血小板活化状态在急性脑梗死中的意义及其与预后的相关性

目的观察急性脑梗死(ACI)患者血小板膜糖蛋白(GP)、急性生理学及慢性健康状况评分(APACHEⅡ评分)和美国国立卫生研究院卒中量表评分(NIHSS评分)的变化及与预后的相关性。方法选择ACI患者68例(ACI组),另选健康体检者48例(对照组);又根据转归将ACI组分为生存组和死亡组两个亚组;测定各组血GP水平、APACHEⅡ评分及NIHSS评分。结果与对照组比较,ACI组患者GP均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与生存组比较,死亡组APACHEⅡ评分、NIHSS评分及GP水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);ACI患者GP水平与NIHSS评分及APACHEⅡ评分,NIHSS评分与APACHEⅡ评分均呈明显正相关(均P<0.05);多因素logistic回归分析显示:APACHEⅡ评分、NIHSS评分、GP与ACI患者的死亡明显相关。结论GP与ACI患者病情严重程度呈正相关,血小板活化状态对于评估ACI患者病情轻重以及判断预后有着重要的意义。

大鼠肠缺血再灌注损伤后乙醛脱氢酶-2的表达及意义

目的探讨大鼠肠缺血再灌注损伤后小肠组织乙醛脱氢酶-2(ALDH-2)的表达与能量代谢和氧化应激的关系。方法雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组(S组)、小肠缺血再灌注损伤组(I/R组)。分别于缺血再灌注后1、6、24、48 h采用荧光定量RT-PCR检测各组小肠组织ALDH-2 mRNA的表达,比色法测定肠黏膜丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力,采用无机磷法同时测定Na+/K+-ATPase和Ca2+/Mg2+-ATPase活性。结果 I/R组各时点ALDH-2 mRNA表达与S组比较差异均有统计学意义(P<0.05),于I/R 6 h最低;I/R组各时点肠黏膜中MDA及SOD水平与S组比较差异均有统计学意义(P<0.05),MDA在缺血再灌注6 h、SOD在缺血再灌注24 h时达到峰值;在不同时间窗,Na+/K+-ATPase和Ca2+/Mg2+-ATPase活性与S组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),两者在缺血再灌注6 h时达到峰值。结论大鼠小肠缺血再灌注损伤后,小肠组织ALDH-2 mRNA的表达下调可能是导致其能量代谢障碍功能下降的机制之一,也可能是启动氧化应激反应进程的关键环节。

肠内喂养温度对大鼠肠缺血-再灌注损伤的影响

目的探讨肠内喂养温度对肠缺血-再灌注损伤（ischemia—reperfusion injury）大鼠的影响及作用机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、缺血-再灌注组、肠内喂养温度组（10℃、24℃、32℃、40qC组），复制大鼠肠缺血一再灌注损伤模型，观察肠黏膜形态行Chiu评分；采用比色法测定胃黏膜丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力；RT—PCR测定TNF—αmRNA在小肠组织中的表达；光镜下观察肠黏膜病理形态的改变，TUNEL法测定肠上皮细胞凋亡。结果缺血-再灌注损伤组肠黏膜屏障指标Chiu评分、MDA含量、凋亡指数、TNF-αmRNA表达及SOD活力与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；10℃组Chiu评分、MDA含量、TNF-α．mRNA表达均低于其他各组，SOD活力高于其他各组；而40℃组Chiu评分、MDA含量、TNF-α mRNA表达均高于其他各组，SOD活力低于其他各组。结论降低肠内喂养温度对缺血-再灌注大鼠肠黏膜损伤具有保护作用，其机制可能与低温抗氧化及抑制机体的炎症反应及凋亡有关。

外科门诊护理带教中常见问题与对策

目的解决外科护理带教常见的问题与解决对策。方法加强带教老师的培养和管理,明确学习目标,帮助消除护生抵触心理。结果经过此方法带教的临床护生,其临床能力等均有显著提升。结论护生实习的效果直接影响他们今后的工作,因此提高临床教育对护生实习效果的影响具有决定性的作用。

大鼠肠缺血-再灌注损伤不同时间窗能量代谢的变化研究

目的研究大鼠肠缺血-再灌注损伤不同时间窗能量代谢的变化。方法复制大鼠肠缺血一再灌注损伤模型，测定缺血1、6、24、48h肠组织线粒体ATP、ADP和AMP的含量，Na2＋，K2＋-ATPase和Ca2＋，Mg2＋-ATPase活性。结果在各个不同时间窗，各检测指标与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论在缺血48h内观测肠组织中能量代谢相关指标，可以用于评价药物对肠缺血-再灌注损伤的保护作用。

