血清胱抑素C在高血压早期肾损害诊断中的临床应用

目的 探讨血清胱抑素C （CysC）对高血压患者早期肾损害的诊断价值.方法 采用免疫比浊法测定244例高血压患者与314例对照者（无高血压、糖尿病、肾病和其他慢性病史）的血清CysC,肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐（CREA）,酶偶联速率法测定血清尿素（BUN）,并进行相关分析.结果 高血压组血清Cys C的阳性率（59.43%）明显高于对照组（6.37%）（P〈0.01）.高血压患者血清Cys C的阳性率（59.43%）明显高于其血尿素（40.16%）和血肌酐阳性率（20.90%）（P〈0.01）.此外,高血压患者血清Cys C的升高早于血尿素和血肌酐.结论 血清CysC是反映高血压早期肾功能损害的敏感指标,其敏感度高于血尿素和血肌酐,在诊断高血压早期肾损害方面有重要的临床价值.

阴道分泌物五联检法与显微镜检测法的对比分析

目的对比分析阴道分泌物五联检法与显微镜检法在白带常规检测中的一致性。方法收集1 440份白带标本,分别用五联检法和显微镜法进行检测,对结果进行分析。结果乳酸杆菌和白细胞的阳性检出率与显微镜法接近,细菌性阴道病和真菌性阴道炎的阳性检出率略高于显微镜法,滴虫的阳性检出率略低于显微镜法,但差异均无统计学意义(P>0.05),并且清洁度判断结果一致性较好。结论阴道分泌物五联检法作为一种新型检测方法,与传统显微镜法的整体一致性较好,并且在辅助诊断细菌性阴道病和真菌性阴道炎方面具有明显优势。但由于滴虫检出率低于显微镜法,因此,在特殊情况下需要结合显微镜检。

急性心肌梗死与血清尿酸、同型半胱氨酸和血浆纤维蛋白原的相关性研究

目的探讨急性心肌梗死(AMI)与血清尿酸(UA)、同型半胱氨酸(Hcy)、血浆纤维蛋白原(FIB)的相关性,为早期预防AMI提供重要的实验室依据。方法选取177例已经确诊为AMI的患者,检测UA、Hcy和FIB水平,并与197例对照组进行比较,分析各项指标之间的相关性。结果 AMI组UA、Hcy和FIB水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论UA、Hcy和FIB的联合检测为AMI的早期预防提供重要的参考价值。

昆明市3885名体检人员血尿酸水平与性别、年龄相关性分析

目的调查研究昆明市人群高尿酸血症的患病情况。方法统计2012年1月至2015年12月间在该院体检的3 885名在昆工作人员(包括退休人员)的尿酸情况,年龄20~89岁,男2 058人,女1 827人,男性尿酸高于420μmol/L、女性高于360μmol/L判断为高尿酸血症。结果该地区高尿酸血症的患病率为34.05%,其中男性患病率为40.47%,女性患病率为26.85%,男性患病率明显高于女性,差异有统计学意义(P<0.01),男性尿酸水平各年龄组间比较差异无统计学意义(P>0.05),女性尿酸水平随年龄增大而升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论昆明地区高尿酸血症患病率较高,可能与当地生活习惯有关,应该提早进行干预,减少并发症。

重组人TGF-β1融合蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定

目的构建人转化生长因子-β1(TGF-β1)基因的原核表达载体,表达并纯化GST-hTGFβ1.方法应用RT-PCR获得人TGF-β1的基因片段,成功构建人TGF-β1原核表达载体,诱导表达人TGF-β1与GST的融合蛋白;应用亲和层析法纯化重组融合蛋白,对纯化产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western Blot检测分析.结果成功构建了人TGF-β1重组融合表达质粒pGEX-4T-1-TGF-β1,表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在Mr约为39×103处出现了一条新生的蛋白条带,该表达蛋白具有与TGF-β1抗体特异性的结合能力.结论成功构建了人TGF-β1基因的原核表达载体并纯化了该基因的原核表达产物,为下一步的人TGF-β1自体疫苗的研制奠定了基础.

