正常Long Evans大鼠不同发育阶段闪光视觉诱发电位波形的比较

目的 比较3组不同发育阶段正常Long Evans大鼠的闪光视觉诱发电位(Flash visual evoked potential,F-VEP)的异同,探索闪光视觉诱发电位波形在视觉发育过程中的变化规律。方法 随机抽取不同发育阶段的Long Evans大鼠50只,分成3组。每组大鼠用乙醚麻醉,使用视觉电生理检查系统采集其F-VEP。结果 未睁眼组未记录到大鼠明显的F-VEP波形,睁眼后可记录到大鼠F-VFP波形,但成年组和幼年组F-VEF主波(Pmax)的潜伏期和振幅有显著性差异,成年组与幼年组Long Evans大鼠相比,F-VEP主波(Pmax)的潜伏期缩短、振幅减小。结论 随着发育,Long Evans大鼠F-VEP主波(Pmax)的潜伏期缩短、振幅减小。F-VEP对大鼠视觉发育阶段的判断具有一定价值。

成年与幼年Long Evans大鼠视皮层蛋白的二维电泳分析

目的 利用双向电泳技术比较正常成、幼年LongEvans大鼠初级视皮层蛋白质组表达差异 ,探索蛋白质组学技术在视觉发育研究中应用的可能性。方法 2 2d龄和10 0d龄LongEvans大鼠各 3只 ,过量戊巴比妥钠处死 ,切取其初级视皮层的灰质 ,裂解抽提总蛋白 ,双向电泳分离总蛋白 ,比较 2组大鼠初级视皮层蛋白质表达差异。结果 胶图差异分析发现幼年鼠初级视皮层中有 12个蛋白质点表达较丰富 ,成年鼠初级视皮层中有 16个蛋白质点表达较丰富。结论 正常成、幼年LongEvans大鼠初级视皮层蛋白质组存在明显差异 ,蛋白质组学技术可以应用于视觉发育方面的研究。

蛋白质组学技术分析LongEvans大鼠眼优势柱可塑性终止相关蛋白

目的利用二维电泳-质谱技术分析LongEvans大鼠初级视皮层中与眼优势柱终止相关的蛋白质,探索蛋白质组学技术在视觉可塑性研究中的应用。方法取100d龄LongEvans大鼠通过向其初级视皮层中灌注硫酸软骨素酶建立成年眼优势柱移动的动物模型,然后分别提取22d龄大鼠、100d龄大鼠和100d龄硫酸软骨素酶灌注大鼠的初级视皮层灰质总蛋白,利用二维电泳-质谱技术分析与眼优势柱终止相关的蛋白质。结果通过双向电泳确定了与眼优势柱终止相关的4个蛋白质点,质谱分析鉴定了其中2种蛋白质。这2种蛋白为磷脂酰乙醇胺结合蛋白和胶质纤维酸性蛋白。结论二维电泳-质谱技术可以有效地分离和鉴定视皮层中的特殊蛋白质,随着技术的进步和完善,蛋白质组学技术必将在视觉可塑性研究中占有重要地位。

基于多角度分析统计的眼底图像微动脉瘤自动检测

糖尿病视网膜病变(DR)是新增失明的主要原因,而视网膜微动脉瘤(MA)是糖尿病视网膜病变的早期临床表现之一。然而,由于微动脉瘤体积小,与周围背景的对比度差,很难用肉眼直接观察出来。本文提出了一种基于多角度分析统计的特征提取方法,每种预处理方法作为一个角度提取一组特征,利用多层感知机分类器(MLP)进行分类,最后对所有的分类统计求均值。该方法在e-ophtha-MA数据库上进行了评估,并获得了较高的灵敏度。使用FROC指标,最终平均得分为0.510,灵敏度为0.91,AUC值为0.98,与现有最先进的方法相当。实验证明,本文提出的基于多角度分析统计提取微动脉瘤的方法增强了MA的识别能力,有利于分类,提高了检测性能。

Long Evans鼠初级视皮层眼优势柱可塑性的发育性变化

目的:利用电生理学技术探讨Long Evans大鼠视皮层眼优势柱可塑性的发育性变化。方法:取22d Long Evans大鼠7只和100d Long Evans大鼠5只,通过缝合一侧眼睑建立单眼剥夺大鼠动物模型。利用电生理学技术检测22 d正常大鼠、22 d单眼剥夺大鼠、100 d正常大鼠、100 d单眼剥夺大鼠眼优势柱的分布。结果:正常22 d Long Evans大鼠、正常100 d Long Evans大鼠和100 d单眼剥夺大鼠视皮层眼优势柱分布为对侧眼优势,22 d单眼剥夺大鼠视皮层眼优势柱分布为同侧眼优势。结论:正常视觉环境下发育的Long Evans大鼠,其眼优势柱的分布为对侧眼优势,幼年Long Evans大鼠视皮层具有可塑性,异常的视觉环境能影响其眼优势柱的分布;成年Long Evans大鼠视觉可塑性终止,异常的视觉环境不能再影响其眼优势柱的分布。

