构建具有科研特色的药学实验教学新体系

引入药学科学研究思路,改革实验教学内容与教学方法,设计基础训练型、综合设计型、研究创新型实验,构建具有药学科学研究特色的实验教学新体系,培养高素质、创新型药学人才。

环糊精类手性流动相添加剂及其在药物分析中的应用

环糊精类手性流动相添加剂及其在药物分析中的应用姚彤炜，曾苏，丁海青（浙江医科大学药物分析教研室杭州３１００３１）关键词反相高效液相色谱法，环糊精，手性流动相添加剂，药物分析１前言α、β、γ－环糊精（ＣＤｓ）分别为６，７，８个Ｄ（＋）－吡喃型葡萄糖组成...

手性毛细管色谱法测定人尿中美芬妥英对映体的含量及其在代谢分型中的应用

采用手性毛细管色谱柱和ＦＩＤ检测器建立了人尿中美芬妥英（ＭＰ）对映体的定量分析方法。尿样用二氯乙烷提取，用酸、碱洗涤得以纯化，测得各对映体的最低检测限为６０μｇ／Ｌ。在１１５～６９０μｇ／Ｌ浓度范围内，标准曲线呈良好的线性关系，ｒ＞０．９９，日内、日间精密度ＲＳＤ＜６．５％，Ｓ－ＭＰ的平均回收率为７４．４１％，Ｒ－ＭＰ的平均回收率为７３．７８％。并以ＭＰ为探针药物，对３２名志愿者的尿样进行了ＭＰ氧化代谢分型研究。

“药物分析”精品课程建设的探索与实践

本文从药物分析精品课程的教学内容的选择与安排、教学方法的改革、教学队伍建设、学生在教学过程中的参与作用、实验室建设等方面介绍了药物分析精品课程建设的几点做法和体会.

培养学生研究创新能力的多元化教学模式在药物分析教学中的尝试

为培养学生的创新思维和研究能力,在药物分析课程教学中采用传统的课堂教学、新型的以问题为基础(PBL)的教学模式和个性化自主学习相结合的多样化教学方式,包括课堂教学、自学讨论、社会调查、自主实验、论文撰写等。培养了学生的独立工作能力、团队协作精神、创新思维和实验研究能力,体现了为学生全面发展提供优质和个性化服务的教学理念。

研究性自主实验和设计性实验的开设与尝试

通过优化实验结构,开设设计性实验和研究性自主实验,发挥学生在实验中的主体作用,综合评定实验成绩等手段,对药物分析课程的实验教学进行改革。实践表明设计性实验和研究性自主实验充分发挥了学生的主观能动性,提高了学生的分析问题、解决问题和创新思维能力。

地非三唑的RP-HPLC法测定及其体外代谢研究

目的 为研究抗早孕新药地非三唑 (DL111 IT)的代谢作用机理和进一步开发利用 ,建立其体外代谢的RP HPLC测定法。方法 以LichrospherODS C1 8为色谱柱 ,甲醇 pH 7 5磷酸盐缓冲液 ( 70∶3 0 )为流动相 ,检测波长 :2 3 5nm ,流速 1 0mL·min- 1 ,地西泮为内标 ,对鼠肝微粒体孵育液中DL111 IT的RP HPLC法进行方法学研究。应用建立的方法对DL111 IT在不同来源的鼠肝微粒体中的体外代谢进行试验。结果 DL111 IT浓度在 1 0 1～ 10 1 0 μg·mL- 1呈良好的线性关系 ,在不同浓度下测得平均绝对回收率和相对回收率分别为 ( 92± 4 ) %和 ( 10 0 3± 1 9) % (n =5 ) ;DL111 IT在鼠肝微粒体中的代谢 ,β 萘黄酮组明显快于其他组。 结论 本法简便、准确 ,可用于DL111

