基于网络药理学和实验验证探究黄精增强免疫功能的作用机制

目的:探究黄精增强免疫功能的作用机制。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集黄精活性成分,通过SwissTargetPrediction数据库获得对应靶点基因。使用GeneCards、DrugBank数据库筛选免疫抑制(IS)相关靶点基因,并通过Venny数据库获得与黄精靶点基因的交集基因。使用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,使用Cytoscape软件构建“黄精-有效成分-靶基因-免疫抑制”网络,利用Metascape数据库对交集基因进行基因本体(GO)富集分析以及京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,使用分子对接对有效成分和靶点进行验证。体外细胞试验采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞模型,通过MTT法检测不同浓度黄精提取物对细胞的毒性反应;采用Griess法检测黄精提取物对细胞中一氧化氮(NO)的影响。结果:经过筛选,ESR1、SRC、IGF1R、PTGS1、PTGS2等均参与了多个关键生物过程和关键通路。GO富集表明,细胞活化、炎症反应、细胞对应激的反应等为主要生物过程;KEGG富集表明,糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、AMPK、核因子κB信号通路等是关键通路。分子对接结果显示有效成分与核心靶点对接结果良好。体外试验结果显示,与LPS组比较,50,200,800μg/mL的黄精提取物组RAW264.7细胞中NO生成量均显著降低(均P<0.01)。结论:本研究初步预测了黄精增强免疫功能的ESR1、SRC等作用靶点和AMPK、核因子κB等信号通路,并结合Griess法表明黄精可通过调控炎症模型RAW264.7细胞NO的释放来发挥免疫作用。

千金子制霜前后提取物对正常及癌性腹水模型小鼠泻下逐水效应与毒性研究

目的:筛选千金子泻下逐水药效部位,探究其制霜前后泻下逐水效应及结肠、肾脏毒性的变化。方法:采用H22癌性腹水模型小鼠,以腹水量、粪便含水量、尿量等生物效应指标筛选千金子药效部位;采用H22癌性腹水模型小鼠,灌胃千金子生品、霜品石油醚部位,结合生物效应指标、脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量及水通道蛋白表达考察千金子的泻下逐水效应;采用正常小鼠,以脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量考察千金子制霜前后的毒性差异。结果:千金子制霜前后石油醚部位能够提高癌性腹水模型小鼠粪便含水量、尿量,降低小鼠腹水量(P<0.05,P<0.01),非石油醚部位无显著作用。药效实验结果显示,与模型组比较,各给药组小鼠组织损伤显著减轻,在灌胃石油醚部位后小鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量降低,总超氧化物歧化酶(SOD)含量升高,丙二醛(MDA)含量下降,结肠、肾脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量显著降低,且能抑制结肠、肾脏组织中水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白3(AQP3)蛋白表达水平。毒性结果显示,与对照组比较,各正常给药组小鼠给药后可见不同程度的结肠、肾脏组织损伤,TNF-α、IL-1β分泌增加,肾功能指标呈上升趋势,SOD含量显著降低,MDA含量显著升高,制霜后该损伤降低。结论:石油醚部位是千金子制霜前后泻下逐水的药效部位,千金子制霜后毒性显著降低的同时,其泻下逐水功效得以保留,表现为减毒存效。

延胡索乙素纳米混悬剂制备及体外评价

目的制备延胡索乙素纳米混悬剂(THP-NS)及其冻干粉,并对其进行体外评价。方法通过沉淀-均质法制备延胡索乙素纳米混悬剂,在单因素实验基础上,以粒径与多分散系数(PDI)的归一值作为考察指标,考察延胡索乙素用量、透明质酸钠用量、泊洛沙姆407用量对纳米混悬剂制备的影响,通过Box-Behnken设计响应面法优化THP-NS的处方工艺,并制备冻干粉末。采用透射电镜法(TEM)、差示扫描量热法(DSC)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)对THP-NS进行表征,透析袋法评价其体外溶出度。结果延胡索乙素纳米混悬剂最佳处方为延胡索乙素用量51.0 mg,透明质酸钠用量3.1 mg,泊洛沙姆407用量18.4 mg。平均粒径为(195.57±1.80)nm,PDI为0.23±0.019,与Box-Behnken响应面法预测值接近。Zeta电位值为-31.0 mV,延胡索乙素纳米混悬剂外貌为球形,THP-NS中延胡索乙素以结晶状态存在,THP-NS在24 h累积溶出度达到97.43%。结论将延胡索乙素制备成纳米混悬剂药物处方设计合理、工艺可行,显著提高了其体外溶出率。

