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多模态肺结节诊断模型的临床验证及应用价值探索
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作者 许万星 王琳 +2 位作者 郭巧梅 王薛庆 娄加陶 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1030-1036,共7页
目的·验证采用随机森林算法并基于血清代谢指纹数据、蛋白标志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)和Image-AI的多模态肺结节诊断模型(a multi-modal pulmonary nodule diagnosis model combined metabolic fingerprints,pro... 目的·验证采用随机森林算法并基于血清代谢指纹数据、蛋白标志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)和Image-AI的多模态肺结节诊断模型(a multi-modal pulmonary nodule diagnosis model combined metabolic fingerprints,protein biomarker CEA and Image-AI via random forest,MPI-RF)的性能,探索其临床应用价值。方法·入组就诊于上海交通大学医学院附属胸科医院且低剂量螺旋CT表现为肺结节的患者289例,根据术后病理结果将其分为恶性结节组(n=197)和良性结节组(n=92),收集并比较2组患者的基本信息。使用电化学发光法检测2组患者术前血清CEA水平,使用基质辅助激光解吸电离质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry,MALDI-MS)检测血清代谢指纹图谱,使用CT影像人工智能模型Image-AI计算影像得分。将CEA数据、血清代谢指纹数据和影像得分整合后输入至MPI-RF中,计算每位患者的恶性概率得分。采用受试者操作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC曲线)、曲线下面积(area under the curve,AUC)评估不同模型的性能并采用DeLong检验进行比较分析,包括MPI-RF在不同类型(实性、纯磨玻璃、混合磨玻璃)和大小(直径<8 mm、直径≥8 mm)的肺结节中的诊断性能,MPI-RF与Mayo Clinic模型、美国退伍军人管理局(veterans administration,VA)模型、Brock模型的诊断性能比较,以及MPI-RF与肺部影像报告和数据系统(lung imaging reporting and data system,Lung-RADS)在良恶性结节中的诊断性能比较。结果·MPI-RF在肺结节良恶性鉴别中具有良好的诊断性能(AUC=0.887,95%CI 0.848~0.925,灵敏度为81.22%,特异度为83.70%);其中,MPI-RF对实性结节的AUC为0.877 (95%CI 0.820~0.934),混合磨玻璃结节的AUC为0.858 (95%CI 0.771~0.946),纯磨玻璃结节的AUC为0.978 (95%CI 0.923~1.000)。对于直径<8 mm的结节,MPI-RF的AUC为0.840 (95%CI 0.716~0.963);直径≥8 mm的结节,其AUC为0.891 (95%CI 0.849~0.933)。与现有模型对比的结果显示,MPI-RF的诊断性能优于Mayo Clinic模型、VA模型、Brock模型(均P=0.000);与Lung-RADS比较,MPI-RF在总样本、不同类型结节中的诊断性能均较优(均P=0.000)。结论·MPI-RF是性能优良的良恶性肺结节鉴别诊断模型,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 机器学习 肺腺癌 代谢组学 多模态模型 肺结节
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蛋白芯片检测肿瘤标志物及其与其他方法的比较 被引量:11
2
作者 娄加陶 顾军 +6 位作者 高春芳 范列英 赵虎 李智 沈霞 孔宪涛 仲人前 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第6期466-469,共4页
