反复自然流产夫妇的免疫学因素探讨

反复自然流产夫妇的免疫学因素探讨６３００４２重庆医科大学附一院妇产科姚珍薇６３００４２重庆医科大学计划生育系杨戎，魏莎莉，梁宪生反复自然流产（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒ－ｔｉｏｎ，ＲＳＡ）是妊娠的并发症之一。其病因十分复杂，近年...

妊娠合并病毒性肝炎

病毒性肝炎是孕妇并发的最常见的肝脏疾病。病原除甲、乙、丙、丁、戊５型肝炎病毒外，近年还发现己、庚、型肝炎病毒。其他引起肝炎的还有单纯疱疹病毒、巨细胞病毒等。妊娠期病毒性肝炎的发病率约为非妊娠妇女的９倍，对胎儿或新生儿可造成严重威胁。隐性感染（携带状态...

避孕药——误解与偏见

每年，全球约有4000万～6000万女性进行人工流产。而中国20～29岁的育龄妇女中，约有27．3％的妇女做过人流，人流率位居世界第二。

雌激素受体α基因PvuⅡ、XbaⅠ、STR多态性与原因不明月经过少的关系

目的探讨西南地区雌激素受体α（estrogen receptorα,ERα）基因多态性与原因不明月经过少的关系。方法选择西南地区100例原因不明月经过少患者为实验组,100例正常月经者作为对照组。应用分子生物学的方法分析PvuⅡ、XbaⅠ限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,RFLP）。同时对人雌激素受体基因上游的短串联重复序列（short tandem repeat,STR）进行纯化、克隆和序列分析,观察ERα基因多态性基因型在实验组与对照组中的基因型分布。结果P基因型频率实验组为47.5%,对照组为30.5%,OR值1.810（95%CI=1.113-2.765）,P=0.012。实验组X基因型频率为20.5%,对照组为32.0%,OR值0.641（95%CI=0.361-0.898）,P=0.036；PvuⅡ和XbaⅠ限制性片段长度多态性在两组中均呈多态性分布。病例组TA13等位基因频率高于对照组,差异有显著性（P=0.006）,TA15等位基因频率低于对照组,差异有显著性（P=0.033）。结论ERα基因多态性与原因不明月经过少有关,P等位基因可能是其危险因素,X等位基因可能是其保护因素,TA13等位基因可能是其危险因素,TA15等位基因可能是其保护因素。

ER、PR、VEGF及其受体在原因不明月经过少发病机制中的作用

目的:通过对子宫内膜组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子((VEGF)及其受体(KDR)表达的研究,探讨原因不明月经过少的发病机制。方法:2004年9月至2005年12月重庆医科大学附属第一医院以前瞻性方法观察月经过少组(观察组)和正常月经组(对照组)患者各40例,采用酶联免疫测定法,测定两组血清6项性激素,包括卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、催乳素(PRL)、孕酮(P)及睾酮(T),通过免疫组化半定量测定两组子宫内膜组织中ER、PR、VEGF、KDR的表达水平。结果:两组血清性激素水平FSH、LH、E2、PRL、P及T差异无显著性意义(P>0.05);观察组子宫内膜ER、VEGF和KDR的表达明显低于对照组(P值分别为<0.05);两组子宫内膜腺上皮细胞PR的表达差异无显著性意义(P>0.05)。结论:子宫内膜组织中ER、VEGF和KDR的异常表达可能导致原因不明的月经过少。

卵巢早衰危险因素的病例对照研究

目的:广泛探索卵巢早衰的危险因素,为卵巢早衰的预防提供科学依据。方法:采用1∶2配比的病例对照研究方法。结果:单因素条件Logistic回归分析显示婚姻状况、人工流产次数等14个变量与卵巢早衰的发生有关;而多因素条件Logistic回归调整后的结果显示婚姻状况(OR=6.098)、人工流产次数(OR=2.176)、吸烟(OR=3.203)、染发(OR=2.759)、心情(OR=0.157)、蔬菜的摄入频率(OR=0.313)、腮腺炎病史(OR=10.475)与卵巢早衰的发生仍有关联。结论:婚姻状况、人工流产次数、蔬菜摄入频率、吸烟、染发、心情、腮腺炎病史是卵巢早衰发生的主要影响因素。

