基于肠道菌群和肠黏膜屏障探讨玉液汤防治气阴两虚证糖尿病肾病大鼠的作用研究

目的基于肠道菌群和肠黏膜屏障探讨玉液汤对气阴两虚证糖尿病肾病大鼠模型的影响。方法采用一测多评法对玉液汤冻干粉中的有效成分葛根素、芒果苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量进行检测,以控制玉液汤冻干粉的质量。将45只Wistar大鼠按照体质量随机分为正常组(NC组)、气阴两虚证糖尿病肾病组(M组)和玉液汤组(YYD组;5.03 g·kg^(-1))。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)25 mg·kg^(-1),佐以附子,青皮,枳壳灌胃8周构建气阴两虚证糖尿病肾病大鼠。期间YYD组大鼠同时干预玉液汤提取物。期间分别检测一次各组大鼠每周体质量和血糖水平,并记录大鼠的体征变化、摄食量和饮水量、游泳时间以及尿量。8周后采用全自动生化仪分析大鼠血清中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、血清肌酐(SCr)、尿氮素(BUN)水平;苏木精-伊红染色法(HE)观察肾脏和结肠组织的病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿液的尿蛋白浓度和血清中IgG、IgM、cAMP和cGMP的含量;16S rRNA对大鼠粪便菌群进行分析,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法对部分菌群进行验证;Western blot法检测大鼠肾脏及结肠炎症因子TNF-α和IL-6蛋白水平及结肠组织肠道屏障蛋白表达水平。结果玉液汤水提物冻干粉得率为27.36%,其中玉液汤中有效成分葛根素的含量为0.3496 mg·g^(-1)、芒果苷的含量为0.1851 mg·g^(-1)、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量为0.0429 mg·g^(-1)。动物实验结果表明,玉液汤能显著改善气阴两虚证糖尿病肾病模型大鼠倦怠、乏力等证候表征,提高大鼠游泳时间,降低饮水量和进食量等症状;增加粪便中拟杆菌门和降低厚壁菌门的丰度;改善模型大鼠血脂四项、血糖、肾功指标、免疫指标IgG、IgM以及机体能量平衡因子cAMP、cGMP水平;HE染色表明玉液汤能显著改善模型大鼠肾脏及结肠黏膜屏障损伤;抑制肾脏及结肠炎症因子TNF-α、IL-6的表达,显著提高结肠动力蛋白CHRM3、5-HT3A以及黏膜屏障蛋白Occludin、ZO-1的表达水平。结论玉液汤可能通过纠正模型大鼠肠道菌群失调,延缓肠黏膜损伤,改善肾脏和结肠炎症,发挥防治气阴两虚证糖尿病肾病的作用。

复方玉液汤通过调控PI3K/Akt信号通路抑制糖尿病大鼠心肌细胞凋亡和炎症反应

目的运用网络药理学技术分析复方玉液汤防治糖尿病心肌病(DCM)的作用机制,并通过动物实验进行验证。方法利用TCMSP数据库检索复方玉液汤所含6种中药(黄芪、山药、知母、葛根、五味子、天花粉)中的化学成分,根据口服生物利用度(OB)和药物相似性(DL)筛选出活性化学成分以及与DCM相关的靶点;利用Drugbank、Gene Cards、OMIM和PharmGKb数据库获取与DCM相关靶点;STRING数据库对核心靶点进行PPI网络的构建和分析;Metascape进行核心靶点的GO和KEGG富集分析;利用Cytoscape3.9.1构建“中药-关键成分-核心靶点-关键通路”网络,并对核心靶点对接的关键成分进行分子对接。建立糖尿病心肌病Wistar大鼠动物模型,将大鼠分为正常组、模型组、玉液汤低剂量组(YYT-低组,0.29 g/kg)、玉液汤高剂量组(YYT-高组,1.15 g/kg),15只/组,药物剂量为生药含量。给药8周后观察各组大鼠的心脏组织病理切片,检测各组大鼠心脏电生理变化、血清中的LDH、CK、CK-MB含量变化以及心脏组织中PI3K、P-PI3K、Akt、P-AKT、BAX、IL-6、TNF-α蛋白的表达情况。结果筛选后得到复方玉液汤中61个活性化合物,1057个靶点;3682个DCM相关疾病靶点,共同靶点551个。根据筛选获得的核心靶点富集得到的核心通路发现,凋亡和炎症及相关PI3K/Akt信号通路可能是治疗DCM的关键信号通路;分子对接结果显示,金色酰胺醇酯、山柰酚等活性成分与AKT1和PIK3R1的结合活性较好。利用动物实验对筛选的靶点及通路进行验证,结果显示,与DCM模型组大鼠比较,复方玉液汤能改善模型大鼠心肌组织细胞紊乱及炎性浸润的病理特征,降低模型大鼠血清中LDH、CK、CK-MB水平及模型大鼠心脏组织中BAX、IL-6、TNF-α的蛋白含量并升高P-PI3K和P-AKT的蛋白含量(P<0.05)。结论复方玉液汤防治DCM是多成分、多靶点和多信号通路共同作用的结果。复方中主要活性成分金色酰胺醇酯、山柰酚等通过调控PI3K/Akt信号通路,抑制DCM发病过程中心肌细胞凋亡及炎症反应,发挥对DCM的保护作用。

