患病异育银鲫中嗜冷黄杆菌的分离鉴定及组织病理学观察

为确定越冬期内江苏多地异育银鲫暴发性死亡的原因,本研究利用高通量测序比较了健康样品和患病样品的微生物群落多样性和结构组成的差异,分析了异育银鲫病害暴发过程中的细菌类型及特性。结果显示,在属水平上,患病样品中黄杆菌属丰度最高。在种水平上,患病样品中嗜冷黄杆菌的丰度最高,分别达到63.01%和61.31%,显著高于健康组的1.55%。根据微生物群落特征分析结果,从患病样品体表的病灶处分离出优势病原菌NJ01,通过细菌形态学、生理生化分析、16S rDNA序列比对确定NJ01菌株为嗜冷黄杆菌。人工感染NJ01菌株14 d后,1.7×10^(6)和1.7×10^(7) CFU/mL两组的死亡率达到100%,感染症状和自然发病症状一致。组织病理学观察发现,病鱼的肌细胞坏死,间质中充满了淋巴细胞;肝脏中细胞溶解坏死,细胞核消融;在脾脏中发现脾细胞散在坏死,伴随着充血的症状;肾小管上皮脱落,肾间质存在大量淋巴细胞。药物敏感实验结果显示,NJ01菌株对头孢西叮、头孢哌酮、庆大霉素和克拉霉素等敏感。研究表明,优势菌NJ01是致病菌,可通过扰乱机体正常的免疫和代谢功能导致疾病的发生。本研究首次报道了嗜冷黄杆菌在异育银鲫中的致病性,这将为大宗淡水鱼“越冬综合征”的药物防治及其致病机理研究提供参考依据。

一株鲫鱼致病性普通变形杆菌的鉴定及生物学特性研究

本研究对患病鲫鱼进行发病原因探究,致病菌特性分析,从而为鲫鱼病害的防控提供理论基础。通过从患病鲫鱼肝脏和肠道中分离纯化细菌,对分离菌进行16S rRNA序列分析、人工感染试验、生理生化鉴定、系统发育树构建,并通过纸片扩散法进行药敏试验,筛选敏感药物。从病鱼肝脏和肠道中均分离出菌株A,16S rRNA序列分析和理化特性均与普通变形杆菌Proteus vulgaris基本一致,人工感染试验证实菌株A为致病菌,LD50为9.77×10^(6)CFU/尾。菌株A对头孢唑啉、头孢拉定、氟苯尼考、卡那霉素、阿奇霉素及庆大霉素等6种抗生素高度敏感,对阿莫西林、红霉素、新霉素、克林霉素及多西环素等5种抗生素耐药。本次试验结果表明菌株A为普通变形杆菌,是此次鲫鱼病害的主要元凶,临床治疗可以根据药敏试验选用高度敏感抗生素进行治疗。

沙塘鳢肠道致病菌G-2全基因组测序及信息分析

为探明造成养殖沙塘鳢肠道出血的病原菌G-2的特性,对G-2进行全基因组测序和分析。基因组组分分析和基因功能注释结果显示:G-2的总基因数为5134个,其中蛋白编码基因4977个,非蛋白编码基因157个,非编码基因中tRNA基因107个,rRNA基因42个,sRNA基因8个;分别有5109、3339、3362、2543个基因在对应的Nr、SwissProt、COG、KEGG数据库中获得注释;毒力基因分析表明G-2含有多种肠毒素和溶血素基因、InhA蛋白、磷脂酶及蛋白质毒素,解释了该菌造成养殖沙塘鳢肠道出血的原因。基于G-2菌株的16S rRNA序列信息构建系统进化树,确定其为苏云金芽孢杆菌。

