唾液腺腺泡细胞癌中NR4A3基因重排及NOR-1蛋白表达分析

目的:探讨NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达在唾液腺腺泡细胞癌中的表达及在鉴别诊断中的价值。方法:收集2020年5月—2024年1月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断的唾液腺癌119例,包括腺泡细胞癌(acinic cell carcinoma,AciCC)63例,黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)31例,分泌性癌(secretory carcinoma,SC)25例。分别使用荧光原位杂交和免疫组织化学染色检测NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达情况,采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:AciCC主要发生于大唾液腺。与MEC和SC相比,AciCC好发于女性(P=0.006)。NR4A3基因重排在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为76.2%(48/63)、0%(0/10)和0%(0/7),NOR-1蛋白表达在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为92.1%(58/63)、9.7%(3/31)和0%(0/25),差异具有统计学意义(P<0.001)。单独使用NR4A3基因重排诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为76.2%和100%。单独使用NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为92.1%和94.6%。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为96.8%和94.6%,曲线下面积为0.896,诊断价值最优。结论:AciCC好发于女性,主要发病部位为大唾液腺。NR4A3基因重排仅见于AciCC中,在诊断工作中具有100%的特异性,但敏感性较低。NOR-1蛋白表达检测具有很好的灵敏度和特异度,可作为鉴别AciCC、MEC和SC的初筛和替代方法。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达检测具有最优的诊断价值。

儿童苔藓样肉芽肿性口炎1例报道及文献回顾

目的探讨口腔苔藓样损害的分类、临床表现、诊断、鉴别诊断及治疗,为临床提供参考。方法获得医院伦理审批及患者知情同意,报道1例儿童口腔苔藓样损害病例,结合文献对口腔苔藓样损害的诊疗进行回顾分析。结果患儿舌背反复破溃伴疼痛3年余,舌背大面积糜烂面,形状不规则,糜烂周围见珠光白色纹,左侧糜烂区伴组织增生,约1.5 cm×2.0 cm,质地韧,宽蒂。舌背白色网纹组织切取活检病理诊断为苔藓样损害;舌背增生物切除活检病理诊断为苔藓样损害伴肉芽肿性炎。根据患者口内损害特征、系统病史、用药史、组织病理学检查结果,最终诊断为苔藓样肉芽肿性口炎。文献回顾表明,口腔苔藓样损害病因不明,临床上需与口腔扁平苔藓、口腔苔藓样药物反应、口腔苔藓样接触性损害、慢性溃疡性口炎等疾病鉴别。临床上治疗口腔苔藓样损害以糖皮质激素的局部和/或全身使用为主。结论目前口腔苔藓样损害的分类和诊断仍无统一标准,主要依靠病史询问、临床表现和组织病理学检查结果,治疗方法主要为糖皮质激素的局部和/或全身使用。

基于橡胶微粒集料的环氧沥青砼低温指标研究

环氧沥青砼铺装层存在的主要问题是低温开裂。该研究将通过小梁弯曲试验分析,以橡胶微粒作为集料加入环氧砼中作为试验组,未添加橡胶微粒的传统环氧砼作为对照组,发现脆化点温度区间可作为评价变形状态的指标,并从能量角度对低温下混合物的破坏应变能量密度进行了研究,研究结果表明,橡胶微粒环氧沥青砼具有更低的脆化点温度区间,更高的破坏应变能量密度。