糖尿病心肌病大鼠动物模型的构建及评价指标的建立

目的构建糖尿病心肌病大鼠动物模型并建立其评价指标。方法30只SPF级Wistar雄性大鼠按体重随机分为两组,正常组给予常规饲料喂养、模型组给予高糖高脂饲料喂养4周。模型组大鼠禁食12 h腹腔注射链脲佐菌素(STZ)25 mg/kg,尾尖取血检测随机血糖值≥16.7 mmol/L判定为2型糖尿病大鼠。实验期间每周记录一次大鼠的体重及血糖值,8周后计算心脏指数,检测各组大鼠的血脂四项指标以及心电图和标志性的心肌酶。Masson和HE染色观察大鼠心肌组织的纤维化程度和形态学变化,并计算心肌胶原容积分数。Western Blot检测大鼠心脏组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、TGF-β1、α-SMA、Collagen-Ⅰ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)蛋白表达水平。结果相较于正常组,模型组大鼠血糖值在1~8周显著升高(P<0.05),体重从第3周起显著降低(P<0.05),心脏指数显著增大(P<0.05),心脏电生理指标表现为心率(HR)、QRS间期、ST段波幅和QT间期水平显著升高(P<0.05)。三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和丙二醛(MDA)的含量显著升高(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量显著降低(P<0.05)。HE染色结果显示模型组大鼠心肌组织中心肌细胞排列紊乱且间隙增大,并伴有炎性细胞浸润。Masson染色显示与正常组相比,模型组大鼠的心肌胶原容积分数显著增大(P<0.05),纤维化严重。模型组大鼠心肌组织中Bax、Caspase-3、TGF-β1、α-SMA、Collagen-Ⅰ、TNF-α、IL-6蛋白的表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论高糖高脂饲料喂养4周后,大鼠腹腔注射小剂量STZ 25 mg/kg,继续喂养8周后的Wistar大鼠在一定程度上已出现了类似于人的糖尿病心肌病的临床表现,此法可用于构建糖尿病心肌病动物模型,上述检测指标可用于糖尿病心肌病大鼠模型的评价。

磁微粒分离酶联免疫法在日本血吸虫抗体检测中的应用

目的探讨磁微粒分离酶联免疫法(MPAIA)用于检测日本血吸虫病血清抗体的效果。方法用MPAIA测定日本血吸虫病血清中特异性抗体。结果用MPAIA检测384例非血吸虫病流行区阴性血清,均为阴性;检测61例急性血吸虫病人血清、788例慢性血吸虫病人血清、32例晚期血吸虫病人血清其阳性率分别为100%、94.2%、90.6%;检测14例并殖吸虫病人、13例囊虫病人、9例旋毛虫病人血清,均未发现交叉反应。结论MPAIA检测日本血吸虫血清抗体有较高的灵敏度和特异度,可用于日本血吸虫病的临床诊断和现场疫情监测,该方法具有广阔应用前景。