地非三唑在鼠肝微粒体中的体外代谢

目的 为了解地非三唑 (Dip)在不同预处理的鼠肝微粒体中主要受何种酶代谢影响 ,为其临床合理应用和进一步开发利用提供科学依据。方法 将Dip与 6种不同诱导剂〔苯巴比妥 (PB)、地塞米松(Dex)、β 萘黄酮 (BNF)、Dip、吡啶和空白对照〕诱导的鼠肝微粒体进行体外共孵育 ,用氯仿终止反应 ,以地西泮为内标 ,采用反相高效液相色谱 (RP HPLC)法测定孵育后剩余的Dip的含量。结果 BNF诱导的鼠肝微粒体对Dip代谢具有强烈的催化活性 ,Dip诱导的微粒体的催化能力次之 ,PB诱导组也有一定的催化能力 ,其他几种诱导剂诱导的微粒体对Dip代谢能力与对照组无明显差别。测得Dip在BNF诱导的鼠肝微粒体中的Km 为 (6 0 .5± 1.3) μmol·L- 1,vm 为 (5 .6± 0 .4 )mmol·g- 1·min- 1。结论 由BNF诱导的鼠肝微粒体 (主要为细胞色素P4 5 0 1A)和PB诱导的鼠肝微粒体 (主要为细胞色素P4 5 0 2B)在Dip的体外代谢中可能起主导作用 ;Dip诱导的鼠肝微粒体对其自身的代谢也起了重要作用。

中国汉族人群S-美芬妥英4'-羟化酶的表型与基因分析

目的：研究中国汉族人群Ｓ美芬妥英４’羟化代谢遗传多态性。方法：以美芬妥英为探针药物采用手性毛细管气相色谱法测定尿中Ｓ／ＲＭＰ浓度比值，对９０名志愿者进行了表型分型测定，应用ＰＣＲ技术对其中的２６名志愿者进行了Ｓ美芬妥英４’羟化酶（ＣＹＰ２Ｃ１９）基因分析。结果：表型分析结果，１１人属慢代谢者（ＰＭ），Ｓ／Ｒ比值０９５；基因分析结果，６人为野生型纯合子（ｗｔ／ｗｔ）；１０人为杂合子（ｗｔ／ｍ１和ｗｔ／ｍ２），９人为ＣＹＰ２Ｃ１９ｍ１突变型纯合子（ｍ１／ｍ１），１人为两突变型杂合子（ｍ１／ｍ２）。结论：表型分析与基因分析结果显示了很好的相关性，本实验测得慢代谢者的频发率为１２２％，与文献报道相符。

5-(对-羟基苯基)-5-苯基乙内酰脲的反相高效液相手性分离测定法

以β－ＣＤ为手性流动相添加剂、苯巴比妥为内标，于ＦＬＣ－Ｃ８反相柱上建立了鼠肝微粒体中５－（对－羟基苯基）－５－苯基乙内酰脲（ｐ－ＨＰＰＨ）外消旋体的拆分方法。测得ｐ－ＨＰＰＨ对映体的线性范围为０．５～１１０ｍｇ／Ｌ（ｒ＝０．９９９６）；最低检出量为５ｎｇ（Ｓ／Ｎ＝３）；Ｓ－ｐ－ＨＰＰＨ的回收率为９３．６％±２．８％，Ｒ－ｐ－ＨＰＰＨ的回收率为９４．７％±１．８％；日内和日间精密度ＲＳＤ值均小于２％。所建立的方法具有结果准确、操作方便等特点。