淋巴瘤患者血浆和PBMC EBV定量测定的对比研究

目的比较分析淋巴瘤患者血浆和外周血单个核细胞（PBMC）EBV～DNA的阳性率及病毒栽量。方法采用荧光定量PCR法，对56例淋巴瘤患者（霍奇金淋巴瘤13例，非霍奇金淋巴瘤43例）血浆和PBMCEBV—DNA进行定量测定，比较分析两种样本的EB病毒阳性率及EBV载量的差异。结果淋巴瘤患者血浆EBV—DNA阳性率（26．8％）与PBMCEBV—DNA阳性率（32．1％）之间差异无统计学意义（P〉0．05）；EB阳性淋巴瘤患者血浆与PBMC的EBV栽量之间差异也无统计学意义（P〉0．05）。结论荧光定量PCR检测血浆EBV—DNA具有较好的特异性和敏感性，血浆EBV—DNA定量可以代替PBMCEBV—DNA定量作为监测EBv阳性淋巴瘤疗效的一个生物标志。

微小RNA在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌（colorectal carcinoma,CRC）是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,随着中国生活条件和饮食习惯的改变,CRC发病率呈明显上升趋势。因此,对CRC发生、发展的机制以及早期诊断标志物的研究是目前CRC研究的重点。自研究者在秀丽隐杆线虫（C.elegans）中发现了第1个定时调控胚胎后期发育的微小RNA（microRNA，miRNA）（Iir-4）以来，

炭疽芽孢杆菌基因芯片探针的制备

目的制备炭疽芽孢杆菌(BA)基因芯片探针,应用于BA基因芯片的检测。方法采用PCR方法,以BA疫苗株A16R基因组DNA为模板,扩增pXO1质粒上的8个特异性片段,连接至pMD19-T Simple载体,构建分别包含8个探针序列的重组质粒,以其为PCR扩增模板获取探针DNA。结果基因测序证明,成功获得BA的3个探针。结论 BA基因探针的成功获取,为炭疽芽孢杆菌基因芯片的制备奠定了基础。

四种高危感染菌联合诊断基因芯片的研制

目的 研制四种高危感染菌联合诊断基因芯片并用于临床.方法 通过筛选金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、破伤风梭菌及炭疽杆菌的基因序列,获得其有效检测的基因位点;利用已有的基因芯片技术,研制了一张用于四种高危感染菌联合诊断的基因芯片.结果 经临床标本或模拟破伤风梭菌及炭疽杆菌危险品的检测验证,该基因芯片的粗符合率达到93.3%以上,并且检测特异性强.结论 成功制备了四种高危感染菌联合诊断基因芯片,并且具有很好的实用价值.

重组人成熟型转化生长因子β_1及其抗原表位在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性鉴定

目的研制人转化生长因子(TGF)-β1自体蛋白疫苗,并诱导小鼠产生抗人TGF-β1的中和抗体。方法将hTGF-β1及其抗原表位基因β32和β80分别克隆入pGEX-4T-1原核表达载体,并引入T细胞辅助表位(TT),转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。应用GST亲和层析纯化重组融合蛋白,并经Westernb lot鉴定,用流式细胞术(FCM)检测抗hTGF-β1抗血清与人肝癌细胞株SMMC-7721表面膜型TGF-β1的结合状况。用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测血清中抗hTGF-β1抗体的效价。结果成功构建了人成熟型TGF-β1及其不同表位基因片段的重组表达质粒pGEX-TT-β32、pGEX-TT-β80和pGEX-TT-hTGF-β1,表达的3种重组蛋白(GST-TT-β32、GST-TT-β80和GST-TT-hTGF-β1)经Western blot鉴定显示,同时具有hT-GF-β1和GST的抗原性。经纯化后免疫BALB/c小鼠,血清抗人TGF-β1抗体的效价均达到1∶104,其中GST-TT-β80的抗体效价最高。FCM显示3种重组蛋白免疫的小鼠抗血清均能与高表达膜型TGF-β1的人SMMC-7721结合,但重组蛋白GST-TT-β80和GST-TT-hTGF-β1免疫组抗血清的结合率明显高于GST-TT-β32组。结论构建的人成熟型TGF-β1及其不同表位片段的不同融合蛋白疫苗均能够诱导BALB/c小鼠产生抗人TGF-β1的中和抗体。

心肌损伤标志物联合检测在早期诊断心肌梗死中的应用

目的探讨血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Myo)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)检测在急性心肌梗死(AMI)早期诊断中的意义。方法对306例疑似AMI的患者检测3个血清指标水平并比较其对AMI诊断的性能。结果 AMI患者在发病初cTnI特异度90.23%,敏感度85.01%;CK-MB特异度71.38%,敏感度89.67%;Myo特异度55.95%,敏感度89.35%。比较cTnI、CK-MB和Myo对AMI诊断的特异度和敏感度,cTnI的特异度明显高于CK-MB和Myo,差异有统计学意义(P<0.01),而特异度以CK-MB最高与cTnI和Myo比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清cTnI在AMI早期诊断中具有良好的灵敏度、特异度和可靠性。cTnI、Myo和CK-MB联合检测可提高对AMI早期诊断的性能。