两色金鸡菊对糖尿病大鼠肾脏纤维化RhoA/ROCK/Nox4信号通路的影响

目的观察两色金鸡菊对糖尿病大鼠肾功能损伤及肾脏纤维化的影响,探讨其作用机制。方法 SD大鼠以高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型。将60只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和两色金鸡菊高、中、低剂量组,每组10只。各给药组给予相应剂量药物灌胃4周。Masson染色观察大鼠肾脏纤维物质沉积的变化;放射免疫法检测大鼠早期肾损伤各指标的水平;免疫组化检测大鼠肾组织RhoA、p-MYPT、Nox4、平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肾脏纤维物质沉积、尿微量白蛋白、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-巨球蛋白(β2-MG)水平显著升高,RhoA、p-MYPT、Nox4、α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,两色金鸡菊高、中、低剂量组均不同程度地改善大鼠肾脏纤维物质的沉积,抑制尿液微量白蛋白、α1-MG、β2-MG表达水平,肾组织RhoA、p-MYPT、Nox4、α-SMA蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论两色金鸡菊乙酸乙酯提取物可能通过RhoA/ROCK/Nox4信号通路抑制模型大鼠肾组织α-SMA的表达、肾脏纤维物质沉积,进而减轻模型大鼠早期肾脏损伤。

高脂高糖与低剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病大鼠模型的建立

目的建立高脂高糖与低剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的SD大鼠的早期糖尿病肾病(DN)模型,模拟早期DN的病理改变及肾功能改变。方法将SPF级正常雄性SD大鼠30只按照体重随机分为正常组、模型组。正常组大鼠给予普通饲料喂养,模型组大鼠高脂饲料喂养8周后,腹腔注射STZ 35 mg/kg,形成糖尿病模型后,继续高脂高糖饲料喂养4周后,观察两组大鼠肾脏病理改变、生化及肾功能各项指标的改变情况。结果模型组大鼠体重显著低于正常组(P<0.01),而随机血糖值显著高于正常组(P<0.01),且达到糖尿病成模标准。模型组大鼠血清胰岛素水平显著低于正常组,相对肾重、24 h尿微量白蛋白、α1-微球蛋白、β2-巨球蛋白值显著高于正常组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。模型组病理特征表现为肾小球基底膜增厚,系膜增宽,肾小球及肾小管糖原物质、胶原纤维聚集等。结论此造模方法可模拟早期DN的基本特征。

反鱼雷水声对抗技术的现状与发展

对于大中型水面舰艇和潜艇来说 ,鱼雷威胁是致命的 ,因此近 10几年来 ,反鱼雷水声对抗技术得到了迅猛的发展。文章在简要介绍威胁不同类型舰艇的各类鱼雷以后 ,讨论了反鱼雷水声对抗系统的基本构成和主要功能 ,也讨论了新一代水声对抗技术对鱼雷发展的影响。

内源性一氧化碳在心肺复苏后大鼠心肌氧化应激损伤中的变化及作用

目的研究内源性一氧化碳（CO）在心肺复苏（CPR）后大鼠心肌氧化应激损伤中的变化，并探讨心肌氧化应激损伤是否与内源性CO及血红素加氧酶-1（HO-1）表达相关。方法将32只雄性SD大鼠随机分为假手术组（Sham组），复苏后1h组（ROSC1h组），复苏后3h组（ROSC3h组），复苏后24h组（ROSC24h组）。Sham组只进行手术操作，不进行致颤及CPR。其余三组大鼠均诱导8min室颤及6minCPR。检测各组大鼠心功能、血清CK—MB、心肌组织活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）水平；观察心肌组织CO水平、心肌HO-1蛋白水平及HO-1mRNA表达；分析CPR后大鼠心肌氧化应激损伤与心肌CO水平、HO-1表达的相关性。结果与Sham组比较，ROSC1h组、3h组及24h组心功能损伤明显，血清CK—MB水平提高（P〈0．05）。大鼠ROSC1h组及3h组心肌ROS及MDA水平均明显高于Sham组（P〈0．01）；ROSC24h组心肌MDA水平高于Sham组（P〈0．01）。ROSC1h组和3h组心肌组织CO水平、HO-1蛋白水平及HO-1mRNA水平较Sham组升高明显（P〈0．01）。ROSC24h组心肌CO及HO-1蛋白水平明显高于Sham组（P〈0．05）。相关性分析结果显示，CPR后心肌组织CO水平与心肌组织HO-1蛋白的表达及HO-1mRNA水平呈正相关（P〈0．01）；心肌组织MDA水平与心肌组织CO水平、HO-1蛋白表达及HO-1mRNA水平均呈正相关（P〈0．01）；心肌组织ROS水平则与心肌组织CO水平及心肌组织HO-1mRNA水平呈正相关（P〈0．01）。结论室颤大鼠CPR后心肌内源性CO水平及心肌HO-1表达可明显增加，与复苏后心肌氧化应激损伤水平呈明显正相关。复苏后过度ROS的产生可能是CO及HO-1水平上调的诱发因素之～。