自主性实验实践活动培养学生综合能力

本文介绍了药物分析课程教学中为加强大学生综合能力培养而特意开设的自主性实验和社会调查活动。这些活动的开展为大学生科研能力和人文素质的提高创造了良好的学习氛围。

手性流动相添加剂法测定5－（对－羟基苯基）－5－苯基乙内酰脲的体外代谢的立体选择性

作者研究了５－（对－羟基苯基）－５－苯基乙内酰脲（ｐ－ＨＰＰＨ）体外形成葡萄糖醛酸甙的立体选择性。以β－环糊精为手性流动相添加剂，反相高效液相法测定底物Ｓ－和Ｒ－ｐ－ＨＰＰＨ的消失量。结果显示，在苯巴比妥（ＰＢ）和β－萘黄酮（β－ＮＦ）诱导的鼠肝微粒体中，Ｒ－ｐ－ＨＰＰＨ形成葡萄糖醛酸甙较Ｓ－ｐ－ＨＰＰＨ快，尤其是β－ＮＦ诱导的微粒体，反应液中Ｓ－／Ｒ－浓度比值由起始时１．０，经反应５０ｍｉｎ后上升到１．８５；而ＰＢ诱导的微粒体，经５０ｍｉｎ反应后，Ｓ－／Ｒ－浓度比值为１．０９。这一结果表明，β－ＮＦ诱导的鼠肝微粒体对Ｒ－ｐ－ＨＰＰＨ葡萄糖醛酸甙的形成，具有显著的立体选择性。

尿中美芬妥英手性色谱分离单纯形法最优化

应用单纯形法对尿中美芬妥荚(MP)的手性气相色谱分离条件进行最优化。优化结果选定柱温为185℃,载气流速为2.5ml/min。在此条件下测得柱效(以S-MP计)n=936/m,MP两对映体的分离度R为0.96％。并对20名健康志愿者口服消旋体后0～8h内的尿样进行分析测定。

外消旋普罗帕酮在经诱导的大鼠肝微粒体中N-去丙基化的立体选择性

:采用对照及 β-萘黄酮 (β- NF)或地塞米松(Dex)诱导的大鼠肝微粒体 ,应用 GITC柱前衍生化 ,反相高效液相色谱法研究了消旋普罗帕酮〔(R/S) - PPF〕体外代谢的立体选择性 .实验结果表明 ,在 Dex,β- NF诱导的微粒体中有 N-去丙基普罗帕酮生成。在 β- NF,Dex预处理组 ,(R/S) - PPF低浓度时的经肝微粒体代谢具有立体选择性 ,R(- )对映体的清除大于 S(+)对映体 ,高浓度时的代谢无立体选择性 .R(- )对映体的 Km 值显著低于 S(+)对映体 ,而 Vmax值无显著性差异 .在 Dex预处理组中的立体选择性大于 β- NF组 .在对照组中代谢无立体选择性 ,且 Km,Vmax值均小于β- NF,Dex预处理组。结果提示 ,CYP1 A,CYP3A4亚族对普罗帕酮 (PPF)的 N-去丙基化有贡献 .(R/S) -

依普黄酮的HPLC测定

采用ＳｈｉｍｐａｃｋＯＤＳ色谱柱，以反相ＨＰＬＣ法同时进行依普黄酮的含量测定及相关杂质的检查，线性范围为２～１００μｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９９）。本法简便，专属性强。

氨基酸自动分析仪茚三酮柱后显色剂的研制

本文介绍了氨基酸自动分析仪柱后显色剂茚三酮试剂的制备,以及在平行条件下,用进口和自制茚三酮试剂测定标准氨基酸的图谱,并进行比较.结果两者灵敏度和稳定性方面的主要指标基本一致.同时,用自制试剂测得不同保留时间的氨基酸峰面积的日间平均变异系数为6.1%.故作者认为可用自制茚三酮试剂代替进口试剂.

2-丙酰-6-甲氧基萘的气相色谱测定法

2-丙酰-6-甲氧基萘(简称丙酰物)是非甾体消炎镇痛药萘普生一条合成路线的重要中间体。本文采用气相色谱法,以正二十四烷为内标,测定丙酰物的含量,获得较满意结果。一、材料与方法 1.仪器和试药: 岛津GC-15A气相色谱仪,C-R4A数据处理机;正二十四烷系色谱试剂,含量≥99％;丙酰物对照品系本系药化教研室提供,含量99％。