光学相干断层成像在眼后段检测中的应用

光学相干断层成像(0CT)是一种新型的、无损伤的光学成像技术,能够实现实时的纵向层析成像,在医学临床具有广泛的应用前景。本文探讨了其在眼后段检测中的应用。

新生Long Evans大鼠初级视皮层神经元的培养和鉴定

目的建立新生Long Evans大鼠视皮层神经元原代培养方法。方法采用钝性分离1d龄Long Evans大鼠双侧视皮层,2.5g·L-1胰蛋白酶消化法获得细胞悬液,在无血清培养基中进行培养,7～14d后行免疫组织化学及膜片钳鉴定。结果用该方法培养的视皮层神经细胞存活率高,生长状态良好,存活可达1个月左右,β-III tubulin免疫组织化学染色阳性神经元占培养细胞中的80%以上,膜片钳成功记录了180个细胞,静息膜电位在-50～-70mV,存在内向、外向电流,脉冲恒流刺激可诱发多个动作电位。结论本研究所采用的分离及原代培养方法是一种简单、高效的视皮层神经元培养方法。

蛋白质组学技术分析眼优势柱可塑性相关蛋白△

目的利用二维电泳-质谱(2-DE/MS)技术分析Long Evans大鼠初级视皮层中与眼优势柱可塑性相关的蛋白质。方法取22d龄Long Evans大鼠通过向其初级视皮层中灌注放线菌酮建立幼年眼优势柱不移动的动物模型,然后分别提取22d龄大鼠、100d龄大鼠和22d龄放线菌酮灌注大鼠的初级视皮层灰质总蛋白,利用2-DE/MS技术分析与眼优势柱可塑性相关的蛋白质。结果通过2-DE/MS技术鉴定了与眼优势柱终止相关的5种蛋白质,这5种蛋白质与蛋白质的更新相关,分别为proteasome protein p45/sug、Malate dehydrogenase、Proteasome alpha1subunits、adolase A和septin4。结论二维电泳-质谱(2-DE/MS)技术可以有效地分离和鉴定视皮层中的特殊蛋白质。随着蛋白质组学技术的进步和完善,必将在视觉可塑性研究中占有重要地位。

负载紫红质通道蛋白2重组腺病毒的包装及功能鉴定

背景紫红质通道蛋白2（ChR2）是从单细胞绿藻莱茵衣藻上分离的一种光敏感通道蛋白，可作为光刺激神经细胞的手段，与电、磁和超声波相比，光在时间和空间上对神经细胞的刺激将更精确。目的构建负载ChR2基因的重组腺病毒，并鉴定其功能。方法将人胚肾293（HEK293）细胞在含质量分数10％胎牛血清的DFl2培养基中进行培养及传代。腺病毒穿梭质粒pSB291-hCHR2-GFP与腺病毒包装质粒pBHGloxAEI，3Cre共转染HEK293，包装得到少量负载ChR2基因的重组腺病毒（Ad—ChR2），经HEK293细胞扩增、CsCl梯度离心，Tris—HCl透析后得到纯化Ad—ChR2。获取4只出生1d的清洁级LongEvans大鼠视皮层组织，用组织块培养法利用无血清培养基原代培养视皮层细胞，用纯化的Ad—ChR2转染培养的视皮层细胞，当转染成功的视皮层细胞表达绿色荧光时给予460hill蓝光刺激，应用膜片钳技术记录视皮层细胞的动作电位。结果纯化浓缩后的Ad—ChR2滴度可达7．9×10^10PFU／ml，HEK293细胞转染Ad—ChR224h后倒置荧光显微镜下即可见细胞膜上有绿色荧光表达，转染13d可见细胞由扁平变为圆形。无血清培养的视皮层细胞转染纯化的Ad—ChR2后细胞膜上可见绿色荧光蛋白（GFP）的表达，460nm蓝光刺激后用膜片钳技术可记录到蓝光诱发的视皮质细胞的动作电位。结论本研究成功构建了负载ChR2基因的重组腺病毒表达载体，并证实ChR2能够感染有功能的视皮质细胞，这对视觉可塑性方面的研究非常重要。

医学生眼科学课程改革探讨

眼科学是高等医学院校为医学生开设的一门临床必修课,它与内、外、妇、儿等大科相比,课时少、内容多.而临床课常常是几门课同时开,大多数学生总认为自己将来主要是做内、外、妇、儿科的医生,有无眼科学知识关系不大,因此把精力主要用于应付考试科目的学习,而对于考查科目眼科学却重视不够.如何在有限的课时内,改进教学方法和教学手段,是提高眼科学教学质量的关键.我们通过近几年来的探索,得到了一些经验和体会,现报告如下。