目的研究多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)检测肿瘤标志物的性能及其与国外检测系统的比较。方法分别选用湖州数康生物科技有限公司C-12、Roche Modular E170、Elecsys 2010和Abbott I2000 4种检测系统对甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA... 目的研究多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统(C-12)检测肿瘤标志物的性能及其与国外检测系统的比较。方法分别选用湖州数康生物科技有限公司C-12、Roche Modular E170、Elecsys 2010和Abbott I2000 4种检测系统对甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)、游离PSA(f-PSA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原242(CA242)、人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)和糖类抗原199(CA199)临床常见肿瘤标志物进行检测,所测得的数据进行统计学分析。结果C-12与Roche Modular E170、Elecsys 2010和Abbott I2000 4种检测系统在肿瘤标志物的检测中符合率呈显著正相关,而且敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值等均有很高的一致性。结论C-12与Roche Modular E170、Elecsys 2010和Abbott I2000在检测肿瘤标志物中具有较高的一致性,对肿瘤标志物的检测具有较高的实用价值。 展开更多
关键词 肿瘤标志物 蛋白芯片检测系统 方法学比较
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基于悬浮点阵技术的新型EGFR基因突变检测方法的建立和应用 被引量:3
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作者 娄加陶 吴传勇 +3 位作者 薛剑 林强 周海燕 朱晓 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期284-289,共6页
目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,... 目的构建基于悬浮点阵技术的新型表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的检测方法,检测并分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)相关的EGFR基因突变状况。方法选取61例经影像学和病理学检查确诊的NSCLC患者作为研究对象,手术后留取新鲜肺癌组织,提取基因组DNA,采用多重聚合酶链式反应(PCR)对组织样本的EGFR基因18、19、20和21号外显子中包含8种高频突变位点的特异片段进行扩增,并经多重连接酶检测反应(LDR)以特异性探针对扩增片段中的突变进行连接,再基于悬浮点阵技术平台对连接产物进行检测,最后通过DNA测序对检测结果进行验证。结果在61例NSCLC组织样本中,运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术共检出EGFR基因突变19例,突变率为31.1%,其中外显子19缺失突变E746-A750 del(1)、E746-A750 del(2)各1例,外显子20点突变T790M 1例,外显子21点突变L858R 14例、L861Q2例,经DNA测序验证完全正确。结论运用PCR-LDR联合悬浮点阵技术初步建立了一种新型的EGFR基因突变检测方法,能同时准确检测EGFR基因中的8种高频突变,具有高通量和高特异性的特点,有望用于NSCLC患者进入EGFR-TKI药物靶向治疗前的EGFR基因突变检测。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 悬浮点阵技术 聚合酶链式反应 连接酶检测反应 非小细胞肺癌
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结核杆菌抗原Rv0173的HLA-A*0201限制性CTL表位的预测及鉴定 被引量:1
4
作者 娄加陶 吴传勇 +5 位作者 陈燕 周晔 陈波 蒋天舒 邓安梅 仲人前 《中国实验诊断学》 2007年第11期1444-1447,共4页
