当归-白芍联合BM-MSCs移植对NASH相关肝硬化小鼠肝脏炎症及肝细胞再生的影响

目的观察当归-白芍药对联合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)相关肝硬化小鼠肝脏炎症及肝细胞再生的影响,探讨其可能机制。方法采用西式饮食联合四氯化碳复合诱导法制备NASH相关肝硬化小鼠模型,将小鼠随机分为对照组、模型组、当归-白芍组、BM-MSCs组和当归-白芍+BM-MSCs组,每组12只。造模成功后,按分组予相应干预,连续4周。HE染色观察肝组织形态;检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、三酰甘油(TG)、白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)含量及肝组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、肝细胞生长因子(HGF)含量;RT-qPCR检测肝细胞Toll样受体9(TLR9)、髓样分化因子88(MyD88)、TNF受体相关因子6(TRAF6)、核因子-κB(NF-κB)p65 mRNA表达;分离肝脏原代细胞,行体外CpG ODN 2216诱导刺激,提取细胞上清液,检测IL-1β和TNF-α含量。结果与对照组比较,模型组小鼠肝组织炎性细胞浸润,伴肝细胞坏死和胶原沉积,形成假小叶;血清ALT、AST、TBil、TG含量升高,ALB含量下降,肝组织HGF含量下降,IL-1β、TNF-α含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05);肝细胞TLR9、MyD88、TRAF6、NF-κBp65 mRNA表达升高(P<0.05),CpG ODN 2216诱导后肝细胞上清液IL-1β、TNF-α含量升高(P<0.05)。与模型组比较,当归-白芍+BM-MSCs组小鼠肝组织炎性细胞浸润及肝细胞坏死减少,肝纤维化程度减轻,当归-白芍组和BM-MSCs组小鼠肝组织损伤轻度好转;除BM-MSCs组血清TG含量外,各干预组检测指标均明显改善(P<0.05)。与当归-白芍组及BM-MSCs组比较,当归-白芍+BM-MSCs组相关检测指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论当归-白芍联合BM-MSCs移植可有效改善NASH相关肝硬化小鼠肝功能,促进肝细胞再生,其机制与下调TLR9/NF-κB信号通路表达及功能,抑制炎症因子分泌,改善肝脏炎症微环境有关。

消脂化纤汤联合骨髓间充质干细胞移植对实验性非酒精性脂肪性肝炎肝硬化小鼠的干预作用及机制

目的观察消脂化纤汤联合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对实验性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)肝硬化小鼠的干预作用及其可能机制。方法将40只健康SPF级C57BL/6小鼠随机分出8只作为空白组,其余32只小鼠采用蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食联合10%四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导NASH肝硬化模型。造模成功后随机分为模型组、中药组、干细胞组、联合组,每组8只。其中中药组予消脂化纤汤灌胃,干细胞组行尾静脉注射BM-MSCs移植1次,联合组予消脂化纤汤灌胃的同时,行尾静脉注射BM-MSCs移植1次,空白组和模型组则不予任何干预。干预4周后取材,检测肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)],酶联免疫吸附法测定肝组织维A酸相关孤儿受体γt(RORγt)、白细胞介素23(IL-23)、IL-21、IL-17含量,酶联免疫吸附法测定血清及肝组织肝细胞生长因子(HGF)含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定肝脏淋巴细胞RORγt、IL-23、IL-21、IL-17 mRNA表达水平。结果(1)与空白组比较,模型组血清ALT、AST含量均升高,ALB含量降低(P<0.01),与模型组比较,不同干预组各指标均有不同程度改善,以联合组变化最显著(P<0.01)。(2)肝组织IL-23、IL-21、RORγt、IL-17水平比较:与模型组比较,各干预组小鼠肝组织各指标均降低,联合组优于各单纯干预组(P<0.01)。(3)RT-PCR结果显示:与模型组比较,各干预组小鼠肝脏淋巴细胞RORγt、IL-23、IL-21、IL-17 mRNA表达降低,联合组优于各单纯干预组(P<0.05)。(4)各组小鼠血清和肝组织HGF表达水平比较:联合组优于中药组与干细胞组(P<0.01)。结论消脂化纤汤联合BM-MSCs移植可抑制肝脏过度炎症反应,从而促进肝脏细胞再生,其作用机制可能与调节辅助性T细胞17(Th17)免疫学功能相关。