眼科多媒体课件的设计

在临床医学课程中,作为小科的眼科学相对于内科、外科、妇科、儿科而言,其课时偏少而内容繁多,难于理解。如何用更少的时间和以更有效的方法、手段让医学生掌握日益增多的眼科学教学内容,完成大纲要求,是眼科学教学面临的一种挑战。而多媒体技术为我们探讨这一课题提供了得心应手的工具。多媒体课件就是利用计算机技术将教学的文本、图形、动画、声音、

基于Flash的《葡萄膜病》多媒体课件制作

目的:研制眼科多媒体计算机辅助教学课件,改进葡萄膜病的传统教学模式。方法:收集和整理我科葡萄膜病教学和临床资料,参考《眼科学》第6版编写脚本,并应用Macromedia Flash 8对葡萄膜病治疗各方面的素材进行了编辑、合成。结果:成功研制《葡萄膜病》多媒体课件。结论:Flash适用于眼科多媒体课件的制作,可促进眼科学教学的发展。

视皮层可塑性的分子生物学研究进展

视皮层在发育的过程中存在"敏感期",具有可塑性。对视皮层可塑性的研究已持续了近半个世纪,众多的研究成果已证实谷氨酸受体、神经营养因子、皮层内抑制因素、细胞内信号传递系统、细胞外环境等因素在视皮层可塑性的发育过程中发挥了重要的作用,其作用机制也为临床上治疗弱视及其他基于视皮层损害的视觉障碍性疾病提供了理论依据,现将视皮层可塑性的分子生物学研究文献综述如下。

西淝河北站深大基坑降水方案设计

文章介绍了西淝河北站深大基坑施工降排水方法比选及降排水方案设计,通过抽水试验验证了方案的可行性、有效性。

晶状体病多媒体课件的设计

晶状体病是眼科常见病、多发病，其中白内障是人类首位致盲性眼病，因而晶状体病教学在眼科教学中占有非常重要的地位。为适应现代高等医学教育的新要求，充分利用现代信息和计算机多媒体技术，采用了文字、图像、声音、动画以及视频等多种媒体方式，制作完成了晶状体病多媒体课件，主要介绍晶状体病多媒体课件设计的思路及设计过程中的经验体会。

硫酸软骨素在眼优势柱可塑性终止中的作用研究

目的:探讨利用电生理学技术研究硫酸软骨素在眼优势柱可塑性终止过程中的作用。方法:取100天龄LongEvans大鼠25只,随机分为正常组、单眼剥夺组、硫酸软骨素酶微注射单眼剥夺组、人工脑脊液微注射单眼剥夺组,然后利用电生理学技术检测4组大鼠初级视皮层眼优势柱的分布。结果:电生理学技术证实正常组、单眼剥夺组及人工脑脊液微注射单眼剥夺组3组大鼠视皮层眼优势柱的分布均为对侧眼优势,而硫酸软骨素酶微注射单眼剥夺组大鼠视皮层眼优势柱的分布为同侧眼优势。结论:硫酸软骨素参与了成年LongEvans大鼠眼优势柱可塑性的终止。

Long Evans大鼠视皮层星型胶质细胞的体外培养

目的建立星型胶质细胞体外培养体系,为体外研究星型胶质细胞的功能奠定基础。方法无菌条件下取新生1～3 d的Long Evans(LE)大鼠视皮层,差速贴壁法除去成纤维细胞,摇床振荡法除去其他细胞,免疫荧光法对细胞进行鉴定。结果分离培养的细胞具备典型的星型胶质细胞形态,表达了星型胶质细胞特异性抗原GFAP,并能分泌硫酸软骨素。结论该方法培养的星型胶质细胞具有正常的形态和功能,可用于星型胶质细胞的体外功能研究。

七叶洋地黄双苷滴眼液治疗青少年屈光不正所致视疲劳

目的:观察七叶洋地黄双苷滴眼液治疗青少年屈光不正所致视疲劳的临床疗效。方法:双眼屈光不正所致视疲劳青少年患者60例据数字表法随机分为2组,对照组(n=30例)滴加同批次安慰剂治疗;观察组(n=30例)滴加七叶洋地黄双苷滴眼液治疗,两组疗程均为6mo。比较两组临床疗效,治疗前后舒适度评分、屈光检查结果及不良反应。结果:观察组治疗总有效率(97%)明显高于对照组(33%),差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前舒适度评分比较无显著统计学差异(P>0.05),治疗后对照组舒适度评分无明显改善(P>0.05),观察组治疗后舒适度评分较治疗前和对照组治疗后均明显升高(P<0.05);两组治疗前左眼及右眼屈光检查结果比较无显著统计学差异(P>0.05),治疗后对照组左眼及右眼屈光检查结果无明显改善(P>0.05),观察组治疗后左眼及右眼屈光检查结果较治疗前和对照组治疗后均明显改善(P<0.05);观察组心律失常、胃肠道反应、神经精神官能症等不良反应发生率(17%)与对照组(10%)比较无显著统计学差异(P>0.05)。结论:七叶洋地黄双苷滴眼液治疗青少年屈光不正所致视疲劳疗效显著,不良反应少。