目的鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Rv0173中的HLA-A*0201限制性CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测结核杆菌Rv0173中可能存在的HLA-A*0201限制性CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间... 目的鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Rv0173中的HLA-A*0201限制性CTL表位。方法应用数据库SYFPEITHI预测结核杆菌Rv0173中可能存在的HLA-A*0201限制性CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对各抗原肽产生的增殖反应,经细胞毒性实验研究各抗原肽诱导的特异性T细胞的细胞毒杀伤活性,逐步鉴定Rv0173的HLA-A*0201限制性CTL表位。结果位于Rv0173氨基酸序列肽3(21-30aa)和抗原肽7(161-170aa)与HLA-A*0201分子具有较高的亲合力,并都能刺激HLA-A*0201阳性个体PBMCs增殖,并诱导产生特异性杀伤活性。结论肽3(RLSQSADQYL)(21-30aa)和肽7(LLRGGGLVNL)(161-170aa)是抗原Rv0173上HLA-A*0201限制性CTL的优势表位,可作为结核疫苗设计的候选表位。 展开更多
关键词 结核杆菌 Rv0173 抗原表位
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HLA-A*0201/BSP融合基因的构建与表达
5
作者 娄加陶 范列英 +4 位作者 张玉芳 侯彦强 周演武 耿红莲 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1332-1334,共3页
目的:克隆表达HLA-A*0201 α链胞外区与BirA酶底物肽(BirA substrate peptide,BSP)的融合蛋白。方法:采用PCR技术从人HLA-A*0201 α链cDNA库中克隆基因的胞外区,拼接可生物素化的BSP片段序列后,经双酶切插入载体pET28a(+)后在E.coli BL2... 目的:克隆表达HLA-A*0201 α链胞外区与BirA酶底物肽(BirA substrate peptide,BSP)的融合蛋白。方法:采用PCR技术从人HLA-A*0201 α链cDNA库中克隆基因的胞外区,拼接可生物素化的BSP片段序列后,经双酶切插入载体pET28a(+)后在E.coli BL21(DE3)诱导高效表达,并对表达产物进行纯化与复性。结果:成功地扩增出HLA-A*0201/BSP基因并测序证实,构建了融合表达载体pET-HLA-A*0201,并获表达与纯化。结论:成功构建了HLA-A*0201/BSP融合基因,为进一步体外构建特定的HLA-A*0201四聚体,标记相应特异性CD8+T细胞提供物质基础。 展开更多
关键词 HLA-A*0201α链胞外区 BirA酶底物肽 融合基因 基因表达
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10个肺癌相关基因多重甲基化特异性PCR检测方法的建立
6
作者 娄加陶 薛剑 +3 位作者 吴传勇 葛歆悦 吴京 姚见儿 《生物医学工程与临床》 CAS 2012年第1期77-83,共7页
目的建立10个肺癌相关基因的多重甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测方法并运用于临床标本的检测。方法选取19例肺癌患者病灶组织标本,患者中男性16例,女性3例;平均年龄57.3岁。1例肺部良性病变患者组织标本为男性,年龄52岁。通过质粒... 目的建立10个肺癌相关基因的多重甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测方法并运用于临床标本的检测。方法选取19例肺癌患者病灶组织标本,患者中男性16例,女性3例;平均年龄57.3岁。1例肺部良性病变患者组织标本为男性,年龄52岁。通过质粒构建及甲基化转移酶和亚硫酸盐修饰制备10个基因的甲基化和非甲基化标准品。通过选择甲基化特异性引物来识别甲基化模板,挑选10对甲基化特异性引物并平均分成2组,经最佳聚合酶及最佳退火温度的选择,建立多重甲基化特异性PCR体系,并应用于19例肺癌组织的检测,计算10个基因的甲基化率。结果在成功构建10个基因的甲基化和非甲基化标准品的基础上,建立了它们的多重甲基化特异性PCR检测方法。临床标本检测结果显示10个肺癌相关基因的甲基化率分别为p16INK4A 92%,H-cadherin 89%,E-cadherin和DAPK 76%,TIMP-3 63%,RARβ50%,MGMT 39%,RASSF1A 21%,GSTP1 11%,hMLH1 0%。2次实验结果重复性较好。结论这种分2组多重甲基化特异性PCR的方法能一次性检测10个基因甲基化状态,可以应用于临床标本的检测。 展开更多
关键词 甲基化 肺癌 多重甲基化特异性PCR
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重组结核分枝杆菌多表位肽的免疫原性研究
7
作者 娄加陶 周晔 +6 位作者 吴传勇 陈燕 蒋天舒 陈波 谷明莉 仲人前 邓安梅 《临床军医杂志》 CAS 2007年第2期162-164,共3页