正交试验优选千金子制霜工艺及制霜前后脂肪油成分变化分析

目的:优选得到千金子最佳机械压榨制霜工艺,明确其工艺参数,并分析制霜前后千金子脂肪油成分的变化情况。方法:以2020年版《中华人民共和国药典》中规定的千金子霜外观性状和脂肪油含量作为评价指标,采用L9(34)正交试验法优选千金子机械压榨制霜工艺的制霜温度、压制时间和制霜压力,以确定千金子最佳机械压榨制霜工艺;采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对千金子制霜前后脂肪油成分进行分析。结果:优选得到最佳机械压榨制霜工艺条件:取千金子种仁碾成泥状(粒度约为40~60目),在50℃、50 MPa的压力下压制1次,压制时间为10 min。千金子生品和霜品脂肪油中共检出14种共有脂肪酸甲酯,制霜前后脂肪油中脂肪酸成分组成基本一致,相对含量略有差别,但变化不大。结论:优选得到的千金子机械压榨制霜工艺稳定可靠,简便易行,可为千金子霜饮片生产和质量控制提供参考。

220kV变电站二次及弱电系统过电压PSCAD/EMTDC仿真研究

针对长春西郊220 kV变电站的二次系统及弱电设备的实际情况,通过分析过电压产生原因及侵入途径,建立了系统各相关元件的数学模型,并利用PSCAD/EMTDC对过电压数值进行了仿真计算,得出不同雷电波及操作过电压作用下二次及弱电系统电压、电流的变化。根据仿真结果提出了长春地区变电站二次系统防雷改进措施。

采用混合整数计算方法处理配电系统事故自动恢复问题

当电力系统发生故障时 ,对停电区域进行最优化操作从而尽快恢复送电是十分重要的。对系统恢复送电的操作 ,分支限定法是一种典型的方法。

延胡索总碱理化性质及体外经皮渗透性的研究

目的考察延胡索总碱的溶解度、油水分配系数等理化性质,研究促透剂及穴位、非穴位贴敷对其体外经皮渗透特性的影响,为指导其经皮给药剂型设计和制备提供参考。方法建立酸性染料比色法和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法对延胡索总碱、延胡索甲素、延胡索乙素及延胡索丑素的含量进行测定,应用饱和溶液法和经典摇瓶法检测延胡索总碱的溶解性及油水分配情况;采用Franz扩散池法考察大鼠神阙穴与非穴位皮肤体外经皮渗透性能。结果结果显示,延胡索总碱纯度大于50%,其在10%乙醇的生理盐水中溶解性较好,可作为扩散池接收介质。当pH在5.5~7.2时,延胡索总碱的log P值控制在-1~0之间,说明延胡索总碱为强亲水性组分,延胡索甲素、延胡索乙素、延胡索丑素的log P值均在0~3之间,体外经皮渗透性良好,神阙穴用药组的24小时体外累积透过量和滞留量优于非穴位(P<0.05)。结论延胡索总碱具有适宜经皮渗透的理化性质及较好的经皮渗透性能,适宜制成经皮给药制剂,且经神阙穴用药具有一定优势,以上结果可为经皮给药剂型设计提供实验基础。

四旋翼无人机轨迹跟踪控制系统设计

针对四旋翼无人机参数不确定性和对外部干扰敏感的问题,提出一种基于线性自抗扰的轨迹跟踪控制系统设计方案。线性自抗扰能够很好地克服无人机的强耦合性、模型不确定性以及外部干扰问题。将四旋翼无人机的轨迹跟踪控制系统分为内外两个环路,内环采用线性自抗扰控制器,外环采用简单的PD控制器。在仿真平台上对线性自抗扰控制系统进行轨迹跟踪实验,并与传统的PID控制系统进行对比分析。通过仿真实验证明,所设计的线性自抗扰控制器不仅能够很好地估计并补偿系统所受内外部干扰,而且对四旋翼无人机参数的不确定性具有较强的鲁棒性,能够满足无人机姿态调节快速和高稳定度的控制要求,性能指标明显优于PID控制器。

基于蜜炙甘草性状特征与内在成分含量的相关性研究

目的 基于熵权法研究不同种类炼蜜炮制的蜜炙甘草内在成分甘草苷、甘草酸和异甘草素与颜色和味觉的相关性。方法 测定15种炼蜜炮制所得不同蜜炙甘草饮片样品中甘草苷、甘草酸、异甘草素的含量,熵权法计算综合指标作为参考评价标准,结合视觉分析仪和电子舌测定样品外观颜色与味觉,运用多元统计学方法对内在成分与色度值、味觉信息进行关联分析。结果 不同炼蜜炮制的蜜炙甘草样品内在成分含量存在显著性差异,甘草苷与色值L^(*)和总色值E^(*)ab呈正向相关性,甘草酸与感应器响应值AHS(酸)、CTS(咸)呈正相关,异甘草素与色度值L^(*)、a^(*)和AHS、ANS(甜)、SCS(苦)有相关性。结论 蜜炙甘草内在成分与颜色、味觉具有显著相关性,性状特征的量化可为质量评价体系的建立提供参考依据。

