大鼠幽门螺杆菌感染慢性萎缩性胃炎模型的研究

目的建立 Hp 相关 CAG 大鼠模型,探讨 Hp 与胃粘膜损伤因子在 CAG 中的致病作用。方法采用二级、体质量90g～110 g、Wistar 大鼠60只,随机分为 Hp 感染 CAG 模型组,单纯 Hp 感染组,单纯胃粘膜损伤 CAG 模型组与对照组,采用灌胃接种 Hp 菌株(SS1),30g/L 水杨酸钠灌胃,5mmaol/L 去氧胆酸钠溶液、50mL/L乙醇交替自由饮用及饥饱失常的方法建立 Hp 相关 CAG 模型,Hp 末次接种12wk 后处死所有动物,检测 Hp 感染情况及粘膜固有层厚度、粘膜表面上皮层厚度,壁细胞计数和肠化、不典型增生等病变。结果 Hp 感染 CAG 模型组及单纯 Hp 感染组 Hp 阳性,Hp感染 CAG 模型组出现以淋巴细胞浸润为主的慢性炎症,粘膜固有层厚度,胃窦(68±4)μm,胃体(315±40)μm,粘膜表面上皮层(71±7)μm,PAS 阳性层厚度(81±7)μm与正常组(99±16)μm,(407±33)μm,(101±11)μm,(121±14)μm比较明显变薄(P<0.01),壁细胞计数(34.9±1.1)/腺管明显减少,正常组为(51.1±2.4)/腺管(P<O.01),无明显肠化及不典型增生单纯 Hp 感染组大鼠亦出现较明显的慢性炎症与活动性炎症,粘膜固有层厚度,壁细胞汁数与正常组比较无明显变化。结论 Hp 感染大鼠 CAG 模型的病因、病理与人类 CAG 病变相似,Hp 相关 CAG 大鼠模型获得了初步成功,可作为 Hp 相关 CAG 发病机制及药物筛选较合适的动物模型,单纯 Hp 感染12wk 内无胃粘膜萎缩病变形成。

重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜免疫屏障的变化及甘露糖的干预效果

目的探讨重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜免疫屏障的变化情况及甘露糖的干预效果。方法将30只大鼠随机分为假手术组、胰腺炎组(重症急性胰腺炎组)和甘露糖组(重症急性胰腺炎+甘露糖干预组),建模后12 h,胰腺和肠黏膜组织进行HE染色观察病理学变化,测定血内毒素、淀粉酶、瘦素水平和分泌性免疫球蛋白(sIg)A、甘露糖结合凝集素(MBL)、白细胞介素(IL)-4水平。结果胰腺炎组和甘露糖组胰腺病理学评分和肠黏膜病理学评分均高于假手术组(P<0.05),甘露糖组大鼠胰腺病理学评分和肠黏膜病理学评分低于胰腺炎组(P<0.05)。胰腺炎组和甘露糖组血清内毒素、淀粉酶、瘦素水平均高于假手术组(P<0.05),甘露糖组大鼠血清内毒素、淀粉酶、瘦素水平低于胰腺炎组(P<0.05)。胰腺炎组和甘露糖组血清sIgA、IL-4水平均低于假手术组(P<0.05),甘露糖组血清sIgA、IL-4水平高于胰腺炎组;胰腺炎组和甘露糖组血清MBL水平均高于假手术组(P<0.05),甘露糖组血清MBL水平高于胰腺炎组(P<0.05)。结论重症急性胰腺炎破坏肠黏膜免疫屏障,甘露糖具有保护重症急性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的作用,其机制可能为甘露糖能够增加血清sIgA、MBL、IL-4水平。

慢性萎缩性胃炎与幽门螺杆菌感染的关系

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是引起慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌的重要病因,几乎所有胃部 Hp 感染者均可引起不同程度胃部炎症改变,少数发展为慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG),甚至胃癌.关于 Hp 感染导致 CAG 的确切发病机制,目前仍不十分清楚.现就 CAG与 Hp 感染关系的研究现状作一综述.

