段变态时间（缩短蜕皮周期），促进生长。其次为豆油组。酵母组最差。其加速变态的效果在仔蟹I期发育变态到Ⅱ期就显著表现出来。此外，鱼油组，豆油组与酵母组相比，相应仔蟹期的规格较大。脂肪酸组成分析显示，仔蟹脂肪酸的组成在一定程度上，反映了其摄食不同脂肪源饲料培育的大型滔的脂肪酸组成。鱼油组的仔蟹具有相对高的EPA，DHA和HUFA的百分组成，而豆油组培育的仔蟹由于大型潘中含有较高含量的C18：2，而致使仔蟹的C18：2具有最高含量。实验证实，饵料中高HUFA的含量，能显著促进仔蟹的生长和变态。PUFA，特别是C18：2对仔蟹变态和成活也有一定的促进作用。

紫外线照射充氧自血回输对光气中毒家兔急性肺损伤治疗实验观察

目的探讨紫外线照射充氧自血回输（AUVIB）疗法对光气中毒家兔肺损伤的治疗作用。方法家兔40只，随机分为4组（n=10）：正常对照组、中毒组、常规治疗组及AuVIB治疗组，于中毒72h后，收集支气管肺泡灌洗液（BALF），分析碱性磷酸酶（AKP）和酸性磷酸酶（ACP）活性，并进行血气分析。结果与正常对照组比较，家兔光气中毒后BALF中AKP，ACP活性显著升高（P〈0．01），给予AUVIB治疗后，BALF中ACP和AKP活性与中毒组比较显著降低（P〈0．01），动脉血pH值、PaO2及SaO2显著升高（P〈0．01），PaCO2显著降低（P〈0．01）。结论AUVIB能改善氧供和代谢，可用于光气急性中毒肺损伤的治疗。

Rh阴性患者股动脉刀伤出血抢救1例

1临床资料患者,女,32岁,育有1子,无输血史。缘于2009年11月17日被他人以锐器刺伤双大腿,出血量较多,当地医院予以输血及手术后左大腿创面仍见肿胀出血,

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子的形态和顶体反应的研究

研究了利用离子载体A23187诱导中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精子产生顶体反应的最佳条件.结果表明:从雌性中华绒螯蟹纳精囊中获得的精子,在pH值为6.0,CaCl2浓度为0.2%的人工海水中,用离子载体A23187(40μg/mL)诱导70min,可以得到最大的精子顶体反应率(72%).在此基础上用光镜观察了顶体反应过程中精子显微结构的变化,并采用天然海水配制的台盼蓝染色液和曙红B染色液对中华绒螯蟹精子的形态进行观察,确定中华绒螯蟹精子的顶体反应过程大致可分为4个阶段:第一阶段为辐射臂收缩,头帽鼓起;第二阶段为顶体囊外翻;第三阶段为顶体管前伸;第四阶段为顶体丝形成.