目的探讨纯化的重组结核分枝杆菌多表位肽激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达多表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产... 目的探讨纯化的重组结核分枝杆菌多表位肽激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达多表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多表位肽的免疫原性。结果以刺激系数(SI)>3为界,多表位肽(10μmol)能刺激全部10例HLA-A*0201阳性(A2+)结核菌素阳性(PPD+)健康个体的PBMC发生增殖,SI为46.2±5.6;增殖反应明显高于单肽(平均SI为10.2±2.3)以及PPD(平均SI为15.6±3.6)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在多表位肽诱导的CTL细胞毒活性分析中以负载抗原肽(10μmol)的T2细胞作为靶细胞,多表位肽诱导的CTL作为效应细胞,多表位肽能诱导全部的10例A2+PPD+健康个体中CTL杀伤活性,平均活性分别为(86.2±9.6%),显著高于单肽[平均为(25.4±3.6)%]和PPD[平均为(22.6±2.8)%](P<0.01)。结论重组优化多表位肽在细胞水平具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 多表位肽 疫苗
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四聚体技术在自身免疫性疾病中的运用
8
作者 娄加陶 仲人前 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第6期490-492,共3页
自身免疫性T淋巴细胞 (autoreactiveTcells,ART)在自身免疫性疾病的发病机制中起着重要作用 ,长期以来 ,一直缺乏研究这群细胞合适的分析方法。近年来基于TCR特异识别表位肽 MHC复合物的原理发展起来的四聚体(tetramer)技术 ,并随着特... 自身免疫性T淋巴细胞 (autoreactiveTcells,ART)在自身免疫性疾病的发病机制中起着重要作用 ,长期以来 ,一直缺乏研究这群细胞合适的分析方法。近年来基于TCR特异识别表位肽 MHC复合物的原理发展起来的四聚体(tetramer)技术 ,并随着特异性结合亲和力的不断提高 ,大大地推进了对ART的研究。MHC Ⅰ和MHC Ⅱ四聚体分别用于检测自身免疫性CD4 + 和CD8+ T细胞 ,而非经典MHC (如CD1d)四聚体用来检测NKT等其他自身免疫性T细胞。四聚体技术既可对血液和组织中ART直接定量检测 ,又可在单个细胞水平上对其表型和功能特征进行分析。另外原位四聚体染色 (insitutetramerstaining ,ISTS)还可在细胞微环境中对ART进行分析。四聚体技术的运用可望为在阐述自身免疫性疾病机制中ART的作用提供重要信息。 展开更多
关键词 MHC四聚体 自身免疫 T细胞
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结核杆菌抗原多表位融合蛋白的重组表达与鉴定 被引量:10
9
作者 吴传勇 娄加陶 +6 位作者 蒋廷旺 钱 周晔 陈燕 谷明莉 邓安梅 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1281-1285,共5页
目的构建含有6个编码结核杆菌抗原HLA-A0201限制性CD8+CTL表位基因序列的重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。方法选取结核杆菌抗原Rv0309、Rv0173、Ag85A、Ag85C的6个HLA-A0201限制性CD8+CTL表位,引入Th表位PADRE及木马肽序列,并以RVKR... 目的构建含有6个编码结核杆菌抗原HLA-A0201限制性CD8+CTL表位基因序列的重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。方法选取结核杆菌抗原Rv0309、Rv0173、Ag85A、Ag85C的6个HLA-A0201限制性CD8+CTL表位,引入Th表位PADRE及木马肽序列,并以RVKR序列作为接头,合成全基因序列,经PCR扩增后插入融合表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western印迹鉴定重组表达蛋白。结果成功构建了结核杆菌多表位蛋白的表达质粒,并经IPTG诱导表达了大小约为40000的融合蛋白。结论多表位融合蛋白的重组表达为进一步开发新型结核疫苗打下了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 表位 疫苗 合成
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肺癌骨转移患者6项骨代谢指标的变化 被引量:15
10
作者 吴京 谢惠英 +2 位作者 蔡梦洁 葛歆悦 娄加陶 《检验医学》 CAS 2016年第10期904-906,共3页