消化性溃疡的愈合质量

消化性溃疡治疗的核心目标是提高溃疡愈合质量,溃疡愈合质量采用内镜、组织学及功能成熟度对再生黏膜进行综合评价。根除幽门螺杆菌。

复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架的体外实验

背景:目前已研制出复合左旋聚乳酸可降解性胆肠支架。目的:研究复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架的溶解性及生物相容性。方法:(1)溶解性:将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架置于人工胃酸中,12周内检测溶解率;(2)热源性:将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液经耳缘静脉注入兔体内,检测体温变化;(3)溶血性:将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液、生理盐水及蒸馏水分别加入兔抗凝血中,检测溶血率;(4)细胞相容性:分别以含体积分数10%胎牛血清的DMEM高汤培养基、橡胶材料浸提液、复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液培养结肠癌Caco-2细胞,12,24,36,48 h后,检测细胞增殖;2 d后,检测细胞乳酸脱氢酶释放量。结果与结论:复合左旋聚乳酸胆肠支架的体内稳定性时间长,在20周左右可以溶解近80%以上;复合左旋聚乳酸胆肠支架不具有热源性及溶血性;复合左旋聚乳酸胆肠支架对Caco-2细胞的增殖及乳酸脱氢酶释放无影响,无明显细胞毒性;结果表明,复合左旋聚乳酸材料具有良好的溶解性及细胞相容性。

螺内酯对肝星状细胞表达基质金属蛋白酶及其抑制剂的影响

目的研究螺内酯干预肝星状细胞(HSCs)后基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、MMP-13和其组织抑制剂1(TIMP-1)的变化。探讨螺内酯对胶原代谢影响的机制。方法应用不同浓度螺内酯(1×10-4)mol/L^(1×10-7)mol/L干预HSCs 48小时,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MMP-2、MMP-9、MMP-13 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达。结果①螺内酯组的MMP-13基因表达强度上调,螺内酯(1×10-4)mol/L^(1×10-6)mol/L浓度组MMP-13基因表达强度(0.91±0.13、0.80±0.01、0.67±0.15)均明显高于对照组(0.53±0.10)(P<0.01)。1×10-4mol/L浓度组MMP-13基因表达强度接近对照组的2倍。②螺内酯干预HSCs 48小时后,TIMP-1基因表达减少,螺内酯(1×10-4)mol/L^(1×10-6)mol/L浓度组(0.15±0.05、0.28±0.15、0.37±0.03)明显低于对照组(0.47±0.04)(P<0.01或<0.05)。③螺内酯不同浓度干预HSCs 48小时后,HSCs MMP-2、MMP-9基因表达无明显变化(P>0.05)。结论螺内酯可抑制HSCs TIMP-1基因的表达,增加间质胶原酶MMP-13 mRNA的含量。螺内酯可能通过对MMPs及TIMP-1影响而促进胶原降解。

螺内酯对血小板衍生生长因子诱导肝星状细胞增殖和胶原合成的影响

目的探讨螺内酯对血小板衍生生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)增殖和胶原合成的影响。方法培养大鼠HSCs,实验分为对照组,PDGF-BB(10μg/L、20μg/L)组,不同浓度螺内酯(1×10~4～1×10^(-8))mol/L+PDGF-BB(10μg/L)5组,螺内酯干预HSCs 48h后,采用~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)、~3H-脯氨酸(~3H-Pro)掺入法研究HSCs的增殖、胶原合成能力。结果 PDGF-BB对HSCs^3H-TdR、~3H-Pro掺入有促进作用,浓度越高,对HSCs^3H-TdR掺入的促进作用越强(P<0.05)。螺内酯对PDGF-BB诱导的HSCs的~3H-TdR、~3H-Pro掺入有显著抑制作用,其抑制作用随浓度增加而增强(P<0.01)。螺内酯(1×10~4～1×10^(-5))mol/L+PDGF-BB组最明显(P<0.01)。结论 PDGF-BB可以促进 HSCs的增殖和胶原合成,螺内酯对PDGF-BB诱导的HSCs的增殖和胶原合成有明显的抑制作用,且具有明显的剂量依赖性;螺内酯发挥抗肝纤维化作用可能与抑制PDGF产生有关。

