基因治疗递送系统的研究新进展:遗传性视网膜疾病治疗的曙光

遗传性视网膜疾病是多种先天性视网膜神经退行性疾病的总称,临床上以夜盲、进行性视野缩小、视力下降甚至失明为特点,具有多种遗传形式。由于其病变的根源在于基因突变,通过基因治疗,即利用外源性核苷酸替换或沉默基因缺陷细胞内的致病基因,使细胞表达正确的蛋白质,恢复细胞的功能,就有可能治愈疾病。同时,眼睛具有免疫“豁免”特性,是实现基因治疗的理想器官。为了完成遗传物质的修正,治疗性核苷酸需要进入细胞内发挥作用,携带健康基因的载体递送系统是实现这一过程的有利工具。该文重点总结了包括病毒载体和非病毒载体在内的遗传性视网膜疾病基因治疗递送系统的研究进展及面临的问题。

眼附属器淋巴瘤临床病理的研究进展

眼附属器淋巴瘤是一种常见的眼眶恶性肿瘤。眼附属器淋巴瘤的发病率呈逐年快速增长趋势,疾病的临床表现以及影像学特点不具有特异性,因此疾病的诊断依赖于病理组织分析。眼附属器淋巴瘤精确诊断依赖于形态学、免疫组化、分子和细胞遗传学。随着对疾病的深入研究,发现该肿瘤的临床预后呈现出高复发特征。该文主要综述眼附属器淋巴瘤高复发率与病理组织学特征的相关性。

庆大霉素对牛眼睫状体色素上皮细胞的毒性研究

为了探索庆大霉素对睫状体色素上皮细胞 (Pigmented ciliary epithelial,PCE)的毒性作用 ,在体外培养了牛眼睫状体色素上皮细胞 ,并加入 12 5、 2 5 0、 5 0 0、 10 0 0、 2 0 0 0 μg/ ml的庆大霉素 ,观察加药后第 3、 6、 12、 2 4、 48h的细胞生长、形态结构 ,计算第 48h细胞死亡率。结果发现低于 2 5 0 μg/ m l的庆大霉素对 PCE细胞无任何影响。 5 0 0 μg/m l的庆大霉素作用 2 4h后开始出现细胞间隙增宽、细胞皱缩等中毒反应 ,48h后有 7.6 %的细胞中毒死亡。提示 ,庆大霉素对牛眼 PCE细胞的安全浓度是 2 5 0 μg/ ml,大于 5 0 0 μg/ ml的庆大霉素可使细胞皱缩、变圆、死亡。

高压氧治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变的临床疗效观察

目的 探讨高压氧治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变的临床疗效。方法 将 6 0例 (6 0只眼 )中心性浆液性脉络膜视网膜病变患者根据性别、年龄、病理和病程等分为治疗组和对照组。治疗组 30例 (30只眼 )采用高压氧联合常规药物治疗 ;对照组 2 8例 (30只眼 )仅用药物治疗。结果 治疗组治愈率 6 3.3% ,总有效率 90 .0 % ;对照组治愈率 33.3% ,总有效率 73.3%。经 χ2 检验分析 ,两组之间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 高压氧对中心性浆液性脉络膜视网膜病变有明显的治疗作用 。

丝裂霉素C对体外培养牛眼小梁细胞毒性的研究

向第3～4代牛眼小梁细胞（bovinetrabecularmeshworkcell，BTMcell）体外培养液内加入不同浓度的丝裂霉素C（MitomycinC，MMC），通过光镜、电镜等观察该药对细胞的形态、结构及吞噬功能的影响.发现MMC可以引起细胞皱缩变形，超微结构中出现线粒体及科面内质网扩张、核固缩或核碎裂等，细胞吞噬微球的数目也有所减少。苔盼蓝染色结果显示MMC不影响小梁细胞存活的浓度为1×10(-7)g／L，半数致死量为1×10(-4)～1×10(-3)g／L。MMC的临床应用是否会对小梁细胞造成损伤值得进一步研究。

酸性成纤维细胞生长因子对牛眼睫状体色素上皮细胞影响的研究

目的研究酸性成纤维细胞生长因子（ａｃｉｄｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ａＦＧＦ）对睫状体色素上皮（ｐｉｇｍｅｎｔｅｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ，ＰＥ）细胞的影响。方法将体外培养的牛眼ＰＥ细胞置于含不同浓度ａＦＧＦ的培养液内，用倒置相差显微镜观察细胞的形态结构，通过细胞计数及ＭＴＴ比色分析测定细胞的增殖。结果在ａＦＧＦ作用下，ＰＥ细胞形态良好、增殖旺盛，而以１０ｎｇｍｌ－１的浓度效力最佳。结论ａＦＧＦ有助于在ＰＥ细胞体外培养中获得更多的实验材料，或在临床用以治疗房水分泌减少的眼科疾病。