基于网络药理学及体外细胞学探讨野黄芩苷抑制口腔白斑癌变的作用机制

目的:利用网络药理学分析野黄芩苷抑制口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)癌变的分子机制,采用细胞学进一步验证。方法:通过网络药理学挖掘野黄芩苷作用于OLK的分子靶点,构建蛋白互作网络,通过GO、KEGG富集分析预测野黄芩苷可能的作用靶点及相关通路。利用CCK-8实验、Transwell实验验证野黄芩苷对口腔白斑细胞(Leuk-1)、舌癌细胞(Cal-27)增殖、迁移、侵袭的作用;Western印迹法检测相关分子的表达。采用GraphPad Prism 9软件包进行统计学分析。结果:野黄芩苷作用于OLK的潜在作用靶点共29个,HIF-1α为其中关键靶点。GO、KEGG分析结果显示,野黄芩苷高度参与细胞及组织对缺氧的反应并作用于组织缺氧相关的HIF-1信号通路。细胞学结果表明,野黄芩苷能显著抑制Leuk-1、Cal-27增殖(IC50:2 mmol/L)、迁移和侵袭(P<0.05)。Western印迹法进一步验证了关键分子靶点,1 mmol/L野黄芩苷能明显抑制Leuk-1和Cal-27细胞内HIF-1α蛋白的表达。结论:野黄芩苷可能通过抑制HIF-1信号通路表达,对OLK癌变起到抑制作用。

会泽铅锌矿超深井矿山矿井水文在线监测系统的研究与应用

针对会泽铅锌矿,其深部岩溶及构造含水带发育,矿井涌水点多,涌水量大等问题,采用了矿井水文监测系统对水文地质参数包括水位、水压、温度、流量、涌水突变等进行实时监测。应用表明:该系统可实时监测矿井水文参数变化,及时、准确、全方位监控矿山地下水、地表水情况,为井下工程开拓、排水优化及水害事故的预警提供了数据支撑,以保障矿山的安全和生产。

唾液腺癌分子病理诊断进展

近年来唾液腺癌的分子检测取得了巨大的进展,越来越多的遗传学改变被发现。这些遗传学改变对唾液腺癌的病理诊断起了重要的辅助作用,也对唾液腺癌的命名、分类及新类型肿瘤的发现产生着影响。本文对近年来发现的唾液腺癌中重要遗传学改变及部分肿瘤中相应蛋白的表达变化进行介绍,这些变化在相关肿瘤的病理诊断、预后评估、靶向治疗中都发挥着重要的作用。

组蛋白甲基化与头颈部恶性肿瘤

有研究表明，头颈部恶性肿瘤的发生率约为14／100000．约占全身恶性肿瘤的10％．患者的5年生存率为35％～60％。最近几年的研究发现，基因的表观遗传学改变在头颈部恶性肿瘤发生中起了一定的作用，并且日益受到人们的重视：其中，组蛋白乙酰化是一种重要的表观遗传学修饰方式．

长学制口腔医学生口腔病理临床实习体系建设

目的:通过临床实习体系建设,弥补及完善口腔组织病理学教学架构中的短板,促进理论与临床实践的融合,提高长学制口腔医学生教学质量.方法:充分利用学科优势和临床资源,制定全面的临床实习计划及病理实验技术操作规范,构建完整的临床实习资料库及培训热爱教学的高水平带教师资,通过实习考核、师生座谈会及问卷调查三方面,对临床实习做出评估.结果:学生在完成临床实习后,考核成绩平均分达到89.37分.在问卷调查中,学生普遍反映对本学科专业特色及常规技能有了更充分的了解,提高了实践能力,激发了自主学习兴趣.结论:通过口腔组织病理学临床实习体系的建设与实践,有效提升了本学科的教学质量,对长学制口腔医学生的科研及今后的医疗工作起到了积极作用.

基于低温性能的橡胶颗粒环氧沥青混合料研究

为了分析橡胶颗粒对环氧沥青混合料低温性能的改善作用,在选择形状特征及硬度合适的橡胶颗粒的前提下,基于抗弯拉强度、最大弯拉应变、弯曲劲度模量、脆化点温度及应变能密度对不同橡胶颗粒体积掺量下的环氧沥青混合料的低温性能进行研究,并通过室内试验对不同橡胶颗粒体积掺量下的环氧沥青混合料的水稳定性及高温性能进行验证.结果表明:橡胶颗粒的细长扁平颗粒含量越小、邵尔A型硬度越大,橡胶颗粒环氧沥青混合料的压实效果及抗松散性越好;体积掺量合适的橡胶颗粒对环氧沥青混合料的抗弯拉强度、水稳定性及高温性能影响不大,但能显著提高其低温变形能力,降低其脆化点温度,改善其低温性能;在-15℃时,5%橡胶颗粒体积掺量下的环氧沥青混合料相对未掺加橡胶颗粒的环氧沥青混合料,应变能密度提高了108.0%.