根除Hp与疗胃煎剂对Hp相关CAG治疗作用

目的研究根除 Hp 与疗胃煎剂对 Hp 相关 CAG 的治疗作用方法实验研究,90g-110g,二级 Wistar 大鼠70只,随机分为疗胃煎剂治疗组(三种不同剂量)、三九胃泰对照组、单纯根除 Hp 组、自然恢复组与正常组(各10只).采用灌胃接种 SS1Hp 菌株,灌胃水畅酸钠溶液,交替自由饮用50mL/L 乙醇与5 mmool/L 去氧胆酸钠溶液的综合方法制备 Hp 相关 CAG 动物模型.模型制备成功后均先根除 Hp.以三九胃泰为对照进行疗胃煎剂治疗,12 wk 疗程结束后,处死动物进行 Hp 感染,病理组织学检查与粘膜氮基已糖含量检测.临床研究,34例经内镜、病理证实的 Hp 阳性 CAG 患者随机分为疗胃煎剂治疗组和硫糖铝对照组,治疗前后分别进行病理组织学及化验指标检测.结果实验研究结果显示,疗胃煎剂中、高剂量组大鼠粘膜萎缩程度较三九胃泰组,自然恢复组及单纯根除 Hp 组明显减轻[粘膜上皮层厚度(μm)分别为97±14,96±13,73±11,66±12,74±10,P<0.05],中剂量组粘膜氨基己糖增加,与自然恢复组比较(22.53±4.37)mg/g vs(12.21±2.40)mg/gP<0.05.自然恢复组 Hp 均为阳性,粘膜固有层有较明显炎症细胞浸润.其他各实验组 Hp 阴性,粘膜固有层无明显炎症反应.临床研究结果显示,疗胃煎剂对萎缩病变治疗有效率75%(15/20)明显高于硫糖铝组29%(4/14)(P<0.01),粘膜氨基己糖含量增加(41.21±7.73,49.72±12.61,P<0.05).硫糖铝对照组治疗前后无明显变化.结论疗胃煎剂具有增强胃粘膜屏障功能作用,可增加氨基己糖含量,能增加粘膜固有层厚度,是治疗 CAG 的有效药物.

黄芩苷对肝癌细胞GJIC及Cx26、Cx43表达的影响

目的:探讨黄芩苷对肝癌细胞缝隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)及细胞间隙连接蛋白26(connexion26,Cx26)、细胞间隙连接蛋白43(connexion43,Cx43)表达的影响.方法:人肝癌细胞株SMMC-7721分为黄芩苷10、20、40mg/L组和对照组.划痕染料示踪技术检测GJIC的变化.用RT-PCR法检测肝癌细胞Cx26、Cx43基因表达,用Westernblot法检测Cx26蛋白表达,用免疫细胞化学检测Cx43蛋白表达.结果:对照组细胞的染料局限于划痕两侧的细胞内,无明显的荧光染料传输现象.随着黄芩苷浓度的增强,LY染料传输范围逐渐增大.黄芩苷10、20、40mg/L各浓度组Cx26mRNA表达水平与对照组比较显著提高(0.148±0.111,10.253±0.222,17.283±0.024vs0.138±0.111;P<0.05).Cx26蛋白表达量与对照组比较明显增加(0.516±0.029,0.759±0.020,1.019±0.076vs0.367±0.029;P<0.05).黄芩苷各浓度组Cx43mRNA表达量与对照组比较无显著变化.而Cx43蛋白的表达水平与对照组比较明显增加(5.512±0.003,5.844±0.046,6.216±0.015vs4.316±0.032;P<0.05).结论:黄芩苷促进肝癌细胞Cx26及Cx43表达,导致肝癌细胞GJIC功能的恢复,这很可能是黄芩苷抑制肿瘤生长的分子机制之一.