用于眼检的光学相干层析成像技术研究

利用光学相干层析(OCT—Optical Coherent Tomography)技术可以透过低透明介质,特别是生物组织成像。介绍了基于1310 nm波长稳定光源的OCT实验装置,实验装置采用SLD超辐射二极管光源。利用该装置对番茄皮进行了实际OCT图样采集,研制成的实验系统具有10m左右的纵向分辨率。最后对进一步提高眼检OCT系统的性能进行了研究。

深层巩膜切除术联合透明质酸片植入治疗原发性开角型青光眼(英文)

目的:探讨深层巩膜切除联合透明质酸片植入(DSHI)治疗原发性开角型青光眼(POAG)的临床疗效。方法:回顾性总结在Saarland大学眼科医院行DSHI治疗的POAG。结果:符合条件并入选的有216患者的377只POAG。平均随诊31(5～51)mo。术前平均眼压(28.3±8.4)mmHg(1mmHg=0.133kPa),术后1wk,6mo,1、2、3、4a眼压分别为(9.7±3.6)、(12.4±5.3)、(15.5±8.7)、(15.4±6.8)、(16.1±6.7)、(17.4±7.5)mmHg。术前平均视力为0.65,术后1wk,6mo,1、2、3、4a视力分别为0.63、0.68、0.72、0.71、0.76、0.70。术后1a显效(不加抗青光眼药物且眼压≤21mmHg)率为89%,有效(加抗青光眼药物时眼压≤21mmHg)率为9%。术后4a时,显效率为45%,有效率48%。并发症包括切口渗漏、前房出血、脉络膜脱离等。结论:DSHI对POAG治疗效果良好,并发症少且轻微。

可见光对体外培养的牛眼小梁细胞的影响

目的:探索光线对小梁细胞的生物学影响。方法:用不同波长、不同功率的可见光照射体外培养的牛眼小梁细胞,观察小梁细胞的形态结构、增殖及吞噬功能的影响。结果:小功率的可见光对细胞无明显影响,当光的功率增加到1.12mw/cm2时,出现细胞浆粗糙、细胞增殖减慢、细胞吞噬功能降低。这种光毒性作用以白光(混合波长光)最大,紫光和黄光次之,红光最小。结论:可见光在能量较高时对小梁细胞有光毒性损伤,提示我们在手术或眼部检查时尽可能避免强光长时间照射眼睛。

SOD复合酶在兔细菌性角膜溃疡中的作用及机理

目的 研究 SOD复合酶对兔细菌性角膜溃疡的保护作用及其作用机理。方法 在体外向接种了绿脓杆菌的培养基上分别加入丁胺卡那霉素、SOD复合酶等 ,观察抑菌圈的直径。建立兔眼绿脓杆菌性角膜溃疡模型 ,给予丁胺卡那霉素治疗 ,加用 SOD复合酶作为辅助治疗 ,而灭活 SOD复合酶作为对照 ,观察临床变化 ,并进行病理学检查和丙二醛测定。结果 体外实验证实 SOD复合酶没有抗菌作用。动物实验中 ,加用 SOD复合酶的兔眼 ,临床表现及病理改变较轻 ,丙二醛含量较低。结论 兔眼细菌性角膜溃疡中 ,自由基及脂质过氧化参与了对组织的损伤 ,而 SOD复合酶通过抗自由基及脂质过氧化而消除这种损伤 。

眼组织细胞的光生物学研究

光线对细胞的功能及代谢有多种多样的影响。眼组织细胞受辐射可发生生理性或病理性的变化。许多眼病由光引起。细胞光生物学的研究可帮助探索眼病的起因，并更科学、更广泛地利用光治疗眼病。

影响硅油取出结果诸因素的临床分析

目的 阐明硅油取出后与视网膜脱离和视力下降有关的各种危险因素。方法 对行硅油取出术的 94眼进行回顾性研究。结果 有 19眼 (2 0 % )术后出现视网膜脱离 ,30眼 (32 % )视力减退。术前及术后低眼压、术后视网膜前膜、初发病变为视网膜巨大裂孔及复发性视网膜脱离、初始视力低于 0 0 2等因素是对视网膜解剖复位及视力有影响的危险因素。结论 在用硅油填充等手段治疗视网膜巨大裂孔或复发性视网膜脱离时 ,特别是当初始视力低于0 0 2时 ,医生和患者都应清楚治疗结果不理想的可能性很大。