池塘养殖密度对斑点叉尾鮰“江丰1号”苗种生长、成活及养殖经济效益的影响

以斑点叉尾鮰"江丰1号"苗种为试验对象,在池塘养殖密度分别为8 000尾/667 m^2(B1)、10 000尾/667 m^2(B2)、12 000尾/667 m^2(B3)、15 000尾/667 m^2(B4)的4个梯度下,进行为期150 d的斑点叉尾鮰"江丰1号"鱼种培育试验,研究斑点叉尾鮰"江丰1号"苗种在池塘养殖中的适宜放养密度。结果显示,B3组的终末体质量、特定生长率显著高于其他3个密度组(P<0.05);B1和B2组终末体质量、特定生长率无显著性差异(P>0.05)。B3组的肥满度显著高于其他3个密度组(P<0.05)。饲料系数B3组显著低于B1、B2组。试验期间,苗种成活率为66.4%~74.7%,4个密度组中B4组的成活率最低,与其他3个密度组差异显著(P<0.05)。养殖产量从高到低依次为B3组>B4组>B2组>B1组,B3组产量最高。B4组支出成本显著高于B3组,导致净利润和投资回报率的降低。综合分析,在本试验条件下,体质量为(1.05±0.02) g的斑点叉尾鮰"江丰1号"苗种放苗密度以12 000尾/667 m2为宜。该结果可为池塘养殖条件下苗种培育提供参考依据,有助于在生产实际中科学设置放养密度,提高养殖经济效益及生态效益。

高铁酸钾对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾的急性毒性研究

为了明确高铁酸钾对养殖动物的安全性,采用静水生物测试法研究了高铁酸钾对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾的急性毒性效应并进行了安全评估。结果表明,高铁酸钾对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾表现出不同的毒性作用,但均为低毒性,对斑点叉尾鮰幼鱼和南美白对虾的96 h LC_(50)值分别为95.01 mg/L和609.45 mg/L。对斑点叉尾鮰幼鱼的毒性主要表现在鱼体接触染毒物质后的24 h内,而南美白对虾的累积死亡率则与暴露时间呈正比。研究结果将对斑点叉尾鮰和南美白对虾养殖过程中的高铁酸钾使用具有一定的指导意义。

微囊藻毒素暴露对河川沙塘鳢病理损伤、生化反应的影响

开展了微囊藻毒素暴露对河川沙塘鳢病理损伤、生化反应的影响试验。设置3个试验组(D3、D5、D7)1个对照组(CK),每组设3个重复组,于试验的第0、3、5、7天,随机取每组3尾河川沙塘鳢的肠道和肝脏组织,进行生化分析和组织病理学观察。结果表明,微囊藻毒素会导致肠道黏膜肌层空泡化,同时引起隐窝结构异常,影响肠道营养物质吸收。肝脏同时出现严重损伤,主要包括肝细胞溶解和充血等症状。随着暴露时间的增加,肠道总超氧化物歧化酶活性受到抑制,过氧化氢酶活性和丙二醛的浓度变化,呈现先下降后上升的趋势,谷胱甘肽过氧化物酶和还原型谷胱甘肽的浓度呈现相反的趋势。这些结果表明了微囊藻毒素对河川沙塘鳢的肠道的损伤可能是通过产生过量活性氧引起的。

噻虫嗪暴露对克氏原螯虾的病理损伤和生化反应的影响

为了探究噻虫嗪对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的影响,开展噻虫嗪对克氏原螯虾的急性毒性试验和14 d的慢性暴露试验,对克氏原螯虾的肝胰腺进行病理损伤和生化酶活分析。结果显示,噻虫嗪对克氏原螯虾的24、48、96 h的半致死浓度(LC_(50))分别为3.611,3.014和2.100 mg/L;噻虫嗪对克氏原螯虾的安全浓度(SC)为0.21 mg/L;通过14 d的噻虫嗪暴露试验,当暴露在52.5μg/L(1/4 LC_(50))和105.0μg/L(1/2 LC_(50))时,克氏原螯虾的肝胰腺都发生管腔扩大、上皮空泡化的损伤,总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和还原型谷胱甘肽(GSH)的浓度显著上升,表明肝脏中有大量活性氧(ROS),肝胰腺发生氧化应激反应。