前列地尔治疗肝硬化并肝肾综合征的疗效观察

目的比较前列地尔脂微球注射液与特利加压素对肝硬化并肝肾综合症患者的临床疗效。方法选取肝硬化并肝肾综合征患者患者50例,随机分成治疗组和对照组。2组除常规治疗外,治疗组使用前列地尔进行治疗,对照组使用特利加压素治疗。通过1周时间的疗程,对比2组患者治疗前后24 h尿量、尿素氮、血清肌酐、ALT、ALB、TBI、PTA变化情况。结果 2组患者尿量、尿素氮、血清肌酐水平均有明显改善,治疗组与对照组比较差异无统计学意义(P<0.05)。2组治疗后,治疗组肝功能明显改善,ALT、TBIL显著降低(P<0.05),ALB、PTA显著提高(P<0.05),对照组治疗前后肝功能无明显变化(P>0.05)。结论前列地尔与特利加压素比较,对于治疗肝肾综合征均具有良好的疗效,但在改善肝功能方面,前列地尔具有更加显著的成效,值得在临床上大力推广及应用。

黄芩苷对肝癌细胞SMMC-7721 JAK-STAT信号通路STAT3的影响

目的:探讨黄芩苷对肝癌细胞SMMC-7721JAK-STAT信号通路STAT3的影响.方法:将肝癌细胞SMMC-7721分为4组:对照组、黄芩苷组、AG490组、黄芩苷+AG490组.应用RT-PCR法检测各组肝癌细胞SMMC-7721中STAT3mRNA表达,Westernblot法检测肝癌细胞SMMC-7721中STAT3、P-STAT3蛋白表达.结果:黄芩苷可以下调肝癌细胞SMMC-7721STAT3mRNA表达,与对照组比较明显下降(0.505±0.111vs0.697±0.145,P<0.05);并可以降低STAT3蛋白的表达量(0.879±0.012vs1.087±0.015,P<0.05);还可以抑制STAT3向活化形式P-STAT3转化,与对照组比较P-STAT3表达明显下降(0.983±0.085vs1.103±0.074,P<0.05),而与AG490联合应用后P-STAT3蛋白表达量较单用黄芩苷下降明显(0.756±0.103vs0.983±0.085,P<0.05).结论:黄芩苷能下调STAT3mRNA表达水平,降低STAT3蛋白表达,还可以抑制STAT3向活化形式P-STAT3转化,与AG490有协同作用.黄芩苷可能通过抑制JAK-STAT信号通路发挥抗肿瘤作用.

血液灌流联合超早期肠内营养治疗中-重症急性胰腺炎的疗效观察

目的观察血液灌流联合超早期肠内营养治疗中-重症急性胰腺炎的疗效,为中-重症急性胰腺炎的治疗提供临床参考。方法选取确诊中-重症急性胰腺炎患者36例,随机分为观察组和对照组,每组18例。2组患者均给予常规集束化治疗,观察组患者在此基础上给予血液灌流及超早期肠内营养,对照组给予血液灌流治疗,比较2组患者治疗前后急性生理和慢性健康状况评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、血清淀粉酶及血钙、白蛋白的变化、主要临床症状、体征消失时间、住院时间及病死率。结果观察组APACHEⅡ评分、PCT、CRP、血清淀粉酶总体均呈下降趋势,血钙、白蛋白总体均呈上升趋势,观察组组内比较治疗3 d及1周时与治疗前各项指标比较,差异有统计学意义(P<0.05);对照组组内比较治疗3天及1周时较治疗前部分指标比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组在治疗3 d、1周时各项指标较对照组变化更显著(P<0.05)。观察组的主要症状体征消失时间、住院时间均短于对照组,病死率低于对照组,2组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2组均未出现明显的不良反应。结论血液灌流联合超早期肠内营养治疗中-重症急性胰腺炎优于单一的血液灌流,效果显著,值得临床推广应用。