发展UUV装备的几个问题

进入新世纪以后,无人水下航行器(UUV)的装备和技术得到了迅猛的发展,至今大约有1000余艘各种用途的UUV已在军用和民用领域得到应用。预料到2030年,美国将组建有2000艘UUV的水下无人部队投入海军使用。首先介绍了国外UUV技术的发展情况和美国正在发展的UUV装备的主要使命和特点。接着讨论了当将UUV投入反水雷战时将如何改变反水雷战的作战方式,最后讨论了在发展UUV技术时对水下电子信息技术的需求。

肠息肉发生的细胞和分子生物学研究进展

肠息肉是一类从黏膜表面突出到肠腔内的隆起状病变的临床诊断．在最近的研究中陆续证实,其发生和发展的原因和机制,是由于Bmprla,APC,SMAD4,PTEN,STK11等基强突变而使各种细胞信号分子通过影响BMP信号通路,PTEN信号通路及Wnt信号通路所组成的生长信号调控网络,造成β-catenin在肠干细胞中的过度积聚,使得肠干细胞功能紊乱,导致其自我更新、克隆增殖、分化和凋亡失去平衡的结果．

潜艇对抗空投鱼雷系统技术研究

利用低频主 /被动拖曳声呐和航空吊放声呐探测安静型潜艇是今后一段时间里的一种主要探潜方式。与此同时 ,使用空投鱼雷与安静型潜艇进行作战将是一种主要的反潜手段。文章讨论潜艇对抗空投鱼雷将涉及的几个主要问题 ,首先分析我国潜艇将面临的敌空投鱼雷的性能特点和反潜飞机上的主动吊放声呐及空投浮标的情况 ,接着讨论早期发现携带空投鱼雷和吊放声呐的直升机平台的方法 ,进一步讨论对入水鱼雷的发现和对抗问题。

针对中药学专业药理学教学中形成性评价的应用探究

本文的行文脉络是从学生的角度出发,紧紧围绕药学专业学生在具体的学习过程中,从而发展为较为完善的形成性评价。在整个探索的过程中,所采取的方法是通过借助平台的作用,从而构建相应的考核机制,对学生在整个学习过程中进行综合分析,从而对学生的整个学习过程进行综合性评价,通过这样的方法所得到的评价结果更加契合实际情况。根据药学专业的学生在学习过程中的形成性评价,通过这个评价结果能够清晰的体现出学生的学习状态和学习效率,使得整个结果更加具有科学性。基于此,对于药学专业开展形成性评价能够有效帮助教学取得更好的效果。

反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中拉贝洛尔的含量

目的:建立血浆中拉贝洛尔的反相高效液相色谱-荧光检测法。方法:血浆样品经叔丁基甲醚一次萃取后有机相挥干,以少量流动相重组,采用KromasilKR100-5C1(8250mm×4.6mm,5μm)为分析柱,甲醇:水:2.4molL二乙胺-磷酸缓冲液(pH=4.0)(50:48:2)为流动相,荧光激发波长(Ex)为302nm,发射波长(Em)为420nm。拉贝洛尔和内标(盐酸普萘洛尔)的保留时间分别为5.5min和8.0min。结果:血浆中的拉贝洛尔在2.5ngmL～160ngmL范围内线性关系良好,r=0.9998。方法的最低检测浓度为2.5ngmL,样品和内标平均提取回收率分别为81.28%和88.68%,批内、批间精密度为0.42%～7.72%。结论:本方法灵敏可靠,可满足拉贝洛尔的临床血药浓度监测和药代动力学研究的需要。

两色金鸡菊提取物抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞炎症反应及相关机制研究

目的探讨两色金鸡菊乙酸乙酯提取物对高糖诱导大鼠肾小球系膜糖尿病肾病(DN)细胞模型的影响及其作用机理。方法通过高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞建立体外DN细胞模型,应用两色金鸡菊乙酸乙酯提取物不同浓度对细胞模型进行干预后,分为正常组、高糖组及高糖+两色金鸡菊乙酸乙酯提取物不同剂量(25、50、100、150μg/mL)组共6组。采用Real time-PCR法、Western blot法,从转录水平及蛋白表达水平检测其对细胞中炎性因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)以及对NF-κB信号通路中p-65表达的影响。结果两色金鸡菊乙酸乙酯提取物能明显抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞中炎症因子MCP-1mRNA和蛋白表达水平,以及ICAM-1的mRNA表达水平。两色金鸡菊乙酸乙酯提取物能明显抑制高糖诱导大鼠肾小球细胞中p-65蛋白的表达。结论两色金鸡菊乙酸乙酯提取物可能通过NF-κB信号通路抑制DN细胞模型的炎症反应。