小龙虾养殖病害综合防治(下)

3.细菌病小龙虾感染的细菌性病原多为气单胞菌属,如嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、维氏气单胞菌等。由于气单胞菌具有几丁质分解能力,刚感染的病虾甲壳局部会出现一些颜色较深的斑点,接着斑点边缘溃烂,严重时出现空洞。小龙虾烂壳、烂尾、黑斑、水肿等常见病均为此类细菌感染引起。

小龙虾养殖病害综合防治(上)

一、小龙虾养殖病害常规预防养殖病害是机体、病原、环境相互作用的结果。一旦出现严重的病害,往往是缺乏有效的治疗措施而造成养殖小龙虾的大量死亡。因此,必须做好病害的常规预防工作。

人工养殖条件下麦穗鱼的生长特性

分析麦穗鱼(Pseudorasbora parva)在人工养殖条件下的生长特性,为麦穗鱼养殖提供参考依据。2016年3—11月,于室外水泥池中开展了麦穗鱼养殖试验,分别测量其体重、体长和全长指标,进行生长特性分析。经180天的养殖,麦穗鱼平均全长达到3.96 cm,平均体长达到3.23 cm,平均体重达到0.49 g。特定生长率、日均增量和肥满度均受水温影响变化明显。体长(LB)与全长(LT)之间存在线性回归关系:LT=1.0589LB+0.767(R2=0.8628),体长与体重(W)的回归方程为:W=0.0466LB2.1623(R2=0.8306)。麦穗鱼体长的变异系数范围为6%~14%,体重的变异系数范围为20%~41%,肥满度在1.45~5.31之间变动。综上所述,麦穗鱼在室外水泥池中生长效果良好,适宜进行规模化人工养殖。

浅谈水产动物健康养殖

我国水产养殖业历史悠久,可以追溯2000多年前[1]。近年来,我国水产养殖业的不断发展,养殖产量持续增长,水产品总量在世界范围一直保持领先态势。现代水产养殖业都是以集约化管理和高密度养殖来实现最大利润的,养殖环境日趋恶化,病害发生趋于频繁,不仅仅影响了养殖对象的健康生长,对我国水产养殖业健康持续发展构成严重制约,尤其是水产品的食用安全问题不断显现,直接危害到人的生存和健康。20世纪90年代初,世界范围内的大规模对虾病害爆发,使得人们意识到健康养殖的重要性[2]。在1993年,泰国曼谷召开的亚洲水产养殖病害会议上,与会的专家着重探讨了“水产动物健康养殖”的概念,强调在养殖生产过程中,预防和控制养殖病害需要通过改造生产条件、改善生态环境和提高养殖生物自身健康状况来实现[3]。

从催熟走向成熟——关于我国报业集团的思考(上)

当前,中国报业集团数目正在滚雪球般地发展着,并且逐步凸现出一些现代报业集团特征。但是由于长期计划经济的惯性,我国报业集团还不能立刻消除因循的僵化形态,马上适应市场经济大潮。本文试对我国报业集团化现存问题进行初步分析,并对未来我国理想的报业集团运作模式进行初步构想。