Fc受体样4蛋白在唾液腺黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的:通过检测唾液腺黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue B cell lymphoma,MALT淋巴瘤)中Fc受体样4(Fc receptor-like 4,FCRL4)蛋白的表达,分析其表达及分布特点与临床病理指标、预后等的相关性。方法:筛选2005—2013经病理确诊为唾液腺MALT淋巴瘤的病例作为实验组;以唇腺良性淋巴上皮病(benign lymphoepithelial lesions,BLEL)、大唾液腺BLEL及弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)作为对照组。免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法检测FCRL4蛋白表达。采用SPSS 17.0软件对FCRL4在实验组、对照组的表达及其与临床病理指标之间的关系进行分析,应用Kaplan-Meier法分析FCRL4表达与总体生存率之间的关系。结果:共收集到72例唾液腺MALT淋巴瘤。FCRL4表达主要定位于淋巴细胞的细胞膜和细胞浆,阳性细胞主要分布在上皮巢内及周边,且在唾液腺MALT淋巴瘤中的表达率显著高于唇腺BLEL(P=0.013)、大唾液腺BLEL(P=0.003)及DLBCL(P=0.001)。FCRL4蛋白表达与临床病理指标、总体生存率之间均无明显相关性(P>0.05)。结论:唾液腺MALT淋巴瘤中FCRL4主要表达于邻近上皮的淋巴细胞中,该类细胞可能与唾液腺MALT淋巴瘤的发生相关,可作为该肿瘤辅助诊断的指标。

免疫组织化学双染技术在唾液腺淋巴上皮性病变中的应用评价

目的:根据抗体阳性表达的不同部位(细胞核、细胞质和细胞膜)、染色顺序及匹配不同的显色系统,探讨免疫组织化学双染技术在唾液腺淋巴上皮性病变诊断中的最佳染色方法。方法:挑选良性淋巴上皮病(benign lymphoepithelial lesion,BLEL)、淋巴上皮癌(lymphoepithelial carcinoma,LEC)和黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue,MALT淋巴瘤)各20例,分别进行AE1/AE3、Ki-67、CD20cy抗体的免疫组织化学单染和两两组合的双染检测。每个病例依据不同抗体的表达部位(细胞核、细胞质及细胞膜)、不同的抗体染色顺序和显色剂,分别采用3种双染方法检测,即①先Ki-67(DAB显色),再AE1/AE3或CD20cy(AEC显色);②先AE1/AE3或CD20cy(DAB显色),再Ki-67(AEC显色);③先Ki-67(AEC显色),再AE1/AE3或CD20cy(BCIP/NBT显色)。所得结果均与单染相比较,采用SPSS 17.0软件包对数据进行χ^2检验和配对t检验,分析染色强度和阳性比率有无差异。结果:所有双染方法中抗体定位均准确,但方法 1中各抗体染色强度(P=0.765)和阳性比率(P>0.05)均无显著差异,而方法 2和方法 3中抗体的阳性比率和染色强度均有不同程度下降(P<0.05)。结论:免疫组织化学双染技术在唾液腺淋巴上皮性病变中的最佳染色方法为先进行阳性定位于细胞核如Ki-67的染色,配合使用DAB显色剂,后进行阳性定位于细胞膜或细胞质如AE1/AE3或CD20cy的染色,配合使用AEC显色剂。