高容量血液滤过联合前列地尔治疗重症急性胰腺炎合并急性肾损伤的疗效观察

目的观察高容量血液滤过(high volume hemofihration,HVHF)联合前列地尔治疗重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)合并急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)患者的疗效。方法随机选取确诊为SAP合并AKI的患者44例,将其随机平均分为观察组和对照组,每组22例。2组均给予常规治疗与HVHF治疗,观察组患者在此基础上给予前列地尔治疗,比较2组治疗前后的肾功能指标及肾血流动力学指标[尿素氨、血肌酐、肾动脉内径(D)、肾动脉阻力指数(RRI)]。结果 2组患者治疗后血肌酐和尿素氮等指标较治疗前均显著下降(P<0.05),而观察组上述指标改善更为明显(P<0.05)。同时观察组患者治疗后的D大于治疗前(P<0.05),RRI低于治疗前(P<0.05)。而对照组患者治疗前后D及RRI均无明显变化(P>0.05)。结论在HVHF基础上加用前列地尔治疗SAP合并AKI,能通过前列地尔靶向扩张肾血管,减轻肾血管阻力使肾血流量增加,从而改善肾脏血流动力学、进一步改善患者的肾功能,较单独使用HVHF治疗SAP合并AKI更具有优势。

黄芩甙对人肝癌细胞BEL-7402增殖、凋亡和分化的影响

目的:研究黄芩甙对人肝癌BEL-7402细胞系增殖、凋亡和分化的影响。方法:培养BEL-7402细胞,应用MTT实验和软琼脂克隆形成实验观察黄芩甙对肝癌细胞增殖的作用,流式细胞术测定细胞凋亡率。光镜、电子显微镜观察细胞形态、超微结构,酶促反应试剂盒检测细胞浆中ALP、γ-GT活性,放免法检测细胞AFP、白蛋白分泌量和细胞内cAMP含量。结果:黄芩甙能明显抑制肝癌细胞增殖、促进其凋亡。黄芩甙作用后肝癌细胞趋于成熟分化,γ-GT降低,ALP比活力明显升高,ALP耐热型同工酶即胎盘型ALP活性显著低于对照,AFP合成和分泌量显著性降低,AIb分泌显著升高,细胞内cAMP含量增加。结论:黄芩甙能抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡,诱导肝癌细胞分化,

前列地尔脂微球注射液对肝硬化门静脉高压患者血管活性物质的影响及意义

目的探讨前列地尔脂微球注射液对肝硬化门静脉高压患者血管活性物质的影响。方法选取消化内科及肝病科收治的肝硬化门静脉高压患者100例,随机分成治疗组和对照组,每组50例。对照组采用传统的综合治疗,治疗组在此基础上加用前列地尔脂微球注射液10μg,静脉滴注,1次/d,疗程为21 d。观察治疗前后血浆内皮素(ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP)的水平。结果治疗组治疗后血浆ET、CGRP浓度显著降低(P<0.05),对照组治疗后血浆ET、CGRP浓度也有所降低,但治疗前后差异无统计学意义(P>0.05),2组治疗前后差值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论前列地尔脂微球注射液能降低肝硬化患者血浆血管活性物质ET、CGRP水平,可能是其降低门静脉压力的机制之一。

