目的:探讨外源性p53AIP1(p53-regulated apoptosis-inducing protein 1)基因抗肿瘤效应及其作用机制,以评估p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性。方法:构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1,感染人肝癌细胞HepG2...目的:探讨外源性p53AIP1(p53-regulated apoptosis-inducing protein 1)基因抗肿瘤效应及其作用机制,以评估p53AIP1基因在肿瘤基因治疗中应用的可行性。方法:构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad-p53AIP1,感染人肝癌细胞HepG2,应用MTT比色法、Western blotting、流式细胞术、罗丹明染色以及电镜等观察外源性p53AIP1基因表达对肿瘤细胞的作用及其相关机制。小鼠皮下接种感染Ad-p53AIP1的小鼠乳腺癌4T1细胞,观察Ad-p53AIP1对肿瘤细胞体内成瘤性的影响;建立4T1细胞皮下移植瘤小鼠模型,直接瘤内多点注射重组腺病毒,观察Ad-p53AIP1的抗肿瘤疗效。结果:感染Ad-p53AIP1的HepG2细胞能够高效表达P53AIP1蛋白。MTT检测显示Ad-p53AIP1对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率达50%以上;流式细胞术分析证实p53AIP1使肿瘤细胞周期阻滞于G_2/M期;罗丹明染色、电镜观察以及凋亡相关蛋白PARP表达的检测均证实p53AIP1能诱导肿瘤细胞发生明显凋亡。感染Ad-p53AIP1的肿瘤细胞体内成瘤受到非常明显的抑制(P<0.01),Ad-p53AIP1瘤体注射对移植瘤生长也有明显的抑制作用(P<0.05)。Western blotting以及RT-PCR检测证实Ad-p53AIP1对p53 mRNA表达无影响,能下调mdm2基因的表达;p53AIP1能上调P53蛋白的表达、下调MDM2蛋白的表达水平,同时还影响P21等细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结论:p53AIP1有明显的体内外抗肿瘤作用,其作用机制与其反向调控P53蛋白、调控多种细胞周期和细胞凋亡相关蛋白、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡有关,该基因在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用前景。展开更多
为了解决小型薄壁铝合金球壳赤道焊接密封的技术问题,本研究针对薄壁铝合金球壳赤道开展了电子束焊接技术研究,采用不同的焊接束流对球壳赤道进行了焊接密封,考察了不同焊接束流下焊缝的成形、组织结构及焊后球壳的气密性和变形情况。...为了解决小型薄壁铝合金球壳赤道焊接密封的技术问题,本研究针对薄壁铝合金球壳赤道开展了电子束焊接技术研究,采用不同的焊接束流对球壳赤道进行了焊接密封,考察了不同焊接束流下焊缝的成形、组织结构及焊后球壳的气密性和变形情况。结果表明,在1.0 m A的束流下,焊缝熔池发生坍塌,球壳变形量较大;而在0.8和0.6 m A情况下,尽管焊缝焊深不同,但是焊缝成形较好,气密性可满足工程要求,球壳变形量也较小。展开更多
文摘为了解决小型薄壁铝合金球壳赤道焊接密封的技术问题,本研究针对薄壁铝合金球壳赤道开展了电子束焊接技术研究,采用不同的焊接束流对球壳赤道进行了焊接密封,考察了不同焊接束流下焊缝的成形、组织结构及焊后球壳的气密性和变形情况。结果表明,在1.0 m A的束流下,焊缝熔池发生坍塌,球壳变形量较大;而在0.8和0.6 m A情况下,尽管焊缝焊深不同,但是焊缝成形较好,气密性可满足工程要求,球壳变形量也较小。