目的探讨肺癌骨转移患者血清总Ⅰ型前胶原氨基端前肽(TPⅠNP)、β-胶原降解产物(β-crosslaps)、1,25-羟基维生素D(简称维生素D)、骨碱性磷酸酶(B-ALP)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原羧基端肽(ⅠCTP)6项骨代谢指标的变化。方法收集诊断明... 目的探讨肺癌骨转移患者血清总Ⅰ型前胶原氨基端前肽(TPⅠNP)、β-胶原降解产物(β-crosslaps)、1,25-羟基维生素D(简称维生素D)、骨碱性磷酸酶(B-ALP)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原羧基端肽(ⅠCTP)6项骨代谢指标的变化。方法收集诊断明确的肺癌骨转移患者101例、肺癌无转移患者115例,并以肺部良性疾病患者56例为对照组。检测各组血清TPⅠNP、β-crosslaps、ⅠCTP、ALP、B-ALP和维生素D水平。结果肺癌骨转移组血清TPⅠNP、β-crosslaps、维生素D和ⅠCTP与肺良性疾病组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。肺癌骨转移组血清TPⅠNP、ALP、B-ALP与肺癌无转移组比较差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌无转移组血清ALP和维生素D与肺良性疾病组比较差异有统计学意义(P<0.05)。其他各项指标3组之间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 TPⅠNP、ALP和B-ALP对肺癌骨转移的早期诊断具有一定的临床指导意义,而β-crosslaps、维生素D、ⅠCTP的预示和诊断价值还有待进一步研究。 展开更多
关键词 Ⅰ型前胶原氨基端前肽 β-胶原降解产物 Ⅰ型胶原羧基端肽 碱性磷酸酶 1 25-羟基维生素D 肺癌 骨转移
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结核杆菌抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8^+CTL表位的预测及鉴定 被引量:7
11
作者 吴传勇 娄加陶 +7 位作者 蒋廷旺 钱 周晔 陈燕 陈波 谷明莉 邓安梅 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期349-354,共6页
目的:预测及鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,为基于表位的结核疫苗研究提供依据。方法:应用SYFPEITHI数据库预测结核杆菌抗原Ag85C序列中可能存在的HLA-A*0201限制性T细胞表位,利... 目的:预测及鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,为基于表位的结核疫苗研究提供依据。方法:应用SYFPEITHI数据库预测结核杆菌抗原Ag85C序列中可能存在的HLA-A*0201限制性T细胞表位,利用T2细胞株分析各预测的抗原肽与HLA-A*0201分子的亲合力,选取高亲合力肽诱导特异性CTL细胞,检测各高亲合力肽刺激其特异性CTL细胞分泌的IFN-γ水平、在体外的CTL增殖反应以及细胞杀伤毒性,逐步鉴定出Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位。结果:SYFPEITHI数据库从Ag85C序列中预测到14条能够结合HLA-A*0201分子的抗原肽,其中3个抗原肽(170~178 aa、317~325 aa和144~153 aa)显示与T2细胞上HLA-A*0201分子有高结合力,而抗原肽FLTREMPAWL(144~153 aa)能够诱导大多数HLA-A*0201阳性结核患者及PPD(+)健康志愿者产生特异性CTL细胞,并分泌大量的IFN-γ,能够诱导CTL体外发生增殖,能够产生特异性杀伤活性。结论:成功鉴定出抗原肽FLTREMPAWL(144~153 aa)结核杆菌抗原Ag85C的HLA-A*0201限制性CD8+CTL表位,可作为结核疫苗设计的候选表位,为进一步研发新型有效的抗结核疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗原 表位 T淋巴细胞 细胞毒性
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腺苷脱氨酶和癌胚抗原联合检测在结核性与恶性肿瘤胸腔积液鉴别诊断上的价值 被引量:9
12
作者 吴京 谢惠英 +2 位作者 葛歆悦 吴传勇 娄加陶 《检验医学》 CAS 2014年第6期688-689,共2页