GSTP1在唾液腺腺样囊性癌中的表达及意义

目的:研究谷胱甘肽S-转移酶P1(glutathione S-transferase P1,GSTP1)在唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoidcystic carcinoma,SACC)中的表达,探讨其与SACC的临床病理特征及肿瘤发生的关系。方法:采用免疫组化法检测51例SACC和18例瘤旁腺体中GSTP1的蛋白表达,分析GSTP1表达与SACC临床病理特征之间的关系。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:GSTP1在SACC肿瘤组织中的表达显著高于瘤旁腺体(P<0.05)。在SACC肿瘤组织中,GSTP1表达的高低与组织学分级显著相关(P<0.05),在组织学3级中的表达高于1、2级。在组织学1级中,GSTP1主要在胞核表达,但随着组织学分级的升高,GSTP1在胞质中表达显著增加(P=0.022)。结论:GSTP1的高表达及在肿瘤细胞不同部位表达与SACC的发生、肿瘤细胞分化相关。

唾液腺腺样囊性癌中RASSF1A表达及与启动子甲基化之间的关系

目的:研究唾液腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)中RASSF1A表达及其与启动子区甲基化之间的关系。方法:收集167例原发性唾液腺ACC,亚硫酸盐测序聚合酶链反应(bisulfite sequencing polymerase chain reaction,BSP)和甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测RASSF1A基因启动子区甲基化状况,免疫组织化学方法检测RASSF1A蛋白表达情况。去甲基化药物decitabine处理ACC细胞系SACC-83后,检测处理前、后RASSF1A基因甲基化及表达情况。应用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:59/167(35.3%)例病例中检测到RASSF1A基因启动子区甲基化。101/167(60.5%)例病例中RASSF1A蛋白呈低或不表达,66/167(39.5)病例中RASSF1A蛋白呈高表达。存在RASSF1A基因甲基化组,RASSF1A蛋白表达显著低于不存在甲基化组(P=0.012)。去甲基化药物decitabine处理ACC细胞系后,RASSF1A mRNA及蛋白水平表达均升高。结论:唾液腺ACC中,启动子区甲基化是RASSF1A基因失活的主要原因,可作为该肿瘤的潜在治疗靶点。

Nrf2对口腔鳞癌患者TPF诱导化疗效果的影响

目的:检测核转录相关因子2(Nrf2)在口腔鳞癌组织中的表达,探讨其对TPF诱导化疗效果的影响。方法:选择65例接受TPF诱导化疗的口腔鳞癌患者,采用免疫组织化学方法检测患者活检肿瘤标本中Nrf2的表达,分析Nrf2表达与患者基线资料及预后的关系。采用SPSS 23.0软件包对数据进行统计学分析。结果:生存分析发现,口腔鳞癌患者Nrf2表达与TPF诱导化疗预后显著相关,Nrf2低表达者较高表达者具有更好的总生存率、无疾病生存率、局部无复发生存率、无远处转移生存率。单因素及多因素Cox风险模型分析发现,Nrf2是口腔鳞癌患者TPF化疗的独立预后风险因素。结论:Nrf2表达与口鳞癌患者TPF诱导化疗疗效相关,Nrf2低表达患者预后更好,Nrf2可作为预测口腔鳞癌患者TPF诱导化疗效果的生物标志物。

红外探水技术在岩溶巷道超前地质预报中的应用

以云南某超深井金属矿山某中段坑道工程为例,阐述红外探测的基本原理、优缺点和操作方法,论证HS-S310红外探水仪在超深井金属矿山坑探工程超前地质预报中的实践应用,分析在几种干扰因素影响下红外探水技术的试验效果及处理方法。试验证明:该方法操作简便、预报精度较高;通过数据反演、三维成像方式可呈现坑道前方的富水状态;易受施工现场条件干扰。使用红外探水仪开展超前地质预报,对坑道前方的地质情况进行超前预判,可为下一步采用“钻探+物探+短探”新探水模式、联合使用多种预报方法奠定基础,对于提高超前地质预报的准确性、经济性与可行性有指导作用。