滋养细胞自噬在重度子痫前期发病中的作用与分子机制

目的:研究重度子痫前期患者胎盘滋养细胞自噬的发生规律及其导致细胞受损的可能机制。方法:收集23例重度子痫前期患者及23例正常孕妇的胎盘组织,应用扫描电镜观察胎盘绒毛表面的变化;透射电镜观察滋养细胞超微结构及自噬体形成;免疫组化检测胎盘组织自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ的表达变化,并将其相对表达量与胎盘重量、新生儿体质量进行相关性分析。结果:与对照组相比,重度子痫前期患者胎盘组织在扫描电镜下见绒毛稀少、排列紊乱等结构异常;透射电镜下见细胞质中典型的自噬体形成;免疫组化提示Beclin-1、LC3Ⅱ等蛋白表达显著升高(P<0.01),其相对表达量与胎盘重量、新生儿体质量呈负相关,Beclin-1,LC3Ⅱ与胎盘重量、新生儿体质量的相关系数分别为-0.977、-0.930,-0.812、-0.849。结论:重度子痫前期患者滋养细胞Beclin-1、LC3Ⅱ等蛋白的表达增加,自噬活性增高,与胎盘重量、新生儿体质量呈负相关。

孕鼠肝内胆汁淤积症对母鼠和胎鼠心脏的影响

目的探讨孕鼠肝内胆汁淤积症对母鼠和胎鼠心脏的影响。方法应用雌、孕激素建立妊娠肝内胆汁淤积大鼠模型,光镜和电镜观察母鼠和胎鼠心脏的病理改变。结果(1)胆淤组和对照组比较,孕鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)的差异有显著性(P<0.01)。(2)胆淤组孕鼠肝脏光镜下见部分肝细胞有颗粒样变性和空泡变性,电镜下见肝组织中毛细胆管扩张,毛细胆管及肝细胞内见高电子致密物沉积。(3)胆淤组孕鼠胎盘光镜下见部分滋养细胞颗粒样变性和空泡变性。(4)胆淤组孕鼠心脏光镜下见心肌组织中局灶性心肌细胞颗粒样变性。(5)胆淤组胎鼠心脏光镜下见心肌组织中心肌细胞广泛空泡变性;电镜下见胎鼠心肌细胞内高电子致密物沉积,部分肌丝断裂,肌节模糊,细胞内线粒体水肿,脱髓鞘样改变。结论孕鼠肝内胆汁淤积症时高胆汁酸血症对母鼠和胎鼠心肌细胞均有明显的毒性作用,尤其以胎鼠心肌细胞病变更为严重。

慢病毒载体抑制FOXM1对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响与分子机制

目的:研究靶向转录因子FOXM1 shRNA慢病毒载体抑制FOXM1表达对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其分子机制。方法:应用感染复数(MOI)为20的靶向FOXM1shRNA慢病毒颗粒感染人卵巢癌SKOV3细胞,MTT比色法检测感染后SKOV3细胞的生长曲线;流式细胞术分析感染72 h后细胞周期变化;实时荧光定量PCR及Western blot法分别检测感染72 h后FOXM1、Cyclin D1、PLK1等基因mRNA及蛋白表达变化。结果:MOI为20的靶向FOXM1 shRNA慢病毒颗粒能显著抑制SKOV3细胞生长,并将细胞阻滞在G0/G1期而S期细胞减少(P<0.01);显著下调FOXM1、CyclinD1、PLK1等基因mRNA及蛋白表达。结论:抑制FOXM1表达对人卵巢癌SKOV3细胞具有显著的增殖抑制作用。其作用与下调Cyclin D1、PLK1等蛋白的表达将细胞阻滞在G0/G1期有关。

一种腹腔镜人工气腹体外模型的建立及评价

目的:建立腹腔镜人工气腹体外模型并评价其效果。方法:采用不锈钢密封罐和自动气腹机建立腹腔镜人工气腹体外模型,用MTT法观察CO2气腹(7mmHg,4h)对人宫颈癌细胞CaSki体外生长的影响,实验重复3次。设未处理组为对照。结果:CO2气腹组和对照组同次处理的组间比较结果显示,处理后第24h、48h两组吸光度值无明显差异(P>0.05),处理后第72h、96h、120h CO2组各时间点吸光度值明显高于对照组(P<0.05)。两组组内3次重复实验同一时间点所测吸光度值(A)无显著差异(P>0.05)。结论:采用密封罐和自动气腹机建立的腹腔镜人工气腹体外模型是一种进行腹腔镜体外研究的理想模型;采用该模型发现CO2气腹促进人宫颈癌细胞CaSki的体外生长。