3种泥鳅微卫星标记和D-Loop部分序列遗传变异分析

为进一步了解中国当前主要养殖鳅类种质资源现状,实验采用7个微卫星标记和线粒体D-Loop部分序列,对泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus,MA）、大鳞副泥鳅（Paramisgurnus dabryanus,PD）和台湾大泥鳅（未见种属分类,TW）3种泥鳅进行群体遗传变异分析。结果显示,6个微卫星位点在3种泥鳅中均能获得有效扩增,1个微卫星标记（Mac239）只在MA中获得特异性扩增,而在PD和TW中未能获得有效扩增条带。在3种泥鳅共90尾个体的D-Loop部分序列中发现32个单倍型,仅在PD和TW间存在1个共享单倍型。实验中共检测到65个变异位点,其中MA与PD和TW间存在29个特异性位点,而PD和TW间未检测到特异性位点。瓶颈效应和中性检验显示,TW近期可能发生有效群体数量的减少。基于微卫星标记和D-Loop部分序列的遗传变异分析显示,TW和PD间的Nei’s遗传距离和K2P遗传距离最近（0.297和0.006）,明显小于两者与MA间的遗传距离（1.011-1.899和0.095-0.099）;分子方差分析（AMOVA）显示,3种泥鳅的遗传分化极显著（P〈0.01）。群体间遗传结构和单倍型网络分析显示,3种泥鳅的遗传结构相对独立,仅在TW和PD间存在一定程度的遗传结构混杂。研究表明,泥鳅和大鳞副泥鳅在遗传结构上存在明显差异,可采用分子标记进行有效鉴别;台湾大泥鳅可能是大鳞副泥鳅的生态种群或遗传改良群体,而非有效物种。

河蚬微卫星引物筛选及洪泽湖野生群体遗传结构分析

利用磁珠富集法筛选了河蚬10对中高度多态性的微卫星引物,并分析了洪泽湖河蚬4个野生群体的遗传结构。结果表明,每个群体至少有4个位点经Bonferroni校正后显示杂合不足,显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.013);4个群体平均期望杂合度均大于0.752,显示出较高的遗传多样性水平,蒋坝、临淮群体遗传多样性高于高良涧和老子山群体;突变-漂移平衡分析结果显示,4个群体在IAM模型下偏离了突变-漂移平衡,高良涧群体在TPM模型下偏离了突变-漂移平衡,且表现杂合过剩,说明少数群体即将或曾经经历瓶颈效应,群体数量已出现波动;群体间AMOVA分析表明,洪泽湖河蚬群体间遗传分化程度较低(FST=0.017 7<0.05),仅有1.77%的变异来自群体间,并没有形成显著的遗传结构,在种质资源保护和管理上可视作一个单元,这为河蚬种质资源保护和合理开发利用提供了理论指导。

南京地区斑点叉尾鮰养殖池塘水体微生物群落结构研究

微生物群落在水产养殖中起着重要作用,深入了解微生物群落组成及其构建机制对了解池塘生态功能具有重要意义。本研究采用高通量测序技术对南京地区斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)养殖池塘水体中细菌群落结构特征进行了分析。结果显示,斑点叉尾鮰养殖池塘水体细菌群落结构呈现出明显的季节性变化,整个年度水体细菌群落呈现出连续的演替特征,冬季与春季、夏季与秋季的细菌群落结构较为相似。优势菌群主要为蓝藻门(Cyanobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)。环境因子中,总溶解性悬浮物(TDS)、水温(Temp)、酸碱度(pH)、亚硝酸盐(NO2--N)和总有机碳(TOC)与斑点叉尾鮰养殖池塘水体细菌群落结构有显著相关(P<0.05),对细菌群落结构的塑造影响也最大(r2>0.6)。