口腔苔藓样损害中淋巴滤泡样结构表征及免疫细胞组成的实验研究

目的:评估口腔苔藓样损害(oral lichenoid lesion,OLL)中是否具有三级淋巴结构(tertiary lymphoid structure,TLS),并分析其免疫细胞的组成特征。方法:收集正常口腔黏膜组织、口腔扁平苔藓组织(oral lichen planus, OLP)和口腔苔藓样损害组织(oral lichenoid tissue reaction, OLTR)各30例,行苏木精-伊红(H-E)染色,评估各组织中是否存在TLS样结构。利用免疫组织化学染色鉴定TLS相关的B细胞(CD19^(+)、CD20^(+))、T细胞(CD3^(+))、滤泡树突状细胞(CD21^(+))、生发中心(Bcl-6^(+))和血管(CD34^(+)PNAd^(+))、淋巴管(CD34^(+)Gp36^(+))结构在各组中的数量和分布特点。在组织病理和分子标志物水平,评价TLS在OLL中的形态学表现。利用GraphPad Prism 7.0软件对数据进行统计学分析。结果:OLP组和OLTR组中,分别有46.7%(14/30)和23.4%(7/30)的病例存在TLS样结构,TLS样结构出现的频率与疾病类型无关(P>0.05)。与对照组相比,OLP组和OLTR组各分子标志物均高表达,其中,CD19、CD20和CD21在OLP组的表达具有TLS的形态结构特点。OLP组和OLTR组中,Bcl-6(平均积分吸光值分别为15 498±15 108∶1 841±2 276,P<0.000 1)、CD20(13 067±9 049∶7 695±5 159,P<0.05)、CD21(13 968±14 560∶2 552±2 584,P<0.000 1)、PNAd(10 328±10 383∶1 756±1 570,P<0.000 1)和Gp36(12 778±12 390∶2 313±2 578,P<0.000 1)的表达水平存在显著差异,但表达差异不能作为鉴别疾病类型的依据。结论:OLL中存在TLS,以非经典TLS为主,可见经典TLS;CD20、CD21可作为鉴定OLL损害组织中TLS的标志物,但TLS不能作为鉴别OLP和OLTR的依据。

唾液腺恶性多形性腺瘤细胞系中E-cadherin的表达差异及表观遗传调控机制

目的 :检测唾液腺恶性多形性腺瘤不同癌变亚型细胞系中E-cadherin蛋白的表达,探讨E-cadherin蛋白表达差异的表观调控机制。方法:采用免疫细胞化学法、蛋白印迹法和聚合酶链反应分别检测E-cadherin蛋白和m RNA在恶性多形性腺瘤的腺癌亚型细胞系SM-AP1和肌上皮癌亚型细胞系SM-AP4中的表达差异。采用亚硫酸盐测序法和染色质免疫共沉淀法检测SM-AP1和SM-AP4细胞中E-cadherin基因启动子DNA甲基化和组蛋白H3上赖氨酸9号位点三甲基化(H3K9me3)修饰状况,探讨2个细胞系中E-cadherin表达差异与基因DNA甲基化、组蛋白甲基化修饰之间的相关性。采用SPSS16.0软件包,运用两独立样本t检验、Fisher确切概率法等对数据进行统计学分析。结果:SM-AP1细胞中,E-cadherin蛋白和m RNA(n=4.97,P<0.05)表达较SM-AP4高;E-cadherin基因启动子区甲基化程度显著低于SM-AP4细胞(P<0.05)。SM-AP4细胞较SM-AP1细胞的E-cadherin基因启动子区具有较高的H3K9me3修饰结合水平。结论 :DNA甲基化可能是恶性多形性腺瘤肌上皮癌亚型中E-cadherin表达低于腺癌亚型的主要调控机制之一,H3K9me3修饰可能在E-cadherin表达下调过程中发挥协调调控作用。