目的为鉴别结核性和恶性肿瘤胸腔积液提供一种比较快速及有实用价值的检测方法。方法采用速率法和化学发光法分别检测65例结核性胸腔积液患者和60例恶性肿瘤胸腔积液患者胸腔积液的腺苷脱氨酶(ADA)活性和癌胚抗原(CEA)含量。结果结核组... 目的为鉴别结核性和恶性肿瘤胸腔积液提供一种比较快速及有实用价值的检测方法。方法采用速率法和化学发光法分别检测65例结核性胸腔积液患者和60例恶性肿瘤胸腔积液患者胸腔积液的腺苷脱氨酶(ADA)活性和癌胚抗原(CEA)含量。结果结核组及恶性肿瘤组胸腔积液ADA活性分别为(52.9±22.8)U/L和(13.8±5.7)U/L,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。恶性肿瘤组胸腔积液CEA含量为(37.8±17.6)ng/mL,明显高于结核组[(7.9±2.8)ng/mL](P<0.01)。结论胸腔积液ADA与CEA对结核性和恶性肿瘤胸腔积液具有鉴别诊断价值。 展开更多
关键词 腺苷脱氨酶 癌胚抗原 胸腔积液 结核 恶性肿瘤
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流式荧光法检测CEA、CYFRA21-1和NSE的应用评价 被引量:6
13
作者 吴传勇 薛剑 +2 位作者 徐淑君 梁小卉 娄加陶 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期95-97,共3页
目的评价流式荧光法(FFA)在癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测中的应用价值。方法用FFA检测CEA、CYFRA21-1、NSE的精密度,确定FFA与电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测3种标志物结果的相关性,... 目的评价流式荧光法(FFA)在癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测中的应用价值。方法用FFA检测CEA、CYFRA21-1、NSE的精密度,确定FFA与电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测3种标志物结果的相关性,建立两法3种标志物参考区间。对FFA检测CEA、CYFRA21-1和NSE准确性进行评价。结果 FFA检测CEA、CYFRA21-1、NSE批内变异系数(CV)均<6%,批间CV均<10%,检测CEA、CYFRA21-1和NSE的结果与ECLIA相关性良好(rCEA=0.974、rCYFRA21-1=0.929、rNSE=0.982)。以第95百分位数(P95)为参考区间上限,FFA:P95 CEA=3.62 ng/mL、P95 CYFRA21-1=2.44 ng/mL、P95 NSE=11.23 ng/mL;ECLIA法:P95 CEA=3.83 ng/mL、P95 CYFRA21-1=2.88 ng/mL、P95 NSE=14.85 ng/mL。以ECLIA为参考方法,FFA检测CEA、CYFRA21-1和NSE与该法的总符合率分别为95.1%、92.6%、93.7%。结论 FFA法检测CEA、CYFRA21-1和NSE准确性好,所需样本量少,可三种指标联合检测,检测速度快,成本低,有良好的应用价值。 展开更多
关键词 癌胚抗原 细胞角蛋白19片段 神经元特异性烯醇化酶 流式荧光法 电化学发光免疫分析法
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细胞外基质蛋白1在肿瘤中的表达及意义 被引量:5
14
作者 侯彦强 范列英 +7 位作者 屠小卿 朱烨 周演武 娄加陶 何玮 倪健 孔宪涛 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1314-1316,共3页
目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)在肿瘤组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学EnVision法,检测肝脏、乳腺、直肠组织(正常组织和肿瘤组织)中ECM1的表达,比较正常组织和肿瘤组织淋巴结转移肿瘤和淋... 目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)在肿瘤组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学EnVision法,检测肝脏、乳腺、直肠组织(正常组织和肿瘤组织)中ECM1的表达,比较正常组织和肿瘤组织淋巴结转移肿瘤和淋巴结未转移肿瘤之间的ECM1表达差异。结果:ECM1的表达如下:正常肝组织阳性率20.0%(4/20),肝癌组织阳性率85.4%(70/82);正常乳腺组织阳性率9.1%(1/11),乳腺癌组织阳性率60.0%(18/30),其中淋巴结(一)者为37.5%(6/16),淋巴结(+)者为85.7%(12/14);正常直肠组织阳性率11.8%(2/17),直肠癌组织阳性率54.5%(18/33),其中淋巴结(一)者为33.3%(6/18),淋巴结(+)者为80.0%(12/15)。统计分析表明,对ECM1的表达,肿瘤组织高于正常组织,淋巴结转移性肿瘤高于非转移性(P<0.01)。结论:ECM1在肿瘤组织中过表达,并且与肿瘤的转移相关。 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白1 肿瘤 肿瘤转移