基于G1-熵权法结合Box-Behnken响应面法优化蜜炙甘草炮制工艺

目的采用G1-熵权法优选蜜炙甘草炮制工艺。方法以炒制温度、炒制时间、炼蜜与水的比例、闷润时间4个因素为自变量,以甘草苷、甘草酸、异甘草素含量的综合评分为响应值,采用G1-熵权法结合Box-Behnken响应面法优化蜜炙甘草的炮制工艺。结果G1-熵权法确定甘草苷、甘草酸、异甘草素的权重系数分别为0.3109、0.4454、0.2438,蜜炙甘草最佳炮制工艺为炒制温度130℃、炒制时间5 min、炼蜜与水的比例2∶2.6、闷润时间43 min。在此条件下,分别进行3批验证试验,甘草苷、甘草酸、异甘草素的平均含量分别为1.0370%、2.3603%、0.0650%,3批验证试验的平均综合评分为79.9324,且试验数据组间比较差异无统计学意义。结论优选的蜜炙甘草炮制工艺稳定、可行,可为蜜炙中药炮制工艺研究提供数据参考。

甘草蜜炙前后对小鼠免疫调节的影响

目的:研究甘草炮制前后对免疫低下小鼠免疫调节作用的影响。方法:小鼠腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下模型,给予生甘草、清炒甘草、蜜炙甘草的提取液,检测免疫功能学评价指标,包括免疫器官指数、半数溶血值、溶血空斑数、脾淋巴细胞增值率、自然杀伤(NK)细胞杀伤率、耳肿胀度、碳廓清指数、腹腔巨噬细胞吞噬率及吞噬指数。结果:与对照组小鼠比较,模型组小鼠各检测指标明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组小鼠比较,各给药组(生甘草组、清炒甘草组、蜜炙甘草组)小鼠各检测指标均能增强。其中,仅蜜炙甘草组能明显增强各检测指标(P<0.05,P<0.01);与生甘草组小鼠相比,清炒甘草组能明显增强血清溶血素和抗体生成细胞、脾淋巴细胞增殖率和NK细胞活性(P<0.05,P<0.01),但对胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、DTH、碳廓清功能无明显影响,蜜炙甘草组能明显增强除胸腺指数的各项评价指标(P<0.05,P<0.01),但对胸腺指数无明显影响。结论:甘草蜜炙前后对小鼠非特异性免疫、体液免疫及细胞免疫功能均有促进作用,且蜜炙后作用更强,为蜜炙甘草机制研究提供参考。

基于网络药理学和分子对接研究千金子二萜醇酯类成分治疗白血病的作用机制

目的运用网络药理学和分子对接探讨千金子二萜醇酯类成分治疗白血病的潜在作用机制。方法选取千金子中7种代表性二萜醇酯类成分为研究对象,综合运用SwissTargetPrediction、SEA、OMIM、Gene Cards数据库筛选及预测千金子二萜醇酯类成分治疗白血病的潜在靶点。通过STRING数据库和Cytoscape 3.7.2软件来建立PPI网络。使用DAVID数据库对筛选出的靶点进行基因本体(GO)生物学过程分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,并应用Cytoscape 3.7.2构建“成分-靶点-通路”网络,最后对千金子二萜醇酯类成分与关键靶蛋白进行分子对接验证。结果7种千金子二萜醇酯类成分涉及252个作用靶点,筛选得到75个治疗白血病的潜在靶点,PPI核心网络表明治疗白血病的关键靶点为CDK1、CDK2、CCNA2,基因富集分析及“成分-靶点-通路”网络图显示千金子二萜醇酯类成分可能通过调节PI3K-Akt、ErbB、p53等信号通路来发挥对白血病的治疗作用。结论本研究表明千金子二萜醇酯类成分可能通过调节细胞凋亡、增殖分化、转录、细胞周期等多种途径来治疗白血病,诠释了中药通过多成分、多靶点、多途径治疗疾病的研究思路,为进一步深入研究千金子二萜醇酯类成分治疗白血病的作用机制提供了科学依据。