甘肃产华中五味子对实验性肾阴虚型小鼠血清超氧化物歧化酶、活性氧的影响

目的探讨甘肃产华中五味子对实验性肾阴虚型小鼠血清中氧化与抗氧化平衡的影响作用。方法以小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)及活性氧(OFR)为指标进行实验观察。结果甘肃产华中五味子对实验性肾阴虚型小鼠血清中SOD的升高与OFR的降低有显著的作用(P<0.01)。结论甘肃产华中五味子通过改变小鼠血清中SOD活性和升高OFR含量,对实验性肾阴虚型小鼠有一定影响。

氧化苦参碱对慢性乙型病毒性肝炎Toll样受体9信号通路的影响

目的探讨氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒(HBV)感染的作用机制。方法分离提取慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMCs),在体外加入氧化苦参碱刺激,检测其诱导抗病毒细胞因子产生的能力,及对Toll样受体9(TLR9)信号通路表达及功能的调节作用。结果氧化苦参碱可直接刺激PBMCs分泌大量干扰素α(IFN-α)和干扰素γ(IFN-γ),上调PBMCs细胞TLR9信号通路中TLR9、髓样分化因子88及肿瘤坏死因子受体相关因子6等信号传递分子,并诱导信号通路活化释放大量抗病毒细胞因子(IFN-α、IFN-γ和肿瘤坏死因子-α)。结论氧化苦参碱通过直接诱导抗病毒细胞因子释放及上调活化TLR9信号通路发挥其抗HBV作用。

丹参与藜芦配伍对小鼠肝脏及肾脏的影响

目的:考察不同比例配伍丹参与藜芦对小鼠肝脏及肾脏的影响,并且探寻可能的机制。方法:丹参与藜芦单味药及不同配伍比例(4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4)水煎,对小鼠灌胃22 d。取外周血检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性以及血清肌酐(Cr)与尿素氮(BUN)含量;取肝脏及肾脏组织检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:数据显示实验设计中各比例丹参藜芦配伍使用对小鼠肝功能无明显损伤作用,并表现出一定的保肝作用,配伍应用实验组中丹参所占比例越大其保肝作用越强。丹参具有保护肾功能的作用,藜芦能使该作用显著减弱,其中丹参藜芦1∶2与1∶4比例配伍出现显著肾脏损伤,同时肾组织GSH-Px活性降低伴随MDA含量升高。结论:丹参藜芦不同比例配伍使用可减弱丹参单独使用时的肝肾功能保护作用,甚至诱发显著的肾脏损害,其原因与肾脏组织氧化-抗氧化平衡紊乱相关。

复方玫瑰胶囊对家兔心肌缺血—再灌注损伤中血清GSH-PX、H_2O_2影响的实验研究

目的:探讨复方玫瑰胶囊对家兔心肌缺血—再灌注损伤的保护作用。方法:以家兔血清中GSH-PX、H2O2为指标进行实验观察。结果:复方玫瑰胶囊对心肌缺血—再灌注损伤家兔血清中GSH-PX的升高与H2O2的降低有非常显著作用(P<0.01)。结论:复方玫瑰胶囊通过对GSH-PX与H2O2含量的影响,对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。

赤芍与藜芦配伍对小鼠肝脏及肾脏损伤的影响

目的观察赤芍与藜芦不同比例配伍对小鼠肝脏及肾脏损伤的影响,并探讨其机制。方法赤芍与藜芦按照单药使用及4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4不同比例配伍水煎对小鼠灌胃22 d,取外周血检测血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶活性及血清肌酐、尿素氮含量,取肝脏及肾脏组织检测组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果不同比例赤芍、藜芦配伍使用对小鼠肝脏损伤作用不明显,但导致血清AST活性增高;不同比例赤芍、藜芦配伍使用对小鼠肾脏损伤作用明显,其中赤芍-藜芦2∶1比例配伍损伤最严重,同时肾脏组织GSH-Px活性降低伴MDA含量升高。结论赤芍、藜芦不同比例配伍使用可引起小鼠肾脏损伤,其原因与肾脏组织氧化-抗氧化平衡紊乱相关。