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结直肠癌组织中ECM1基因水平的测定及临床意义 被引量:7
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作者 侯彦强 娄加陶 +4 位作者 彭亮 周琳 倪健 孔宪涛 仲人前 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第17期1960-1964,共5页
目的:探讨细胞外基质蛋白1基因在结直肠癌中的表达及其意义.方法:基于TaqMan-MGB荧光探针技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,检测正常结直肠黏膜组织(n=46),结直肠腺瘤(n=18),结直肠癌(淋巴结未转移)(n=25)和结直肠癌(淋巴结转移)(n=21)... 目的:探讨细胞外基质蛋白1基因在结直肠癌中的表达及其意义.方法:基于TaqMan-MGB荧光探针技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,检测正常结直肠黏膜组织(n=46),结直肠腺瘤(n=18),结直肠癌(淋巴结未转移)(n=25)和结直肠癌(淋巴结转移)(n=21)中ECM1基因的表达.结果:正常黏膜,腺瘤组织,结直肠癌(淋巴结未转移)组织和结直肠癌(淋巴结转移)组织中ECM1基因的表达均值分别为(9.81±3.16)×10~8拷贝/g RNA,(10.1±3.65)×10~8拷贝/g RNA,(6.89±2.96)×10~9拷贝/g RNA,(5.01±2.22)×10^(10)拷贝/g RNA.正常黏膜和腺瘤组织组间无明显差异(P>0.05);结直肠癌(淋巴结未转移)组明显高于正常黏膜和腺瘤组织组P<0.01);结直肠癌(淋巴结转移)组明显高于其他三组(P<0.01).结论:ECM1基因在结直肠癌中表达升高,并且与结直肠癌的转移相关. 展开更多
关键词 细胞外基质蛋白1 结直肠癌 实时定量聚合酶链反应
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5S管理模式在医院检验科急诊组的应用 被引量:8
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作者 李欣 吴京 娄加陶 《检验医学》 CAS 2019年第6期559-562,共4页
目的探讨5S管理模式在医院检验科急诊组的应用效果。方法比较上海市胸科医院检验科急诊组开展5S改善行动前后工作区域内物品数量、工作人员年走动步数及公里数、5S评分的数据,分析改善前后的差异。结果开展5S改善行动后,工作区域内物品... 目的探讨5S管理模式在医院检验科急诊组的应用效果。方法比较上海市胸科医院检验科急诊组开展5S改善行动前后工作区域内物品数量、工作人员年走动步数及公里数、5S评分的数据,分析改善前后的差异。结果开展5S改善行动后,工作区域内物品数量较改善前大大减少,工作人员年走动步数和公里数也较改善前明显减少,5S评分有所提高。结论将5S管理模式应用于医院检验科急诊组后,工作环境得到切实改善,工作流程得以优化,有效激发了员工的主观能动性,提升了检验质量与效率。 展开更多
关键词 5S管理 医院 检验科急诊组
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数字PCR的临床应用和挑战 被引量:2
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作者 关明 郭玮 +3 位作者 刘维薇 娄加陶 田月如 郭永 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第14期1665-1669,1673,共6页
关明:随着分子遗传知识的积累,DNA和RNA分子的定量变得越来越重要。人们发明了诸多方法,以便尽可能精确地量化核酸的数量。在序列特异性定量方法中,基于聚合酶链反应(PCR)的技术一直是较为理想的选择。实时定量PCR被认为是生物医学实验... 关明:随着分子遗传知识的积累,DNA和RNA分子的定量变得越来越重要。人们发明了诸多方法,以便尽可能精确地量化核酸的数量。在序列特异性定量方法中,基于聚合酶链反应(PCR)的技术一直是较为理想的选择。实时定量PCR被认为是生物医学实验室的常规操作,但由于其计量的灵敏度有限,无法满足越来越严格的定量要求,尤其是当目标浓度较低或存在PCR抑制剂干扰精细测定时。此外,随着下一代测序和单细胞分析等技术的不断发展,人们对核酸定量的兴趣已经达到了前所未有的单分子水平,这导致了数字PCR技术的繁荣。“限制稀释PCR”和“单分子PCR”是最初用来描述这种方法的名称,直到更流行、更贴切的术语“数字PCR”被提出,很快引起了生物医学研究者的广泛关注。数字PCR 的策略很简单,就是“分而治之”,这是一个很好的比喻。 展开更多