基于层次分析法-熵权法评价不同种类黄酒对酒当归饮片的影响

目的结合层次分析法(AHP)-熵权法(EWA)对不同种类黄酒炮制的酒当归饮片进行质量综合评价研究,为其他中药饮片质量评价提供参考。方法对比15批不同种类黄酒的理化性质,包括总糖、非糖固形物、总酸、氨基酸态氮、氧化钙含量、酒精度和pH值,并用其对当归进行炮制,以阿魏酸、多糖、醇溶浸出物、水溶浸出物、总灰分、酸不溶性灰分为评价指标,采用AHP-EWA建立酒当归质量的量化评价模型,并对黄酒理化性质与酒当归饮片质量综合评分进行相关性分析,探究不同种类黄酒对酒当归饮片质量的影响。结果黄酒的总糖、酒精度与其炮制的酒当归饮片质量存在一定相关性。结论黄酒的种类对酒当归饮片质量具有一定影响,采用AHP-EWA确定各指标的权重,提高了酒当归饮片评价结果的可靠性,可为酒当归饮片质量评价研究提供参考。

千金子制霜前后提取物对人胚肾细胞HEK293的体外毒性作用

目的:比较千金子制霜前后提取物对正常人胚肾细胞HEK293的影响,探究千金子制霜减毒的作用机制。方法:采用HEK293细胞为体外模型,随机分为对照组,千金子生品低、中、高质量浓度(100、200、400μg·mL^(-1))组和千金子霜品低、中、高质量浓度(100、200、400μg·mL^(-1))组。细胞体外培养后,分别给予等体积的无血清培养液和千金子生品、霜品提取物溶液,各组均设置3个复孔。采用CCK-8法评价细胞存活率,利用倒置显微镜观察细胞数量及形态变化;碘化丙啶(PI)染色法和AnnexinV-FITC/PI双重染色法检测细胞周期和凋亡情况;试剂盒法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)、肌酐(Cr)和细胞裂解液中尿素氮(BUN)水平。结果:与对照组比较,千金子生品各质量浓度组HEK293细胞存活率降低,细胞形态异常,细胞数量减少,G_(0)/G_(1) 、 G_(1)/G_(2)期细胞比例明显降低,S期细胞比例明显增加,细胞凋亡率升高(P<0.01),LDH、BUN、Cr水平升高(P<0.05,P<0.01),GSH水平降低(P<0.01);与千金子生品组比较,千金子霜品相应质量浓度可显著增加HEK293细胞存活率(P<0.01),改善细胞形态,增加G_(0)/G_(1) 期、 G_(1)/G_(2)期细胞比例,降低S期细胞比例,同时能明显降低LDH、BUN、Cr水平(P<0.05,P<0.01),提高GSH水平(P<0.01)。结论:千金子制霜后可能通过减轻细胞周期阻滞和细胞氧化损伤改善肾细胞功能、减少细胞凋亡,从而降低体外肾毒性。

延胡索总碱贴片安全性和对神经病理性疼痛大鼠镇痛作用研究

目的 探讨延胡索总碱贴片的安全性及其对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及其机制。方法 (1)安全性实验:采用单次、多次给药的皮肤刺激性实验及皮肤过敏性实验,评价延胡索总碱贴片的安全性。(2)镇痛实验:取48只雄性SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、模型组、布洛芬组、双氯芬酸钠贴片组及延胡索总碱贴片高、中、低剂量组,每组6只。除正常组和假手术组外,其余组大鼠采用坐骨神经慢性压迫损伤方法诱导神经病理性疼痛模型,术后第8天开始,布洛芬组灌胃给药,双氯芬酸钠贴片组及延胡索总碱贴片高、中、低剂量组分别给予双氯芬酸钠贴片及延胡索总碱贴片腹部贴敷,其余组腹部贴敷空白贴片,均每天1次,连续14 d。分别于术前及干预后1,3,7,10,14 d测定各组大鼠热缩足反射潜伏期;采用Western blot法检测各组大鼠干预结束后脊髓中Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、信号传导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达情况。结果 (1)给予延胡索总碱贴片后,皮肤刺激反应评分均小于0.5分,致敏率为0,组织结构与正常皮肤无差异。(2)镇痛实验中,延胡索总碱贴片中、高剂量组干预后3 d和延胡索总碱贴片各剂量组干预后7,10,14 d患侧的热缩足反射潜伏期均明显长于同期模型组(P均<0.05);干预结束后,延胡索总碱贴片各剂量组大鼠脊髓中TLR4、NF-κB、p38MAPK蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05), STAT3蛋白相对表达量均明显高于模型组(P均<0.05)。结论 延胡索总碱贴片安全性良好,可抑制慢性坐骨神经挤压损伤神经病理性疼痛大鼠痛觉敏感,其机制可能与抑制脊髓中TLR4、NF-κB、p38MAPK表达并上调STAT3的表达有关。