浅谈小儿静脉穿刺的体会

目的总结十多年儿科临床护理工作中小儿静脉穿刺成功的经验。方法通过回顾性分析,在患儿和护理两方面会出现的各种特殊情况。结果针对患儿和护理两方面的特殊情况应采取的技巧和注意点。结论在小儿静脉穿刺时,针对不同的患儿血管特点,采取相应的操作技巧,提高穿刺成功率,减轻患儿的痛苦。

护患心理因素影响患儿静脉穿刺的探讨

目的笔者总结护患陪心理因素对患儿静脉穿刺的影响，提高一次静脉穿刺的成功率。方法通过50例患儿实行对照组与实验组的对比可见，只有护患陪得到心理的互相沟通和信任，才能达到一次静脉穿刺的成功率。结果通过实施心理护理使静脉穿刺的成功率由原来的70％提高到94％，而且增加了护患之间的感情，降低了投诉率和纠纷。结论开展心理护理，增加护患陪三者之间的感情及语言的互相沟通和互相信赖，才能使一次静脉穿刺技术得到提高。

乌司他丁联合小剂量甲基强的松龙在急性呼吸窘迫综合征临床应用研究

目的:评价乌司他丁联合小剂量甲基强的松龙对急性呼吸窘迫综合征的治疗效果。方法:将56例急性呼吸窘迫综合征患者随机分为A、B两组各28例,A组用乌司他丁联合甲基强的松龙治疗,B组单用甲基强的松龙治疗;观察治疗前、后患者呼吸频率、动脉血气、呼吸力学、肺泡灌洗液TNF-α和IL-10、乳酸的变化及机械通气时间、ICU住院时间、急性肺损伤评分和APACHEⅡ评分。结果:治疗后两组患者呼吸频率、动脉血气、呼吸力学、肺泡灌洗液TNF-α和IL-10、乳酸的变化及机械通气时间、ICU住院时间和APACHEⅡ评分等指标较前均有改善(P均<0.05),且A组较B组改善明显(P均<0.05)。结论:乌司他丁联合小剂量甲基强的松龙对急性呼吸窘迫综合征有良好的治疗作用。

急性颅脑损伤患者血清P-选择素及D-二聚体水平与其预后的关系

目的观察急性期颅脑损伤患者血清P-选择素及D-二聚体的变化规律,分析其与病情严重程度及预后的相关性。方法急性颅脑损伤患者96例,按斯堪的纳维亚卒中量表(SSS)进行神经功能缺损评分,在第1、3、30天检测血清P-选择素、D-二聚体、血糖水平及SSS评分。P-选择素、D-二聚体浓度采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测。并对P-选择素、D-二聚体与SSS评分进行相关性分析。以同期20例健康体检者作为对照组。结果急性颅脑损伤患者依据SSS评分将患者分为轻、中、重型,P-选择素及D-二聚体水平均随分型加重而明显增加(P<0.05);颅脑损伤患者各时间血糖、P-选择素及D-二聚体、SSS评分水平与对照组比较差异有显著性(P均<0.05);血清P-选择素及D-二聚体水平与SSS下降值呈直线正相关(r=0.513,P<0.05);Logistic回归分析显示,血清P-选择素及D-二聚体水平为急性颅脑损伤患者预后的独立危险因素及预后的有效指标。结论急性颅脑损伤患者血清P-选择素及D-二聚体水平可以作为判断病情和预后的重要指标。

儿科门诊护理带教的改进

儿科门诊的带教工作不同于病房，要求带教老师技术性高、专业性强、反应敏捷。对于到儿科实习的护生，他们有种无处下手的感觉。为了提高教学质量，在较短的时间里达到预期目标和要求，我们在带教中实行了“一带一”规范化教学方法，收到了良好的效果。

miR-21对ADAMTS-1的调节在肺纤维化体内外实验中的研究

目的:探讨mi R-21在肺纤维化模型中对ADAMTS-1表达水平的调节作用。方法:(1)建立博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型和构建体外肺纤维化模型,应用q RT-PCR检测mi R-21表达水平,Western blot法观察ADAMTS-1蛋白的表达。(2)通过体外转染mi R-21相似剂(mimics)及抑制剂(inhibitors)至NIH3T3细胞,Westem blot法检测ADAMTS-1蛋白的表达。结果:(1)在小鼠肺纤维化模型中,与空白对照组比较,博来霉素处理后的3个时间点,小鼠肺组织mi R-21表达明显上调,而ADAMTS-1蛋白表达明显下调(P<0.01)。(2)在构建体外肺纤维化模型中,NIH3T3细胞经5μg/L的TGF-β1刺激后,ADAMTS-1蛋白表达下调,mi R-21表达量明显上调(P<0.01)。(3)对NIH3T3细胞转染mi R-21相似物及抑制剂后实验结果显示,高表达mi R-21后,NIH3T3细胞ADAMTS-1蛋白表达下调,反之亦然。结论:(1)体内外实验证实,肺纤维过程中mi R-21表达上升,ADAMTS-1蛋白表达下降。(2)mi R-21可负调控细胞ADAMTS-1的表达水平。