血清Hcy水平与慢性肾功能不全分期的关系

目的分别检测慢性肾功能不全不同临床分期患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平,探讨血清Hcy与肾功能不全临床分期的关系。方法运用循环酶法测定94例早期慢性肾功能不全患者(早期肾功能不全组)、58例肾功能衰竭患者(肾功能衰竭组)、148例慢性肾功能不全尿毒症期且行血液透析治疗(透析组)、194例健康体检者(对照组),比较各组间的Hcy水平。结果与对照组血清Hcy水平[(13.7±3.6)μmol/L]相比,早期肾功能不全组血清Hcy水平[(23.9±7.4)μmol/L]、肾功能衰竭组血清Hcy水平[(28.1±10.1)μmol/L]、透析组血清Hcy水平[(33.0±12.6)μmol/L]显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。3组患者血清Hcy水平比较,透析组、肾衰竭组、早期肾功能不全组依次降低,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,3组患者男性血清Hcy水平均显著高于女性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与对照组比较,慢性肾功能不全者的血清Hcy水平普遍升高,而且随着肾功能损伤的程度加深,Hcy结果也逐渐增高,在肾功能不全尿毒症透析时达到较高的浓度水平,血清Hcy水平可以作为监测慢性肾功能不全病情进展的一个重要指标。

老年下呼吸道感染患者痰分离真菌种类及药物敏感性

目的了解老年患者下呼吸道痰标本中真菌种类分布及药物敏感性,为预防真菌感染及针对性诊治提供依据。方法收集2010年1月—2014年10月云南亚高原地区3所医院老年患者下呼吸道标本分离的真菌,对其进行鉴定和药物敏感性试验。结果 1 887株真菌中,白假丝酵母菌最多,占65.18%,同时,分离出毛霉菌属（0.69%）、构巢曲霉菌（0.16%）等少见菌株;分离的菌株对制霉菌素、两性霉素B和伊曲康唑的敏感率较高,分别为100.00%、90.14%和88.98%;对氟康唑和咪康唑的耐药率较高,分别为34.29%和36.62%;5种常见酵母菌对制霉菌素均敏感,但白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌对氟康唑、咪康唑的耐药率达35.94%~40.88%,白假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶的耐药率为19.51%。结论对老年人临床抗真菌治疗需要考虑真菌类别及药敏结果。

荧光定量PCR检测婴幼儿巨细胞病毒感染情况分析

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测婴幼儿尿液人巨细胞病毒(HCMV)在HCMV感染诊断中的意义。方法采用FQ-PCR检测148例临床疑似HCMV感染婴幼儿尿液中HCMV-DNA水平。同时采用ELISA法检测婴幼儿血清HCMV-IgM抗体。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中比较血清HCMV-IgM抗体阳性与阴性患儿尿液中HCMV-DNA拷贝数差异。结果 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA的阳性率为35.14%,ELISA检测婴儿血清HCMV-IgM的阳性率为15.54%。两种方法对HCMV感染诊断的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。在尿液HCMV-DNA检测阳性患儿中,IgM抗体阳性组尿液HCMV-DNA拷贝数显著高于阴性组(P<0.01)。结论 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA是早期诊断婴幼儿HCMV感染的敏感有效的方法。

急性呼吸道感染成年患者病原体检测结果分析

目的通过对成年患者9种呼吸道感染病原体IgM抗体的检测,了解本地呼吸道病原体的流行情况,为临床提供早期诊断和治疗依据。方法选取成都军区昆明总医院呼吸道感染住院成年患者1 855例,通过9项呼吸道感染病原体IgM抗体试剂检测住院成年患者血清病原体抗体,分析9项呼吸道感染病原体在不同季节、不同年龄段成年患者血清中的检出情况。结果 1 855例患者血清IgM抗体阳性共510例,总阳性率为27.76%(510/1 855),阳性率较高的病原体依次为:MP(19.14%)、IFB(14.18%)、PIV(9.54%)和IFA(6.47%)。MP在6、7、8月的阳性率低于其他月份(P<0.05);IFA在5、6、7、10月的阳性率较高(P<0.05),IFB在5月阳性率最高,达30.61%(P<0.05);4、8月是PIV的高发期(P<0.05)。MP、IFB和PIV在16~30岁和>30~40岁这两个年龄段患者中的阳性率明显高于其他年龄段(P<0.05);IFA在16~30岁患者中的阳性率明显高于其他年龄段(P<0.05)。结论昆明地区成年人呼吸道感染的病原体主要为MP和各型流感病毒,并且病原体的阳性率与年龄和季节有关。