杂合式血液净化序贯治疗重症急性胰腺炎的时机选择

目的通过观察杂合式血液净化序贯治疗不同时机重症急性胰腺炎(sever acute pancreatitis,SAP)的效果,为SAP的治疗寻找最佳的血液净化介入时机。方法回顾性分析2014年10月至2015年11月确诊为SAP患者22例,观察组和对照组患者11例,2组患者入院时急性生理和慢性健康状况评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分均>8分和降钙素原(PCT)均>5 ng/ml,且均无急性肾功能损伤(acute kidney injury,AKI),2组患者均给予集束化治疗,观察组患者入院后即在此基础上序贯给予血液灌流(hemoperfusion,HP)及连续性静脉-静脉血液滤过(continuous veno-venous hemofiltration,CVVH)治疗,对照组患者在此基础上监测肾功能及尿量,当出现AKI后序贯给予HP及CVVH治疗,比较2组患者治疗前后APACHEⅡ评分、PCT、血浆内皮素(ET)、氧合指数(Pa O2/Fi O2)、平均动脉压(MAP)、血清淀粉酶(AMY)、血钙、血清肌酐(Cr)的变化及血液灌流时间、血液净化时间、住ICU时间、有效率、病死率。结果血液灌流后观察组指标较治疗前明显好转(P<0.05),对照组各项指标也较治疗前明显好转(P<0.05),且观察组APAC HEⅡ评分、ET较对照组好转更明显(P<0.05);2组患者血液净化后的各项指标较治疗前均明显好转(P<0.05),但观察组ET较对照组改善的程度更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血液灌流时间、血液净化时间、住ICU时间均短于对照组;有效率高于对照组;病死率低于对照组,2组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论以指标APACHEⅡ评分>8分和PCT>5 ng/ml作为SAP患者行血液净化开始的时机,治疗效果显著,较传统的AKI更具有指导意义,值得临床推广应用。

抑制NF-κB活性可减轻CCl4诱导的小鼠急性肝损伤

目的研究核因子-κB(nuclearfactorkappaB,NF-κB)活性抑制剂对CCl4诱导急性肝损伤小鼠肝组织中细胞间黏附分子-1(intercellularashesionmolecule-1,ICAM-1)表达及肝功能的影响。方法30只雄性昆明小鼠(28±2.2)g随机分为3组,即正常对照组、急性肝损伤模型组和NF-κB活性抑制剂组。正常对照组腹腔注射生理盐水0.1mL/10g,实验组腹腔注射0.1%CCl40.1mL/10g,NF-κB活性抑制剂组于腹腔注射0.1%CCl40.1mL/10g前15min腹腔注射脯氨酸二硫代氨基甲酸酯(prothiocarbamatesDTC,ProDTC150μg/10g)1次,其后1次/d,共5次。结果模型组ALT、AST及MDA较正常组显著升高(P<0.01),SOD降低明显(P<0.01)。在正常组中肝脏无NF-κB、ICAM-1表达,肝损伤模型组中NF-κB有较强表达,ICAM-1在肝细胞坏死区强表达。NF-κB抑制剂组ALT、AST及MDA较模型组显著降低,NF-κB、ICAM-1表达均较肝损伤组减弱,肝组织坏死程度较轻。结论NF-κB在CCl4诱导小鼠急性肝损伤中表达明显增强,NF-κB抑制剂可减少NF-κB及ICAM-1表达并减轻肝损伤程度。

三羟异黄酮诱导人肝癌细胞凋亡及对凋亡相关基因的影响

目的探讨三羟异黄酮(genistein)对人肝癌细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法将三羟异黄酮作用于体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721),MTT法检测增殖抑制率,光镜下观察凋亡细胞的形态,凝胶电泳分析DNA改变;通过免疫组化技术检测凋亡基因蛋白P53、survivin和caspase-3的表达。结果三羟异黄酮呈浓度和时间依赖性抑制人肝癌细胞的增殖。5mg/L、10mg/L和20mg/L三羟异黄酮作用48h对肝癌细胞的抑制率分别为9·86%、19·13%和25·64%。形态学显示,三羟异黄酮能诱导SMMC-7721细胞凋亡,细胞DNA电泳出现典型梯状条带;且凋亡相关基因蛋白survivin表达明显减少,而P53和caspase-3的表达增加。结论三羟异黄酮能诱导SMMC-7721细胞凋亡,其凋亡机制之一可能是下调survivin基因蛋白表达,增强P53和caspase-3的表达。