绝经后女性雌激素受体β基因多态性与骨密度的关系

目的探讨绝经后女性雌激素受体β基因(estrogen receptor β,ESR2)CA重复序列多态性及G1082A多态性与骨密度的关系。方法随机数字表法抽取重庆地区绝经后女性200例,采用基因扫描及DNA测序技术分析ESR2基因CA重复序列多态性,采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性法分析ESR2基因G1082A多态性,使用双能X线骨密度仪测量股骨近端及腰椎骨密度。结果以CA重复序列平均数22次为界,将重复序列基因分为短基因(<22)和长基因(≥22),分别以S和L表示。200名绝经后女性中CA重复序列基因型SS、SL及LL的频率分别为25.0%、46.0%及29.0%;G1082A基因型rr、Rr及RR的频率分别为43.0%、42.0%及15.0%;基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。在校正年龄、绝经年限、身高、体质量和体质指数后,CA重复序列SS基因型者股骨颈骨密度较SL或LL基因型者高(P<0.01),其余部位(大转子、Wards三角和腰椎)各基因型骨密度无统计学差异(P>0.05);G1082A位点各基因型股骨颈、大转子、Wards三角及腰椎骨密度无统计学差异(P>0.05);这2个ESR2基因的多态性位点非连锁不平衡(P>0.05)。结论绝经女性中,ESR2基因第5内含子的CA重复序列多态性可能对骨密度的遗传调节起作用,而ESR2基因第5外显子的G1082A多态性可能对骨密度无明显影响。

中老年人腰椎骨密度变化的临床观察

目的了解中老年人随着年龄增长骨密度变化规律及骨量减少和骨质疏松患病率。方法用双能X线骨密度测定仪测量40岁以上人群正位腰椎骨密度2 325例,按年龄、性别分组统计。结果男女骨密度值均随年龄增加而逐渐降低。中老年男性骨量减少患病率为42.2%,骨质疏松为37.3%;中老年女性骨量减少为19.8%,骨质疏松为66.5%;50岁以后女性骨质疏松患病率显著高于男性(P<0.05),男性骨量减少患病率显著高于女性(P<0.05)。老年男性骨质疏松患病率为42.3%,女性为79.7%,老年女性骨质疏松患病率显著高于老年男性(P<0.05)。结论随着年龄增长,骨质疏松患病率逐年增加,女性比男性更易患骨质疏松,低骨量是导致骨质疏松骨折的一个重要危险因素。

产后性问题与产后保健服务

目的 :了解产后各种不同类型性问题的发生率以及在产后保健服务中对性健康重视的状况。方法 :采用横断面研究方法 ,将分娩活婴的 4 6 0例初产妇产科住院记录和产后 6月门诊随访问卷调查所得资料进行分析。结果 :94 74 %初产妇于产后 6月内恢复性生活 ,但妇女性问题的发生率较产前明显增加。其中 ,产后 3月内 70 5 9%存在性问题 ,产后 3～ 6月内下降为 6 4 0 8% ,产后 6月时 ,降至 34 17% ,但未恢复到妊娠前 (7 17% )的水平。产后常见的女性性问题有 :性交疼痛、阴道干涩、性高潮障碍、阴道松弛等 ;其中 ,性交疼痛发生率占第 1位 ,产后 3月内为 6 1 76 % ,产后 6月为 13 2 1%。产后 4 2天接受产科随访时 ,仅 2 0 82 %的妇女从卫生保健人员得到有关的性健康知识。在有产后性问题的妇女中 ,与卫生保健人员讨论过该问题者仅为 8 0 2 %。结论 :产后性健康问题非常普遍 ,但产后保健服务中性健康未得到应有重视 ,缺乏专业人员提供咨询与治疗。提示对产后性问题的咨询与治疗的潜在需求极大 ,值得重视。

妇女产后性问题与分娩方式

产后性问题发生率国外报道为 4 9%～ 83% ,其中最常见的是性交疼痛。一般认为病因是多因素的 ,其中心理因素占相当大比例。性交疼痛与哺乳、会阴损伤及阴道助娩正相关。本文就产后性问题与分娩方式的关系进行了探讨。虽对产后性问题的咨询与治疗的潜在需求极大 ,但产后保健服务中的性健康问题未得到应有的重视 ,更缺乏专业人员提供咨询与治疗。

腰椎和股骨近端骨密度测定在原发性骨质疏松症诊断中的相关性分析

目的:探讨成年女性不同部位骨密度变化规律,评价不同骨密度检测部位在原发性骨质疏松症诊断中的作用,为防治骨质疏松症提供科学依据。方法:采用美国NORLAND公司的XR-46系列双能X线骨密度仪测量1435例成年女性腰椎骨密度值,其中308例同时测定非优势(左)股骨近端各部位(股骨颈、大转子及Wards三角区)骨密度值,并进行统计学分析。结果:Wards三角区骨量下降最早,骨量累计丢失率最大,是骨密度变化最敏感的部位;腰椎各部位骨密度呈正相关性,股骨近端各部位亦呈正相关性;各部位骨密度与年龄的拟合曲线均以三次回归模型决定系数最高,其中股骨颈和Wards三角区决定系数最高;不同部位骨质疏松症诊断率无显著性差异。结论:不同年龄段的成年女性,应选择测量不同部位骨密度来诊断骨质疏松症。<50岁测量部位应首选股骨近端,≥50岁,腰椎与股骨近端应同时测定。