中医院校“客观结构化临床考试”改革在毕业考核中的应用价值探讨

中医类院校现有传统的毕业生考核模式已不适应培养"高层次、强能力"的临床应用型人才的要求。毕业考核模式的改革将有助于促进教学模式的全方位跟进,转变教育理念,有利于更好地培养出"中西医并重"的合格中医临床类专业人才。本文对客观结构化临床技能考试(OSCE)在中医类院校毕业生考核的实践分析,认为OSCE考核模式在中医院校毕业考核中的应用能达到充分全面检验学生临床技能水平的目的,具有很强的客观性及可信度,可以提供有效的信息和数据以不断提高学校的临床教学能力和水平。通过实践和推广,将有利于培养出符合临床需求的高水平中医类临床专业人才。

舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经MDA、Ca^(2+)的影响

目的:探讨舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经的保护作用。方法:以小鼠子宫组织匀浆中MDA及Ca^(2+)为指标进行实验观察。结果:舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性病经子宫组织匀浆中MDA与Ca^(2+)的降低有显著的作用(P<0.01)。结论:舒经玫瑰胶囊通过对小鼠子宫组织匀浆中MDA和Ca^(2+)含量的影响,对小鼠原发性痛经起到保护作用。

肝郁证与神经内分泌网络和血管舒缩平衡紊乱的相关性实验研究

目的:探讨肝郁证与神经内分泌网络中大鼠下丘脑-腺垂体-肾上腺皮质轴(HPA)的关系和血管舒缩平衡紊乱的相关性。方法:采用"颈部带枷单笼喂养法"复制大鼠肝郁证模型。用放射免疫法检测模型2周组、4周组下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、血浆内皮素(ET)含量,用比色法检测血清一氧化氮(NO)含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性。结果:实验显示应激大鼠呈现急性应激躁狂,2周和4周应激大鼠呈现慢性应激肝郁证时的抑郁状态;肝郁证模型大鼠下丘脑CRH、血浆ACTH、CORT和ET浓度较正常对照组显著升高,血清NO含量降低;而且肝脏组织有明显损伤,血清ALT活性增加。结论:肝郁证与HPA轴有相关性,并且出现血管舒缩功能的紊乱,肝脏细胞的损伤。

复方玫瑰胶囊对家兔心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的:探讨复方玫瑰胶囊对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:以家兔心肌组织中一氧化氮合酶(NOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)为指标进行实验观察。结果:复方玫瑰胶囊对心肌缺血再灌注损伤家兔心肌组织中NOS与GSH-PX的升高有显著作用(P<0.01)。结论:复方玫瑰胶囊通过对NOS与GSH-PX含量的影响,对再灌注心肌损伤有保护作用。

甘肃产华中五味子对实验性肾阴虚型雌性小鼠卵巢组织超氧化物歧化酶、活性氧的影响

目的探讨甘肃产华中五味子对实验性肾阴虚型雌性小鼠卵巢组织中氧化与抗氧化平衡的影响。方法以雌性小鼠卵巢组织中超氧化物歧化酶(SOD)及活性氧(OFR)为指标进行实验观察。结果甘肃产华中五味子对实验性肾阴虚型雌性小鼠卵巢组织中SOD的升高与OFR的降低有显著的作用(P<0.01)。结论甘肃产华中五味子通过对雌性小鼠卵巢组织中SOD活性和OFR含量的影响,对实验性肾阴虚型雌性小鼠有影响作用。

舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经血清中谷胱甘肽过氧化物酶及一氧化氮的影响作用

目的探讨舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经的保护作用。方法以小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及一氧化氮(NO)为指标进行实验观察。结果舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经血清中GSH-PX与NO的升高有显著的作用(P<0.01)。结论舒经玫瑰胶囊通过对小鼠血清中GSH-PX和NO含量的影响,对小鼠原发性痛经有保护作用。

基于经典传承理念的中药学“课程思政”模式的探索与实践

目的以“以文化人、以文育人”为核心理念,寓“价值观引导于知识传授之中”,探索并构建具有经典传承特色的中药学“课程思政”模式。方法将中药经典文化融入中药学课程常规教学中,采用层次递进(Stage-progressive Learning,SPL)的模式,分“传承发扬创新”3个阶段逐步构建“课程思政”育人体系,通过参与效果、过程效果、发展效果进行教学效果评价。结果本教学模式具有良好的参与度,思政意愿与传承、发扬、创新意识之间具有过程相关性,并衍生出一系列与“中药学文化创新研究与应用”相关的大学生课外素质拓展项目,显示潜在的发展效果。结论基于经典传承理念的中药学“课程思政”模式的教学活动突出实践性、活动性,在一定程度上促进了学生的主动性、参与性,在完成教学目标的同时,侧重于情感体验和行为锻炼,从而达到课程思政的育人目标,需在进一步的教学过程中加强反馈并不断完善。

舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经血浆血栓素B_2、6-酮-前列腺素F_(1α)的影响

目的探讨舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经的保护作用。方法取体重24～26 g未孕健康小鼠64只,随机分4组:生理盐水组、舒经玫瑰胶囊小剂量组(0.8 g/25 g)、舒经玫瑰胶囊大剂量组(8 g/25 g)、月月舒对照组(50 mg/25 g),以小鼠血浆中血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)为指标进行实验观察。结果舒经玫瑰胶囊对原发性痛经小鼠血浆中的6-Keto-PGF1α升高与TXB2的降低有显著作用(P<0.01)。结论舒经玫瑰胶囊通过对TXB2及6-Keto-PGF1α含量的影响,对原发性痛经有保护作用。

衰老机制的分子水平研究进展

衰老机制复杂,涉及面广,对衰老机制的研究始终是生命科学领域中最基本、最关键的问题。有关衰老的学说繁多,但迄今为止没有一种学说能完全阐释衰老的机制。近年来,随着现代遗传学、细胞生物学、分子生物学等边缘学科的飞速发展,对衰老机制的研究越来越趋向于分子水平。现主要从端粒与端粒酶、衰老与长寿基因、DNA修复能力、线粒体DNA损伤几个方面与细胞衰老的关系进行阐述。

学生标准化病人的培训

学生标准化病人是现代医学教育的研究方向之一,目前国内对学生标准化病人的培训方法报道很少。在此对学生标准化病人的选择、培训和考核的具体方式方法进行了经验总结和探讨。发现应用学生标准化不仅节省开支,而且培训时间较短,学生标准化病人有其独特的优势。

当归四逆加吴茱萸生姜汤和北细辛对小鼠肾脏组织细胞Ca^(2+)、Na^+-K^+-ATP酶的影响

目的观察当归四逆加吴茱萸生姜汤(原方)、原方去木通和北细辛对肾脏毒性的作用。方法将小鼠随机分为4组,各组分别以生理盐水及药物灌胃,每日1次,连续给药21d。检测各组对小鼠肾脏组织细胞Ca2+含量、Na+-K+-ATP酶活性的影响。结果当归四逆加吴茱萸生姜汤等药物组对组织细胞Ca2+、Na+-K+-ATP酶等指标均有影响,具有统计学意义(P<0.05)。结论当归四逆加吴茱萸生姜汤(原方)组、原方去木通组、北细辛组对肾脏均产生毒性。

当归四逆加吴茱萸生姜汤和北细辛对小鼠血清中肌酐、一氧化氮的影响

目的观察当归四逆加吴茱萸生姜汤(原方)、原方去木通和北细辛对小鼠血清中肌酐(Cr)、一氧化氮(NO)的影响。方法将小鼠随机分为4组,各组分别以生理盐水及药物灌胃,每日1次,连续给药21d。检测各组对小鼠血清中Cr、NO指标的影响。结果当归四逆加吴茱萸生姜汤等药物组对Cr、NO指标均有影响(P<0.05)。结论当归四逆加吴茱萸生姜汤(原方)组、原方去木通组、北细辛组对肾脏均产生毒性。

肝郁证与血浆内皮素(ET)、血清一氧化氮(NO)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)的相关性实验研究

目的:探讨肝郁证模型与血浆内皮素(ET)、血清一氧化氮(NO)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)的相关性。方法:采用"颈部带枷单笼喂养法"复制大鼠肝郁证模型。用放射免疫法检测模型2周组、4周组血浆ET含量、用比色法检测血清NO含量以及ALT活性。结果:实验显示应激大鼠呈现急性应激躁狂,2周和4周应激大鼠呈现慢性应激肝郁证时的抑郁状态;肝郁证模型大鼠血浆ET升高,血清NO含量降低(P<0.01),而且肝脏组织有明显损伤,血清ALT活性增加(P<0.01)。结论:肝郁证状态时机体会出现血管舒缩功能的紊乱,并且出现肝脏细胞的损伤。