非穿透性滤过手术治疗原发性开角型青光眼的疗效观察

目的 对非穿透性滤过手术治疗原发性开角型青光眼的疗效进行分析研究。方法 回顾性分析 1997年～1999年在德国Saarland大学眼科医院因药物控制不佳而行非穿透性滤过手术的原发性开角型青光眼病例资料。结果 有 2 16人、 377只原发性开角型青光眼行非穿透性滤过手术 ,平均随诊 31(5～ 5 1)个月。术前平均眼压 (2 8 3±8 4 )mmHg (1mmHg =0 133kPa) ,术后 1周、 6月、 1年、 2年、 3年、 4年眼压分别为 (9 7± 3 6 )mmHg、 (12 4± 5 3)mmHg、 (15 5± 8 7)mmHg、 (15 4± 6 8)mmHg、 (16 1± 6 7)mmHg、 (17 4± 7 5 )mmHg。术前平均视力为 0 6 5 ,术后 1周、 6月、 1年、 2年、 3年、 4年视力分别为 0 6 3、 0 6 8、 0 72、 0 71、 0 76、 0 70。术后 1年显效(不加抗青光眼药物且眼压≤ 2 1mmHg)率为 89% ,总有效 (加或不加抗青光眼药物时眼压≤ 2 1mmHg)率达 98%。术后 4年时 ,显效率降为 4 5 % ,总有效率达 93%。并发症包括切口渗漏、前房出血、脉络膜脱离等。结论 非穿透性滤过手术对药物控制不佳的原发性开角型青光眼治疗效果良好 ,且并发症少。

干燥综合征型干眼患者生命质量研究

目的:探讨干燥综合征(sjgren's syndrome,SS)型干眼患者生命质量。方法:采用36条目简明量表(SF-36)和视功能损害眼病患者生存质量(SQOL-DVI)对42例SS型干眼患者的生命质量(qualityofLife,QL)进行评价研究。结果:SS型干眼患者全面健康相关生存质量各维度均下降,并与视觉相关生存质量具相关性,尤其在躯体功能对角色功能的影响(role limitation due to physical problem,RP)、情绪对角色功能的影响(role limitation due to emotional problem,RE)、健康总体自评(general health,GH)和社会功能(social functioning,SF)方面尤为突出。结论:与其他类型干眼患者相比,SS型干眼患者生存质量明显降低。应该重视SS型干眼患者的社会心理状况及相关治疗,结合病因个体化施治,为评价各种治疗措施对SS型干眼患者生存质量的影响提供依据。

Medpor在眼眶爆裂性骨折整复中的应用

目的:探讨Medpor在眼眶爆裂性骨折中的疗效。方法:患者21例,采用手术切开复位,Medpor填充。结果:所有患眼眼球内陷均得以矫正,双眼突出度基本一致,眼球各方向运动基本到位。19例复视消失,1例复视改善但仍存在,1例复视无改善。结论:Medpor在眼眶爆裂性骨折整复中是一种安全有效的填充材料。

干眼患者生命质量研究

目的探讨干眼患者生命质量。方法采用36条目简明量表(SF-36)和视功能损害眼病患者生存质量量表(SQOL-DVI)对120例干眼患者的生命质量(QL)进行评价研究。结果干眼患者的全面健康相关生存质量下降,尤其在情绪对角色功能的影响(RE)、躯体功能对角色功能的影响(RP)、健康总体自评(GH)、社会功能(SF)、心理功能(MH)、活力(VT)和疼痛(BP)方面较为突出,在部分维度上,干燥综合征水样液缺乏性患者(SSATD)生存质量最低,屏幕终端综合征患者(VDT)最高。上述结果与视觉相关生存质量检测结果相关。社会因素和医学因素对QL也均有显著影响。结论应该重视干眼患者的社会心理状况及影响患者生存质量的因素,有针对性地根据患者的具体情况制订合理治疗方案以使其得到最恰当的治疗。