异位和正常子宫内膜间质细胞对上皮细胞间隙连接细胞间通讯的影响

目的研究体外异位和正常子宫内膜间质细胞对内膜上皮细胞间隙连接细胞间通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)功能的不同影响。方法取24例卵巢处子宫内膜异位灶以及10例正常子宫内膜,分离、纯化上皮细胞和间质细胞,建立体外上皮细胞单独培养、上皮细胞与间质细胞共培养模型。在激光共聚焦显微镜下采用荧光漂白后恢复技术分别检测各组上皮细胞的GJIC功能。结果①异位内膜上皮、间质细胞纯度分别为92%、95%,对照组内膜上皮、间质细胞纯度分别为95%、98%;②单独培养的异位内膜上皮细胞与单独培养的正常内膜上皮细胞的GJIC功能无显著性差异(P>0.05);③与正常间质细胞共培养后,上皮细胞中GJIC功能明显上调,而与异位内膜间质细胞共培养的上皮细胞中GJIC功能未见明显变化。结论异位间质细胞丧失了调节上皮细胞GJIC的能力,这种调节能力的异常可能与子宫内膜异位症发生有关。

EMs异位及在位内膜间质细胞Cx43的表达及GJIC功能的体外研究

目的:研究子宫内膜异位症(EMs)的异位与在位内膜间质细胞中Cx43的表达及间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能,探讨间质细胞GJIC功能异常对EMs发病的影响。方法:取24例卵巢处子宫内膜异位灶、41例EMs在位内膜以及30例正常子宫内膜,分离出间质细胞,加入雌、孕激素培养,建立体外间质细胞培养模型。利用激光共聚焦显微镜(LSCM)分别检测三组间质细胞的Cx43表达及GJIC功能。结果:间质细胞成功培养率分别为:异位内膜组45.8%(11/24)、EMs在位内膜组92.7%(38/41)、对照组93.3%(28/30),异位内膜间质细胞纯度为95%,在位内膜间质细胞纯度达98%。EMs异位内膜间质细胞中Cx43表达水平及GJIC功能明显比其他两组低,正常对照组的Cx43表达水平及GJIC功能最高,且差异均有显著性(P﹤0.01)。结论:(1)同时建立EMs异位内膜、在位内膜及正常内膜间质细胞的体外模型,有助于研究EMs的发病机制;(2)间质细胞中Cx43蛋白表达下调及其GJIC功能异常与EMs发生有关,调节Cx43表达或GJIC功能可能是潜在的治疗策略。

雌激素受体2基因多态性与绝经后女性骨密度的相关性研究

目的探讨雌激素受体2(estrogen receptor beta,ESR2)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与绝经后女性的骨密度(bone mineral density,BMD)是否相关。方法使用双能X线骨密度仪测量重庆市140例绝经后女性第2～4腰椎(L2～L4)及左股骨颈BMD值。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析ESR2基因第5外显子T1057G和G1082A及第8外显子G1730A SNPs。结果在全部受试者中,ESR2基因第5外显子1057T位点仅检测到VV1种基因型;G1082A基因型RR、Rr及rr频率分别为81.43%、17.14%及1.43%;G1730A基因型AA及Aa频率分别为87.86%及12.14%,aa基因型缺失;G1082A和G1730A SNPs的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。校正年龄、体质量、绝经年限等BMD影响因素后,G1082A SNP与L2和L4BMD显著相关(P<0.05),而与L3及股骨颈BMD无明显关联(P>0.05);G1730ASNP与股骨颈BMD显著相关(P<0.01),而与腰椎BMD无明显关联(P>0.05)。结论绝经后女性ESR2基因第5外显子G1082ASNP的r等位基因可能是腰椎低BMD的独立危险因素;第8外显子G1730A SNP的a等位基因可能是股骨颈低BMD的独立危险因素。

二氧化碳气腹对人卵巢癌细胞株SKOV_3VEG F和MMP9表达的影响

目的探讨腹腔镜二氧化碳(CO2)气腹对恶性卵巢肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法体外培养人卵巢浆液性乳头状腺癌SKOV3细胞株,以CO2处理2 h,应用细胞爬片免疫组织化学法和半定量RT-PCR方法检测不同时相中血管内皮生长因子VEGF和MMP9表达水平。结果CO2处理后12 h SKOV3细胞VEGF和MMP9蛋白和mRNA表达显著增加,VEGF在CO2处理后24 h表达达到高峰,MMP9在48 h达到高峰。结论CO2可以增强卵巢癌细胞SKOV3的侵袭能力。