保存2年头颈部恶性肿瘤石蜡标本中Ki-67蛋白表达对比分析

免疫组化染色是组织中检测特定蛋白表达最常用、最成熟的方法[1]。研究表明,组织固定、蜡块保存时间、抗原修复等是影响免疫组化染色结果的重要因素[2]。其中,蜡块保存时间对免疫组化染色结果影响的研究较少[3]。Ki-67属于大分子量核蛋白,表达于细胞周期的各个活动期,是反映细胞增殖活性的重要指标[4],其在头颈部常见恶性肿瘤的疗效及预后评估中具有重要意义[5-6]。本科室对比分析保存2年的常见头颈部恶性肿瘤石蜡标本中Ki-67蛋白的表达,结果发现Ki-67增殖指数明显降低,提示在临床诊断及科研工作中如果使用保存时间较久的蜡块,需注意时间因素对免疫组化结果的影响,现介绍如下。

98例原发性颌骨内鳞状细胞癌预后影响因素的回顾性分析

目的:总结原发性颌骨内鳞状细胞癌(PIOSCC)的临床及病理特征,对其预后影响因素进行探讨。方法:收集2013—2017年上海交通大学医学院附属第九人民医院收治的原发性颌骨内鳞状细胞癌患者的临床、影像、组织病理及术后随访资料,采用描述性统计学方法分析影响预后的因素。采用SPSS 23.0软件包将基线资料进行单因素及多因素生存分析。结果:共纳入98例患者,平均年龄56.6岁;男71例,女27例;上颌骨33例,下颌骨65例。术后随访的95例患者中,24例出现复发,10例出现远处转移,复发和远处转移多发生于术后2年内。患者的2年和5年总生存率分别为74.7%和61.8%。单因素分析显示,肿瘤部位、肿瘤大小、切缘阳性、颈淋巴结转移对总生存率有显著影响;面部麻木、切缘阳性,肿瘤部位、颈淋巴结转移分别对复发和远处转移有显著影响。多因素分析显示,仅切缘阳性和颈淋巴结转移对总生存率的影响有统计学差异。结论:术后前2年是PIOSCC患者复发、远处转移及死亡的高发期,切缘阳性及颈淋巴结转移是原发性颌骨内鳞状细胞癌的不良预后因素。

涎腺微分泌性腺癌的临床病理及分子特征分析

目的探讨涎腺微分泌性腺癌(microsecretory adenocarcinoma,MSA)的临床病理、免疫表型及分子遗传学特征,提高对该新型罕见肿瘤的认识。方法回顾性收集上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科确诊为MSA的病例,并通过病理复片2000年1月至2020年1月间的多形性腺癌和非特指腺癌病例筛选可能误诊的MSA病例。对所有确诊MSA病例行临床病理分析及随访,并复习相关文献。结果共收集到4例MSA,其中2例从多形性腺癌中筛选出来。男性3例,女性1例,平均年龄53岁(37~67岁)。3例发生于腭部,1例发生于颊部。临床表现为逐渐生长的无痛性肿物。肿瘤普遍较小,最大径为0.7~1.8 cm不等,平均1.2 cm。镜下见肿瘤无包膜,呈侵袭性生长。肿瘤细胞体积较小、形态温和,立方状、扁平状,排列呈微囊及腺管状。囊腔内见嗜碱性分泌物。肿瘤巢之间为黏液纤维间质。免疫组织化学示肿瘤细胞弥漫或部分表达细胞角蛋白7、S-100蛋白、SOX10、p63和波形蛋白;p40、Mammaglobin、Calponin均阴性;Ki-67阳性指数低(1%~3%)。4例MSA经荧光原位杂交检测证实存在SS18基因重排,其中2例经靶向RNA二代测序检测到MEF2C::SS18融合基因。4例患者均行单纯的手术切除,未行其他辅助治疗。随访3例,随访时间2~203个月,均未发现肿瘤复发、转移和造成患者死亡。结论涎腺MSA是一种新型且罕见的低级别肿瘤,具有独特且较一致的组织学形态、免疫表型和分子学改变。形态不典型或发生高级别转化时免疫组织化学染色及SS18基因检测可辅助诊断。