多信息G1-熵权组合赋权法优选醋当归炮制工艺

目的:运用多信息G1-熵权组合赋权法优选醋当归饮片的炮制工艺。方法:采用L9(34)正交试验设计,以阿魏酸含量、醇浸出物含量、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)组成的综合评分为指标,采用G1-熵权组合赋权法计算各指标的权重系数,考察炒制温度、炒制时间、米醋用量和闷润时间对醋当归炮制工艺的影响,进而确定醋当归的最优炮制工艺参数。结果:G1-熵权组合赋权法确定PT、APTT、TT、阿魏酸和醇浸出物的权重系数分别为0.4517、0.2316、0.1306、0.1046、0.0816,醋当归的最佳炮制工艺为每100 g当归饮片加米醋15 mL,闷润1 h,150℃炒制20 min。结论:联合凝血功能指标证实优选的醋当归炮制工艺稳定可靠,可为醋制中药炮制工艺研究提供参考。

UPLC-MS/MS法同时测定红鹤胶囊在大鼠血浆中3种活性成分含量及其药代动力学研究

目的建立同时测定大鼠血浆中红鹤胶囊的竹节参皂苷Ⅳα、金丝桃苷和岩白菜素3种活性成分的UPLC-MS/MS定量分析方法,同时探讨灌胃给予红鹤胶囊后3种活性成分在大鼠体内的药代动力学特征。方法灌胃给予大鼠红鹤胶囊混悬液后,采用乙酸乙酯萃取法处理血浆样品,以葛根素为内标,采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱,0.01%甲酸-乙腈进行梯度洗脱,采用电喷雾电离源,以多反应监测模式检测不同时间点大鼠血浆中竹节参皂苷Ⅳα、金丝桃苷和岩白菜素的浓度,并用DAS 2.0药代动力学软件计算药代动力学参数。结果方法学结果揭示,3种活性成分的线性关系、精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性均符合样品分析要求。大鼠灌胃给予红鹤胶囊后,竹节参皂苷Ⅳα、金丝桃苷和岩白菜素的C_(max)分别为(53.16±31.67)、(6.29±5.42)、(0.37±0.06)μg·L^(-1);t_(max)分别为(49.17±65.76)、(32.50±34.60)、(54.00±21.91)min;t_(1/2)分别为(437.99±127.83)、(535.41±182.87)、(603.12±288.14)min;AUC_((0-t))分别为(12114.75±6435.41)、(1539.98±459.55)、(330.92±88.37)μg·min·L^(-1)。结论该研究建立的UPLC-MS/MS定量分析方法快速、灵敏、精确,适用于大鼠血浆中红鹤胶囊3种活性成分的药代动力学研究,为红鹤胶囊的质量控制以及临床合理应用提供了理论支撑。

四波混频对掺镱光纤激光光谱展宽特性的影响

为了探究四波混频非线性过程对高功率掺镱光纤激光光谱展宽特性的影响,采用纤芯和内包层直径分别为20μm和400μm的掺镱光纤作为增益介质,基于四波混频非线性过程建立掺镱光纤激光光谱分析模型,分析了抽运功率、抽运波长、中心波长和注入模式数参数变化对掺镱光纤激光光谱展宽特性的影响,得到了1080 nm激光的输出光功率谱以及输出激光线宽随各参数变化的曲线。结果表明,四波混频非线性过程中,抽运功率的增大会导致掺镱光纤激光输出光谱线宽展宽;不同抽运波长抽运的输出光谱线宽展宽速率不同;不同中心波长的输出激光光谱展宽程度相近;掺镱光纤激光光谱线宽随着注入模式数增加逐渐展宽。该分析结果为掺镱光纤激光光谱展宽特性研究提供了理论支持,对高功率光纤激光的工程应用有一定的参考意义。

Box-Behnken响应面法结合熵权法优化千金子二萜醇酯类成分的闪式提取工艺

以千金子中3种主要的二萜醇酯类成分提取率的综合评分为评价指标,通过Box-Behnken响应面法结合熵权法对千金子二萜醇酯类成分的闪式提取工艺进行优化。确定最佳提取工艺为:料液比1∶14(g∶mL)、提取时间2.5 min、提取电压130 V,在此条件下,3种二萜醇酯类成分提取率的综合评分为0.370,与模拟预测值(0.396)接近。该闪式提取工艺设计合理,可为千金子主要二萜醇酯类成分的快速高效提取提供一定的参考。