不同饵料对大口黑鲈生长性能和肠道微生物的影响

以冰鲜鱼、配合饲料和混合投喂3种饵料,研究其对大口黑鲈(Micropterus salmoides)生长性能和肠道微生物的影响。结果表明,在生长性能方面,配合饲料组试验鱼的末均重、体长、增重率和特定生长率均显著低于冰鲜鱼组和混合投喂组(P<0.05),混合投喂组最后养成规格最大,生长速度也最快,但与冰鲜鱼组差异不显著(P>0.05)。在肠道微生物群落的丰富度与多样性方面,配合饲料投喂组丰富度最高,冰鲜鱼组最低,但冰鲜鱼组多样性最高,配合饲料投喂组次之,混合投喂组最低。在门级水平上,厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteriota)、蓝藻门(Cyanobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidota)、浮霉菌门(Planctomycetota)、绿弯菌门(Chloroflexi)和酸杆菌门(Acidobacteriota)是大口黑鲈肠道优势菌群。属级水平上,冰鲜鱼组的优势菌属主要为支原体属(Mycoplasma)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)及聚球菌属(Synechococcus_CC9902);配合饲料组优势菌属为克雷伯氏菌属(Klebsiella)、罗姆布茨菌(Romboutsia)及分枝杆菌属(Mycobacterium);混合投喂组优势菌属则是支原体属(Mycoplasma)、厌氧氨氧化菌(Candidatus_Brocadia)及罗姆布茨菌(Romboutsia)。功能预测表明,配合饲料投喂组大口黑鲈肠道菌群在“能量生产与转化”“碳水化合物运输和代谢”“氨基酸转运与代谢”和“脂质转运与代谢”等功能类群的相对丰度最高,而冰鲜鱼组肠道菌群在“核苷酸的转运和代谢”“辅酶运输和代谢和翻译”“核糖体结构和生物发生”等功能类群的相对丰度占优。饵料对大口黑鲈的生长、肠道菌群组成和功能都具有显著的影响。研究为大口黑鲈的配合饲料开发和健康养殖提供了理论依据。

世界斑点叉尾鮰产业近况Ⅱ:中国斑点叉尾鮰产业发展与展望

斑点叉尾鮰（Letaurus Punetaus）,原产于北美,是美国最主要淡水养殖品种（[1]）,产量超过了美国鱼类养殖总量的60%以上^（[2]）。1984年,引入中国后,养殖面积和总产量不断增加,2016年总产量达28.5万t（[3]）。中国已经和美国一起成为世界最主要的斑点叉尾鮰养殖国家。中国也从最初单一出口型国家,转变成为本土消费为主兼具一定出口,且出口主要针对美国。中国鮰鱼产业的发展壮大改变了世界斑点叉尾鲴产业的格局，也对美国鲴鱼产业造成了冲击。

斑点叉尾鮰几种健康养殖模式总结

斑点叉尾鮰(Ictalures Punctatus),属于鲶形目(Siluriformes),鮰科(Ictalurimae),是我国1984年从美国引进较为成功的一种淡水养殖鱼类,随着其产业结构日益完善,已成为我国经济性状较为优良的饲养鱼类品种之一。养殖上具有对环境的适应性很强、生长快、抗病能力强、集群摄食、饲料转化率高、管理方便、易上钩的垂钓品种等特点。各地人工可控的淡水水体中都适合养殖。其肉质细嫩、鲜美,无肌间刺,深受老人、孩子的喜爱。

世界斑点叉尾产业近况Ⅰ:美国斑点叉尾产业现状与展望

斑点叉尾鲴（Ictalurus punctatus），又称沟鲇。英文名为channelcatfish，隶属于鲇形目（Siluriformes），鲴科（Ictaluridae），叉尾鲴属（Ictalurus），原产于北美，是美国淡水养殖的主要鱼类品种，产量占美国水产养殖总量的60％以上。2016年，美国斑点叉尾鲴养殖量约15万t，总产值为3．86亿美元。中国自1984年从美国引入斑点叉尾鲴后，养殖面积和总产量不断增加，2015年总产量达26．5万t。

江苏斑点叉尾鮰产业现状及发展战略思考

2017年以来,江苏斑点叉尾鮰养殖规模急剧扩大,养殖面积已经达1万hm^(2),养殖产量也占全国总量的1/4。为了进一步推进江苏鮰鱼产业的稳定发展,文章从消费动态、苗种瓶颈、养殖模式和加工产业等方面概述了江苏斑点叉尾鮰产业现状,提出了产业面临的问题。随着沿海池塘养殖规模的大幅增加,江苏鮰鱼产业苗种和消费市场出现严重的供求不平衡,苗种和消费严重依赖省外,同时加工产品缺乏创新,消费形式单一。因此,研究提出良种良法结合,加强加工研发,建立品牌,拓宽销售渠道,以实现本省鮰鱼产业的可持续性发展。