MicroRNA-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响

目的探讨小鼠肺成纤维化细胞模型中microRNA（miR）-21对肺成纤维细胞增殖和分化的影响。方法24只SPF级C57BIJ6小鼠随机分为假手术组和肺纤维化模型组，各12只。经气管内注入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型，采用荧光定量PCR检测各组肺组织miR-21的表达。提取小鼠成纤维细胞，胰酶消化，接种于6孔板，使细胞浓度达到30％～50％。设随机对照组、空白对照组和miR-21mimic组。各组分别在50μL Opti-MEM加入2．5μLPBS、阴性对照储存液和miR-21mimic储存液（20μmol／L）。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞增殖活性，蛋白质印迹法检测成纤维细胞含I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）和转化生长因子（TGF）-β1的表达。结果与假手术组比较，肺纤维化模型组小鼠肺组织中miR-21的表达量明显上调。与随机对照组和空白对照组比较，miR-21mimic组成纤维细胞miR-21基因表达显著上调，成纤维细胞增殖率增加，ADAMTS-1蛋白表达明显下降，而TGF-β1表达显著上调；空白对照组与随机对照组ADAMTS-1及TGF-β1蛋白表达无明显差异。结论在小鼠肺成纤维化细胞模型中上调的miR-21可通过ADAMTS-1／TGF-β1信号通路促进肺纤维化。

急性脑梗死患者外周血microRNA表达及其与炎症细胞因子的相关性

目的探讨急性脑梗死患者外周血microRNA(miRNA)的表达及其与炎症细胞因子的相关性和临床意义。方法选取南华大学附属南华医院神经内科和重症监护室急性脑梗死(ACI)患者60例(根据临床神经功能缺损程度评分分为轻度ACI 28例、中度ACI 18例、重度ACI 14例)及20例正常对照组。分别采集各组的外周静脉血予以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-210、miR-145、miR-21、miR-223、miR-497、miR-15a mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素10(IL-10)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果 ACI组患者外周血miRNA的表达以及TNF-α、TNF-α/IL-10、IL-10水平均高于正常对照组(P<0.01);miRNA水平随ACI病情加重呈逐渐升高趋势,重度ACI患者血浆miR-21和miR-223表达水平均高于轻度ACI组和中度ACI组(P均<0.01);并且随着ACI病情加重,TNF-α、TNF-α/IL-10、IL-10水平呈增加趋势,差异均有统计学意义(P均<0.01),而且ACI患者死亡组TNF-α、TNF-α/IL-10、IL-10水平均显著高于生存组(P均<0.05);血浆TNF-α与miR-223水平呈正相关,与miR-21水平无相关性;血浆IL-10和TNF-α/IL-10分别与miR-21、miR-223水平呈正相关。结论 ACI患者miR-21、miR-223表达上调,与IL-10、TNF-α/IL-10水平正相关,有望作为ACI早期诊断和判断病情严重程度的标志物。

急性脑梗死患者外周血Th17细胞与调节性T细胞的表达水平与预后的关系

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者外周血清Th17细胞与调节性T细胞的表达水平与预后的关系。方法选择50例ACI患者,按照临床神经功能缺损程度评分分为轻型20例,中型22例,重型8例,依照28 d转归分为死亡组12例,生存组38例。于发病第3、7、14天采用流式细胞术及荧光RT-PCR的方法检测其外周血CD4+T细胞IL-17 mRNA及Foxp3 mRNA的表达并进行急性生理学与慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ)评分。同期20例健康体检者作为对照组。结果随发病时间的延长,ACI患者不同病情各组IL-17 mRNA的表达逐渐降低,而Foxp3 mRNA表达逐渐升高;中重型组IL-17 mRNA和Foxp3 mRNA的表达在3、7、14 d与轻型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。生存组IL-17 mRNA表达逐渐降低而Foxp3 mRNA表达逐渐升高;死亡组IL-17 mRNA表达逐渐升高而Foxp3 mRNA表达逐渐下降,且7、14 d时与生存组比较差异有统计学意义(P<0.01)。ACI患者不同病情各组APACHEⅡ评分逐渐降低,中重型组APACHEⅡ评分与轻型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。生存组APACHEⅡ评分逐渐降低,死亡组APACHEⅡ评分逐渐升高,死亡组患者APACHEⅡ评分与生存组比较差异有统计学意义(P<0.01)。IL-17 mRNA与APACHEⅡ评分呈正相关,与Foxp3 mRNA呈负相关。IL-17 mRNA、Foxp3 mRNA和APACHEⅡ评分为影响预后的死亡影响因素(P<0.01)。结论 ACI患者外周血CD4+T细胞Foxp3 mRNA及IL-17 mRNA的动态变化趋势可能与脑梗死的发生发展和疾病严重程度密切相关,与APACHEⅡ评分是影响预后的死亡危险因素之一。