细胞色素P-450对β-阻滞剂类药物代谢物与鼠肝微粒体大分子形成络合物的选择作用

目的 :探讨不同来源鼠肝微粒体对 β-阻滞剂类药物代谢形成络合物的选择能力和可能机制。方法 :将经 β-萘黄酮 (BNF)、苯巴比妥 (PB)、地塞米松 (DEX)、普萘洛尔 (PROP)、阿替洛尔(ATE) 5种药物处理的鼠肝微粒体及对照组微粒体分别与β-阻滞剂类药物共孵育 ,测定孵育后代谢络合物形成的差示光谱。结果 :与对照组相比 ,经 PROP处理的鼠肝微粒体降低 PROP代谢络合物形成 ,但增加美托洛尔 (METO)代谢络合物形成 ;PB抑制 PROP代谢 ;而 BNF诱导 METO代谢。 S-PROP在不同微粒体中形成络合物能力较 R-PROP强。结论 :细胞色素 P-4

氧氟沙星对映体在经不同诱导剂诱导的大鼠肝微粒体中的葡醛酸化代谢(英文)

为评价氧氟沙星 ( OFLX)对映体葡醛酸化代谢的立体选择性 ,采用手性 HPLC法测定大鼠肝微粒体孵育液中 OFLX对映体 .结果显示 :经苯巴比妥 ( PB)和β-萘黄酮 ( BNF)诱导的不同葡醛酸转移酶 ( UDPGT)亚族对 OFLX对映体葡醛酸化代谢有不同的影响 .在所试验的对照 ,PB或 BNF诱导的微粒体中 S- ( - ) -和 R- ( + ) - OFLX之间 ,Km 和Vmax无显著性差异 ;但 PB组中 S- ( - ) -和 R- ( + ) -OFLX的 Km 和 Vmax与对照组或 BNF组相应的对映体比较有显著性差异 ;OFLX对映体之间的 Clint在对照组与 BNF组没有显著性差异 ;而在 PB组则有显著性差异 .另外 BNF组的 Clint较对照组和 PB组分别有显著性差异 .因此 ,经 PB诱导的 UDPGT亚族对 S-和 R- OFLX的 相代谢存在立体选择性 ,并主要是由于其催化部位的差异引起了内在清除率的变化 .

P450ⅢA在2，4，5－三氟苯胺代谢生—氧化碳中起主导作用

２，４，５－三氟苯胺（２，４，５－ＴＦＡ）与空气氧，ＮＡＤＰＨ及地塞米松（ＤＥＸ）预处理的大鼠肝微粒体共温育，可生成大量的一氧化碳（ＣＯ）．但是，未处理或β－萘黄酮预处理的大鼠肝微粒体却无上述能力。与ＤＥＸ相比，苯巴比妥（ＰＢ）诱导的鼠肝微粒体使２，４，５－ＴＦＡ生成ＣＯ的能力仅为前者的１／４．Ｐ４５０ⅢＡ是ＤＥＸ所诱导的最主要的Ｐ４５０亚族，亦能为ＰＢ所诱导，因而在Ｐ４５０ⅢＡ对２，４，５－ＴＦＡ降解为ＣＯ中或许起主要作用，为证实这一推论，我们研究了ＣＯ生成能力与Ｐ４５０不同亚族的特征催化活性间的相关性。在所选用的红霉素氮上去甲基化，三乙酰竹桃霉素（ＴＡＯ）代谢中间体（ＭＩ）络合物生成能力，对氨基苯甲酸叔丁酯ＭＩ络合物生成能力，戊氧基异吩唑氧上去烷基化，乙氧基异吩唑氧上去乙基化，以及氨基比林氮上去甲基化等活性指标中，仅表征Ｐ４５０ⅢＡ的活性指标──ＴＡＯ－ＭＩ络合物生成能力及红霉素氮上去甲基酶活性，与ＣＯ的生成能力明显相关。给ＤＥＸ诱导的大鼠以Ｐ４５０ⅢＡ的抑制剂ＴＡＯ处理，鼠肝微粒体的Ｐ４５０含量，ＴＡＯ－ＭＩ络合物生成能力，红霉素氮上去甲基化作用，及ＣＯ生成能力的丢失程度相近。上述结果表明，Ｐ４５０Ⅲ?