血清同型半胱氨酸检测在早期预防冠心病发生中的临床应用

目的评价血清同型半胱氨酸（Hcy）水平在早期预防冠心病（CHD）发生的诊断价值。方法选择240例冠心病患者作为实验组和210例健康人作为对照组，分别检测血清Hcy含量，比较分析实验组与对照组，实验组中不同年龄、不同性别的Hcy含量的水平差异，评价Hcy在早期预防冠心病发生中的临床应用。结果实验组血清Hcy水平（20．1士7．9μmol／L）高于对照组（13．1±3．6μmol／L）；实验组中60岁以上人员血清Hcy水平（20．5±7．8／μmol／L）高于60岁以下人员（17．9±8．6μmol／L），男性人员血清Hcy水平（20．5±8．Sμmol／L）高于女性人员（17．8士6．7μmol／L），各组间差异具有统计学显著性意义（t=11．81，2．543，2．697，P均〈0．01）。结论高Hcy血症是冠心病发生的高危因素，尤其是老年男性，定期监测血清Hcy水平并进行干预，对冠心病的早期预防具有较好的指导意义。

应用酵母双杂交系统筛选Foxp3△2相互作用蛋白

目的：应用酵母双杂交系统从人外周血白细胞cDNA文库中筛选与转录因子Foxp3相互作用的蛋白，为进一步研究Foxp3的转录调控机制奠定基础。方法：首先构建pG—BKT7／-Foxp3△2酵母双杂交诱饵载体，转化AH109酵母细胞，检测其毒性及自激活作用；然后将诱饵质粒与人外周血白细胞eDNA文库共转AH109酵母细胞，筛选了与Foxp3△2存在相互作用的蛋白。结果：成功构建了pGBKT7-Foxp3△2酵母表达载体，经转染AHl09酵母细胞，无有毒性，无自激活作用。获得了40个阳性克隆，经生物信息学分析，其中9个具有开放读框。结论：应用酵母双杂交技术筛选出一组可与Foxp3△2相互作用的候选蛋白，为进一步研究Foxp3△2功能奠定了基础。

血清肌酐苦味酸法自主研发生化诊断试剂的临床研究

目的评价自主研发的血清肌酐(Cr)生化诊断试剂苦味酸法自身的性能评价及研发试剂与进口优质Cr生化诊断试剂对血清Cr实验检测的可比性及偏倚评估,确认研发试剂是否符合临床要求,能否应用于临床。方法依据美国临床实验室标准化协会EP9-A文件标准,科学设计试验方案。在设置好各种参数的前提下,首先作自主研发血清Cr生化诊断试剂苦味酸法做自身的性能评价:空白吸光度、重复性和线性检测;然后取样本,在奥林巴斯5421型全自动生化仪上进行两种试剂的比对和偏倚评估。结果自主研发血清Cr生化诊断试剂空白吸光度、重复性和线性检测符合要求,X组试剂和Y组试剂对临床标本Cr的检测结果经统计学处理显示:方法内重复性检查DXi′≤4DXi′、DYi′≤4DY′i,离群点检查Eij≤4E,Eij′≤4E′,线性回归r=0.999 8、系统误差的估计值及其置信区间|BClow,BChigh|<允许误差,系统误差符合国际标准要求。结论自主研发的Cr生化诊断试剂与公认的优质进口ROCHE生化诊断试剂间具有良好的相关性,自主研发Cr生化诊断试剂自身性能良好,安全性和有效性符合临床应用要求。

门诊女性生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型感染情况分析

目的了解女性泌尿生殖道感染者单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-Ⅱ）的感染情况,为早期诊断及治疗提供依据。方法应用荧光定量PCR技术对158例女性患者生殖道分泌物进行HSV-Ⅱ-DNA检测,同时以40名健康体检妇女作为对照组。结果在158例生殖道感染者中有48例HSV-Ⅱ阳性,阳性率为30.4%,明显高于对照组（7.5%）;31~40岁年龄组阳性率（46.2%）明显高于其他年龄组（P〈0.05）。结论女性泌尿生殖道感染者HSV-Ⅱ的感染不容忽视,部分无生殖器疱疹症状的患者也能检测到HSV-Ⅱ,对此类患者进行HSV-Ⅱ检测十分必要。

昆明市1000例银行职员EB病毒VCA-IgA抗体的调查与分析

EB病毒是鼻咽癌重要的致病因子,抗EB病毒相关抗体的检测常用于筛查鼻咽癌[1].我科2011年10月对昆明市某银行1000名健康体检者进行EB病毒VCA-IgA抗体检测,现将结果分析如下.