基于微信的案例教学法在护理学基础课程中的应用

目的评价基于微信的案例教学法在护理学基础课程中的应用效果。方法抽取船山学院2013级132名护理本科生为试验组,2012级130名护理本科生为对照组。对照组采用传统教学方法,试验组采用基于微信的案例教学法。课程结束后,采用理论和技能考核以及问卷调查评价教学效果。结果试验组学生理论和技能考试成绩优于对照组(P<0.01);且试验组学生对该教学法评价良好。结论基于微信的案例教学法应用于护理学基础教学中,取得了良好的效果,值得在教学中推广。

急性脑梗死患者外周血微小RNA-155和CD4^+CD25^+Treg细胞表达的关系

目的:探讨微小RNA-155(mi R-155)对急性脑梗死患者外周CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)的调节作用,从而了解mi R-155在急性脑梗死发病中的作用机制。方法:选取南华大学附属南华医院神经内科和重症监护室急性脑梗死患者60例(轻度20例、中度20例、重度20例)及20例正常对照组。分别采集各组的外周静脉血,采用流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的表达;实时荧光定量聚合酶联反应(RT-PCR)检测mi R-155、Foxp3 m RNA的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果 :急性脑梗死组患者外周血Treg表达率和mi R-155、Foxp3 m RNA的表达以及IL-10水平均高于正常对照组(P<0.01);并且随着临床神经功能缺损程度评分增加而升高,重中轻度组之间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.01);死亡组各项指标显著高于生存组(均P<0.01)。mi R-155的表达与Treg和Foxp3 m RNA的表达水平均呈正相关。结论:mi R-155参与对Treg细胞增殖的调节,在急性脑梗死免疫失衡中发挥一定的作用。

七氟醚预处理对脊髓缺血再灌注大鼠5脂氧合酶表达的影响

目的探讨七氟醚预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤时5脂氧合酶（5-LOX）表达的影响。方法雄性成年SD大鼠45只,体重250~300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组（n=15）：假手术组（S组）、脊髓缺血再灌注组（I/R组）和七氟醚预处理组（I组）。采用胸主动脉球囊阻断＋体循环低血压法制备大鼠脊髓缺血再灌注模型。I组吸入3.4%七氟醚2 h,24 h后制备模型。于再灌注24 h时采用神经功能缺陷评分（NDS）法评价大鼠神经功能,随后处死取脊髓,分别采用Western blot法和RT-PCR法测定5-LOX、p-ERK1/2和t-ERK1/2蛋白及其m RNA的表达水平。应用ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。结果与S组比较,I/R组和I组神经功能缺陷评分升高,I/R组5-LOX和p-ERK1/2蛋白及其m RNA表达上调,TNF-α含量升高,I组5-LOX m RNA和p-ERK1/2蛋白及其m RNA表达上调（P〈0.05）;与I/R组比05）。结论七氟醚预处理可能通过下调5-LOX表达,抑制ERK1/2信号通路,从而减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤。

白黎芦醇对鼻咽癌CNE-2细胞自噬的影响及机制

目的观察白藜芦醇(RES)对鼻咽癌CNE-2细胞自噬活性及自噬流的影响,并探讨其作用机制。方法取人低分化鼻咽癌细胞系CNE-2,分为对照组、RES干预组,对照组置于37℃培养箱中培养,不作处理;RES干预组加入40μmol/L RES,置37℃培养箱中培养。采用Western blot法检测2组自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、p62、Beclin-1及m TOR通路蛋白p-m TOR、p-S6表达水平,腺病毒GFP-m RFP-LC3荧光瞬时转染技术通过不同颜色斑点检测自噬流表达。结果 (1)RES干预组LC3B蛋白表达水平明显高于对照组,p62蛋白表达水平低于对照组(均P<0.05)。2组Beclin-1蛋白表达差异无统计学意义。(2)RES干预组p-m TOR和p-S6蛋白表达水平明显低于对照组(均P<0.05)。(3)RES干预组的m RFP荧光点数(红点)多于对照组,GFP荧光点数(黄点)则少于对照组(均P<0.05)。结论 RES能够促进鼻咽癌CNE-2细胞自噬流,其机制可能与促进m TOR信号通路中的相关蛋白表达有关。