浅谈专职化院前急救医师在中国的发展

院前急救的及时性与有效性对急危患者的预后起着越来越重要的作用。专职化院前急救医师的发展已广泛引起了国内外的关注。我国只有少量的综合医院进行了尝试性的发展，还未进入一个规范化的进程。我们认为，专职化院前急救将成为一个独立的医学专业。在院前急救培训工作中，应加强如下几个方面的工作：①院前急救医学专业知识的培训；②人文科学、法律及心理学的学习；③增强身体素质，加强体力训练。

住院老年患者跌倒原因分析及预防措施

世界面临老龄化的严峻挑战,整个社会都在关注老龄化问题。众多研究资料表明,跌倒是老年人的一个重要健康问题,而据医疗机构统计,患者在医院内跌倒而引发的事故呈持续增长的趋势。因此,防范患者跌倒是医院护理质量中的一个重要方面,也是评价医院护理质量的一个重要指标。据报道,女性跌倒的比例随年龄增长而增加,而跌倒的发生不仅影响老年患者的生存质量,而且生活质量也随之显著下降。

新疆多伞阿魏对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制作用研究

目的:研究新疆多伞阿魏提取物对胃癌细胞株SGC-7901增殖抑制作用及作用机制。方法:采用二苯基四氮唑溴盐比色法(MTT法)检测新疆多伞阿魏不同提取物对SGC-7901细胞增殖的抑制作用,筛选出抑制作用最强的提取物W3。光镜下观察W3不同浓度对SGC-7901细胞形态的影响,TUNLE凋亡染色实验检测W3诱导SGC-7901细胞凋亡作用,流式细胞仪进一步检测其对细胞凋亡率的影响。结果:多伞阿魏提取物W3能显著抑制SGC-7901细胞增殖,同时具有诱导细胞凋亡作用,且呈剂量依赖关系。结论:多伞阿魏提取物W3抑制胃癌细胞增殖作用可能与诱导细胞凋亡有关。

张仲景治疗呕吐用药规律研究

仲景学说之研究,东汉以后代有发展,张仲景之《伤寒论》与《金匮要略》合为一书,名为《伤寒杂病论》,其多数方剂与经文前后互用,详于此则略于彼,不可分割。当下由于分科之细,将《伤寒论》与《金匮要略》分开研究蔚然成风。诚然,将二书分开研究,精于该书则易,但是可能以偏概全,难得仲景学说之全貌。重视脾胃是仲景学说的特色之一,

张仲景治疗疼痛用药规律探析

目的探究张仲景治疗疼痛的用药规律,以期更好地指导中医对疼痛的治疗。方法将张仲景《伤寒杂病论》中关于疼痛的组方中所涉及中药进行高频用药、功效、四气、五味、归经的统计分析,并对高频用药位居前15位的中药进行聚类分析。结果前15味药物依次为:甘草、芍药、生姜、大枣、桂枝、附子、白术、干姜、大黄、人参、半夏、枳实、当归、黄芩、麻黄;功效用药以解表药、补气药、温里药、活血化瘀药、补血药位居前5位;四气用药以温性药、寒性药、平性药位居前3位;五味用药以甘、辛、苦味药位居前3位;归经中以归心经、脾经、肺经、肝经位居前4位;对高频用药进行聚类分析可聚为4类。结论张仲景治疗疼痛用药规律概括为:从寒论治,突出虚实,从心治痛,注重化瘀,治从整体,寒热并治,治从中焦,甘以缓之,学遵内经,多有发挥。

虫类药在古方治疗消渴中的应用规律分析

目的:探索与讨论虫类药在古方治疗消渴中的用药特点及规律。方法:依据纳入排除标准,收集、整理治疗消渴古方中使用的虫类药并录入Excel数据库,应用SPSS17.0进行统计学分析。结果:经统计,高频应用的虫类药以牡蛎、鸡内金、桑螵蛸位居前3位,其中以平肝熄风药、补虚药及消食药占据大部分,四气以平性、寒性、温性药为主,五味以咸味、甘味居多。结论:虫类药在消渴发展的不同阶段发挥不同作用,其中部分高频用药于今方中鲜有所见,以上可为指导临床用药及新药开发提供借鉴。