Medpor下睑插片与异体巩膜植入治疗下睑退缩

目的:探讨Medpor下睑插片和异体巩膜植入在治疗下睑退缩患者中的临床治疗效果。方法:对26例下睑退缩患者行Medpor下睑插片或异体巩膜移植矫正下睑退缩,随访3mo,观察手术治疗效果。结果:手术治疗后3mo,Medpor下睑插片和异体巩膜植入各有1例欠矫,其余24例下睑退缩均成功矫正,眼睑闭合正常,下睑缘位置正常,无巩膜暴露。所有病例均无感染、排斥及其它并发症。结论:Medpor下睑插片或异体巩膜植入都能有效地矫正大多数患者的下睑退缩,手术安全性好,治疗效果较好。两者在手术效果上相比没有明显的差别。

CYP1B1基因敲除小鼠视网膜神经节细胞和视乳头结构的观察

目的探讨CYP1B1基因敲除小鼠是否存在视网膜神经节细胞(RGCs)和视乳头结构的改变,以及这些改变与前房角发育之间是否存在关系。方法采用18只成年CYP1B1基因敲除小鼠作为实验对象,随机分成3组,每组6只,分别对视网膜、视乳头及前房角进行光学显微镜和透射电子显微镜观察,并用末端脱氧核苷酸转移酶介导的三磷酸脱氧尿苷缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡的视网膜神经细胞。以同龄C57BL/6J小鼠作对照研究。结果正常对照小鼠未发现视网膜、视乳头及前房角的异常改变。CYP1B1基因敲除小鼠中,光镜组观察发现2只眼视乳头形态结构的改变;电镜组观察发现2只眼RGCs呈现进行性的细胞浆和细胞核的浓缩;TUNEL染色组显示3只眼RGCs层和内核层出现TUNEL阳性细胞。上述7只眼均存在较严重的房角发育畸形。结论CYP1B1基因敲除小鼠部分存在RGCs的变性和视乳头结构的改变,这些改变与前房角发育畸形存在一定的相关性。

视神经炎患者的临床检查及治疗——附100例临床报告

目的探讨视神经炎患者的视野、视觉诱发电位、眼底荧光血管造影和影像学等检查的临床意义及视神经炎的临床治疗效果。方法 100例视神经炎患者,分别行视野、视觉诱发电位、眼底荧光血管造影和影像学检查,并给予糖皮质激素、B族维生素、神经营养类药物、血管扩张剂及复方樟柳碱等综合治疗,观察各项检查指标及临床治疗效果。结果大多数视神经炎患者找不到明显发病诱因,视野、视觉诱发电位和眼底荧光血管造影有相应的非特异性异常表现,影像学检查特别是磁共振有助于发现隐匿的异常病灶,有重要的临床价值。经综合治疗后,85例视力提高,15例视力不变或下降。结论联合各项检查手段及时诊断及采取综合治疗是提高视神经炎患者疗效和预后的关键。

Toll样受体4对2型糖尿病小鼠视网膜病变的影响

目的探讨Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)对2型糖尿病小鼠模型糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的影响。方法取16周龄的健康雄性TLR4基因缺陷小鼠C3H/He J(mutation,Mut)及相应野生型小鼠C3H/He N(wild type,WT)各12只,用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立2型糖尿病动物模型,另取4只未处理小鼠做对照,分为Mut组、WT组与对照组。于模型建成后1个月、2个月、4个月分别取材,每个时间点模型组分别取材4只,对照组分别取16周龄的两种小鼠各2只眼球。通过电镜观察小鼠视网膜组织超微结构的变化,并应用RTq PCR检测视网膜TLR4及巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2,MIP-2)的mRNA表达。结果糖尿病模型造模后1个月的超微电镜显示,小鼠视网膜组织即有神经节细胞及神经纤维水肿,核周间隙增宽,核固缩,胞浆颜色变淡;模型造模后2个月时毛细血管内皮细胞胞浆线粒体水肿,嵴变短,周细胞水肿;模型造模后4个月时基底膜节段性增厚,微绒毛突起,管腔狭窄,各时间点的病变WT组均重于Mut组。视网膜组织RT-q PCR结果显示,WT组和Mut组TLR4及MIP-2的mRNA的表达在糖尿病模型造模后1个月、2个月、4个月时依次上调(均为P<0.001),各时间点TLR4及MIP-2的mRNA的表达以WT组强于Mut组(均为P<0.05)。结论 2型糖尿病小鼠模型中,随病程发展出现视网膜病变并不断恶化,此过程中视网膜中TLR4与MIP-2的mRNA表达呈显著性上调趋势;TLR4基因突变小鼠的视网膜TLR4及MIP-2的表达比野生型小鼠减弱,同时视网膜病变减轻。