关键词 实时定量PCR 临床应用 生物医学实验室 聚合酶链反应 分子遗传 核酸定量 RNA分子
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肺癌分子诊断学研究进展 被引量:7
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作者 薛剑 娄加陶 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期373-377,共5页
肺癌的分子诊断作为影像学和细胞学筛查策略的重要补充,其内容不仅包括早期诊断,还包括预后指标及靶向治疗的预测等。该文拟对当前肺癌分子诊断的研究热点基因突变与靶向治疗预测、miRNA、肿瘤干细胞、甲基化及相关检测方法进行综述。
关键词 基因突变 靶向治疗 MIRNA 肿瘤干细胞 甲基化
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KLIANNTRV是结核抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL表位 被引量:2
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作者 陈燕 娄加陶 +5 位作者 吴传勇 周晔 陈波 蒋天舒 仲人前 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2007年第5期1-3,共3页
目的鉴定结核杆菌抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL优势表位。方法采用数据库SYFPEITHI初步预测结核抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL表位;经流式细胞术分析抗原肽与HLA-A*0201的亲和力;经时间荧光分辨法检测患者外周血单个核细胞(PBMCs)... 目的鉴定结核杆菌抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL优势表位。方法采用数据库SYFPEITHI初步预测结核抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL表位;经流式细胞术分析抗原肽与HLA-A*0201的亲和力;经时间荧光分辨法检测患者外周血单个核细胞(PBMCs)对抗原肽的增殖反应;最后通过细胞毒实验逐步鉴定Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL预测的表位。结果实验证明,预测的位于Ag85A氨基酸序列(242-250aa)的肽表位与HLA-A*0201具有较高的亲和力。结论筛选出的KLIANNTRV(242-250aa)是结核杆菌抗原Ag85A的HLA-A*0201限制性CTL优势表位。 展开更多
关键词 结核杆菌 AG85A CTL表位 预测 鉴定
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循环肿瘤DNA的研究进展 被引量:6
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作者 郭巧梅 娄加陶 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期601-608,共8页
循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)是由肿瘤细胞释放到循环系统中的基因组小片段,其来源于机体所有荷瘤部位,具有含量极低、个体间差异大、半衰期短、匀质性、携带有肿瘤特异性遗传学/表观遗传学变异等特点,与肿瘤的发展进化、... 循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)是由肿瘤细胞释放到循环系统中的基因组小片段,其来源于机体所有荷瘤部位,具有含量极低、个体间差异大、半衰期短、匀质性、携带有肿瘤特异性遗传学/表观遗传学变异等特点,与肿瘤的发展进化、休眠耐药、转移复发等密切相关,正逐渐成为肿瘤学分子研究领域的热点。目前针对ctDNA的检测方法和平台种类繁多,主要分为基于PCR和二代测序(next-generation sequence,NGS)的方法,二者各有利弊,需要根据研究目的灵活选择并建立统一标准。随着相关技术的发展和法规的不断完善,ctDNA可作为癌症筛查、早期诊断、个体化治疗及预后评估理想的血源性生物标志物,在肿瘤的精准医疗中必将大放异彩。 展开更多
关键词 循环肿瘤DNA 肿瘤 表观遗传学变异 二代测序
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